ເມທິລີນບລູ ແລະ ອໍໂຕຟາຈີ: AMPK, mTOR ແລະ ການທົດລອງໃນເຊລປະສາດ

ລອງຈິນຕະນາການວ່າ ທ່ານເຮັດການທົດລອງໃນເຊລ, ເພີ່ມເມທິລີນບລູ ແລ້ວເຫັນແຖບໂປຣຕີນທີ່ເອີ້ນວ່າ LC3-II ເຂັ້ມຂຶ້ນໃນຜົນການກວດບລອດ. ມັນຊວນໃຫ້ຢາກປະກາດວ່າ ສານນີ້ "ເພີ່ມອໍໂຕຟາຈີ" ແລ້ວສືບຕໍ່ໄປ. ແຕ່ການຕີຄວາມແບບນັ້ນຍັງໄວເກີນໄປ. ແຖບ LC3-II ທີ່ເຂັ້ມຂຶ້ນອາດໝາຍຄວາມວ່າ ເຊລກຳລັງສ້າງຖົງສຳລັບເກັບກວາດຫຼາຍຂຶ້ນ ຫຼື ອາດໝາຍຄວາມວ່າ ຖົງເຫຼົ່ານັ້ນກຳລັງສະສົມ ເພາະຂັ້ນຕອນກຳຈັດຖືກຂັດຂວາງ. ການຕີຄວາມທັງສອງຊີ້ໄປໃນທິດທາງກົງກັນຂ້າມ ແລະ ວັນນະກຳວິຈັຍເມທິລີນບລູໃນເຊລປະສາດກໍມີຕົວຢ່າງຫຼັກຖານຂອງທັງສອງແບບ. ບົດຄວາມນີ້ຈະພາໄປເບິ່ງວ່າ ມີການວັດແທກຫຍັງແທ້ ໂດຍພິຈາລະນາທີລະວິທີກວດ.

ມາໂຄຣອໍໂຕຟາຈີ ເຊິ່ງເປັນຮູບແບບທີ່ສຶກສາໃນທີ່ນີ້ ແມ່ນຂະບວນການນຳອົງປະກອບຂອງເຊລກັບມາໃຊ້ໃໝ່ເປັນກຸ່ມ. ຖົງເຍື່ອທີ່ເອີ້ນວ່າ ຟາໂກຟໍ ຂະຫຍາຍຕົວລ້ອມໂປຣຕີນ ແລະ ອໍແກເນລທີ່ເສື່ອມສະພາບ, ປິດຕົວເປັນອໍໂຕຟາໂກໂຊມ, ຫຼອມລວມກັບໄລໂຊໂຊມ ແລ້ວສິ່ງທີ່ບັນຈຸຢູ່ພາຍໃນຈະຖືກຍ່ອຍສະຫຼາຍ ແລະ ປ່ອຍອອກມາເພື່ອນຳໃຊ້ອີກ. ເຊລປະສາດອາໄສຂະບວນການນີ້ ເພາະມັນບໍ່ແບ່ງຕົວ ແລະ ບໍ່ສາມາດຫຼຸດສັດສ່ວນຂອງສ່ວນທີ່ເສຍຫາຍດ້ວຍການແບ່ງເຊລໄດ້. ເມື່ອການນຳກັບມາໃຊ້ໃໝ່ຢຸດຊະງັກ ຂອງເສຍຈະສະສົມ. ເມື່ອຂະບວນການນີ້ດຳເນີນໄປ ເຊລຈະໄດ້ວັດຖຸດິບສຳລັບສ້າງອົງປະກອບຄືນມາໃນພາວະຄວາມຄຽດ.

ການທົດລອງໜຶ່ງໃນເຊລຮິບໂປແຄມປັສສະແດງຫຍັງ

ການສຶກສາຫຼັກກ່ຽວກັບການກະຕຸ້ນໃຊ້ເຊລຮິບໂປແຄມປັສຂອງໜູ HT22 ທີ່ຖືກເຮັດໃຫ້ຢູ່ໃນພາວະຄວາມຄຽດດ້ວຍການຂາດເຊຣັມເປັນເວລາ 24 ຊົ່ວໂມງ. ສະພາວະນີ້ເອົາປັດໄຈການເຕີບໂຕ ແລະ ສັນຍານຄ້ຳຈູນເຊລອອກ ແລະ ກະຕຸ້ນທັງອະພອບໂທຊິສ ແລະ ອໍໂຕຟາຈີ. ນັກວິຈັຍລາຍງານ ວ່າ ເມທິລີນບລູຫຼຸດການຕາຍຂອງເຊລຕາມປະລິມານທີ່ໃຊ້ ແລະ ການປົກປ້ອງນີ້ເກີດຄຽງຄູ່ກັບສັນຍານຂອງມາໂຄຣອໍໂຕຟາຈີ.

ຜົນຈາກຕົວບົ່ງຊີ້ມີລັກສະນະສະເພາະ. ການຍ້ອມ LC3B ທີ່ກະຈາຍຢູ່ໄດ້ປ່ຽນເປັນຈຸດນ້ອຍໆອ້ອມນິວເຄລຍສ ເລີ່ມທີ່ເມທິລີນບລູປະມານ 20 nM, ໂດຍ LC3-I ແລະ LC3-II ຕອບສະໜອງແຮງທີ່ສຸດໃກ້ກັບ 1 μM. ທັງ LC3B-I ແລະ LC3B-II ເພີ່ມຂຶ້ນຕາມປະລິມານ ແລະ ເວລາ. ສິ່ງສຳຄັນຄື ທີມວິຈັຍບໍ່ໄດ້ຢຸດພຽງການກວດບລອດ LC3 ໃນຈຸດເວລາດຽວ. ພວກເຂົາເພີ່ມຄລໍໂຣຄວິນ 10 μM ເຊິ່ງຂັດຂວາງການກຳຈັດໂດຍໄລໂຊໂຊມ ແລະ ພົບວ່າ LC3-II ສູງຂຶ້ນ ພ້ອມກັບ p62 ທີ່ຄົງຕົວຢູ່ໃນເຊລທີ່ໄດ້ຮັບເມທິລີນບລູ. ຮູບແບບນີ້ສະໜັບສະໜູນວ່າ ມີການໝູນວຽນແລະຍ່ອຍສະຫຼາຍທີ່ອາໄສໄລໂຊໂຊມ ບໍ່ແມ່ນພຽງການສະສົມ. ພວກເຂົາຍັງສະແດງວ່າ ຄລໍໂຣຄວິນຫຼຸດຜົນຕ້ານອະພອບໂທຊິສລົງບາງສ່ວນ ເຊິ່ງເຊື່ອມໂຍງການປົກປ້ອງກັບເສັ້ນທາງອໍໂຕຟາຈີ ແລະ ໄລໂຊໂຊມໃນແບບຈຳລອງນີ້.

ຜົນດ້ານການສົ່ງສັນຍານແມ່ນສ່ວນທີ່ມັກຖືກອ້າງຜິດຫຼາຍທີ່ສຸດ. ການສົ່ງສັນຍານ AMPK ທີ່ວັດຈາກ AMPK ທີ່ຖືກຟອສຟໍຣິເລດ ແລະ ACC ທີ່ຖືກຟອສຟໍຣິເລດ ເຊິ່ງເປັນເປົ້າໝາຍປາຍທາງຂອງມັນ ເພີ່ມຂຶ້ນທີ່ 12 ແລະ 24 ຊົ່ວໂມງ ຕາມປະລິມານທີ່ໃຊ້. ສານຍັບຍັ້ງ AMPK ຊື່ Compound C ທີ່ໃຊ້ໃນຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ 20 μM ໃນຊ່ວງ 4 ຊົ່ວໂມງສຸດທ້າຍ ຫຼຸດທັງການຟອສຟໍຣິເລຊັນຂອງ ACC ແລະ ການກະຕຸ້ນ LC3. ໃນທາງກົງກັນຂ້າມ ບໍ່ພົບການກົດ mTOR ທີ່ຖືກຟອສຟໍຣິເລດໃນລະດັບທີ່ກວດວັດໄດ້. ດັ່ງນັ້ນ ໃນເຊລຮິບໂປແຄມປັສທີ່ຢູ່ໃນພາວະຄວາມຄຽດ ຜົນທີ່ພົບແມ່ນການກະຕຸ້ນທີ່ເຊື່ອມໂຍງກັບ AMPK ຜ່ານເສັ້ນທາງທີ່ປາກົດວ່າບໍ່ຂຶ້ນກັບ mTOR. ຮູບແບບດຽວກັນຍັງປາກົດໃນໜູທີ່ມີຊີວິດ ເຊິ່ງການໃຫ້ເມທິລີນບລູກະຕຸ້ນຕົວບົ່ງຊີ້ມາໂຄຣອໍໂຕຟາຈີໃນເປືອກສະໝອງ ແລະ ຮິບໂປແຄມປັສ.

ການກະຕຸ້ນບໍ່ເທົ່າກັບການໄຫຼຜ່ານຂະບວນການຈົນສຳເລັດ

ໃນຈຸດນີ້ ການແຍກແນວຄິດໃຫ້ຊັດເຈນແມ່ນສຳຄັນທີ່ສຸດ. ການກະຕຸ້ນໝາຍເຖິງ ກົນໄກຕົ້ນທາງສ້າງອໍໂຕຟາໂກໂຊມຫຼາຍຂຶ້ນ. ການໄຫຼຜ່ານຂະບວນການ ຫຼື flux ໝາຍເຖິງ ສິ່ງທີ່ຖືກບັນຈຸເດີນທາງຄົບທຸກຂັ້ນຕອນ: ການກັກເກັບ, ການພັດທະນາຈົນສົມບູນ, ການຫຼອມລວມກັບໄລໂຊໂຊມ, ການຍ່ອຍສະຫຼາຍ ແລະ ການນຳກັບມາໃຊ້ໃໝ່. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງ LC3-II ທຸກຄັ້ງຍັງເປັນພຽງຂໍ້ອ້າງເລື່ອງການກະຕຸ້ນ ຈົນກວ່າການທົດສອບ flux ຈະຢືນຢັນຂັ້ນຕອນທີ່ເຫຼືອ.

ການທົດສອບ flux ມາດຕະຖານວັດ LC3-II ທັງໃນສະພາວະທີ່ມີ ແລະ ບໍ່ມີການຂັດຂວາງໄລໂຊໂຊມໄລຍະສັ້ນ ເຊັ່ນ ດ້ວຍບາຟິໂລໄມຊິນ A1 ຫຼື ຄລໍໂຣຄວິນ. ຖ້າການໃຫ້ສານເລັ່ງການສ້າງໄດ້ແທ້ ການຂັດຂວາງການທຳລາຍຄວນເຮັດໃຫ້ LC3-II ສູງຂຶ້ນອີກ. ຕົວລາຍງານສັນຍານຄູ່ mCherry-GFP-LC3 ເພີ່ມມຸມມອງອີກດ້ານໜຶ່ງ: ໂຄງສ້າງຈະເຮືອງແສງສີເຫຼືອງກ່ອນຫຼອມລວມກັບໄລໂຊໂຊມ ແລະ ເປັນສີແດງຢ່າງດຽວຫຼັງຈາກຄວາມເປັນກົດດັບສັນຍານ GFP. ດັ່ງນັ້ນ ການມີຈຸດສີແດງຢ່າງດຽວຫຼາຍຂຶ້ນຈຶ່ງສະໜັບສະໜູນວ່າ ຂະບວນການດຳເນີນໄປສູ່ອໍໂຕໄລໂຊໂຊມທີ່ເປັນກົດ. ໂປຣຕີນ p62 ທີ່ຫຼຸດລົງອາດຊ່ວຍຢືນຢັນການໝູນວຽນແລະຍ່ອຍສະຫຼາຍສິ່ງທີ່ບັນຈຸຢູ່ ແຕ່ຕ້ອງຄຳນຶງວ່າ ການຖອດລະຫັດຂອງ p62 ເອງກໍຕອບສະໜອງຕໍ່ຄວາມຄຽດ ແລະ ຄວນກວດຢູ່ລະດັບ mRNA.

ລາຍການກວດສອບຂ້າງລຸ່ມເຊື່ອມໂຍງແຕ່ລະວິທີກວດທີ່ໃຊ້ໃນວັນນະກຳວິຈັຍນີ້ ກັບສິ່ງທີ່ມັນວັດແທກ ແລະ ສິ່ງທີ່ມັນພິສູດບໍ່ໄດ້ດ້ວຍຕົນເອງ. ຜູ້ອ່ານສາມາດນຳໄປໃຊ້ກັບຂໍ້ອ້າງເລື່ອງມາໂຄຣອໍໂຕຟາຈີໃນອະນາຄົດ ລວມທັງ ຂໍ້ໂຕ້ແຍ້ງເລື່ອງການອົດອາຫານ ແລະ ອາຍຸຍືນ ທີ່ນຳຕົວບົ່ງຊີ້ເຫຼົ່ານີ້ໄປອ້າງອີງ.

ຄວນສັງເກດຈຸດທີ່ອາດໃຊ້ຄຳຜິດຢ່າງໜຶ່ງ ເຊິ່ງຕາຕະລາງນີ້ຊ່ວຍປ້ອງກັນ. ACC ທີ່ຖືກຟອສຟໍຣິເລດແມ່ນຮູບແບບທີ່ກິດຈະກຳເອນໄຊຖືກຍັບຍັ້ງ. ການເພີ່ມຂຶ້ນຂອງມັນສະແດງສັນຍານຂາອອກຈາກ AMPK ບໍ່ແມ່ນການກະຕຸ້ນ ACC.

ວະລີ "ການຍັບຍັ້ງມາໂຄຣອໍໂຕຟາຈີເຮັດໃຫ້ການປົກປ້ອງເຊລປະສາດຫາຍໄປ" ກໍຕ້ອງຕີຄວາມໃຫ້ແມ່ນຍຳເຊັ່ນກັນ. ໃນແບບຈຳລອງ HT22 ມັນໝາຍຄວາມວ່າ ການລົບກວນເສັ້ນທາງອໍໂຕຟາຈີ ແລະ ໄລໂຊໂຊມ ເຮັດໃຫ້ຄວາມໄດ້ປຽບດ້ານການຢູ່ລອດຈາກເມທິລີນບລູໃນສະພາວະຂາດເຊຣັມຫາຍໄປ. ມັນສະໜັບສະໜູນວ່າ ອໍໂຕຟາຈີມີຄວາມຈຳເປັນ ຫຼື ມີສ່ວນຊ່ວຍໃນຈານເພາະລ້ຽງນັ້ນ. ມັນບໍ່ໄດ້ຢືນຢັນວ່າ ອໍໂຕຟາຈີແມ່ນກົນໄກປົກປ້ອງພຽງຢ່າງດຽວຂອງສານນີ້, ບໍ່ໄດ້ພິສູດວ່າ ຄລໍໂຣຄວິນອອກ຤ິດຜ່ານອໍໂຕຟາຈີພຽງເສັ້ນທາງດຽວ ແລະ ຈະຕ້ອງມີການປັບປ່ຽນທາງພັນທຸກຳຂອງ ATG5, ATG7 ຫຼື ULK1 ເພື່ອໃຫ້ຂໍ້ອ້າງເລື່ອງເຫດແລະຜົນແໜ້ນໜາຂຶ້ນ.

ສອງເສັ້ນທາງເຂົ້າສູ່ກົນໄກດຽວກັນ

ແຜນຜັງແບບຫຍໍ້ຊ່ວຍໃຫ້ເຂົ້າໃຈໄດ້. ຄວາມຄຽດດ້ານພະລັງງານເພີ່ມ AMPK, AMPK ກະຕຸ້ນກຸ່ມໂປຣຕີນ ULK1 ແລ້ວອໍໂຕຟາຈີກໍເລີ່ມຂຶ້ນ. ປັດໄຈການເຕີບໂຕ ແລະ ສານອາຫານເພີ່ມ mTORC1, mTORC1 ຍັບຍັ້ງ ULK1 ແລ້ວອໍໂຕຟາຈີກໍຍັງບໍ່ເລີ່ມ. ໃນຂັ້ນຕອນຖັດຈາກ ULK1, ກຸ່ມໂປຣຕີນ Beclin-1 ແລະ VPS34 ເລີ່ມການກໍ່ຕົວຂອງຟາໂກຟໍ, LC3-I ເຊື່ອມຕໍ່ກັບລິພິດກາຍເປັນ LC3-II, ອໍໂຕຟາໂກໂຊມປິດຕົວ ແລະ ຫຼອມລວມກັບໄລໂຊໂຊມ ແລ້ວສິ່ງທີ່ບັນຈຸຢູ່ກໍຖືກຍ່ອຍສະຫຼາຍ ພ້ອມກັບການໝູນວຽນແລະຍ່ອຍສະຫຼາຍຂອງ p62.

ແຜນຜັງນີ້ຈັດວາງຜົນການສຶກສາເມທິລີນບລູແຕ່ລະຢ່າງລົງໃນເສັ້ນທາງ: ຜົນໃນເຊລຮິບໂປແຄມປັສຢູ່ຂ້າງແຂນງ AMPK ແລະ ຜົນໃນເຊລຕົ້ນກຳເນີດຢູ່ຂ້າງແຂນງ mTOR.

ການອະທິບາຍແບບນີ້ຊ່ວຍແກ້ຄວາມຂັດແຍ້ງທີ່ເບິ່ງຄືວ່າມີກັບການສຶກສາທີສອງຂອງ Xie. ໃນເຊລຕົ້ນກຳເນີດປະສາດຂອງໜູແຣັດທີ່ກຳລັງເພີ່ມຈຳນວນ, ການທົດລອງອີກຊຸດໜຶ່ງ ພົບວ່າ ເມທິລີນບລູ 5 μM ຍັບຍັ້ງການເພີ່ມຈຳນວນ ແລະ ສົ່ງເສີມພາວະພັກຕົວ ໂດຍເຊລທີ່ໃຫ້ຜົນບວກຕໍ່ Ki67 ຫຼຸດລົງໃນວັນທີ 1 ແລະ 3, ຂະນະທີ່ການປ່ຽນສະພາບເປັນເຊລປະສາດຂອງເຊລທີ່ກຳນົດແນວທາງແລ້ວຍັງຄົງຢູ່. ໃນການທົດລອງນັ້ນ ກົນໄກດຳເນີນຜ່ານການກົດສັນຍານ mTOR: mTOR ທັງໝົດ ແລະ mTOR ທີ່ຖືກຟອສຟໍຣິເລດຫຼຸດລົງ ຄຽງຄູ່ກັບການສະແດງອອກຂອງ p70S6K ແລະ 4EBP1 ທີ່ຕ່ຳລົງ ພ້ອມທັງການຫຼຸດການສະແດງອອກຂອງໄຊຄລິນ E1, B1, D1 ແລະ D2. ລັກສະນະທີ່ເດັ່ນທີ່ສຸດແມ່ນພາວະພັກຕົວຂອງເຊລຕົ້ນກຳເນີດ ເຊິ່ງຜູ້ຂຽນເຊື່ອມໂຍງກັບການຊະລໍຄວາມຊະລາຂອງເຊລ ບໍ່ແມ່ນການຊ່ວຍໃຫ້ເຊລຮິບໂປແຄມປັສທີ່ຢູ່ໃນພາວະຄວາມຄຽດຢູ່ລອດ.

ບົດວິຈັຍທັງສອງບໍ່ໄດ້ຂັດແຍ້ງກັນ. AMPK ແລະ mTOR ເປັນຕົວປະສານສັນຍານທີ່ຕອບສະໜອງຕາມບໍລິບົດ ບໍ່ແມ່ນສະວິດທີ່ເຮັດວຽກແບບຕາຍຕົວ. ເຊລທີ່ຄ້າຍເຊລປະສາດແລະຢູ່ໃນພາວະຄວາມຄຽດອາດໃຊ້ AMPK ໂດຍບໍ່ມີການຍັບຍັ້ງ mTOR ທີ່ວັດໄດ້, ຂະນະທີ່ເຊລຕົ້ນກຳເນີດທີ່ຖືກກະຕຸ້ນໂດຍສານກະຕຸ້ນການແບ່ງເຊລ ອາດຕອບສະໜອງຕໍ່ສານດຽວກັນດ້ວຍການຫຼຸດການເຮັດວຽກຂອງກົນໄກການເຕີບໂຕທີ່ຂຶ້ນກັບ mTOR. ຊະນິດຂອງເຊລ, ບໍລິບົດຄວາມຄຽດ, ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ ແລະ ຈຸດເວລາ ເປັນຕົວກຳນົດວ່າແຂນງໃດຈະມີບົດບາດເດັ່ນ. ນີ້ຍັງເປັນເຫດຜົນທີ່ຕ້ອງພິຈາລະນາຜົນຂອງເມທິລີນບລູຕໍ່ພະລັງງານໃນໄມໂຕຄອນເດຣຍ ແລະ ຣີດອກຊ໌ໃນພາບລວມດຽວກັນ: ດັ່ງທີ່ ບົດທົບທວນກົນໄກການປົກປ້ອງເຊລປະສາດ ອະທິບາຍ, ສານນີ້ເຮັດໜ້າທີ່ເປັນຕົວຂົນສົ່ງອິເລັກຕຣອນທາງເລືອກ, ກະຕຸ້ນສັນຍານຕ້ານອະນຸມູນອິດສະລະ ແລະ ຕ້ານອະພອບໂທຊິສ, ຍັບຍັ້ງ MAO ແລະ NOS ແລະ ເຊື່ອມໂຍງກັບການຟື້ນຟູໄມໂຕຄອນເດຣຍຜ່ານການສ້າງໃໝ່ ແລະ ອໍໂຕຟາຈີ. ອໍໂຕຟາຈີເປັນໜຶ່ງແຂນງຂອງຜົນຫຼາຍດ້ານ ບໍ່ແມ່ນທັງໝົດຂອງເລື່ອງ.

ສິ່ງທີ່ການທົດລອງບໍ່ໄດ້ສະແດງ

ການຂາດເຊຣັມຈຳລອງຄວາມຄຽດຈາກການຂາດປັດໄຈຄ້ຳຈູນ ແລະ ຄວາມຄຽດດ້ານເມຕາບໍລິຊຶມໃນຈານເພາະລ້ຽງ. ມັນບໍ່ໄດ້ຈຳລອງການອົດອາຫານຂອງສິ່ງມີຊີວິດທັງຮ່າງກາຍ: ກລູໂຄສ, ກົດອະມິໂນ ແລະ ເກືອຍັງຄົງຢູ່ໃນອາຫານເພາະລ້ຽງພື້ນຖານ ແລະ ບໍ່ມີພຶດຕິກຳການກິນອາຫານ. ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໃນການເພາະລ້ຽງຕັ້ງແຕ່ 20 nM ຫາ 5 μM ບໍ່ສາມາດປ່ຽນເປັນປະລິມານທີ່ໃຊ້ໃນມະນຸດດ້ວຍການຄຳນວນທາງເລກຄະນິດ ເພາະການດູດຊຶມ, ການຈັບກັບໂປຣຕີນ, ສະພາວະຣີດອກຊ໌, ເມຕາບໍລິຊຶມ, ການສະສົມໃນເນື້ອເຍື່ອ ແລະ ໄລຍະເວລາສຳຜັດ ລ້ວນແຕ່ແຕກຕ່າງກັນ.

ຍັງບໍ່ມີການທົດລອງໃນມະນຸດທີ່ອອກແບບເພື່ອສະແດງ flux ຂອງອໍໂຕຟາຈີທີ່ຖືກກະຕຸ້ນດ້ວຍເມທິລີນບລູໃນຜູ້ປ່ວຍ. ຫຼັກຖານດ້ານກົນໄກຍັງຈຳກັດຢູ່ໃນງານລະດັບເຊລ, ງານໃນເນື້ອເຍື່ອທີ່ນຳອອກມາຈາກຮ່າງກາຍ ແລະ ງານໃນສັດ ແລະ ບົດທົບທວນຍັງຄົງລະບຸວ່າ ຫຼັກຖານສຳລັບການນຳໄປໃຊ້ທາງຄລີນິກເປັນພຽງຂັ້ນເບື້ອງຕົ້ນ. ດັ່ງນັ້ນ ການສຶກສາເຫຼົ່ານີ້ບໍ່ໄດ້ສະແດງວ່າ ເມທິລີນບລູສ້າງຜົນແບບການອົດອາຫານ, ຍືດອາຍຸມະນຸດຜ່ານອໍໂຕຟາຈີ ຫຼື ເຮັດໃຫ້ flux ຂອງອໍໂຕຟາຈີສຳເລັດຄົບວົງຈອນໃນສະໝອງມະນຸດ. ຂໍ້ອ້າງເລື່ອງການລຽນແບບການອົດອາຫານ ແລະ ອາຍຸຍືນ ຕ້ອງມີຫຼັກຖານທາງຄລີນິກຂອງຕົນເອງ ແລະ ການທົດລອງເມທິລີນບລູໃນມະນຸດສຳລັບຂໍ້ບົ່ງໃຊ້ອື່ນ ບໍ່ໄດ້ກາຍເປັນການທົດລອງອໍໂຕຟາຈີພຽງເພາະມີຄວາມກ່ຽວຂ້ອງກັນ. ຄວນອ່ານງານວິຈັຍກ່ຽວກັບແບບຈຳລອງຄວາມຄຽດຈາກສານອາຫານ ແລະ ອາຍຸຍືນ ໂດຍຄຳນຶງເຖິງຂອບເຂດນີ້.

ສຳລັບບົດວິຈັຍຕໍ່ໄປທີ່ທ່ານອ່ານ ໃຫ້ໃຊ້ລາຍການກວດສອບຕາມລຳດັບ. ທຳອິດ ໃຫ້ຖາມວ່າແຂນງໃດປ່ຽນແປງ: AMPK, mTOR ຫຼື ບໍ່ມີທັງສອງ. ຈາກນັ້ນ ຖາມວ່າຜົນ LC3 ມີການທົດສອບ flux ປະກອບ ຫຼື ເປັນຜົນດ່ຽວ. ແລ້ວກວດວ່າ ການຂັດຂວາງເສັ້ນທາງເຮັດໃຫ້ຜົນດີຫາຍໄປຫຼືບໍ່ ແລະ ໃຊ້ວິທີໃດ. ການສຶກສາທີ່ຕອບໄດ້ທັງສາມຂໍ້ ມີຫຼັກຖານພຽງພໍສຳລັບຂໍ້ອ້າງດ້ານກົນໄກທີ່ໜັກແໜ້ນ. ການສຶກສາທີ່ຕອບໄດ້ພຽງຂໍ້ທຳອິດ ສະແດງໄດ້ພຽງສັນຍານອະນຸຍາດ ແລະ ຂັ້ນຕອນທີ່ເຫຼືອຂອງເສັ້ນທາງຍັງບໍ່ຖືກອະທິບາຍ.