G6PD ପରୀକ୍ଷାଗାର ପରୀକ୍ଷାରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ରଞ୍ଜକଟି ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ କରୁଛି

ଜଣେ ଛାତ୍ର ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେସନ୍ ପରେ ଦୁଇଟି ଟ୍ୟୁବ୍‌କୁ ଦେଖୁଛନ୍ତି। ଗୋଟିଏରେ ଆଶା କରାଯାଇଥିବା ରଙ୍ଗ ଆସିଛି। ଅନ୍ୟଟିରେ ଆସିନାହିଁ। ଛାତ୍ର ନିଷ୍କର୍ଷ କରୁଛନ୍ତି ଯେ ଦ୍ୱିତୀୟ ରୋଗୀଙ୍କର ଗ୍ଲୁକୋଜ୍-6-ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ଡିହାଇଡ୍ରୋଜେନେଜ୍‌ର ଅଭାବ ଅଛି। ସେହି ନିଷ୍କର୍ଷ ଠିକ୍ ହୋଇପାରେ, କିନ୍ତୁ ତାଙ୍କ ଯୁକ୍ତିରେ ପରୀକ୍ଷାଟି କାମ କରିବାର ମୂଳ ଧାରଣା ବାଦ୍ ପଡ଼ିଯାଇଛି। ଟ୍ୟୁବ୍‌ରେ କୌଣସି ଜିନିଷ ଏନ୍‌ଜାଇମ୍‌କୁ ସିଧାସଳଖ ମାପୁନାହିଁ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଭାବେ ବ୍ୟବହାର କରି, ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ଯାହା ଉତ୍ପାଦନ କରେ ଟ୍ୟୁବ୍ ତାହା ମାପୁଛି।

ଏହି ପରୋକ୍ଷ ପଦ୍ଧତି ବୁଝିଗଲେ, ପ୍ରକ୍ରିୟା, ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା ଏବଂ ଭୁଲ୍ ଫଳାଫଳର ଲମ୍ବା ତାଲିକା ଆଉ ମନମୁଖୀ ଲାଗେ ନାହିଁ।

ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଉତ୍ତର

G6PD ପରୀକ୍ଷାରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ରେଡକ୍ସ ସୂଚକ। G6PD ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ NADPH ଉତ୍ପାଦନ କରେ, ଏବଂ NADPH-ନିର୍ଭର ପ୍ରଣାଳୀଗୁଡ଼ିକ ନୀଳ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ତାହାର ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ଲ୍ୟୁକୋ ରୂପକୁ ବିଜାରିତ କରନ୍ତି ବା ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ବହନ ପାଇଁ ଏହାକୁ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତି। ସ୍ୱାଭାବିକ ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ସକ୍ରିୟତାରେ ବିଜାରଣ ଦକ୍ଷତାର ସହ ହୁଏ। ସକ୍ରିୟତା କମ୍ ଥିଲେ ବିଜାରଣ ଧୀର କିମ୍ବା ଅସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ହୁଏ। ପରୀକ୍ଷାର ସମଗ୍ର ସଙ୍କେତ ଏହାହିଁ।

ଦୁଇଟି ଐତିହାସିକ ପଦ୍ଧତିରେ ଏହି ଏକା ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, କିନ୍ତୁ ଅନ୍ତିମ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ଭିନ୍ନ। ସେଗୁଡ଼ିକୁ ଅଲଗା କରି ବୁଝିଲେ ଅଧିକାଂଶ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ଦୂର ହୋଇଯାଏ।

ଦୁଇଟି ପରୀକ୍ଷା, ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ, ଭିନ୍ନ ଅନ୍ତିମ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ

ପ୍ରଥମଟି ହେଉଛି ସିଧାସଳଖ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବିଜାରଣ ପରୀକ୍ଷା, ଯାହାକୁ ସାସ୍ ଓ ତାଙ୍କ ସହକର୍ମୀମାନେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରିଥିଲେ ଏବଂ ପରେ ଗିବ୍ସ ମୂଲ୍ୟାୟନ କରିଥିଲେ। ଏଠାରେ ରଞ୍ଜକ ନିଜେ ଅନ୍ତିମ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣର ଆଧାର: ଜାରିତ ନୀଳ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବିଜାରିତ ହୋଇ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ଲ୍ୟୁକୋମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ପରିଣତ ହୁଏ, ଏବଂ ସେହି ପରିବର୍ତ୍ତନର ହାର NADPH ଉତ୍ପାଦନ କ୍ଷମତାକୁ ପ୍ରତିଫଳିତ କରେ। ମୂଳ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଗବେଷଣାପତ୍ରଟି ପବ୍‌ମେଡ୍‌ରେ ସାସ୍ ଓ ଅନ୍ୟମାନଙ୍କ ନାମରେ (1966) ସୂଚୀଭୁକ୍ତ ହୋଇଛି।

ଦ୍ୱିତୀୟଟି ହେଉଛି ବ୍ରୁଅର୍ ମେଟ୍‌ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍ ବିଜାରଣ ପରୀକ୍ଷା। ସୋଡିୟମ୍ ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍ ପ୍ରଥମେ ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌କୁ ଜାରିତ କରି ବାଦାମୀ ମେଟ୍‌ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ରେ ପରିଣତ କରେ। ତା’ପରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ସ୍ଥାନାନ୍ତରଣର ମଧ୍ୟସ୍ଥ ଭାବେ କାମ କରେ: ବିଜାରିତ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମେଟ୍‌ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌କୁ ବିଜାରକ ସମତୁଲ୍ୟ ପ୍ରଦାନ କରି ତାହାକୁ ପୁଣି ଲାଲ୍ ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ରେ ପରିଣତ କରେ। ତେଣୁ ଦୃଶ୍ୟମାନ ଅନ୍ତିମ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ହେଉଛି ବାଦାମୀ ବନାମ ଲାଲ୍, ନୀଳ ବନାମ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ନୁହେଁ। ମୂଳ ପଦ୍ଧତିଟି ବିଶ୍ୱ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ସଂଗଠନର ବୁଲେଟିନ୍‌ରେ (ବ୍ରୁଅର୍ ଓ ଅନ୍ୟମାନେ, 1960) ପ୍ରକାଶିତ ହୋଇଥିଲା।

ବ୍ରୁଅର୍ ପରୀକ୍ଷାକୁ ରଞ୍ଜକର ବର୍ଣ୍ଣହୀନକରଣ ପରୀକ୍ଷା ବୋଲି କହିବା ରାସାୟନିକ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ସଠିକ୍ ନୁହେଁ। ରଞ୍ଜକଟି ଚକ୍ରାକାରରେ ଜାରିତ ଓ ବିଜାରିତ ହୁଏ; ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ର ରଙ୍ଗ ବଦଳେ। ତଳ ଚିତ୍ରରେ ଉଭୟ ପଥ ଦର୍ଶାଯାଇଛି।

ମୂଳ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା

G6PD ପେଣ୍ଟୋଜ୍ ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ପଥର ପ୍ରଥମ ଜାରଣ ପଦକ୍ଷେପକୁ ଉତ୍‌ପ୍ରେରିତ କରେ:

Glucose-6-phosphate + NADP+ becomes 6-phosphogluconolactone + NADPH + H+

ପରିପକ୍ୱ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା NADPH ପାଇଁ ଏହି ପଥ ଉପରେ ବହୁଳ ଭାବେ ନିର୍ଭର କରନ୍ତି, ଯାହା ବ୍ଲଡ୍ ପତ୍ରିକାରେ ଲୁଜାଟୋ ଓ ତାଙ୍କ ସହକର୍ମୀଙ୍କ ସମୀକ୍ଷାରେ (2020) ଆଲୋଚିତ ହୋଇଛି। NADPH ଗ୍ଲୁଟାଥାଇଓନ୍‌କୁ ବିଜାରିତ ଅବସ୍ଥାରେ ରଖେ ଏବଂ କୋଷକୁ ଜାରଣଜନିତ କ୍ଷତିରୁ ସୁରକ୍ଷା ଦିଏ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏହି ବ୍ୟବସ୍ଥାରେ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ଗ୍ରହୀତା ଭାବେ ଯୋଗ ଦିଏ। ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ G6PD ଥିଲେ ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ NADPH ମିଳେ, ଯାହା ଫଳରେ ବିଜାରଣ ଦକ୍ଷତାର ସହ ହୁଏ। G6PD କମ୍ ଥିଲେ ଏହି ଶୃଙ୍ଖଳା ତାହାର ପ୍ରଥମ କଡ଼ିରେ ଭାଙ୍ଗିଯାଏ।

ରଞ୍ଜକକୁ ଇଞ୍ଜିନ୍ ନୁହେଁ, ଇନ୍ଧନ ମାପକ ବୋଲି ଭାବନ୍ତୁ। ଏହା NADPH ଯୋଗାଣ ବିଷୟରେ ସୂଚନା ଦିଏ। ସେହି ଯୋଗାଣ ବା ଫଳାଫଳର ପଠନକୁ ବଦଳାଉଥିବା ଅନ୍ୟ କୌଣସି କାରକ, ଜିନ୍‌ରେ କୌଣସି ପରିବର୍ତ୍ତନ ନ ଥାଇ ମଧ୍ୟ, ମାପକର ସୂଚନା ବଦଳାଇପାରେ।

ବ୍ରୁଅର୍-ପ୍ରକାର ପ୍ରକ୍ରିୟା କିପରି ଚାଲେ

ଦଶନ୍ଧି ଧରି ଅଭିକର୍ମକ ପ୍ରସ୍ତୁତିର ସୂତ୍ର ବଦଳିଛି, ତେଣୁ ଶିକ୍ଷାଦାନ ପାଇଁ ଦିଆଯାଇଥିବା ବର୍ଣ୍ଣନାକୁ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଭାବେ ଧରିନେବା ଉଚିତ ନୁହେଁ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷାଗାର ନିଜର ବୈଧୀକୃତ ମାନକ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ଅନୁସରଣ କରେ। ଏହି ସତର୍କତା ସହ, ପାରମ୍ପରିକ ଟ୍ୟୁବ୍ ବ୍ୟବସ୍ଥା ନିମ୍ନପ୍ରକାରେ କାମ କରେ; ତିନୋଟି ଟ୍ୟୁବ୍ ଏବଂ 3 ଘଣ୍ଟାର ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେସନ୍ ସହ ଏହାର ଏକ ରୂପ ଏହି ପ୍ରକାଶିତ ପ୍ରୟୋଗରେ ଦଲିଲଭୁକ୍ତ ହୋଇଛି:

1. ରୋଗୀଙ୍କ ନମୁନା ଟ୍ୟୁବ୍: ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରକ୍ତ ସହ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, ସୋଡିୟମ୍ ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍ ଏବଂ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ। ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍ ମେଟ୍‌ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ, ଗ୍ଲୁକୋଜ୍ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକାର ବିପାକକୁ ଚାଲୁ ରଖେ, ଏବଂ ରଞ୍ଜକ NADPH-ନିର୍ଭର ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ବାହକ ଭାବେ କାମ କରେ।
2. ଜାରିତ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା: ରକ୍ତ ସହ ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍ ଏବଂ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, କିନ୍ତୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ନାହିଁ। ଏହା ବାଦାମୀ ମେଟ୍‌ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ର ଅନ୍ତିମ ରଙ୍ଗ, ଅର୍ଥାତ୍ ଅଭାବ ସୂଚକ ରୂପ, ଦର୍ଶାଏ।
3. ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା: ରକ୍ତ ସହ ପାଣି। ଏହା ଲାଲ୍ ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ର ଅନ୍ତିମ ରଙ୍ଗ, ଅର୍ଥାତ୍ ସ୍ୱାଭାବିକ ରୂପ, ଦର୍ଶାଏ।
4. ସବୁ ଟ୍ୟୁବ୍‌କୁ ପ୍ରାୟ 37 C ତାପମାତ୍ରାରେ, ସାଧାରଣତଃ 3 ଘଣ୍ଟା ପାଇଁ, ଧୀରେ ମିଶାଇ ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ।
5. କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ଭାଙ୍ଗି ରଙ୍ଗର ତୁଳନା ସ୍ପଷ୍ଟ କରିବା ପାଇଁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଟ୍ୟୁବ୍‌ରୁ ଏକ ଛୋଟ ମାପିତ ଅଂଶ ନେଇ ପାତିତ ଜଳରେ ପତଳା କରନ୍ତୁ।
6. ରୋଗୀଙ୍କ ନମୁନା ଟ୍ୟୁବ୍‌କୁ ଦୁଇଟି ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା ସହ ତୁଳନା କରନ୍ତୁ। ରଙ୍ଗ ପୁଣି ଲାଲ୍ ଆଡ଼କୁ ଫେରିବା ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ ବିଜାରଣ କ୍ଷମତା ସୂଚାଏ। ବାଦାମୀ ରଙ୍ଗ ରହିଯିବା ଗୁରୁତର ଅଭାବ ସୂଚାଏ।

ଏକ ଐତିହାସିକ ପ୍ରସ୍ତୁତିରେ ପ୍ରାୟ 1 mL ରକ୍ତ ସହ ପ୍ରାୟ 180 mM ସୋଡିୟମ୍ ନାଇଟ୍ରାଇଟ୍, 280 mM ଡେକ୍ସ୍‌ଟ୍ରୋଜ୍ ଏବଂ 0.4 mM ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଥିବା ଅଭିକର୍ମକ ବ୍ୟବହୃତ ହୋଇଥିଲା। ଏହି ସଂଖ୍ୟାଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରକାଶିତ ସାହିତ୍ୟର ଏକ ଉଦାହରଣ ଭାବେ ନିଅନ୍ତୁ, ସର୍ବଜନୀନ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ମାନ ଭାବେ ନୁହେଁ।

ଫଳାଫଳ ବୁଝିବା

ଗୁଣାତ୍ମକ ସ୍କ୍ରିନିଂ ସ୍ୱାଭାବିକ ସକ୍ରିୟତାର ପ୍ରାୟ 30 ରୁ 40 ପ୍ରତିଶତ ସ୍ତର ନିକଟରେ ସବୁଠାରୁ ଭଲ ଭାବେ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଚିହ୍ନଟ କରେ, ଯାହା G6PD ଚିହ୍ନଟର ଅଭାବଗୁଡ଼ିକ ଉପରେ ମାଲେରିଆ ଜର୍ଣ୍ଣାଲ୍‌ର ଏହି ସମୀକ୍ଷାରେ ଆଲୋଚିତ ହୋଇଛି। ତେଣୁ ସ୍ୱାଭାବିକ ସ୍କ୍ରିନିଂ ଫଳାଫଳର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ପରୀକ୍ଷାଟି ଗୁରୁତର ଅଭାବ ଚିହ୍ନଟ କରିନାହିଁ। ଏହା ସକ୍ରିୟତା ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ସ୍ୱାଭାବିକ ବୋଲି ପ୍ରମାଣିତ କରେ ନାହିଁ।

ସ୍କ୍ରିନିଂ କାହିଁକି ଭ୍ରମିତ କରେ

ହିମୋଲାଇସିସ୍ ପରେ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟୋସିସ୍ ମିଥ୍ୟା ସ୍ୱାଭାବିକ ଫଳାଫଳର ଏକ ପରିଚିତ କାରଣ। ନୂତନ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା ଏବଂ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍‌ରେ ପୁରୁଣା କୋଷ ତୁଳନାରେ ଅଧିକ G6PD ଥାଏ। ଏକ ତୀବ୍ର ହିମୋଲାଇଟିକ୍ ପର୍ବ ସମୟରେ ସବୁଠାରୁ ପୁରୁଣା ଓ ସର୍ବାଧିକ ଅଭାବ ଥିବା କୋଷଗୁଡ଼ିକ ଆଗରୁ ନଷ୍ଟ ହୋଇଯାଇଥାଇପାରନ୍ତି। ଫଳରେ ନୂତନ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ରହିଯାଆନ୍ତି, ଯାହାଙ୍କ ସକ୍ରିୟତା ପରୀକ୍ଷାରେ ସ୍ୱାଭାବିକ ଦେଖାଯାଏ। ଏହି ଏକା ଜୈବିକ ପ୍ରକ୍ରିୟା କେବଳ ରଞ୍ଜକ-ଆଧାରିତ ସ୍କ୍ରିନିଂ ନୁହେଁ, ପରିମାଣାତ୍ମକ ପରୀକ୍ଷାକୁ ମଧ୍ୟ ଭ୍ରମିତ କରେ।

ନିକଟ ଅତୀତରେ ହୋଇଥିବା ରକ୍ତ ସଞ୍ଚାରଣ ଅଭାବକୁ ଲୁଚାଇଦିଏ, କାରଣ ଦାତାଙ୍କ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା ନମୁନାରେ ନିଜର ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ଯୋଗ କରନ୍ତି। ରେଟିକୁଲୋସାଇଟୋସିସ୍ ଏବଂ ଶ୍ୱେତ ରକ୍ତକଣିକାର ହସ୍ତକ୍ଷେପ ସହିତ, ଅବିଶ୍ୱସନୀୟ ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ଫଳାଫଳର କାରଣ ମଧ୍ୟରେ ମେୟୋ କ୍ଲିନିକ୍ ଲାବୋରେଟୋରିଜ୍ ରକ୍ତ ସଞ୍ଚାରଣକୁ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ କରିଛି।

ହେଟେରୋଜାଇଗସ୍ ମହିଳାମାନଙ୍କ କ୍ଷେତ୍ରରେ ମୂଲ୍ୟାୟନ ସବୁଠାରୁ କଠିନ। ଯାଦୃଚ୍ଛିକ X-କ୍ରୋମୋଜୋମ୍ ନିଷ୍କ୍ରିୟତା ଫଳରେ ସ୍ୱାଭାବିକ ଏବଂ ଅଭାବ ଥିବା ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକାର ମିଶ୍ରଣ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ। ଏହାର ସାମଗ୍ରିକ ସକ୍ରିୟତା ଗୁରୁତର ଅଭାବଠାରୁ ଆରମ୍ଭ କରି ଦୃଶ୍ୟତଃ ସ୍ୱାଭାବିକ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ଯେକୌଣସି ସ୍ତରରେ ରହିପାରେ। ଗୁଣାତ୍ମକ ସ୍କ୍ରିନିଂରେ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ଫିନୋଟାଇପ୍ ପ୍ରାୟତଃ ଚିହ୍ନଟ ହୁଏ ନାହିଁ। G6PD ପରୀକ୍ଷା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ WHO ଦଲିଲରେ ଏହି ସୀମାବଦ୍ଧତା ବିଷୟରେ ବିସ୍ତୃତ ଆଲୋଚନା ରହିଛି।

ଏହି ଜୈବିକ ପ୍ରଭାବ ସହିତ ନମୁନା କେତେ ପୁରୁଣା, ସଂରକ୍ଷଣ ତାପମାତ୍ରା, ଦୃଶ୍ୟମାନ ଅନ୍ତିମ ରଙ୍ଗର ବ୍ୟକ୍ତିନିର୍ଭର ମୂଲ୍ୟାୟନ, ହିମାଟୋକ୍ରିଟ୍ ଏବଂ ଅଭିକର୍ମକର ଗୁଣମାନ ବିଶ୍ଳେଷଣରେ ଅତିରିକ୍ତ ଅନିଶ୍ଚିତତା ଯୋଗ କରନ୍ତି।

ସ୍କ୍ରିନିଂ ରୋଗନିର୍ଣ୍ଣୟ ନୁହେଁ

ଅଭାବ ସୂଚକ, ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ବା କ୍ଲିନିକାଲ୍ ତଥ୍ୟ ସହ ମେଳ ଖାଉନଥିବା ସ୍କ୍ରିନିଂ ଫଳାଫଳ ପାଇଁ ପରିମାଣାତ୍ମକ G6PD ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ପରୀକ୍ଷା ଆବଶ୍ୟକ। WHO ତାପମାତ୍ରା-ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ପରିମାଣାତ୍ମକ ସ୍ପେକ୍ଟ୍ରୋଫୋଟୋମେଟ୍ରିକୁ ସନ୍ଦର୍ଭ ପଦ୍ଧତି ଭାବେ ଗ୍ରହଣ କରେ। ସେହି ପରୀକ୍ଷାରେ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକାର ହିମୋଲାଇସେଟ୍‌ରେ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍-6-ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ଏବଂ NADP+ ଯୋଗ କରାଯାଏ, ଏବଂ ଉତ୍ପାଦିତ NADPHକୁ 340 nmରେ ବଢ଼ୁଥିବା ଆଲୋକ ଶୋଷଣ ମାଧ୍ୟମରେ ମାପାଯାଏ। ପରିବର୍ତ୍ତନର ହାର ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ସକ୍ରିୟତା ସହ ସମାନୁପାତିକ ହୁଏ। ଏହାକୁ ସାଧାରଣତଃ ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍ ପରିମାଣ ଅନୁସାରେ ସମନ୍ୱୟ କରି ପ୍ରତି ଗ୍ରାମ୍‌ରେ ୟୁନିଟ୍ ଭାବେ ପ୍ରକାଶ କରାଯାଏ। ବର୍ତ୍ତମାନର କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପରୀକ୍ଷାଗାର ପ୍ରଚଳନର ସାରାଂଶ G6PD ସକ୍ରିୟତା ପାଇଁ ମେୟୋ ପରୀକ୍ଷା କ୍ୟାଟାଲଗ୍‌ର ଏଣ୍ଟ୍ରିରେ ଦିଆଯାଇଛି।

ଫଳାଫଳର ବ୍ୟାଖ୍ୟା ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷାଗାରର ବୈଧୀକୃତ ସନ୍ଦର୍ଭ ପରିସର ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ। ଏହା ପ୍ରାୟତଃ ଜନସମୂହର ସ୍ୱାଭାବିକ ସକ୍ରିୟତା ସାପେକ୍ଷରେ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ ହୁଏ; ଅଭାବକୁ ସାଧାରଣତଃ 30 ପ୍ରତିଶତ ସୀମାମାନ ନିକଟରେ ଏବଂ ମଧ୍ୟବର୍ତ୍ତୀ ସକ୍ରିୟତାକୁ ତାହାଠାରୁ ଉପରେ ଆଲୋଚନା କରାଯାଏ। G6PD ପରୀକ୍ଷା ପାଇଁ WHOର ଲକ୍ଷ୍ୟ ଉତ୍ପାଦ ପ୍ରୋଫାଇଲ୍‌ଗୁଡ଼ିକ (2022) ଏହି ରୋଗନିର୍ଣ୍ଣୟ ଢାଞ୍ଚା ବର୍ଣ୍ଣନା କରନ୍ତି। ନିକଟ ଅତୀତର ହିମୋଲାଇସିସ୍ ବା ରକ୍ତ ସଞ୍ଚାରଣ ଯୋଗୁଁ ଫିନୋଟାଇପ୍ ନିର୍ଦ୍ଧାରଣ ଅବିଶ୍ୱସନୀୟ ହେଲେ, ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକାର ସମୂହ ପୁଣି ସନ୍ତୁଳିତ ହେବା ପରେ ପରୀକ୍ଷା ପୁନରାବୃତ୍ତି କରନ୍ତୁ। ଆଣବିକ ପରୀକ୍ଷା ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ମାପନର ବିକଳ୍ପ ନ ହୋଇ ଅତିରିକ୍ତ ସୂଚନା ଦେଇପାରେ।

ଏକ ପାର୍ଥକ୍ୟ ଯାହା ସ୍ପଷ୍ଟ ରଖିବା ଉଚିତ

ଏହି ପରୀକ୍ଷାଗୁଡ଼ିକରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ଶରୀର ବାହାରେ ବ୍ୟବହୃତ ପରୀକ୍ଷାଗାର ଅଭିକର୍ମକ। ଏହା ରୋଗୀଙ୍କୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଦେବାର ସୁରକ୍ଷା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଆଲୋଚନାଠାରୁ ଅଲଗା ବିଷୟ; ସେହି ବିଷୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାରର ପ୍ରତିନିର୍ଦ୍ଦେଶ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ମାର୍ଗଦର୍ଶନରେ ଆଲୋଚିତ ହୋଇଛି। ଜୈବରସାୟନ ଏହି ଦୁଇ ବିଷୟକୁ ଯୋଡ଼େ, କାରଣ ଔଷଧଟି ମଧ୍ୟ NADPH-ନିର୍ଭର ବିଜାରଣ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ। କିନ୍ତୁ ପରୀକ୍ଷା ଟ୍ୟୁବ୍‌ରେ ଥିବା ରଞ୍ଜକ ରକ୍ତପ୍ରବାହରେ ଦିଆଯାଇଥିବା ଔଷଧ ମାତ୍ରା ନୁହେଁ। ଅନ୍ୟ ଏକ ପରିବେଶରେ ଏହି ରଞ୍ଜକ ଷ୍ଟେନ୍ ଭାବେ କିପରି କାମ କରେ, ତାହା ବୁଝିବା ପାଇଁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଷ୍ଟେନିଂର ନୀତିଗୁଡ଼ିକ ଦେଖନ୍ତୁ। ଏହା ଯେଉଁ ରାସାୟନିକ ପରିବାରର ଅନ୍ତର୍ଗତ, ସେଥିପାଇଁ ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ରେଡକ୍ସ ରଞ୍ଜକ ବିଷୟକ ଆଲୋଚନା ଦେଖନ୍ତୁ।

ସ୍କ୍ରିନିଂ ପଚାରେ, ବିଜାରଣ କ୍ଷମତା ଅକ୍ଷୁଣ୍ଣ ଥିବା ପରି ଦେଖାଯାଉଛି କି ନାହିଁ। ନିଶ୍ଚିତକରଣ ପଚାରେ, ପ୍ରକୃତରେ କେତେ ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ ଅଛି। ରଞ୍ଜକଟି ପ୍ରଥମ ପ୍ରଶ୍ନର ଉତ୍ତର ଭଲ ଭାବେ ଦିଏ, ଯଦି କେହି ତାହାଠାରୁ ଦ୍ୱିତୀୟ ପ୍ରଶ୍ନର ଉତ୍ତର ଆଶା ନ କରନ୍ତି।