Тест за редукција на метиленско сино во течност од бурагот

Дипломирана ветеринарка се јавува од фарма со сина епрувета во раката. Пред десет минути додала метиленско сино во течност од бурагот, а сината боја сè уште е присутна. Прашува дали треба да ѝ даде уште боја на кравата.

Тоа прашање открива погрешно разбирање. Во тестот за редукција на метиленско сино во течност од бурагот, бојата се додава во епруветата, никогаш во животното. Целиот тест се одвива во епруветата. Мерењето колку брзо исчезнува сината боја дава информации за микробите во тој примерок, а не за третман што му е потребен на животното.

Забуната е разбирлива бидејќи метиленското сино се појавува во три одделни ветеринарни контексти. Оваа статија ги разграничува и покажува како да се толкува времето на редукција заедно со pH, протозоите, квалитетот на земањето примерок и клиничките знаци.

Што всушност мери тестот

Метиленското сино е сино кога е оксидирано и речиси безбојно кога е редуцирано. Свежата течност од бурагот на здраво животно има силно редукциско дејство бидејќи анаеробните бактерии активно ја ферментираат храната. Кога во таква течност ќе измешате мало количество боја, бактерискиот метаболизам ја отстранува бојата во рок од неколку минути.

Значи, принципот на работа е едноставен: активната анаеробна флора брзо ја отстранува сината боја, а неактивната или оштетената флора ја отстранува бавно. Краткото време значи поголем редукциски капацитет во тој примерок. Продолженото време укажува на намалена микробна активност, под услов примерокот да бил правилно земен и обработен.

Тестот не го мери директно редокс-потенцијалот на бурагот. Истражување на методите кај говеда, кое го споредило тестот за редукција со директни мерења во миливолти, не нашло линеарна корелација меѓу времето на редукција и измерениот редокс-потенцијал. Заклучокот бил дека тие не треба да се сметаат за заменливи мерења на истата променлива. Целосната споредба е сумирана на PubMed. Гледајте на тестот за редукција како на функционален тест на микробната популација, а не како на евтина електрода.

Описот на едноставната индигестија кај преживарите од Merck/MSD го сместува продолженото време на редукција во истата слика со абнормална pH на бурагот и намален број протозои. Ниту една вредност сама по себе не ја утврдува дијагнозата. Тоа го прави целокупната слика.

Стандардна постапка покрај животното

Протоколите малку се разликуваат меѓу образовните установи, затоа запишете ги точните волумени и температурата што ги користите и споредувајте ги резултатите само во рамките на истиот протокол. Една широко предавана верзија е:

Земете најмалку 10 до 20 mL свежа течност од бурагот, со минимално присуство на плунка, изложување на воздух и ладење. Направете го тестот веднаш.
Подгответе метиленско сино од 0.03 проценти, што е 0.3 mg на mL.
Додајте боја во количество од 5 проценти од волуменот на течноста. Тоа е 1.0 mL боја во 20 mL течност или 0.5 mL боја во 10 mL течност. Во двата случаи се добива истиот сооднос течност спрема боја од 20 спрема 1.
Чувајте втора епрувета со нетретирана течност од истиот примерок како контрола за бојата.
Нежно измешајте, веднаш започнете со мерење на времето и одржувајте ја епруветата близу до телесната температура, околу 37 до 39 степени Целзиусови, зависно од локалниот протокол.
Запишете го времето додека бојата во тест-епруветата не се изедначи со контролата. Тенок син прстен може да остане на површината во контакт со воздухот бидејќи кислородот таму повторно ја оксидира бојата. Не чекајте да исчезне тој прстен.

Редокс-хемијата на метиленското сино објаснува зошто кислородот е важен тука. Силното протресување, широко отворената епрувета или долгото одложување овозможуваат навлегување кислород и ја задржуваат сината боја подолго отколку што би се случило во самиот бураг. Од истата причина се важни деталите за правилната техника на земање течност од бурагот. Плунката го разредува примерокот и ја зголемува pH, па при земање со желудочна сонда многу клиничари го отфрлаат првиот дел, ако количеството го дозволува тоа.

Што мерат различните набљудувања

Времето на редукција одговара само на едно прашање. Проценката на бурагот подолу покажува што придонесува секое набљудување покрај животното. Користете го целиот ред, а не само една ќелија.

Набљудување	Што мери	Типичен наод покрај животното	Чести фактори што го нарушуваат толкувањето
Време на редукција на метиленско сино	Функционална редукциска активност на анаеробните бактерии во примерокот	Кај говедата често 2 до 6 минути; кај овците и козите често побрзо, при што 6 минути се користат како практична гранична вредност за соодветна активност, а времињата над 10 минути се изразено абнормални	Ладен, задоцнет, аериран или со плунка разреден примерок; малку супстрат по продолжена анорексија; орални антимикробни средства; споредување при различни соодноси на боја или температури
pH на бурагот	Хемиска средина, киселинско или алкално оптоварување	Кај говеда хранети со кабаста храна често околу 6.0 до 7.2; во текстовите за мали преживари често се наведува околу 6.5 до 7.5; исхраната и времето поминато од хранењето ја менуваат вредноста	Контаминацијата со плунка ја зголемува pH во примероците земени со желудочна сонда; губење јаглерод диоксид по земањето; хранењето со жито ја намалува pH
Број и подвижност на протозоите	Интегритет на популацијата на цилијати, особено на големите форми чувствителни на нарушувања	Многубројни организми со различни големини и со енергично насочено движење во топла, свежа капка	Ладењето го забавува движењето; тешката ацидоза може да ги елиминира протозоите; одложувањето прави нормален примерок да изгледа слабо активен
Мирис, боја и конзистенција	Карактер на ферментацијата и контаминација	Течност со благо ароматичен мирис, зеленикаво-кафеава боја и мала вискозност	Гнил или кисел мирис при тешка дисбиоза; воденеста течност или течност со многу плунка по неправилно земање
Контракции на бурагот и апетит	Функција на преджелудниците и внес на храна кај целото животно	Редовни контракции и постојано преживање кај животно со добра општа состојба	Неодамнешна промена на оброкот, болка, дехидратација, системско заболување

Табелата ја содржи суштината. Продолжено време на редукција, заедно со слабо подвижни протозои, абнормална pH и слаби контракции, укажува на вистински намалена микробна активност. Изолирано продолжено време кај животно со добра општа состојба, кое прежива и има активно подвижни протозои, укажува на проблем со примерокот, а не со бурагот. Повторете го земањето примерок пред да преземете мерки.

Толкување на времето заедно со pH и анамнезата

Исхраната ја одредува почетната состојба. Оброците богати со концентрати брзо ферментираат и можат да ја отстранат бојата за околу една минута, додека исхраната со сено може да бара неколку минути, дури и кај здрави животни. Затоа, краткото време само по себе не докажува подобро здравје. Тоа покажува дека повеќе ферментабилен супстрат дошол во контакт со активни микроби.

Тешкото преоптоварување со жито го нарушува овој едноставен образец. Раната ферментација на јаглехидратите може да биде интензивна, а потоа оштетувањето од киселината ги потиснува нормалната флора и протозоите, па редукцијата се продолжува. Затоа едно правило што се предава вели дека тестот не е валиден кога pH на бурагот е под околу 5.5. Во тој момент флората што се тестира веќе е променета.

Практичен водич за препознавање на обрасците:

Нормална pH со редукција во рок од околу 6 минути укажува на функционално активна флора.
Нормална pH со изразено продолжена редукција укажува на неактивност поради анорексија, дејство на антимикробни средства или нарушен квалитет на примерокот.
Висока pH со продолжена редукција често следи по продолжена анорексија со малку супстрат, но земете ја предвид и контаминацијата со плунка при земањето со сонда.
Ниска pH со намалена активност на протозоите предизвикува сомнеж за дисбиоза поврзана со јаглехидрати. Тука помагаат насоките за толкување на pH на бурагот. Вредностите под 5.5 со нарушена општа состојба укажуваат не на едноставна индигестија, туку на преоптоварување со жито и тешка ацидоза.

Секогаш евидентирајте неодамнешна орална примена на тетрациклини, јонофори во храната, продолжена системска примена на антимикробни средства, нагли промени на оброкот, траење на анорексијата и внес на вода. Прирачникот на MSD изречно предупредува дека оралните тетрациклини можат значително да ја намалат микрофлората на бурагот. Јонофорите намерно го менуваат составот на бактериските популации. Без таа анамнеза, продолженото време не може да се толкува.

Квалитетот на земањето примерок заслужува еднакво внимание. Контролирано истражување покажало дека примероците земени со желудочна сонда имаат повисока pH и помалку испарливи масни киселини од примероците земени преку канила од истите животни, главно поради плунката. Времето на редукција било значително продолжено 60 минути по земањето кај секој испитан волумен, а најмногу биле засегнати малите примероци. Земете најмалку 10 mL, тестирајте во рок од 30 минути, направете го тестот за редукција на почетокот, одржувајте го примерокот топол и сведете го контактот со воздух на минимум.

Три употреби што не смеат да се мешаат

Истата боја, три различни системи.

Прво, тестот на течност од бурагот опишан тука. Примерокот е земена течност од бурагот. Бојата се додава in vitro во концентрација од 0.03 проценти. Крајниот показател е времето до обезбојување. Целта е проценка на микробната редукциска активност.

Второ, метиленско сино дадено на жив преживар. Утврдениот пример е интравенска терапија за токсикоза од нитрати или нитрити со метхемоглобинемија, при која лекот ја враќа функционалноста на хемоглобинот. Важат правилата за доза, формулација, резидуи и каренца. Таа одлука нема никаква врска со мерењето време во епрувета. Ако бојата се користи како in vivo трагач во одредена постапка, принципот е да се следи каде се движи бојата, а не колку брзо микробите во бурагот ја редуцираат.

Трето, тестот за редукција во млеко. Примерокот е млеко. Бојата се додава во примерокот од млеко. Брзото губење на сината боја генерално укажува на поголема микробна активност и послаба трајност, додека бавната редукција укажува на подобар квалитет. Тој припаѓа на микробиологијата на храна и тестирањето на квалитетот на млекото, а не на медицината на бурагот, и не претставува броење бактерии.

Јасното именување спречува грешки: време на редукција во течност од бурагот, системска терапија со метиленско сино или употреба како трагач, и тест за редукција во млеко. Безбедносното правило се собира во една реченица. Бојата за тестот на бурагот останува во лабораториската епрувета, а таа епрувета потоа се отфрла. Никогаш не му се дава на животното за да се изведе тестот.

Кратко правило за повикот од фармата

Стандардизирајте ја бојата на 0.03 проценти и 1 дел боја спрема 20 дела течност, тестирајте свежа течност близу до телесната температура со споредба со нетретирана контрола и толкувајте ги минутите заедно со pH, подвижноста на протозоите, квалитетот на земањето примерок, исхраната, лековите, контракциите, апетитот, изметот и хидратацијата. Изолирана бројка никогаш не поставува дијагноза на индигестија. Тоа го прави усогласената целокупна слика.