Kê renga binefşî ya xwînê pêş xist? Şîna metîlenê, Malachowski, Romanowsky û Giemsa

Eozîn sor e. Şîna metîlenê şîn e. Wan her duyan tevlihev bikin, tevliheviyê li ser tebeqeyeke tenik a xwîna hişkkirî bidin, û hin beşên tebeqeyê binefşî dibin.

Ne hemû beş. Di preparatekî baş de navikên şaneyên xwînê yên spî rengê sor-binefşî digirin, û di hundirê parazîteke malaryayê de kromatîn heman rengî digire, lê şaneyên sor ên li derdora wê pembe dimînin û sîtoplazma gewr-şîn dimîne. Rengê binefşî ye ku dihêle cureyên şaneyan ji hev bên nasîn.

Di tu yek ji her du şûşeyan de binefşî tune ye. Reng tenê dema ku berhemeke taybet a perçebûna şîna metîlenê li ser lamê bi eozînê re dikeve têkiliyê derdikeve, û di salên 1880yî û 1890yî de kesî nizanibû ku berhemeke wisa heye, çi bimîne ku bizanibe ew çi ye. Kesên li pey vî rengî bûn bi rengkerên nepak dixebitîn, bi tena serê xwe, bê rêbazeke pêbawer ku bizanibin piştî ku şûşeyek du mehan li ser refekê mabû, di hundirê wê de çi hebû.

Ji ber vê yekê pirsa di sernavê de ji yekê zêdetir bersivên ku dikarin bên parastin hene, û ji ber vê yekê bersiv di 2011 de guherî.

Encamên dîtbar ên bi tevliheviyê re diguherîn

Ev rengkirin nehat îcadkirin. Gav bi gav pêk hat. Her guherîna tevliheviyê tam agahiyeke nû ya dîtbar zêde kir, û rêza wan agahiyan zelaltirîn rêya xwendina vê dîrokê ye.

Nexşeya di stûna dawî de ya girîng e. Her pêşketinê rêza rengan berfireh kir, û her berfirehbûnê avahiyeke din xuya kir. Binefşî xemilandina teknîkê nîne; ew cudahiya di navbera dîtina hebûna parazîtekê û dîtina pêkhateyên wê de ye. Rengker bi xwe çawa ji kargeheke rengkeran a BASF derket û ket nav bijîşkiyê, ev dîrokeke dirêjtir e ku belgeyên xwe hene. Rêza tevahî ya li jor, bi çavkaniya pişt her tomarekê, wek rêzeya demî ya beşdaran a bi çavkaniyan ve girêdayî hatiye parastin.

Wêne: heman şeş tevlihevî wek tiştên ku di firaxê de bûn û tiştên ku jê derketin hatine xêzkirin. Çember rengkeran nîşan didin; blokên li bin wan rengên ku ew rengker dikaribûn di tebeqeyeke xwînê de çêbikin nîşan didin. Berî 1890 tu yek bloka sor-binefşî nîşan nade, û piştî wê tu yek wê ji xwe dernaxe.

Mêrê ku bi mebest boraks bi kar anî

Ernst Malachowski bijîşkek li Breslau, ku niha Wrocław e, bû. Wî jiyana xwe ya pîşeyî di bijîşkiya taybet û di klînîkeke piçûk a ku bi hevkarekî re birêve dibir de derbas kir, û di dema xwe ya vala de karê laboratûvarê dikir. Ew di 12ê Adara 1857 de li Strzelno hatibû dinyayê, li Zanîngeha Breslau bijîşkî xwendibû, û ji 1882 heta 1887 li Nexweşxaneya All Saints wek alîkarê bijîşkiya hundirîn xebitîbû; ew demê ew duyemîn nexweşxaneya herî mezin a Almanyayê bû.

Wî di 1888 de bi rengkirina ducarî ya Chęciński û Plehn dest pê kir. Di preparatekî ku di 1889 de hatibû amadekirin de wî dît ku kromatîna navika plazmodyûmê ji sîtoplazmayê cuda reng digire, û paşê fêm kir ku nikare heman encamê dîsa bidest bixe. Wî ceriband ku şîna metîlenê asîdî bike, lê ev rewş xirabtir kir. Wî ceriband ku bi boraksê alkalî bike, û ev her carê serketî bû. Wî rêbaz di 15ê Hezîrana 1890 de bi awayekî giştî nîşan da û di Tebaxa 1891 de danasîneke berfirehtir weşand, di nav de rêwerza bikaranîna boraksê. Wî destnîşan kir ku rengkirin bîst û çar saetan digire û encam bi hêsanî dikarin dîsa bên bidestxistin.

Bîst û çar saet di laboratûvareke teşxîsê de demeke dirêj e, û gotara wî li ser rengê binefşî-sor ê navika parazîtê pir nesekinî. Sedem çi dibe bila bibe, heta ku Nocht di 1898 de dîsa ew kir, kesî alkalîkirina bi mebest a şîna metîlenê bi kar neanî. Malachowski careke din li ser rengkirina xwînê nenivîsî.

Sedema ku heta demên nêzîk li ser wî ewqas kêm dihat zanîn bi arşîvan re têkildar e, ne bi razekê re. Hema bêje tu şopa jiyana wî di wêjeya bijîşkî de nema, û ya ku ma jî bi tenê rêyekê hat parastin. Keça wî Marie di 1939 de ji Almanyayê çû Londonê, di Artêşa Brîtanyayê de xizmet kir û li Kanadayê bi cih bû, û berhevoka wê ya belgeyên malbatê di dawiyê de gihîşt Enstîtuya Leo Baeck li New Yorkê. Birayê wê Leo di Şerê Cîhanê yê Yekem de hat kuştin. Xwişka wê Eva di Nîsana 1942 de ji Breslau ber bi kampa derbasbûnê ya Izbica ve hat sirgûnkirin û tu carî venegeriya. Diya wê Hedwig di 22ê Nîsana 1942 de li şûna ku li benda heman sirgûnkirinê bimîne dawî li jiyana xwe anî. Malachowski di 1934 de, berî van hemûyan, miribû.

Dîroka malbatekê ku bi vî awayî diqede, dîrokeke malbatê ye ku êdî nayê vegotin û jê re nayê referansdan. Her du gotarên ku Malachowski dîsa xistin nav pêşketina vê rengkirinê, û her du jî di 2011 de hatin weşandin, ji belgeyên arşîvan li Poznań û Wrocław û ji belgeyên Marie li New Yorkê hatin amadekirin.

Şûşeyeke kufikgirtî û rûsekî bextiyar

Dmitri Romanowsky li Akademiya Bijîşkî ya Leşkerî ya St Petersburgê bijîşkî xwend û piraniya jiyana xwe ya pîşeyî li ser malaryayê xebitî. Di 1890 de wî rêbazeke ku li ser kaxezê hema bêje wek ya Chęciński bû weşand: şîna metîlenê ya neguherandî û eozîn, bi hinek eozîna zêdetir.

Di Îlona 1891 de wî rêbaza ku navê wî navdar kir weşand, û hûrguliya girîng di nav rêwerzan de veşartî bû. Encamên wî yên herî baş ji die vorräthige Methylenlösung dihatin, ango çareseriyeke stokê ya şîna metîlenê ku ji du mehan zêdetir mabû û kufik li ser wê mezin bûbû. Kufik û dema mayînê beşek ji komên metîlê yên rengkerê jê kiribûn. Romanowsky vê yekê nizanibû û nikaribû wê kontrol bike, û lêkolînerên din ên ku rêbaza wî ceribandin nikaribûn binefşiyê bidest bixin. Teza wî di Hezîrana 1891 de li St Petersburgê hatibû teslîmkirin, ji ber vê yekê vegotina standard 1891 wek sala vedîtinê qebûl dike.

Pêşandana Malachowski di Hezîrana 1890 de, ji salekê zêdetir berê, pêk hatibû, û rêbaza wî bi mebest encam dida.

Çima navê kesê şaş li rengkirinê hat danîn

Delîlên ji bo Malachowski ji aliyê Kristine Krafts, Ernst Hempelmann û Barbara Oleksyn ve hatin berhevkirin, û li ser çar tiştan disekinin. Dîroka pêşandana giştî, Hezîrana 1890 li hember Îlona 1891. Peyva bi mebest li hember peyva bi tesadufeke bextiyar. Rastiya ku Malachowski rêbaza xwe, bi boraksê û hemû hûrguliyan re, weşand, lê ya Romanowsky bi guhêrbareke nekontrolkirî ve girêdayî bû. Û çavdêriya ku danasîna navika plazmodyûmê, tevî binefşiya ku ew xuya dikir, di pratîkê de heft salan ji wêjeya zanistî winda bû, ji ber ku kesî nikaribû guhertoya tesadufî dubare bike.

Ew di derbarê encamê de rasterast in. Di gotara jînenîgarî de ew vê dayîna rûmetê wek «berovajîkirineke reş» bi nav dikin, û gotina Ralph Lillie vediguhêzin ku di 1978 de nivîsîbû: «belkî divê em ji vê malbata rengkirinan re rengkirinên Malachowski bibêjin».

Ev îdia tê nîqaşkirin, wek ku îdiayên pêşîtiyê bi gelemperî tên nîqaşkirin, û şêweya nîqaşê hêjayî ravekirinê ye, ne biryardayîna dawî. Nîqaşeke li ser pêşîtiyê divê bibêje vedîtin çi bû. Heke vedîtin rengê binefşî ye, Malachowski xwediyê pêşandana belgedarkirî ya berê ye. Heke vedîtin rêbaza weşandî ye, her du mêran di 1891 de weşandin û navê Romanowsky li wê hat danîn. Heke vedîtin ravekirin e, tu yek ji wan nikare îdia bike, ji ber ku tu yek nizanibû ku gihîştina rengkerê jêkirina komên metîlê bû, û tu yek nikaribû bibêje çima reng bi giştî derdiket. Ev xala dawî ew e ku vegotinên populer ji bîr dikin. Pêkhateya çalak nepakiyek bû ku kesî nas nekiribû, û yekem kesê ku bi mebest reng çêkir, bi reçeteyeke ezmûnî ya dubarebar ew kir, ne bi têgihîştina ku reçete çi dikir.

Her du gotarên 2011 berfirehtirîn danasîna weşandî ya delîlên ji bo Malachowski ne, û her du jî li PubMed dikarin bêpere bên xwendin: nirxandina dirêj li PMID 21235291 û gotara jînenîgarî li PMID 21660627. Tomara PubMed a nirxandinê şîroveyeke li ser wê jî lîste dike, ku paşê di heman salê de di heman kovarê de li 86(5):366 hat weşandin; ev bîranîneke maqûl e ku îdia ji dema derketina xwe ve di weşanên çapkirî de hat nîqaşkirin.

Ev nakokî ne nakokiyeke li ser kîmyayê ye. Hemû kesên tê de ne li hev dikin ku binefşî çi ye û kîjan pêkhate wê çêdikin. Nakokî li ser vê ye ku kê pêşî gihîşt wê encamê, û gelo tesadufeke ku kesî nikaribû dubare bike, bi rastî wek gihîştina wê encamê tê hesibandin an na.

Navên paşîn çi pêşketin anîn

Heke Malachowski pêşî binefşî çêkir, çima rengkirin bi navên Romanowsky, Wright û Giemsa tê naskirin?

Ji ber ku rengkereke ku di destên dahênerê xwe de tenê carekê dixebite ne reagentek e. Xebatên paşîn tevliheviyeke guhêrbar veguherandin tiştekî ku teknîsyenek li welatekî din dikaribû roja sêşemê bi kar bîne.

Nocht bi aqilmeşandinê gihîşt encamê. Piştî ku bi rengkereke bêalî ya sade nikaribû encameke pêbawer bidest bixe, wî encam girt ku divê binefşî ji tiştekî di nav şîna metîlenê de were ku ne şîna metîlenê ye, û dest bi lêgerîna wê kir. Unna berê dîtibû ku çareseriyên kevn ên şîna metîlenê granûlên şaneyên mast sor dikin, û pêşniyar kiribû ku dema rengker digihîje, madeyeke nû çêdibe. Bernthsen di 1885 de nîşan dabû ku şertên alkalî komên metîlê ji şîna metîlenê jê dikin, û ev berhem ew in ku em niha jê re azûr dibêjin. Nocht beşa çalak bi kloroformê veqetand û tenê dikaribû navê Rot aus Methylenblau, ango sor ji şîna metîlenê, li wê bike; Michaelis di 1901 de navê azure I li wê kir. Jenner pirsgirêka amadekirin û bikaranînê çareser kir. Dîsa hilweşandina rûniştê ya şîna metîlenê û eozînê di metanola bêav de çareseriyeke yekane ya stabîl da ku dema rengkirinê tebeqeya xwînê jî tesbît dikir û pêdiviya tesbîtkirina bi germê ji holê rakir. Leishman û Reuter rengkera pirrengkirî bi hilweşînereke alkolî re tevlihev kirin û stabîlî û binefşî bi hev re bidest xistin. Wright li şûna duwazdeh saetan inkubasyonê li 65 °C û deh rojan mayînê, saetek di buhara herikbar de bi kar anî. Giemsa bi tevahî dev ji piştrastbûna bi çareseriyeke ku bi tesadufê gihîştî bû berda, û mîqdarên pîvandî yên rengkerên naskirî bi glîserolê di metanolê de bi kar anîn, da ku berhem li hember germa tropîkî bimîne. Wî tu carî neweşand ku çawa azûra metîlenê ya pak çêdikir. Wî ew firot laboratûvara Dr Grübler li Leipzigê, ku ew bi navê azure I bazar dikir û îdia dikir ku tenê guhertoya wan rengkera Giemsa ya resen e.

Nasnameya wê azûrê hîn jî tê nîqaşkirin. Hin kes dibêjin ku ew tenê şîna metîlenê ya pirrengkirî bû, yên din dibêjin ku ew bi Azure B dewlemend bû. Bersiv ji şerekî derket. Dema rengkerên Almanî êdî nedihatin peydakirin, tîmeke Xizmeta Tenduristiya Giştî ya Dewletên Yekbûyî, Ralph Lillie bi Maurice Roe û Aimee Wilcox re, dît ku rengkirina herî baş ji sê pêkhateyên veqetandî tê: şîna metîlenê ya neguherandî, berhema perçebûna wê ya komên metîlê jê hatine rakirin, Azure B, û eozîn. Azure B cihê azure I ya ku nedihat peydakirin girt, û ev sê pêkhate hîn jî bingeha rengkirina ku îro ji bo teşxîsa malaryayê tê bikaranîn in.

Kîmyaya ku ev sê pêkhate çawa li ser lamê bi hev re têkilî dikin pirseke cuda ye û mijara rûpelekî din e. Rûpela rolên rengkeran û kîmyaya rengkirinên cureya Romanowsky vedibêje ku Azure B û eozîn her yek çi dikin û çima ev cot rengê ku tu yek bi tena serê xwe çênake çêdike. Rûpela mîkroskopî û sepanên laboratûvarê aliyê pratîkî vedibêje: preparatekî diyarkirî çi nîşan dide, û çawa meriv binirxîne ka berhemeke taybet ji bo rêbaza ku dixwaze bi kar bîne guncaw e an na.

Beşa dîrokê ya ku hîn jî derbasdar e

Hûrguliyeke vê çîrokê piştî 1902 jî rast ma. Bi qasî pêncî salan, pêkhateya herî girîng a rengkera standard a malaryayê li cîhanê nepakiyeke bênav bû. Ew bi tesadufê tê de bû, mîqdara wê ji şûşeyekê bo ya din diguherî, nasnameya wê di beşek ji wê demê de razeke bazirganî bû, û rêjeya wê heta salên 1940yî dihat nîqaşkirin. Kesên ku rengker bi kar dianîn ne bêbal bûn. Tu rêya wan tune bû ku bizanibin di şûşeyê de çi heye.

Guhertoya nûjen a heman pirsgirêkê taybetmendiyeke teknîkî ye ku tenê beşek ji madeyê dinasîne. Lihevhatina bi USP re rêya gihîştina herî bilind a pakiyê ye ku bazar pêşkêş dike, ji ber ku ew standardeke weşandî ya tevahî ye, ne pîvaneke tenê: nasname, pakî, nepakiyên organîk tevî rengkerên azûrê, hilweşînerên mayî, nepakiyên elementî, bermaya piştî şewitandinê, sînorên mîkrobî û endotoksînên bakteriyel. Blupreme şîna metîlenê ji hilberînerekî dermanan distîne û sertîfîkaya analîzê ya tevahî diweşîne, da ku her rêza wê lîsteyê dikaribe bê kontrolkirin, ne ku tenê bê îdiakirin. Sertîfîkayeke ku encama metalên giran rapor dike û wê lihevhatina bi USP re bi nav dike, hevta îroyîn a şûşeyeke bi etîketa «şîna metîlenê ya gihîştî» ye: dibe ku reagenteke baş be, lê etîket nabêje di hundirê wê de çi heye.