ପ୍ରବନ୍ଧ

ସୂଚକ ଭାବେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ ସୂଚାଏ

ସୂଚକ ଭାବେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ ସୂଚାଏ

ଜଣେ ଟେକ୍ନିସିଆନ୍ ଏକ ବିକରରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମିଶାନ୍ତି, pH ସମନ୍ୱୟ କରନ୍ତି ଏବଂ ରଙ୍ଗ ଅମ୍ଳତା ସୂଚାଇବାକୁ ଅପେକ୍ଷା କରନ୍ତି। କୌଣସି ସ୍ପଷ୍ଟ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୁଏ ନାହିଁ। ଏହା ବଦଳରେ ସେ ଏକ ବୁନ୍ଦା ଆସ୍କର୍ବିକ୍ ଅମ୍ଳ ଦ୍ରବଣ ମିଶାନ୍ତି, ଆଉ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ଅଦୃଶ୍ୟ ହୋଇଯାଏ। ସେ ବାୟୁରେ ଫ୍ଲାସ୍କକୁ ହଲାନ୍ତି, ଆଉ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ଫେରିଆସେ। ସମାନ ରଞ୍ଜକ, କିନ୍ତୁ ଦୁଇଟି ଅତ୍ୟନ୍ତ ଭିନ୍ନ ଆଚରଣ। ଏହି ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ହିଁ ଏହି ଲେଖାର ମୂଳ ବିଷୟ: ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ରେଡକ୍ସ ସୂଚକ, ଯାହା ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ପ୍ରତି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରେ; ଏହା ପ୍ରୋଟନ୍ ପ୍ରତି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା କରୁଥିବା pH ସୂଚକ ନୁହେଁ। ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟ ସ୍ପଷ୍ଟ ହେଲେ ଅନ୍ୟ ସବୁ ବିବରଣୀ ବୁଝିବା ସହଜ ହୁଏ।

ବ୍ୟାବହାରିକ ନିୟମଟି ଏକ ବାକ୍ୟରେ କୁହାଯାଇପାରେ। ନୀଳ ରଙ୍ଗର ଅର୍ଥ ଜାରିତ ରୂପ ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି। ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ଅବସ୍ଥାର ଅର୍ଥ ବିଜାରିତ ରୂପ, ଲ୍ୟୁକୋମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି। ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ କରୁଥିବା ଯେକୌଣସି ପଦାର୍ଥ ଏହି ଅବସ୍ଥାକୁ ବଦଳାଇପାରେ। କେବଳ ଅମ୍ଳ ଓ କ୍ଷାର ତାହା କରିପାରନ୍ତି ନାହିଁ, ଯଦିଓ pH ଏହି ପରିବର୍ତ୍ତନ ଘଟୁଥିବା ଭୋଲ୍ଟେଜ୍‌କୁ ବଦଳାଏ।

ରଙ୍ଗ ପଛରେ ଥିବା ରେଡକ୍ସ ଯୁଗଳ

ଜାରିତ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ହେଉଛି ମିଥାଇଲଥାୟୋନିନିୟମ୍ ଧନାୟନ—ଏକ ସମତଳ, ତିନି-ବଳୟବିଶିଷ୍ଟ ଫେନୋଥାୟାଜିନିୟମ୍ ଗଠନ, ଯାହା କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ଲବଣ ଭାବେ ଯୋଗାଇ ଦିଆଯାଏ ଏବଂ ଯାହାକୁ ପବ୍‌କେମ୍ ମିଥାଇଲଥାୟୋନିନିୟମ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ଭାବେ ଦର୍ଶାଏ। ପତଳା ଜଳୀୟ ଦ୍ରବଣରେ ଏହାର ଏକକ ଅଣୁ ପ୍ରାୟ 664 nm ନିକଟରେ ଆଲୋକ ଶୋଷଣ କରେ, ଏବଂ ଏହି ଶୋଷଣ ହିଁ ଆଖିକୁ ଦେଖାଯାଉଥିବା ନୀଳ ରଙ୍ଗର କାରଣ। ଏହାର ବିଜାରିତ ସହଭାଗୀ, ଲ୍ୟୁକୋମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ମୂଳ ଗଠନ ସମାନ, କିନ୍ତୁ କେନ୍ଦ୍ରୀୟ ବଳୟର ନାଇଟ୍ରୋଜେନ୍ ପ୍ରୋଟନ୍ ଗ୍ରହଣ କରିଥାଏ ଏବଂ ବର୍ଣ୍ଣଦାୟୀ ଗଠନ ବା କ୍ରୋମୋଫୋର୍ ଭଙ୍ଗ ହୋଇଥାଏ। ତେଣୁ ଏହା ପ୍ରାୟ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ, ଏବଂ ଏହାର ପ୍ରବଳ ଶୋଷଣ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଅତିବାଇଗଣି କ୍ଷେତ୍ରରେ ଥାଏ (ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପ ପାଇଁ ପବ୍‌କେମ୍ ତଥ୍ୟ)।

ସମଗ୍ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟାରେ ଦୁଇଟି ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ, କିନ୍ତୁ ପ୍ରୋଟନ୍ ସଂଖ୍ୟା pH ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, କାରଣ ବିଜାରିତ ରୂପ ଅମ୍ଳୀୟ ପରିବେଶରେ ପ୍ରୋଟନ୍ ଗ୍ରହଣ କରେ। ରେଡକ୍ସ ରସାୟନର ଦୃଶ୍ୟାୟନରେ ଥିବା ସନ୍ଦର୍ଭ ବିବେଚନା ଅନୁସାରେ, ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସାପେକ୍ଷରେ pH 0ରେ ମାନକ ବିଭବ ପ୍ରାୟ +0.53 V ଏବଂ pH 7ରେ ଫର୍ମାଲ୍ ବିଭବ ପ୍ରାୟ +0.011 V। ଏହି ଦୁଇ ବିନ୍ଦୁ ମଧ୍ୟରେ pH ସହିତ ବିଭବ ବଦଳେ। ରଞ୍ଜକର ରେଡକ୍ସ ଆଚରଣ ଓ ବିଭବ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଅଧ୍ୟୟନରେ ଆଧୁନିକ ଭୋଲ୍ଟାମେଟ୍ରି ଦ୍ୱାରା ପ୍ରାୟ pH 4ରୁ 10 ମଧ୍ୟରେ ପ୍ରତି pH ଏକକ ପାଇଁ ପ୍ରାୟ 29.5 mV ପରିବର୍ତ୍ତନ ମିଳିଛି, ଯାହା ଦୁଇ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍, ଏକ-ପ୍ରୋଟନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସହ ମେଳ ଖାଏ। pH 4ରୁ ତଳେ ପ୍ରତି pH ଏକକ ପାଇଁ ପ୍ରାୟ 88.5 mV ପରିବର୍ତ୍ତନ ମିଳିଛି, ଯାହା ଦୁଇ-ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍, ତିନି-ପ୍ରୋଟନ୍ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସହ ମେଳ ଖାଏ। ତେଣୁ pH ଉଲ୍ଲେଖ ନଥିବା ବିଭବର କୌଣସି ଅର୍ଥ ନାହିଁ। ଏହି ସଂଖ୍ୟା ପଛରେ କେଉଁ ଢାଳ ଏବଂ କେଉଁ ସନ୍ଦର୍ଭ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ଅଛି, ସବୁବେଳେ ପଚାରନ୍ତୁ; କାରଣ ରୂପା ସନ୍ଦର୍ଭ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ସାପେକ୍ଷରେ ଦିଆଯାଇଥିବା ମୂଲ୍ୟକୁ ହାଇଡ୍ରୋଜେନ୍ ସ୍କେଲ୍ ସାପେକ୍ଷ ମୂଲ୍ୟ ସହ ସିଧାସଳଖ ତୁଳନା କରାଯାଇପାରେ ନାହିଁ। ମୂଳ ଗଠନ ଓ ଗୁଣଧର୍ମ କ୍ରୋମୋଫୋର୍‌କୁ ନିର୍ଦ୍ଧାରଣ କରେ, ଏବଂ ରେଡକ୍ସ ସଙ୍କେତ ପଠନର ପରିକଳ୍ପନା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଏକ ସହଯୋଗୀ ପୃଷ୍ଠା ଏହି ଯୁଗଳକୁ ଫର୍ମୁଲେସନ୍ ବାଛିବା ସହ ଯୋଡ଼େ।

ବିଭବ ସ୍କେଲ୍‌ରେ ଏହି ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ସ୍ଥାନ ହିଁ ରଞ୍ଜକଟିକୁ ଉପଯୋଗୀ କରେ। pH 7ରେ ଏହା ମୃଦୁ ଜାରକମାନଙ୍କ ମଧ୍ୟରେ ରହେ: ଆସ୍କର୍ବେଟ୍ କିମ୍ବା NAD(P)H ଭଳି ଭଲ ଦାତାଙ୍କଠାରୁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ଗ୍ରହଣ କରିବାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଶକ୍ତିଶାଳୀ, ଆଉ ସେହି ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍‌କୁ ଦ୍ରବୀଭୂତ ଅକ୍ସିଜେନ୍ କିମ୍ବା ଫେରିକ୍ କେନ୍ଦ୍ରକୁ ଦେବାକୁ ଯଥେଷ୍ଟ ଦୁର୍ବଳ। ତେଣୁ ଏହା ଗୋଟିଏ ଅବସ୍ଥାରେ ଅଟକି ନରହି ଚକ୍ରାକାରେ ବଦଳେ। ବିଜାରଣ ଏହାକୁ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ କରେ। ବାୟୁ ଏହାକୁ ପୁନଃ ଜାରିତ କରେ। ଉଭୟ ଦିଗରେ ପଥ ସମାନ।

pH ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପ୍ରଶ୍ନ ବାରମ୍ବାର କାହିଁକି ଉଠେ

ପରୀକ୍ଷାଗାର ଓ ଶ୍ରେଣୀଗୃହରେ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱର ତିନୋଟି କାରଣ ବାରମ୍ବାର ଦେଖାଯାଏ, ଏବଂ ପ୍ରତ୍ୟେକର ଏକ ସ୍ପଷ୍ଟ ସଂଶୋଧନ ଅଛି।

ପ୍ରଥମତଃ, pH ବିଭବକୁ ବଦଳାଏ, ଯାହା pH ପ୍ରତି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ପରି ଦେଖାଯାଏ। pH ବଢ଼ାଇଲେ, ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଇଲେକ୍ଟ୍ରୋଡ୍ ପଠନରେ ଯୁଗଳଟିକୁ ବିଜାରିତ କରିବା ସହଜ ହୁଏ, ତେଣୁ ସମାନ ଦାତା ରଞ୍ଜକକୁ ଅଧିକ ଶୀଘ୍ର ବର୍ଣ୍ଣହୀନ କରେ। କିନ୍ତୁ ସାଧାରଣ ପରିସରରେ କେବଳ ପ୍ରୋଟନ୍ ଗ୍ରହଣର କୌଣସି ପଦକ୍ଷେପ ନୀଳରୁ ବର୍ଣ୍ଣହୀନକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ ପରିବର୍ତ୍ତନ ଘଟାଏ ନାହିଁ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ଗୁଣଧର୍ମ ଉପରେ 2025ର ଏକ ସମାଲୋଚନାତ୍ମକ ସମୀକ୍ଷା ଅନୁସାରେ, pH 2ରୁ 12 ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ 665 nmର ଶୋଷଣ ସର୍ବାଧିକ ବିନ୍ଦୁ ମୂଳତଃ ଅପରିବର୍ତ୍ତିତ ରହେ, କେବଳ ଶୋଷଣମାତ୍ରାରେ ସାମାନ୍ୟ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହୁଏ। ପ୍ରୋଟନ୍ ଭୋଲ୍ଟେଜ୍‌କୁ ସମନ୍ୱୟ କରେ। ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ରଙ୍ଗକୁ ବଦଳାଏ।

ଦ୍ୱିତୀୟତଃ, ଅଣ୍ଟୋଲୋଜିରେ ଦିଆଯାଇଥିବା ଶ୍ରେଣୀ-ଲେବଲ୍ ଭ୍ରମ ସୃଷ୍ଟି କରେ। ପବ୍‌କେମ୍ ବର୍ତ୍ତମାନ ChEBIରୁ ଏକ ଭୂମିକା ଆମଦାନି କରେ, ଯେଉଁଥିରେ ଏହି ରଞ୍ଜକକୁ ଅମ୍ଳ-କ୍ଷାର ସୂଚକ କୁହାଯାଇଛି। ଏହି ଲେବଲ୍‌କୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଫେନଲ୍‌ଫ୍ଥାଲିନ୍ କିମ୍ବା ମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍ ପରି ଆଚରଣ କରେ ବୋଲି ପ୍ରମାଣ ଭାବେ ନେବା ଉଚିତ ନୁହେଁ। ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ ପରୀକ୍ଷଣରେ ଏହା ସେପରି କରେ ନାହିଁ।

ତୃତୀୟତଃ, ତାଶିରୋ ମିଶ୍ରଣ ଏହି ନାମକୁ ବ୍ୟବହାର କରେ। ତାଶିରୋ ସୂଚକ ହେଉଛି ମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ଏକ ମିଶ୍ରଣ, ଯେଉଁଥିରେ ମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍ ଅମ୍ଳ-କ୍ଷାର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଯୋଗାଏ ଏବଂ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ନୀଳ ଦୃଶ୍ୟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଯୋଗାଏ। ଏହା ଲାଲରୁ ହଳଦିଆ ପରିବର୍ତ୍ତନକୁ ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ଯୌଗିକ ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନରେ ପରିଣତ କରେ। ଏକ ବାଣିଜ୍ୟିକ ତାଶିରୋ ଫର୍ମୁଲେସନ୍ pH 4.4ରୁ 6.2 ଉଲ୍ଲେଖ କରେ, ଯେତେବେଳେ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ ITW Reagents ଫର୍ମୁଲେସନ୍ pH 4.4ରେ ଲାଲ-ବାଇଗଣିରୁ pH 5.8ରେ ସବୁଜ ହେବାକୁ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରେ। ଏହି ଦୁଇ ପରିସର ମଧ୍ୟରୁ କୌଣସିଟି ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ନିଜସ୍ୱ ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ପରିସର ନୁହେଁ। ରଞ୍ଜକଟି ଦୃଶ୍ୟ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଦେଇଥାଏ, ସଂବେଦକର କାମ କରେ ନାହିଁ।

ଗୋଟିଏ ସୀମାନ୍ତ ପରିସ୍ଥିତି ବିଷୟରେ ସତର୍କତା ଆବଶ୍ୟକ। ପ୍ରାୟ pH 13ରେ, ତୀବ୍ର କ୍ଷାରୀୟ ପରିସ୍ଥିତି ଅପ୍ରତ୍ୟାବର୍ତ୍ତୀ ଜଳବିଶ୍ଳେଷଣ ମାଧ୍ୟମରେ ଲାଲରୁ ଗୋଲାପୀ ମିଥିଲିନ୍-ଭାୟୋଲେଟ୍ ପ୍ରକାରର ଉତ୍ପାଦ ସୃଷ୍ଟି କରିପାରେ। ସେହି ଗୋଲାପୀ ରଙ୍ଗ ଅବକ୍ଷୟର ଚିହ୍ନ, ସୂଚକର ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ନୁହେଁ। ଏହାକୁ ଦ୍ରବଣ ଫିଙ୍ଗିଦେବାର ସଙ୍କେତ ଭାବେ ନିଅନ୍ତୁ, ପଠନ ନେବାର ସଙ୍କେତ ଭାବେ ନୁହେଁ।

କେଉଁଠି ଏହା ରେଡକ୍ସ ସୂଚକ ଭାବେ କାମ କରେ

ଏହାର ପାରମ୍ପରିକ ବ୍ୟବହାର ହେଉଛି ଲେନ୍-ଆଇନନ୍ ବିଜାରକ ଶର୍କରା ଟାଇଟ୍ରେସନ୍। ଗରମ କ୍ଷାରୀୟ ଫେଲିଙ୍ଗ୍ ଦ୍ରବଣକୁ ଶର୍କରା ସହ ଟାଇଟ୍ରେଟ୍ କରାଯାଏ, ଏବଂ ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ପାଖରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମିଶାଯାଏ; ଶର୍କରାର ବିଜାରଣ କ୍ଷମତା କପର୍(II) ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ କ୍ଷମତାଠାରୁ ଅଧିକ ହେଲେ ଅବଶିଷ୍ଟ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ଅଦୃଶ୍ୟ ହୁଏ। AOAC ଲେନ୍-ଆଇନନ୍ ପ୍ରଣାଳୀରେ ମିଶ୍ରଣକୁ ଫୁଟାଇ ରଖାଯାଏ, ଯାହାଫଳରେ ନିର୍ଗତ ବାଷ୍ପ ବାୟୁ ଦ୍ୱାରା ପୁନଃଜାରଣକୁ ଦମନ କରେ; ସାଧାରଣତଃ ରଞ୍ଜକ ଦ୍ରବଣର କିଛି ବୁନ୍ଦା ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସୂଚାଏ ଯେ ବିଜାରଣଯୋଗ୍ୟ କପର୍ ଆଉ ଅବଶିଷ୍ଟ ନାହିଁ। ଏହା ଫ୍ଲାସ୍କର ରେଡକ୍ସ ଅବସ୍ଥା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ସୂଚନା, pH ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ନୁହେଁ।

ପୁରୁଣା ଟାଇଟ୍ରିମେଟ୍ରିରେ ଅନ୍ୟତ୍ର ମଧ୍ୟ ସମାନ ଯୁକ୍ତି ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। କେତେକ ଆୟୋଡିମେଟ୍ରିକ୍ ଟାଇଟ୍ରେସନ୍‌ରେ, ଯେଉଁଠି ଆଲକୋହଲ୍ ଯୋଗୁଁ ଷ୍ଟାର୍ଚ୍ଚ ଅନୁପଯୁକ୍ତ ହେଉଥିଲା, ପତଳା ରଞ୍ଜକ ପ୍ରାୟ 0.05 g per liter କାର୍ଯ୍ୟକାରୀ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ଷ୍ଟାର୍ଚ୍ଚର ବିକଳ୍ପ ହୋଇପାରୁଥିଲା। ତେବେ ଅଧିକ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କଲେ ଆୟୋଡିନ୍-ରଞ୍ଜକ ଯୌଗିକ ତିଆରି ହେବାର ଆଶଙ୍କା ଥାଏ, ଯେପରି 1912ରେ ସିନାଟ୍ ଦର୍ଶାଇଥିଲେ। ହାତପୁସ୍ତିକା ସଂକଳନରେ ମଧ୍ୟ ଟାଇଟାନୋମେଟ୍ରି ଓ ଆୟୋଡୋମେଟ୍ରି ପାଇଁ ଏହି ରଞ୍ଜକର ଉଲ୍ଲେଖ ଅଛି। 1936ର ଗାଲ୍‌ଙ୍କ ଆସ୍କର୍ବିକ୍ ଅମ୍ଳ ପଦ୍ଧତିରେ ଭିଟାମିନ୍ C ନିଷ୍କର୍ଷ ଦ୍ୱାରା ରଞ୍ଜକକୁ ବିଜାରିତ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ଅବଶିଷ୍ଟ ରଞ୍ଜକକୁ ଟାଇଟାନିୟମ୍ ଟ୍ରାଇକ୍ଲୋରାଇଡ୍ ସହ ପଶ୍ଚାତ୍-ଟାଇଟ୍ରେଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ପଦ୍ଧତି ଏବେ ନିୟମିତ ବ୍ୟବହାର ଅପେକ୍ଷା ଐତିହାସିକ, କିନ୍ତୁ ଏହା ମୂଳ ଧାରାକୁ ଦର୍ଶାଏ: ଦାତା ନୀଳ ରୂପକୁ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ରୂପରେ ବିଜାରିତ କରେ, ଏବଂ ନୀଳ ରଙ୍ଗର ଅଦୃଶ୍ୟ ହେବା ହିଁ ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ।

ଦ୍ରବୀଭୂତ ଅକ୍ସିଜେନ୍ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ସମାନ ଯୁଗଳକୁ ବିପରୀତ ଦିଗରେ ଚଳାନ୍ତି। ଏକ ପ୍ରକାଶିତ ପଦ୍ଧତିରେ ପ୍ରଥମେ କ୍ଷାରୀୟ ଜଳୀୟ ଇଥାନଲ୍‌ରେ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ ଦ୍ୱାରା ରଞ୍ଜକକୁ ବିଜାରିତ କରାଯାଏ, ତା’ପରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ ଅକ୍ସିଜେନ୍ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପକୁ ପ୍ରାୟ ତୁରନ୍ତ ପୁଣି ନୀଳ ରୂପରେ ଜାରିତ କରେ। ଓକୁମୁରା ଓ ହାଶିତାନିଙ୍କ ବର୍ଣ୍ଣନା ଅନୁସାରେ, ପ୍ରାୟ 13 micrograms per milliliter ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ପରିମାପ ପାଇଁ 600 nm ନିକଟରେ ପଠନ ନିଆଯାଏ। ଏହାକୁ ପାରମ୍ପରିକ ୱିଙ୍କଲର୍ ଦ୍ରବୀଭୂତ-ଅକ୍ସିଜେନ୍ ଟାଇଟ୍ରେସନ୍ ସହ ମିଶାନ୍ତୁ ନାହିଁ, ଯାହାର ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ପାଇଁ ଷ୍ଟାର୍ଚ୍ଚ ବ୍ୟବହାର ହୁଏ; NOAA ୱିଙ୍କଲର୍ SOP ପ୍ରାୟ 1 percent ଷ୍ଟାର୍ଚ୍ଚ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରେ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଆଧାରିତ ଅକ୍ସିଜେନ୍ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଅଲଗା ଗୋଷ୍ଠୀ, ଯେଉଁଥିରେ ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନର ଦିଗ ଓଲଟା।

ଶ୍ରେଣୀଗୃହର ନୀଳ ବୋତଲ ପରୀକ୍ଷଣ ହେଉଛି ଏହି ସମାନ ଯୁଗଳର ଏକ କ୍ଷୁଦ୍ର ରୂପ: କ୍ଷାରୀୟ ଦ୍ରବଣରେ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, ଦ୍ରବଣକୁ ସ୍ଥିର ରଖିଲେ, ନୀଳ ରଞ୍ଜକକୁ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ରୂପରେ ବିଜାରିତ କରେ। ହଲାଇଲେ ଅକ୍ସିଜେନ୍ ଦ୍ରବୀଭୂତ ହୁଏ, ଯାହା ଏହାକୁ ପୁନଃ ଜାରିତ କରି ନୀଳ କରେ। ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରଣାଳୀ ଓ ଏହାର ନିୟନ୍ତ୍ରଣଗୁଡ଼ିକ ନୀଳ ବୋତଲ ପ୍ରଦର୍ଶନର ବିଷୟ, ଏବଂ ବ୍ୟାଣ୍ଡର ସ୍ଥାନ ଓ ସମୁଚ୍ଚୟନ ଯୋଗୁଁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣ ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ ଓ ସାନ୍ଦ୍ରତା ପ୍ରଭାବ ପୃଷ୍ଠାର ବିଷୟ। ଏହି ଲେଖା କେବଳ କ୍ରିୟାବିଧିରେ ସୀମିତ, କାରଣ ପ୍ରଣାଳୀ ଓ ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପାଇଁ ନିଜସ୍ୱ ପରିସ୍ଥିତି ଉଲ୍ଲେଖ ଆବଶ୍ୟକ।

ରଙ୍ଗ-ଅବସ୍ଥା ଚାର୍ଟ: ଅବସ୍ଥା, ପରିସ୍ଥିତି, ସୀମାବଦ୍ଧତା

ଏହି ସାରଣୀ ଲେଖାଟିର ମୂଳ ସନ୍ଦର୍ଭ। କୌଣସି ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁକୁ ବିଶ୍ୱାସ କରିବା ପୂର୍ବରୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଧାଡ଼ିଟି ପଢ଼ନ୍ତୁ।

ଅବସ୍ଥାଦୃଶ୍ୟ ରୂପଏହା ସୃଷ୍ଟି କରୁଥିବା ପରିସ୍ଥିତିଏହା କ’ଣ ସୂଚାଏସୀମାବଦ୍ଧତା
ଜାରିତ ଏକକ ଅଣୁ, ପତଳା, ନିରପେକ୍ଷଗାଢ଼ ନୀଳ, 664 nm ନିକଟରେ ଶିଖରବାୟୁ-ସନ୍ତୃପ୍ତ ଦ୍ରବଣ, କୌଣସି ଦାତା ଉପସ୍ଥିତ ନାହିଁଆଧାରରେଖାର ପ୍ରସ୍ତୁତ ଅବସ୍ଥାଅଧିକ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ଦ୍ୱିଅଣୁ ଗଠନ ଯୋଗୁଁ ଶିଖର 610 nm ଆଡ଼କୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ, ତେଣୁ ପତଳା କରିବା ପରେ ହିଁ ରଙ୍ଗ ବିଚାର କରନ୍ତୁ
ବିଜାରିତ ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପ, ନିରପେକ୍ଷବର୍ଣ୍ଣହୀନଦାତା ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି (କ୍ଷାରରେ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, ଆସ୍କର୍ବେଟ୍, ଡାଇଥାୟୋନାଇଟ୍, ଉତ୍ପ୍ରେରକ ସହ NAD(P)H)ବିଜାରଣ କ୍ଷମତା ସୂଚକର ଆବଶ୍ୟକତାକୁ ଅତିକ୍ରମ କରିଛିବାୟୁ ଏହାକୁ ପୁନଃ ଜାରିତ କରେ, ତେଣୁ ବାୟୁକୁ ବାଦ ନଦେଲେ କିମ୍ବା ତାହାର ପ୍ରଭାବକୁ ମାନକୀକୃତ ନକଲେ ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ପୁଣି ନୀଳ ହୋଇଯାଏ
ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପ, ଅମ୍ଳୀୟବର୍ଣ୍ଣହୀନଅମ୍ଳରେ ସମାନ ଦାତା, ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପର ଅତିରିକ୍ତ ପ୍ରୋଟନ୍ ଗ୍ରହଣ ସହପରିବର୍ତ୍ତିତ ବିଭବରେ ଉପରୋକ୍ତ ସମାନ ସୂଚନାpH 4ରୁ ତଳେ ବିଭବର ଢାଳ ଅଧିକ ତୀବ୍ର ହୁଏ, ତେଣୁ pH 7ର କ୍ୟାଲିବ୍ରେସନ୍ ଏଠାରେ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଇପାରେ ନାହିଁ
ତାଶିରୋ ମିଶ୍ରଣ, ଅମ୍ଳୀୟଲାଲ-ବାଇଗଣିମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମିଶ୍ରଣରେ pH ପ୍ରାୟ 4.4ରୁ କମ୍ମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଅମ୍ଳତାମିଥାଇଲ୍ ରେଡ୍‌ର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସୂଚାଏ, ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ନୁହେଁ; ଏହାକୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର pH ପରିସର ଭାବେ ଉଲ୍ଲେଖ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ
ତାଶିରୋ ମିଶ୍ରଣ, pH 5.8ରୁ 6.2 ନିକଟରେସବୁଜରୁ ଧୂସର-ସବୁଜସମାନ ମିଶ୍ରଣ ଏହାର ଉପର ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସୀମା ନିକଟରେଉପରୋକ୍ତ ସମାନ ସୂଚନାଫର୍ମୁଲେସନ୍ ଉପରେ ନିର୍ଭରଶୀଳ; ସ୍ମୃତି ଉପରେ ନିର୍ଭର ନକରି ବୋତଲ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ
ଅବକ୍ଷୟିତ, ତୀବ୍ର କ୍ଷାରୀୟଗୋଲାପୀରୁ ଲାଲpH ପ୍ରାୟ 13, ଉତ୍ତାପ, ଦୀର୍ଘ ସମୟ କ୍ଷାର ସଂସ୍ପର୍ଶଅପ୍ରତ୍ୟାବର୍ତ୍ତୀ ଜଳବିଶ୍ଳେଷଣରେ ଭାୟୋଲେଟ୍ ପ୍ରକାରର ଉତ୍ପାଦ ସୃଷ୍ଟିହଲାଇଲେ ପୂର୍ବ ଅବସ୍ଥା ଫେରେ ନାହିଁ; ଫିଙ୍ଗିଦେଇ ପୁଣି ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ
ଆଲୋକରେ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ହୋଇଥିବାପରିବର୍ତ୍ତିତ ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ ସହ ଫିକା ନୀଳତୀବ୍ର ଦୃଶ୍ୟମାନ ଆଲୋକ, ବିଶେଷତଃ ଦାତା ଉପସ୍ଥିତ ଥିଲେଆଲୋକଚାଳିତ ପାର୍ଶ୍ୱ ରସାୟନ, ଯେଉଁଥିରେ ମିଥାଇଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଅପସାରିତ ଉତ୍ପାଦ ମଧ୍ୟ ରହେମାନକ ଦ୍ରବଣକୁ ଆଲୋକରୁ ସୁରକ୍ଷିତ ରଖନ୍ତୁ, ଯେପରି ଦୃଶ୍ୟମାନ ଆଲୋକରେ ଫଟୋବିଜାରଣ ଅଧ୍ୟୟନ ଦର୍ଶାଇଥିଲା

ସୂଚକ ଭାବେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ରଙ୍ଗ-ଅବସ୍ଥା ଚାର୍ଟ। ଧାଡ଼ିରେ ଥିବା ପାଞ୍ଚଟି ଶିଶି ଗାଢ଼ ନୀଳ ଜାରିତ ଏକକ ଅଣୁ, ନୀଳ-ବାଇଗଣି ସାନ୍ଦ୍ର ଦ୍ୱିଅଣୁ, ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ବିଜାରିତ ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପ, ଉପର ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତନ ସୀମା ନିକଟରେ ସବୁଜ ତାଶିରୋ ମିଶ୍ରଣ ଏବଂ ଗୋଲାପୀ ଅବକ୍ଷୟିତ କ୍ଷାରୀୟ ଉତ୍ପାଦ ଦର୍ଶାଉଛି। ଲେବଲ୍‌ଗୁଡ଼ିକ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅବସ୍ଥାର ପରିସ୍ଥିତି ଓ ସୀମାବଦ୍ଧତା ଦର୍ଶାଉଛି।

ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁକୁ ଅସ୍ପଷ୍ଟ କରୁଥିବା ବିଫଳତାର କାରଣ

ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ବଦଳିବାକୁ ଲାଗିଲେ ପ୍ରଥମ ସନ୍ଦେହ ବାୟୁ ଉପରେ ହେବା ଉଚିତ। ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପ ସହଜରେ ପୁନଃ ଜାରିତ ହୁଏ, ବିଶେଷତଃ କ୍ଷାରୀୟ ବ୍ୟବସ୍ଥାରେ। ତେଣୁ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ହୋଇଥିବା ଟାଇଟ୍ରେସନ୍ ଦ୍ରବଣକୁ ସ୍ଥିର ରଖିଲେ କିମ୍ବା ଜୋରରେ ଘୁରାଇଲେ ପୁଣି ନୀଳ ହୋଇପାରେ। ରଙ୍ଗର ସ୍ଥାୟିତ୍ୱ ଜରୁରୀ ଥିଲେ ବାୟୁକୁ ବାଦ ଦିଅନ୍ତୁ, ହଲାଇବା ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ମାନକୀକୃତ କରନ୍ତୁ ଏବଂ ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟରେ ପଠନ ନିଅନ୍ତୁ।

ଦ୍ୱିତୀୟ ସନ୍ଦେହ ଆଲୋକ ଉପରେ। ରଞ୍ଜକଟି ଆଲୋକରସାୟନିକ ଭାବେ ସକ୍ରିୟ, ଏବଂ ଦାତା ଉପସ୍ଥିତ ଥିବାବେଳେ ଆଲୋକ ବିକିରଣ ଏହାକୁ ଏପରି ପଥରେ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ କରିପାରେ, ଯେଉଁଥିରେ ମିଥାଇଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଅପସାରିତ ଉତ୍ପାଦ ମଧ୍ୟ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ। ବିଶ୍ଳେଷଣ ପାଇଁ ବ୍ୟବହୃତ ରଞ୍ଜକ ଦ୍ରବଣକୁ ଅନ୍ଧାରରେ ରଖନ୍ତୁ ଏବଂ ତୀବ୍ର ପରୀକ୍ଷାଗାର ଲ୍ୟାମ୍ପ ତଳେ ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ।

ତୃତୀୟ କାରଣ ହେଉଛି ସାନ୍ଦ୍ରତା। ଜାରିତ ଧନାୟନଗୁଡ଼ିକ ସ୍ତରୀଭୂତ ହୋଇ ଦ୍ୱିଅଣୁ ଓ ବଡ଼ ସମୁଚ୍ଚୟ ଗଠନ କରନ୍ତି, ଯାହାର ବ୍ୟାଣ୍ଡ ପ୍ରାୟ 610ରୁ 615 nm ନିକଟକୁ ସ୍ଥାନାନ୍ତରିତ ହୁଏ। ତେଣୁ ସାନ୍ଦ୍ର ଦ୍ରବଣ ଅଶୁଦ୍ଧ ନହୋଇ ମଧ୍ୟ ଆଶାକୃତ ଶିଖରଠାରୁ ଭିନ୍ନ ଦେଖାଯାଏ। ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ କିମ୍ବା ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ବିଚାର କରିବା ପୂର୍ବରୁ ଦ୍ରବଣକୁ ଏକକ ଅଣୁ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ଥିବା ସାନ୍ଦ୍ରତା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ପତଳା କରନ୍ତୁ।

ଆଉ ଦୁଇଟି ସୂକ୍ଷ୍ମ ତ୍ରୁଟିର କାରଣ ଉଲ୍ଲେଖଯୋଗ୍ୟ, କାରଣ ସେଗୁଡ଼ିକ ବିଶେଷତଃ କମ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାର ପରୀକ୍ଷଣକୁ ପ୍ରଭାବିତ କରେ। ରଞ୍ଜକଟି କାଚ-ଜଳ ସଂସ୍ପର୍ଶ ପୃଷ୍ଠରେ ପରିମାପଯୋଗ୍ୟ ଭାବେ ଅଧିଶୋଷିତ ହୁଏ, ଯାହା ପତଳା ମାନକ ଦ୍ରବଣ ଓ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଗତିର ପରିମାପରେ ତ୍ରୁଟି ଆଣେ; ସଠିକତା ଜରୁରୀ ଥିଲେ ପଲିମର୍ ପାତ୍ର କିମ୍ବା କ୍ୟୁଭେଟ୍ ଏହାର ସମାଧାନ। ବାଣିଜ୍ୟିକ ରଞ୍ଜକରେ Azure B ସମେତ ସମ୍ବନ୍ଧିତ ଥାୟାଜିନ୍ ଅଶୁଦ୍ଧି ମଧ୍ୟ ଥାଇପାରେ, ଯାହାକୁ ପୂର୍ବତନ ଶୁଦ୍ଧୀକରଣ ଅଧ୍ୟୟନରେ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବେ ଅପସାରଣ କରାଯାଇଥିଲା। ତେଣୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଲେଖାଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ ବୋତଲ ରାସାୟନିକ ଭାବେ ସମାନ ବୋଲି ଧରିନେବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ବିଶ୍ଳେଷଣମୂଳକ କାମରେ ଗ୍ରେଡ୍ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରିବା ଉଚିତ। ସମୁଚ୍ଚୟନ ଯୋଗୁଁ ହେଉଥିବା ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣର ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ ବିବରଣୀ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟପୂର୍ବକ ବର୍ଣ୍ଣାଳୀ ପୃଷ୍ଠାରେ ରଖାଯାଇଛି।

ପରୀକ୍ଷାଗାର ପାଇଁ ଏକ ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଯାଞ୍ଚତାଲିକା

ଦ୍ରବଣରେ ବଫର୍ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ ଏବଂ ପ୍ରତ୍ୟେକ ବିଭବ ଓ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଅନ୍ତିମ ବିନ୍ଦୁ ପାଖରେ pH ଲେଖନ୍ତୁ। ଅକ୍ସିଜେନ୍ ପରିସ୍ଥିତିକୁ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ କରନ୍ତୁ: ଲେନ୍-ଆଇନନ୍ ଧରଣର କାମ ପାଇଁ ବାଷ୍ପ ଆବରଣ ସହ ଫୁଟାଇବା, ଅନ୍ୟତ୍ର ନିଷ୍କ୍ରିୟ ଗ୍ୟାସ୍ ଆବରଣ କିମ୍ବା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ସମୟ। ଏକକ ଅଣୁର ରୂପ ଦେଖିବା ପାଇଁ ଯଥେଷ୍ଟ ପତଳା ଦ୍ରବଣରେ କାମ କରନ୍ତୁ, ଦ୍ରବଣକୁ ଆଲୋକରୁ ସୁରକ୍ଷିତ ରଖନ୍ତୁ, କମ୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାରେ ପଲିମର୍ ପାତ୍ରକୁ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ଦିଅନ୍ତୁ ଏବଂ ରଞ୍ଜକର ଗ୍ରେଡ୍ ଲିପିବଦ୍ଧ କରନ୍ତୁ। ଯଦି ପ୍ରକୃତ ଲକ୍ଷ୍ୟ pH ନିର୍ଣ୍ଣୟ, ତେବେ ଏକ ପ୍ରକୃତ ଅମ୍ଳ-କ୍ଷାର ସୂଚକ କିମ୍ବା ଏକ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ ତାଶିରୋ ମିଶ୍ରଣ ବାଛନ୍ତୁ। ମିଶ୍ରଣର ପରିସରକୁ ମିଶ୍ରଣର ପରିସର ଭାବେ ହିଁ ଉଲ୍ଲେଖ କରନ୍ତୁ, କେବେବି ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ପରିସର ଭାବେ ନୁହେଁ।

ଏହି ଶୃଙ୍ଖଳିତ ପଦ୍ଧତିରେ ମୂଳ ଧାରଣା ଅକ୍ଷୁଣ୍ଣ ରହେ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଅସାଧାରଣ ସ୍ପଷ୍ଟତାରେ ଜାରଣ ଅବସ୍ଥା ସୂଚାଏ, କାରଣ ଏହାର ଦୁଇଟି ଅବସ୍ଥାର ଦୃଶ୍ୟମାନ ଆଲୋକ ଶୋଷଣ ଅତ୍ୟନ୍ତ ଭିନ୍ନ। ଏହାର ରଙ୍ଗକୁ ଏକ ରେଡକ୍ସ ପଠନ ଭାବେ ନିଅନ୍ତୁ—ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ pHରେ, ଉଲ୍ଲେଖିତ ଅକ୍ସିଜେନ୍ ଓ ଆଲୋକ ପରିସ୍ଥିତିରେ, ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ରଞ୍ଜକ ଗ୍ରେଡ୍ ସହ—ତେବେ ଏହା ଟାଇଟ୍ରେସନ୍‌ରେ ନିଜ ଉପଯୋଗିତା ପ୍ରମାଣ କରେ। ଏହାକୁ ଲିଟ୍‌ମସ୍ ଭାବେ ବ୍ୟବହାର କଲେ ଏହା ପ୍ରତିଥର ସମାନ ଭାବେ ଭ୍ରମିତ କରିବ।