L-Artikolu
It-test tar-riduzzjoni tal-blu tal-metilen għall-fluwidu tal-kirxa
Gradwata ċċempel minn razzett b’tubu blu f’idha. Żiedet il-blu tal-metilen mal-fluwidu tal-kirxa għaxar minuti ilu u l-kulur blu għadu hemm. Tistaqsi jekk għandhiex tagħti aktar żebgħa lill-baqra.
Dik il-mistoqsija turi fehim żbaljat. Fit-test tar-riduzzjoni tal-blu tal-metilen għall-fluwidu tal-kirxa, iż-żebgħa tidħol fit-tubu, qatt fl-annimal. It-tubu fih it-test kollu. Il-kejl ta’ kemm il-kulur blu jisparixxi malajr jagħtik informazzjoni dwar il-mikrobi f’dak il-kampjun, mhux dwar trattament li l-annimal jeħtieġ.
Il-konfużjoni tinftiehem għax il-blu tal-metilen jidher fi tliet kuntesti veterinarji separati. Dan l-artiklu jżommhom distinti u juri kif tinterpreta l-ħin tar-riduzzjoni flimkien mal-pH, il-protożoa, il-kwalità tat-teħid tal-kampjun u s-sinjali kliniċi.
X’ikejjel fil-fatt it-test
Il-blu tal-metilen ikun blu meta jkun ossidat u kważi bla kulur meta jkun ridott. Il-fluwidu frisk tal-kirxa minn annimal b’saħħtu għandu kapaċità riduċenti qawwija għax il-batterji anaerobiċi jkunu qed jiffermentaw l-għalf b’mod attiv. Meta tħallat ammont żgħir ta’ żebgħa ma’ dan il-fluwidu, il-metaboliżmu batteriku jneħħi l-kulur fi ftit minuti.
Għalhekk il-prinċipju operattiv huwa sempliċi: flora anaerobika attiva tneħħi l-kulur blu malajr, filwaqt li flora inattiva jew imħassra tneħħih bil-mod. Ħin qasir ifisser kapaċità riduċenti akbar f’dak il-kampjun. Ħin imtawwal jindika attività mikrobika mnaqqsa, sakemm il-kampjun ikun inġabar u ġie mmaniġġjat tajjeb.
Ma jkejjilx direttament il-potenzjal redox tal-kirxa. Studju tal-metodi fl-ifrat li qabbel it-test tar-riduzzjoni ma’ kejl dirett f’millivolts ma sab ebda korrelazzjoni lineari bejn il-ħin tar-riduzzjoni u l-potenzjal redox imkejjel, u kkonkluda li t-tnejn m’għandhomx jitqiesu bħala qari interkambjabbli tal-istess varjabbli. Il-paragun sħiħ huwa miġbur fil-qosor fuq PubMed. Aħseb fit-test tar-riduzzjoni bħala test funzjonali tal-popolazzjoni mikrobika, mhux bħala elettrodu irħis.
Id-deskrizzjoni ta’ Merck/MSD tal-indiġestjoni sempliċi fir-ruminanti tqiegħed il-ħin imtawwal tar-riduzzjoni fl-istess xejra bħall-pH anormali tal-kirxa u l-għadd imnaqqas ta’ protożoa. Ebda valur waħdu ma jagħti d-dijanjożi. Hija x-xejra li tagħtiha.
Proċedura standard ħdejn l-annimal
Il-protokolli jvarjaw kemxejn bejn l-iskejjel, għalhekk irreġistra l-volumi eżatti u t-temperatura li tuża u qabbel ir-riżultati biss fl-istess protokoll. Verżjoni mgħallma ħafna hija din:
- Iġbor mill-inqas 10 sa 20 mL ta’ fluwidu frisk tal-kirxa bl-inqas bżieq, espożizzjoni għall-arja u tkessiħ possibbli. Wettaq it-test minnufih.
- Ipprepara blu tal-metilen ta’ 0.03 fil-mija, jiġifieri 0.3 mg għal kull mL.
- Żid żebgħa f’ammont ta’ 5 fil-mija tal-volum tal-fluwidu. Jiġifieri 1.0 mL ta’ żebgħa ma’ 20 mL ta’ fluwidu, jew 0.5 mL ta’ żebgħa ma’ 10 mL ta’ fluwidu. It-tnejn jagħtu l-istess proporzjon ta’ 20 għal 1 bejn il-fluwidu u ż-żebgħa.
- Żomm it-tieni tubu bi fluwidu mhux trattat mill-istess kampjun bħala l-kontroll tal-kulur.
- Ħallat bil-mod, ibda l-arloġġ minnufih, u żomm it-tubu qrib it-temperatura tal-ġisem, madwar 37 sa 39 grad Celsius skont il-protokoll lokali.
- Irreġistra l-ħin sakemm it-tubu tat-test jaqbel mal-kontroll. Jista’ jibqa’ ċirku blu rqiq fil-wiċċ f’kuntatt mal-arja għax l-ossiġnu jerġa’ jossida ż-żebgħa hemmhekk. Tistenniex sakemm jisparixxi dak iċ-ċirku.
Il-kimika redox tal-blu tal-metilen tispjega għaliex l-ossiġnu huwa importanti hawnhekk. Taħwid qawwi, tubu b’fetħa wiesgħa mhux magħluqa, jew dewmien twil iħallu l-ossiġnu jidħol u jżommu ż-żebgħa blu għal aktar żmien milli kieku kien ikun fil-kirxa stess. Id-dettalji dwar teknika nadifa ta’ ġbir tal-fluwidu tal-kirxa huma importanti għall-istess raġuni. Il-bżieq iddilwixxi l-kampjun u jgħolli l-pH, għalhekk meta jużaw sonda tal-istonku ħafna kliniċisti jarmu l-ewwel porzjon jekk il-volum jippermetti.
X’ikejlu osservazzjonijiet differenti
Il-ħin tar-riduzzjoni jwieġeb mistoqsija waħda biss. Il-valutazzjoni tal-kirxa hawn taħt turi x’tikkontribwixxi kull osservazzjoni ħdejn l-annimal. Uża r-ringiela kollha, mhux ċellola waħda.
| Osservazzjoni | X’tkejjel | Sejba tipika ħdejn l-annimal | Fatturi komuni li jfixklu l-interpretazzjoni |
|---|---|---|---|
| Ħin tar-riduzzjoni tal-blu tal-metilen | Attività riduċenti funzjonali tal-batterji anaerobiċi fil-kampjun | Fl-ifrat spiss 2 sa 6 minuti; fin-nagħaġ u l-mogħoż spiss aktar malajr, b’6 minuti użati bħala limitu prattiku għal attività adegwata u ħinijiet ta’ aktar minn 10 minuti meqjusa anormali ħafna | Kampjun kiesaħ, ittestjat tard, espost għall-arja jew dilwit bil-bżieq; ftit sottostrat wara nuqqas ta’ aptit fit-tul; antimikrobiċi mogħtija mill-ħalq; paragun bejn proporzjonijiet differenti ta’ żebgħa jew temperaturi differenti |
| pH tal-kirxa | Ambjent kimiku, tagħbija ta’ aċidu jew alkali | Ifrat mitmugħa għalf oħxon spiss qrib 6.0 sa 7.2; testi dwar ruminanti żgħar spiss jikkwotaw madwar 6.5 sa 7.5; id-dieta u ż-żmien mill-għalf ibiddlu l-valur | Kontaminazzjoni bil-bżieq tgħolli l-pH f’kampjuni meħuda b’sonda tal-istonku; telf ta’ diossidu tal-karbonju wara l-ġbir; għalf biċ-ċereali jbaxxi l-pH |
| Għadd u motilità tal-protożoa | Integrità tal-popolazzjoni ta’ protożoa ċiljati, speċjalment forom kbar sensittivi għat-tfixkil | Ħafna organiżmi ta’ diversi daqsijiet b’moviment qawwi u direzzjonali f’qatra friska u sħuna | It-tkessiħ inaqqas il-moviment; aċidożi severa tista’ telimina l-protożoa; id-dewmien jagħmel kampjun normali jidher kajman |
| Riħa, kulur u konsistenza | Karattru tal-fermentazzjoni u kontaminazzjoni | Fluwidu kemxejn aromatiku, kannella fl-aħdar u kemxejn viskuż | Riħa putrida jew qarsa b’disbijożi severa; fluwidu ilmawi jew b’ħafna bżieq wara ġbir ħażin |
| Kontrazzjonijiet tal-kirxa u aptit | Funzjoni tal-preistonki u konsum tal-għalf fl-annimal kollu | Kontrazzjonijiet regolari u ruminazzjoni kostanti f’annimal attent | Bidla reċenti fir-razzjon, uġigħ, deidratazzjoni, mard sistemiku |
It-tabella hija l-punt ewlieni. Ħin imtawwal tar-riduzzjoni flimkien ma’ protożoa kajmani, pH anormali u kontrazzjonijiet dgħajfa jindika tnaqqis ġenwin fl-attività mikrobika. Ħin imtawwal waħdu f’annimal attent li qed jixtarr u għandu protożoa attivi jindika problema fil-kampjun, mhux fil-kirxa. Irrepeti l-ġbir qabel taġixxi.
Interpretazzjoni tal-ħin flimkien mal-pH u l-istorja
Id-dieta tistabbilixxi l-linja bażi. Razzjonijiet b’ħafna għalf ikkonċentrat jiffermentaw malajr u jistgħu jneħħu l-kulur taż-żebgħa f’madwar minuta, filwaqt li dieti tal-ħuxlief jistgħu jieħdu diversi minuti, anki f’annimali b’saħħithom. Għalhekk ħin qasir waħdu ma jipprovax saħħa aħjar. Jipprova li aktar sottostrat fermentabbli ltaqa’ ma’ mikrobi attivi.
Tagħbija eċċessiva severa ta’ ċereali tkisser din ix-xejra sempliċi. Il-fermentazzjoni bikrija tal-karboidrati tista’ tkun intensa, imbagħad il-ħsara mill-aċidu trażżan il-flora normali u l-protożoa, u r-riduzzjoni titwal. Għalhekk regola waħda mgħallma tgħid li t-test mhuwiex validu meta l-pH tal-kirxa jkun taħt madwar 5.5. F’dak il-punt il-flora li qed tiġi ttestjata tkun inbidlet.
Gwida prattika għax-xejriet:
- pH normali b’riduzzjoni fi żmien madwar 6 minuti jissuġġerixxi flora funzjonalment attiva.
- pH normali b’riduzzjoni mtawla ħafna jissuġġerixxi inattività minħabba nuqqas ta’ aptit, effett antimikrobiku jew kampjun kompromess.
- pH għoli b’riduzzjoni mtawla spiss isegwi nuqqas ta’ aptit fit-tul bi ftit sottostrat, iżda kkunsidra kontaminazzjoni bil-bżieq mis-sonda.
- pH baxx b’attività mnaqqsa tal-protożoa jqajjem tħassib dwar disbijożi relatata mal-karboidrati. Gwida dwar l-interpretazzjoni tal-pH tal-kirxa tgħin hawnhekk. Valuri taħt 5.5 flimkien ma’ tnaqqis fl-istat ġenerali tal-annimal jindikaw tagħbija eċċessiva ta’ ċereali u aċidożi severa aktar milli indiġestjoni sempliċi.
Dejjem irreġistra tetracyclines mogħtija reċentement mill-ħalq, jonofori fl-għalf, użu fit-tul ta’ antimikrobiċi sistemiċi, bidliet f’daqqa fir-razzjon, kemm dam in-nuqqas ta’ aptit u l-konsum tal-ilma. Il-manwal MSD iwissi speċifikament li tetracyclines mogħtija mill-ħalq jistgħu jnaqqsu sostanzjalment l-attività tal-mikroflora tal-kirxa. Il-jonofori jbiddlu intenzjonalment il-popolazzjonijiet batteriċi. Mingħajr dik l-istorja, ħin imtawwal ma jistax jiġi interpretat.
Il-kwalità tat-teħid tal-kampjun jistħoqqilha l-istess importanza. Riċerka kkontrollata sabet li kampjuni meħuda b’sonda tal-istonku kellhom pH ogħla u inqas aċidi grassi volatili minn kampjuni meħuda b’kannula mill-istess annimali, l-aktar minħabba l-bżieq. Il-ħin tar-riduzzjoni kien tawwal b’mod sinifikanti sa 60 minuta wara l-ġbir għal kull volum ittestjat, u l-kampjuni żgħar kienu l-aktar affettwati. Iġbor mill-inqas 10 mL, ittestja fi żmien 30 minuta, wettaq it-test tar-riduzzjoni kmieni, żomm il-kampjun sħun u naqqas kemm jista’ jkun il-kuntatt mal-arja.
Tliet użi li m’għandhomx jitħalltu
L-istess żebgħa, tliet sistemi differenti.
L-ewwel, it-test tal-fluwidu tal-kirxa deskritt hawnhekk. Il-kampjun huwa fluwidu tal-kirxa miġbur. Iż-żebgħa tiżdied in vitro f’konċentrazzjoni ta’ 0.03 fil-mija. Il-punt finali huwa ż-żmien sakemm jisparixxi l-kulur. L-għan huwa l-valutazzjoni tal-attività riduċenti mikrobika.
It-tieni, blu tal-metilen mogħti lil ruminant ħaj. L-eżempju stabbilit huwa terapija ġol-vini għal tossikożi minn nitrati jew nitriti b’metemoglobinemija, fejn il-mediċina tirrestawra emoglobina funzjonali. Japplikaw regoli dwar id-doża, il-formulazzjoni, ir-residwi u l-perjodi ta’ rtirar. Dik id-deċiżjoni m’għandha x’taqsam xejn mal-kejl tal-ħin f’tubu. Jekk iż-żebgħa tintuża bħala traċċatur in vivo fi proċedura speċifika, il-prinċipju huwa fejn tivvjaġġa ż-żebgħa, mhux kemm il-mikrobi tal-kirxa jirriduċuha malajr.
It-tielet, it-test tar-riduzzjoni tal-ħalib. Il-kampjun huwa ħalib. Iż-żebgħa tiżdied mal-kampjun tal-ħalib. Telf rapidu tal-kulur blu ġeneralment jindika attività mikrobika akbar u kwalità agħar ta’ konservazzjoni, filwaqt li riduzzjoni bil-mod tindika kwalità aħjar. Dan jagħmel parti mill-mikrobijoloġija tal-ikel u mill-ittestjar tal-kwalità tal-ħalib, mhux mill-mediċina tal-kirxa, u mhuwiex għadd batteriku.
Li l-ismijiet jinżammu espliċiti jipprevjeni l-iżbalji: ħin tar-riduzzjoni tal-fluwidu tal-kirxa, terapija sistemika bil-blu tal-metilen jew użu bħala traċċatur, u test tar-riduzzjoni tal-ħalib. Ir-regola tas-sigurtà tidħol f’sentenza waħda. Iż-żebgħa għat-test tal-kirxa tibqa’ fit-tubu tal-laboratorju u dak it-tubu jintrema. Qatt ma tingħata lill-annimal biex jitwettaq it-test.
Regola qasira għat-telefonata mir-razzett
Standardizza ż-żebgħa għal 0.03 fil-mija u parti 1 ta’ żebgħa għal 20 parti ta’ fluwidu, ittestja fluwidu frisk qrib it-temperatura tal-ġisem kontra kontroll mhux trattat, u interpreta l-minuti flimkien mal-pH, il-motilità tal-protożoa, il-kwalità tal-ġbir, id-dieta, il-mediċini, il-kontrazzjonijiet, l-aptit, l-ippurgar u l-idratazzjoni. Numru iżolat qatt ma jagħti dijanjożi ta’ indiġestjoni. Xejra konsistenti bejn is-sejbiet tagħtiha.