ເມທິລີນບລູ ແລະ ໄນຕຣິກອອກໄຊ: NOS, cGMP ແລະ ການສົ່ງສັນຍານໃນຫຼອດເລືອດ

ຄຳຖາມນີ້ຟັງເບິ່ງຄືງ່າຍ: ເມທິລີນບລູຍັບຍັ້ງໄນຕຣິກອອກໄຊບໍ? ໃນຫ້ອງທົດລອງ ຄຳຕອບແຍກອອກເປັນສີ່ຄຳຖາມທີ່ຕ່າງກັນ ແລະ ແຕ່ລະຄຳຖາມກໍມີວິທີທົດສອບທາງການທົດລອງທີ່ຕ່າງກັນ. ການສັບສົນລະຫວ່າງຄຳຖາມເຫຼົ່ານີ້ເປັນເຫດຜົນຫຼັກທີ່ເຮັດໃຫ້ບົດຂຽນກ່ຽວກັບເມທິລີນບລູ ແລະ ໄນຕຣິກອອກໄຊອ່ານແລ້ວຄືມີຄວາມໝັ້ນໃຈ ແຕ່ຍັງຄຸມເຄືອ.

ລອງຄິດວ່າສັນຍານໄນຕຣິກອອກໄຊເປັນຕ່ອງໂສ້ທີ່ມີສີ່ຂໍ້. ຍີນຖືກຖອດລະຫັດເພື່ອສ້າງເອນໄຊໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສ. ເອນໄຊປ່ຽນອາຈີນີນເປັນໄນຕຣິກອອກໄຊ. ກາຊແຜ່ໄປຫາເປົ້າໝາຍກ່ອນທີ່ຈະເຮັດປະຕິກິລິຍາກັບສິ່ງອື່ນ. ກວານີເລດໄຊເຄລສທີ່ລະລາຍໄດ້ຮັບຮູ້ມັນ ແລະ ສ້າງ GMP ແບບວົງແຫວນ. ມີລາຍງານທີ່ຕີພິມແລ້ວວ່າເມທິລີນບລູມີຜົນຕໍ່ທຸກຂໍ້ຂອງຕ່ອງໂສ້ນີ້ ແຕ່ຫຼັກຖານມາຈາກລະບົບທົດລອງ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ ແລະ ໄອໂຊຟອມທີ່ຕ່າງກັນ. ຜົນທີ່ເກີດຂຶ້ນຢູ່ຂໍ້ໜຶ່ງບໍ່ໄດ້ພິສູດວ່າມີການອອກລິດຢູ່ອີກຂໍ້ໜຶ່ງ.

ອະທິບາຍຕ່ອງໂສ້ມາດຕະຖານໃຫ້ເຂົ້າໃຈງ່າຍ

ໃນຝາຫຼອດເລືອດ ລຳດັບມາດຕະຖານດຳເນີນໄປແບບນີ້. ສິ່ງກະຕຸ້ນອອກລິດຕໍ່ເຊລເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດ. ເອນໄຊໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສຂອງເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດ ທີ່ເອີ້ນວ່າ eNOS ຫຼື NOS3 ສ້າງໄນຕຣິກອອກໄຊປະລິມານນ້ອຍໃນຊ່ວງສັ້ນໆ. ກາຊແຜ່ເຂົ້າໄປໃນເຊລກ້າມຊີ້ນກ້ຽງທີ່ຢູ່ຂ້າງຄຽງ, ຈັບກັບຮີມທີ່ມີທາດເຫຼັກໃນສະພາບຣີດິວຊ໌ຂອງກວານີເລດໄຊເຄລສທີ່ລະລາຍໄດ້ ແລະ ເລັ່ງການປ່ຽນ GTP ເປັນ GMP ແບບວົງແຫວນ. GMP ແບບວົງແຫວນກະຕຸ້ນໂປຣຕີນໄຄເນສ G, ການຄວບຄຸມແຄລຊຽມປ່ຽນໄປ ແລະ ກ້າມຊີ້ນຄາຍຕົວ.

ຍັງມີຕ່ອງໂສ້ທີສອງທີ່ຄວນແຍກອອກຈາກກັນ. ໃນລະຫວ່າງການຕິດເຊື້ອ ຫຼື ການສຳຜັດກັບໄຊໂຕໄຄນ໌ ເຊລຈະຖອດລະຫັດເພື່ອສ້າງເອນໄຊອີກຊະນິດໜຶ່ງ ຄື ໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສຊະນິດທີ່ຖືກຊັກນຳໄດ້ ຫຼື iNOS ທີ່ເອີ້ນອີກຊື່ວ່າ NOS2. ມັນຜະລິດໄນຕຣິກອອກໄຊໃນອັດຕາທີ່ສູງກວ່າ ແລະ ຕໍ່ເນື່ອງດົນກວ່າ eNOS. ໄອໂຊຟອມທີສາມ ຄື NOS ຂອງເຊລປະສາດ ຫຼື nNOS ກໍຢູ່ໃນອີກບໍລິບົດໜຶ່ງ. ເມື່ອບົດຄົ້ນຄວ້າໃຊ້ຄຳວ່າໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສໂດຍບໍ່ລະບຸໄອໂຊຟອມ ໃຫ້ຢຸດກວດເບິ່ງວ່າໄດ້ວັດແທກຊະນິດໃດ. ບົດພາບລວມກ່ຽວກັບວິທີທີ່ເມທິລີນບລູເຄື່ອນຍ້າຍເອເລັກຕຣອນກໍຊີ້ໃຫ້ເຫັນປະເດັນດຽວກັນນີ້ສຳລັບເປົ້າໝາຍຣີດອກຊ໌ໂດຍທົ່ວໄປ: ຕົວຖ່າຍທອດບໍ່ເຮັດຫຍັງດ້ວຍຕົວມັນເອງ ແລະ ສານທີ່ຮ່ວມປະຕິກິລິຍາຢູ່ແຕ່ລະປາຍເປັນຕົວກຳນົດຜົນລັບ.

GMP ແບບວົງແຫວນທີ່ວັດແທກໄດ້ກໍເປັນຄ່າອ່ານຜົນລວມ ບໍ່ແມ່ນການທົດສອບເອນໄຊໂດຍກົງ. ລະດັບຂອງມັນສະທ້ອນການສັງເຄາະໂດຍໄຊເຄລສ ຫັກລົບດ້ວຍການສະຫຼາຍໂດຍຟອສໂຟໄດເອສເທີເຣສ ໂດຍສະເພາະ PDE5 ໃນກ້າມຊີ້ນກ້ຽງຂອງຫຼອດເລືອດ. ດັ່ງນັ້ນ ການຫຼຸດລົງຂອງ GMP ແບບວົງແຫວນຈຶ່ງໝາຍຄວາມວ່າມີສັນຍານໄປເຖິງຕົວຮັບຮູ້ໜ້ອຍລົງ. ຄ່ານີ້ພຽງຢ່າງດຽວບໍ່ໄດ້ບອກວ່າຂໍ້ໃດຂອງຕ່ອງໂສ້ລົ້ມເຫຼວ.

ຂໍ້ທີ 1: ມີການສ້າງເອນໄຊ iNOS ໜ້ອຍລົງ

ໃນເຊລແມັກໂຄຣຟາຈຂອງໜູທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍລິໂພໂພລີແຊັກຄາໄຣດ໌ຈາກແບັກທີເຣຍ, ອິນເຕີເຟີຣອນແກມມາ ຫຼື ທັງສອງຢ່າງ ເມທິລີນບລູໄດ້ປ້ອງກັນການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງໂປຣຕີນ iNOS ທີ່ຄາດໄວ້ ແລະ ກົດການສ້າງ RNA ນຳຂ່າວຂອງ iNOS ຢ່າງຫຼາຍໃນການທົດລອງການຖອດລະຫັດໃນແມັກໂຄຣຟາຈ. ສ່ວນທີ່ໃຫ້ຂໍ້ມູນສຳຄັນຄືສິ່ງທີ່ບໍ່ປ່ຽນແປງ. ການສະຫຼາຍຂອງຕົວຍັບຍັ້ງ I kappa B alpha, ການເຕີມໝູ່ຟອສເຟດໃຫ້ NF kappa B ແລະ STAT1 ແລະ ການເຄື່ອນຍ້າຍປັດໄຈເຫຼົ່ານີ້ເຂົ້າໄປໃນນິວເຄລຍສ ຍັງຄົງດຳເນີນໄປໄດ້ເກືອບຕາມປົກກະຕິ. ສິ່ງທີ່ຫຼຸດລົງຄືການຈັບຂອງພວກມັນກັບ DNA ເຊິ່ງຢືນຢັນດ້ວຍການຕົກຕະກອນໂຄຣມາຕິນດ້ວຍພູມຄຸ້ມກັນ ທີ່ສະແດງວ່າມີການຈັບຢູ່ບໍລິເວນໂປຣໂມເຕີຂອງ iNOS ໜ້ອຍລົງ.

ນັ້ນເປັນຜົນຕໍ່ການຄວບຄຸມຍີນໃນຂັ້ນກ່ອນທີ່ຈະກຳນົດປະລິມານເອນໄຊ ບໍ່ແມ່ນການຂັດຂວາງເອນໄຊທີ່ມີຢູ່ແລ້ວໃນທັນທີ. ມັນເປັນສ່ວນໜຶ່ງຂອງການສົ່ງສັນຍານການອັກເສບ ເຊິ່ງປັດໄຈການຖອດລະຫັດຕ້ອງຈັບກັບໂປຣໂມເຕີກ່ອນທີ່ໂປຣຕີນຈະປາກົດຂຶ້ນ. ຜົນນີ້ບໍ່ໄດ້ບອກຫຍັງໂດຍກົງກ່ຽວກັບ eNOS ທີ່ມີຢູ່ຕາມປົກກະຕິໃນຫຼອດເລືອດທີ່ຢູ່ໃນສະພາບພັກ ແລະ ຄວນອະທິບາຍຕາມຂອບເຂດນັ້ນ.

ຂໍ້ທີ 2: ເອນໄຊ NOS ທີ່ມີຢູ່ແລ້ວເຮັດວຽກຊ້າລົງ

ການສຶກສາໃນໜູແຣັດໄດ້ທົດສອບອີກລະດັບໜຶ່ງ. ໜູແຣັດເພດຜູ້ທີ່ຍັງມີສະຕິໄດ້ຮັບລິໂພໂພລີແຊັກຄາໄຣດ໌ທາງຫຼອດເລືອດດຳ ແລ້ວສາມຊົ່ວໂມງຕໍ່ມາໄດ້ຮັບນ້ຳເກືອ ຫຼື ເມທິລີນບລູ 3 mg ຕໍ່ kg ທາງຫຼອດເລືອດດຳ. ຈາກນັ້ນໄດ້ວັດແທກກິດຈະກຳຂອງໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສໃນໄຮໂພທາລາມັສສ່ວນຖານດ້ານໃນ ໂດຍອາໄສການປ່ຽນອາຈີນີນທີ່ຕິດສານໝາຍເປັນຊິຕຣູລີນ ໃນການສຶກສາກິດຈະກຳ NOS ໃນໄຮໂພທາລາມັສ. ຄວາມຄຽດຮ່ວມກັບນ້ຳເກືອພຽງຢ່າງດຽວໄດ້ຊັກນຳໃຫ້ເກີດກິດຈະກຳທີ່ບໍ່ຂຶ້ນກັບແຄລຊຽມບາງສ່ວນ ແລະ ລິໂພໂພລີແຊັກຄາໄຣດ໌ເພີ່ມກິດຈະກຳນັ້ນເປັນປະມານສິບເທົ່າຂອງລະດັບກຸ່ມຄວບຄຸມ. ເມທິລີນບລູເຮັດໃຫ້ອົງປະກອບທີ່ຖືກຊັກນຳທັງສອງຫາຍໄປ. ກິດຈະກຳທີ່ມີຢູ່ຕາມປົກກະຕິແລະຂຶ້ນກັບແຄລຊຽມ ບໍ່ໄດ້ປ່ຽນແປງໃນເນື້ອເຍື່ອນັ້ນ ທີ່ປະລິມານ ແລະ ເວລາວັດແທກນັ້ນ.

ໃຫ້ອ່ານຜົນນັ້ນຕາມທີ່ລາຍງານໄວ້ຢ່າງແນ່ນອນ: ກິດຈະກຳແບບ iNOS ທີ່ວັດແທກໄດ້ຖືກກົດລົງພາຍໃຕ້ເງື່ອນໄຂເຫຼົ່ານັ້ນ. ນີ້ບໍ່ແມ່ນການວັດແທກການສະແດງອອກຂອງຍີນ ແລະ ບໍ່ແມ່ນຫຼັກຖານວ່າມັນເລືອກຍັບຍັ້ງ iNOS ຫຼາຍກວ່າ eNOS ຫຼື nNOS ສະເໝີໄປ. ວຽກທົດລອງກັບເອນໄຊບໍລິສຸດເຮັດໃຫ້ຂໍ້ຄວນລະວັງນີ້ຊັດເຈນຂຶ້ນ. ໃນການທົດສອບໄນຕຣິກອອກໄຊຊິນເທສບໍລິສຸດໂດຍກົງ ເມທິລີນບລູຂັດຂວາງການສ້າງຊິຕຣູລີນຢ່າງສົມບູນທີ່ 30 ໄມໂຄຣໂມລາ ໂດຍມີຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນທີ່ຍັບຍັ້ງໄດ້ເຄິ່ງໜຶ່ງປະມານ 5.3 ໄມໂຄຣໂມລາເມື່ອບໍ່ມີຊູເປີອອກໄຊດິສມິວເທສ ແລະ 9.2 ໄມໂຄຣໂມລາເມື່ອມີມັນ ຕາມທີ່ລາຍງານໃນການປຽບທຽບ NOS ແລະ ກວານີເລດໄຊເຄລສບໍລິສຸດ. ການສຶກສາ nNOS ບໍລິສຸດອີກງານໜຶ່ງຊີ້ວ່າການອອກຊິໄດຊ໌ຮີມທີ່ຈັບຢູ່ກັບເອນໄຊມີສ່ວນກ່ຽວຂ້ອງ. ບົດຮຽນທີ່ນຳໄປໃຊ້ໄດ້ຄື ການຍັບຍັ້ງ NOS ໂດຍກົງມີຢູ່ຈິງໃນລະບົບທີ່ແຍກອອກມາທົດລອງ ແຕ່ຜົນຈາກໄຮໂພທາລາມັສບໍ່ສາມາດນຳໄປຂະຫຍາຍເປັນຂໍ້ອ້າງທົ່ວໄປວ່າເມທິລີນບລູບໍ່ກະທົບຕໍ່ NOS ທີ່ມີຢູ່ຕາມປົກກະຕິທຸກຊະນິດໃນທຸກບ່ອນ.

ຂໍ້ທີ 3: ໄນຕຣິກອອກໄຊສູນເສຍໄປກ່ອນຈະໄປເຖິງ

ຫຼັກຖານທີ່ຊັດເຈນທີ່ສຸດວ່າສິ່ງອື່ນນອກຈາກການຂັດຂວາງເອນໄຊສາມາດອະທິບາຍການຫຼຸດລົງຂອງ GMP ແບບວົງແຫວນໄດ້ ມາຈາກເຊລກ້າມຊີ້ນກ້ຽງຂອງຫຼອດເລືອດແດງປອດກະຕ່າຍທີ່ລ້ຽງໃນຫ້ອງທົດລອງ. ການອອກແບບທົດລອງໄດ້ຂ້າມ NOS ພາຍໃນເຊລຢ່າງສິ້ນເຊີງ ໂດຍເຕີມສານປ່ອຍໄນຕຣິກອອກໄຊໂດຍກົງ ແລ້ວກວດເບິ່ງວ່າເມທິລີນບລູຍັງກົດການຕອບສະໜອງຂອງ GMP ແບບວົງແຫວນຫຼືບໍ່ ໃນການສຶກສາຊູເປີອອກໄຊໃນກ້າມຊີ້ນກ້ຽງຂອງຫຼອດເລືອດ.

ໄດ້ທົດສອບສານປ່ອຍສາມຊະນິດໃນຊ່ວງ 1 ຫາ 100 ໄມໂຄຣໂມລາ: S ໄນໂຕຣໂຊ L ຊິສເຕອີນ, ໂຊດຽມໄນໂຕຣພຣັສໄຊດ໌ ແລະ ສານຄ້າຍຄືກັນທີ່ມີຄວາມຄົງຕົວແລະຖືກເອົາໝູ່ອາມີນອອກ ທີ່ເອີ້ນວ່າ MPANO. ທັງໝົດເພີ່ມ GMP ແບບວົງແຫວນປະມານ 1.5 ເທົ່າຫາ 12 ເທົ່າ. ເມທິລີນບລູທີ່ 10 ໄມໂຄຣໂມລາຍັບຍັ້ງການຕອບສະໜອງຕໍ່ສອງຊະນິດທຳອິດໄດ້ 51 ຫາ 100 ເປີເຊັນ ແລະ ປ່ອຍໃຫ້ການຕອບສະໜອງຕໍ່ MPANO ບໍ່ປ່ຽນແປງ. ຖ້າເມທິລີນບລູພຽງແຕ່ຂັດຂວາງບໍລິເວນເລັ່ງປະຕິກິລິຍາຂອງໄຊເຄລສ ການເລືອກມີຜົນຕໍ່ສານປ່ອຍແບບນັ້ນຈະອະທິບາຍໄດ້ຍາກ ເພາະທັງສາມຊະນິດລ້ວນໄປຈົບທີ່ເອນໄຊດຽວກັນໃນຂັ້ນຕໍ່ມາ.

ຈາກນັ້ນ ການທົດລອງຄວບຄຸມສາມຢ່າງໄດ້ລະບຸວ່າກົນໄກນີ້ກ່ຽວຂ້ອງກັບຊູເປີອອກໄຊ. ຢ່າງທຳອິດ ການສ້າງຊູເປີອອກໄຊນອກເຊລດ້ວຍແຊນທີນຮ່ວມກັບແຊນທີນອອກຊິເດສເຮັດໃຫ້ເກີດຮູບແບບດຽວກັນ: ການຕອບສະໜອງຕໍ່ CYSNO ແລະ ໄນໂຕຣພຣັສໄຊດ໌ຖືກຂັດຂວາງ ແຕ່ MPANO ບໍ່ຖືກກະທົບ. ຢ່າງທີສອງ ເມທິລີນບລູເຮັດໃຫ້ເຊລກ້າມຊີ້ນກ້ຽງຜະລິດຊູເປີອອກໄຊຕາມປະລິມານທີ່ໃຊ້ ແລະ ໄລຍະເວລາ ໂດຍວັດແທກຜ່ານການຣີດິວຊ໌ໄຊໂຕໂຄຣມ c. ຢ່າງທີສາມ ຊູເປີອອກໄຊດິສມິວເທສປ້ອງກັນການຍັບຍັ້ງໄດ້ຢ່າງສົມບູນ ໃນຂະນະທີ່ຄາຕາເລສເຮັດບໍ່ໄດ້ ເຊິ່ງຊີ້ວ່າຊູເປີອອກໄຊ ບໍ່ແມ່ນໄຮໂດຣເຈນເປີອອກໄຊ ເປັນສານທີ່ກໍ່ຜົນໂດຍກົງໃນລະບົບທົດລອງນັ້ນ.

ການທົດລອງແບບລ້ຽງເຊລຮ່ວມກັນກໍຄວນອະທິບາຍ ເພາະມັນບອກຕຳແໜ່ງທີ່ຜົນເກີດຂຶ້ນ. ເຊລເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດເທິງແຜ່ນແກ້ວປິດຕົວຢ່າງຖືກລ້ຽງຮ່ວມກັບເຊລກ້າມຊີ້ນກ້ຽງເປັນເວລາສັ້ນໆ ເຮັດໃຫ້ປັດໄຈຈາກເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດທີ່ປ່ອຍອອກໃນສະພາບພື້ນຖານເພີ່ມ GMP ແບບວົງແຫວນໃນກ້າມຊີ້ນກ້ຽງສາມຫາແປດເທົ່າ. ການໃຫ້ເມທິລີນບລູກ່ອນແກ່ເຊລໃນສ່ວນໃດສ່ວນໜຶ່ງໄດ້ຫຼຸດສັນຍານນັ້ນ ແລະ ຊູເປີອອກໄຊດິສມິວເທສຊ່ວຍກູ້ຄືນຜົນຈາກການໃຫ້ເມທິລີນບລູກ່ອນແກ່ເຊລເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດໄດ້ບາງສ່ວນ. ເວົ້າອີກແບບໜຶ່ງ ເມທິລີນບລູບໍ່ຈຳເປັນຕ້ອງອອກລິດພາຍໃນເຊລກ້າມຊີ້ນກ້ຽງທີ່ເປັນຕົວຮັບຮູ້ສັນຍານເລີຍ. ມັນສາມາດຫຼຸດສັນຍານໄດ້ໂດຍກຳຈັດສານນຳຂ່າວໃນລະຫວ່າງທາງ. ຄູ່ມືການອ່ານງານຄົ້ນຄວ້າເມທິລີນບລູຖືວ່ານີ້ເປັນຫຼັກການທົ່ວໄປ: ລະບຸສ່ວນທີ່ໄດ້ຮັບການແຊກແຊງກ່ອນຈະລະບຸເປົ້າໝາຍລະດັບໂມເລກຸນ.

ການເອີ້ນສິ່ງນີ້ວ່າການຍັບຍັ້ງ NOS ຈະບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ສານປ່ອຍບໍ່ຈຳເປັນຕ້ອງອາໄສຂັ້ນຕອນຂອງເອນໄຊຊິນເທສເພື່ອເຮັດວຽກ ແຕ່ສັນຍານກໍຍັງຫຼຸດລົງ.

ຂໍ້ທີ 4: ຕົວຮັບຮູ້ສັນຍານເອງຕອບສະໜອງໜ້ອຍລົງ

ມີຜົນໂດຍກົງຕໍ່ກວານີເລດໄຊເຄລສທີ່ລະລາຍໄດ້ ແຕ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນມີຄວາມສຳຄັນ. ໃນການປຽບທຽບເອນໄຊບໍລິສຸດທີ່ອ້າງເຖິງຂ້າງເທິງ ໄຊເຄລສທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍໄນຕຣິກອອກໄຊຕ້ອງໃຊ້ເມທິລີນບລູປະມານ 60 ໄມໂຄຣໂມລາເພື່ອຍັບຍັ້ງໄດ້ເຄິ່ງໜຶ່ງ ທຽບກັບການຍັບຍັ້ງ NOS ໄດ້ເຄິ່ງໜຶ່ງທີ່ປະມານ 5 ຫາ 9 ໄມໂຄຣໂມລາ ແລະ ແມ່ນແຕ່ 1 ມິລລິໂມລາກໍຂັດຂວາງໄດ້ສູງສຸດພຽງບາງສ່ວນ. ນັ້ນເປັນຄວາມແຕກຕ່າງປະມານຫົກຫາສິບເອັດເທົ່າ. ດັ່ງນັ້ນ ການທົດລອງໃນເຊລທີ່ໃຊ້ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນລະດັບໄມໂຄຣໂມລາຕ່ຳແລ້ວເຮັດໃຫ້ GMP ແບບວົງແຫວນຫຼຸດລົງ ຈຶ່ງບໍ່ສາມາດລະບຸວ່າເປັນການຍັບຍັ້ງໄຊເຄລສຢ່າງຈຳເພາະໂດຍອາໄສພຽງຄ່າ GMP ແບບວົງແຫວນເທົ່ານັ້ນ.

ການສຶກສາຣີດອກຊ໌ໃນພາຍຫຼັງໄດ້ເພີ່ມຂໍ້ຄວນລະວັງອີກຢ່າງໜຶ່ງ: ເມທິລີນບລູເຮັດໃຫ້ໄຊເຄລສທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍໄນຕຣິກອອກໄຊໝົດກິດຈະກຳ ຜ່ານກົນໄກທີ່ຕ່າງຈາກການອອກຊິໄດຊ໌ທາດເຫຼັກໃນຮີມດ້ວຍອາກາດແບບງ່າຍໆ. ດັ່ງນັ້ນ ຕົວຮັບຮູ້ສັນຍານສາມາດເຮັດວຽກບົກພ່ອງໄດ້ ແຕ່ກົນໄກທາງເຄມີຍັງບໍ່ມີຂໍ້ສະຫຼຸບທີ່ແນ່ນອນ ແລະ ຊ່ອງຫວ່າງຂອງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນນີ້ໝາຍຄວາມວ່າ ໃນການສຳຜັດທີ່ລະດັບໄມໂຄຣໂມລາຕ່ຳ ຄວນທົດສອບຕັດຜົນຈາກຊູເປີອອກໄຊ ແລະ NOS ອອກກ່ອນ. ການຄວບຄຸມຟອສໂຟໄດເອສເທີເຣສກໍຄວນຢູ່ໃນຂັ້ນນີ້ເຊັ່ນກັນ. ຖ້າບໍ່ໄດ້ວັດແທກ ຫຼື ຂັດຂວາງການສະຫຼາຍ ການສະສົມ GMP ແບບວົງແຫວນທີ່ຫຼຸດລົງອາດສອດຄ່ອງກັບການສັງເຄາະທີ່ໜ້ອຍລົງ, ການສະຫຼາຍທີ່ໄວຂຶ້ນ ຫຼື ທັງສອງຢ່າງ.

ເປັນຫຍັງຈຶ່ງບໍ່ສາມາດຫຍໍ້ທັງໝົດນີ້ເປັນຂໍ້ອ້າງດຽວກ່ຽວກັບຄວາມດັນເລືອດ

ແຕ່ລະຂໍ້ຂອງຕ່ອງໂສ້ຖືກຢືນຢັນໃນລະບົບທີ່ຕ່າງກັນ. ການຖອດລະຫັດໃນແມັກໂຄຣຟາຈບໍ່ແມ່ນກິດຈະກຳເອນໄຊໃນໄຮໂພທາລາມັສ. ກິດຈະກຳໃນໄຮໂພທາລາມັສຫຼັງໄດ້ຮັບລິໂພໂພລີແຊັກຄາໄຣດ໌ບໍ່ແມ່ນການຄວບຄຸມຄວາມຕຶງຕົວໂດຍເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດໃນສະພາບພັກ. ປັດໄຈຈາກເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດທີ່ປ່ອຍອອກໃນສະພາບພື້ນຖານໃນການລ້ຽງເຊລຮ່ວມກັນ ບໍ່ແມ່ນການຂະຫຍາຍຫຼອດເລືອດທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍສານກະຕຸ້ນຕົວຮັບ. ເຊລຫຼອດເລືອດແດງປອດທີ່ລ້ຽງໃນຫ້ອງທົດລອງແລະສຳຜັດກັບເມທິລີນບລູ 10 ໄມໂຄຣໂມລາ ບໍ່ແມ່ນລະບົບໄຫຼວຽນເລືອດຂອງມະນຸດ. ການລວມທັງໝົດເຂົ້າເປັນຂໍ້ຄວາມເຊັ່ນວ່າ ເມທິລີນບລູເພີ່ມຄວາມດັນເລືອດໂດຍຂັດຂວາງໄນຕຣິກອອກໄຊ ເປັນການລະເລີຍຄວາມແຕກຕ່າງທີ່ການທົດລອງຄວບຄຸມໄດ້ຖືກອອກແບບມາເພື່ອຮັກສາໄວ້ໂດຍສະເພາະ.

ການກວດສອບສາມຢ່າງຊ່ວຍໃຫ້ການອະທິບາຍກົງຕາມຫຼັກຖານ. ຢ່າງທຳອິດ ລະບຸໄອໂຊຟອມ: eNOS ສຳລັບຄວາມຕຶງຕົວຂອງຫຼອດເລືອດໃນສະພາບພັກ, iNOS ສຳລັບການຜະລິດທີ່ຖືກຊັກນຳໃນການອັກເສບ, nNOS ສຳລັບບໍລິບົດຂອງເຊລປະສາດ ແລະ ການທົດລອງເອນໄຊບໍລິສຸດບາງຢ່າງ. ຢ່າງທີສອງ ລະບຸວິທີທີ່ສັນຍານໄນຕຣິກອອກໄຊຖືກສົ່ງມາ: ການສັງເຄາະພາຍໃນເຊລ, ການປ່ອຍຈາກເຢື່ອບຸຫຼອດເລືອດໃນສະພາບພື້ນຖານ ຫຼື ສານປ່ອຍສະເພາະເຊັ່ນ CYSNO, ໄນໂຕຣພຣັສໄຊດ໌ ຫຼື MPANO ເພາະສານປ່ອຍທີ່ຄົງຕົວບໍ່ຖືກເມທິລີນບລູກະທົບ ແຕ່ສານທີ່ບໍ່ຄົງຕົວຖືກກະທົບ. ຢ່າງທີສາມ ລະບຸຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ ແລະ ການກູ້ຄືນຜົນ: ການກູ້ຄືນດ້ວຍຊູເປີອອກໄຊດິສມິວເທສຊີ້ວ່າຊູເປີອອກໄຊມີສ່ວນກ່ຽວຂ້ອງ, ການທີ່ຄາຕາເລສກູ້ຄືນບໍ່ໄດ້ເປັນຫຼັກຖານທີ່ບໍ່ສະໜັບສະໜູນບົດບາດຂອງໄຮໂດຣເຈນເປີອອກໄຊໃນລະບົບທົດລອງນັ້ນ, ການຈຳລອງຜົນດ້ວຍແຊນທີນອອກຊິເດສສະແດງວ່າກົນໄກນັ້ນພຽງພໍທີ່ຈະກໍ່ຜົນ ແລະ ການທົດສອບເອນໄຊບໍລິສຸດແຍກຜົນໂດຍກົງຕໍ່ການເລັ່ງປະຕິກິລິຍາອອກຈາກການສູນເສຍໃນລະຫວ່າງທາງ.

ຂໍ້ສະຫຼຸບແບບກະຊັບຄືດັ່ງນີ້. ຄວນມອງເມທິລີນບລູເປັນສານທີ່ລົບກວນຫຼາຍຈຸດໃນການສົ່ງສັນຍານຈາກໄນຕຣິກອອກໄຊໄປສູ່ GMP ແບບວົງແຫວນ ຫຼາຍກວ່າຈະມອງວ່າເປັນຕົວຂັດຂວາງໄຊເຄລສຢ່າງຈຳເພາະ. ຂຶ້ນກັບລະບົບທົດລອງ ແລະ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ ມັນສາມາດຫຼຸດການຈັບຂອງປັດໄຈການຖອດລະຫັດຂອງ iNOS, ຍັບຍັ້ງເອນໄຊ NOS ໂດຍກົງ, ຫຼຸດປະລິມານໄນຕຣິກອອກໄຊທີ່ພ້ອມໃຊ້ຜ່ານການສ້າງຊູເປີອອກໄຊ ແລະ ເຮັດໃຫ້ໄຊເຄລສທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍໄນຕຣິກອອກໄຊເຮັດວຽກບົກພ່ອງ. ບົດບາດຂອງການສົ່ງສັນຍານ GMP ແບບວົງແຫວນໃນການສຶກສາຫຼອດເລືອດ ແລະ ການປຽບທຽບສານປ່ອຍໄນຕຣິກອອກໄຊທີ່ໃຊ້ໃນການທົດສອບເຊລ ແຕ່ລະບົດອະທິບາຍໜຶ່ງໃນເສັ້ນທາງເຫຼົ່ານັ້ນຢ່າງລະອຽດກວ່າ ແລະ ວິທີທີ່ໃຊ້ແຍກຜົນຣີດອກຊ໌ອອກຈາກຜົນຕໍ່ເອນໄຊ ອະທິບາຍວ່າເປັນຫຍັງຈຶ່ງພົບການໃຊ້ຊູເປີອອກໄຊດິສມິວເທສ ຮ່ວມກັບຄາຕາເລສ ແລະ ສານປ່ອຍທີ່ຄົງຕົວເປັນຕົວຄວບຄຸມຢ່າງເລື້ອຍໆໃນງານຄົ້ນຄວ້າເຫຼົ່ານີ້.

ຄ່າ GMP ແບບວົງແຫວນທີ່ຕ່ຳຫຼັງຈາກໃຊ້ເມທິລີນບລູບອກວ່າຕ່ອງໂສ້ຂາດ. ມີພຽງການທົດລອງຄວບຄຸມເທົ່ານັ້ນທີ່ບອກໄດ້ວ່າຂໍ້ໃດຂາດ.