អត្ថបទ

ការធ្វើតេស្តមេផ្សិតដោយមេទីឡែនខៀវ៖ ការរាប់កោសិកាមានជីវិតធៀបនឹងការវាស់ពេលដកដង្ហើម

ការធ្វើតេស្តមេផ្សិតដោយមេទីឡែនខៀវ៖ ការរាប់កោសិកាមានជីវិតធៀបនឹងការវាស់ពេលដកដង្ហើម

បំពង់ពីរដាក់នៅលើតុពិសោធន៍។ ទាំងពីរមានពណ៌ខៀវ។ ក្នុងបំពង់មួយ កោសិកាពណ៌ខៀវដែលឃើញក្រោមមីក្រូទស្សន៍មានន័យថាមេផ្សិតងាប់។ ក្នុងបំពង់មួយទៀត ការប្រែពីពណ៌ខៀវទៅគ្មានពណ៌មានន័យថាមេផ្សិតមានជីវិត និងកំពុងដកដង្ហើម។ សារធាតុពណ៌ដូចគ្នា ប៉ុន្តែការបកស្រាយផ្ទុយគ្នា។ បើច្រឡំតេស្តទាំងពីរនេះ សេចក្តីសន្និដ្ឋានទាំងអស់នឹងបញ្ច្រាស។

ភាពខុសគ្នានេះជាចំណុចស្នូលនៃអត្ថបទទាំងមូល។ មេទីឡែនខៀវជាសារធាតុពណ៌រេដុក៖ នៅទម្រង់អុកស៊ីតកម្ម វាមានពណ៌ខៀវ ហើយនៅទម្រង់រេដុកម្ម វាជាល្យូកូមេទីឡែនខៀវដែលគ្មានពណ៌។ ការរាប់ភាពមានជីវិតប្រើគីមីសាស្ត្រនេះក្នុងការសង្កេតរយៈពេលខ្លីក្រោមមីក្រូទស្សន៍។ ការពិសោធន៍ដកដង្ហើមប្រើវាក្នុងប្រតិកម្មនៃល្បាយទាំងមូលដែលវាស់តាមពេល។ តេស្តនីមួយៗត្រូវការពិធីការផ្ទាល់ខ្លួន សំណាកត្រួតពិនិត្យផ្ទាល់ខ្លួន និងការប្រុងប្រយ័ត្នក្នុងការបកស្រាយរៀងៗខ្លួន។

ការរាប់ភាពមានជីវិត៖ ជ្រលក់ពណ៌រយៈពេលខ្លី ហើយអានលទ្ធផលភ្លាមៗ

ពិធីការបែបរោងផលិតស្រាបៀរជាកំណែដែលមានស្តង់ដារច្បាស់លាស់បំផុត។ រៀបចំមេទីឡែនខៀវ 0.01% w/v ក្នុងសូដ្យូមស៊ីត្រាត 2% លាយវាក្នុងសមាមាត្រ 1:1 ជាមួយសំណាកមេផ្សិតព្យួរក្នុងអង្គធាតុរាវ ហើយពិនិត្យល្បាយក្រោយរយៈពេលខ្លីដែលកំណត់ទុកជាមុន។ រយៈពេលដែលបានផ្សព្វផ្សាយខុសគ្នា ចាប់ពី 1 ដល់ 2 នាទីក្នុងសៀវភៅណែនាំរបស់ Brewing Science Institute រហូតដល់ប្រហែល 5 នាទីក្នុងពិធីការស្រាវជ្រាវ ខណៈវិធីសាស្ត្រមីក្រូជីវសាស្ត្រស្រាទំពាំងបាយជូររបស់ OIV តម្រូវឱ្យពិនិត្យក្នុងរយៈពេល 10 នាទី។ កំហាប់សារធាតុពណ៌ក្នុងល្បាយសម្រាប់រាប់ចុងក្រោយមានប្រហែល 0.005%។ បញ្ចូលល្បាយទៅក្នុងបន្ទប់រាប់ប្រភេទ Neubauer កែលម្អ ហើយនៅកម្រិតពង្រីកប្រហែល 400x ចាត់ថ្នាក់កោសិកាពណ៌ខៀវចាស់ថាមិនមានជីវិត និងកោសិកាមិនជាប់ពណ៌ថាមានជីវិត។ វិធីសាស្ត្រ OIV រាប់កោសិកាពណ៌ខៀវស្រាលថាមានជីវិត ដែលបង្ហាញរួចមកហើយពីបញ្ហានៃការវិនិច្ឆ័យតាមអ្នកសង្កេត ដែលនឹងពិភាក្សាខាងក្រោម។

កំហាប់កោសិកាគណនាពីធរណីមាត្រនៃបន្ទប់រាប់។ នៅពេលរាប់ផ្ទៃការ៉េកណ្តាល 1 mm ទាំងមូល ចំនួនកោសិកាក្នុងមួយ mL ស្មើនឹង N គុណនឹងមេគុណពង្រាវ គុណនឹង 10^4 ដែល N ជាចំនួនកោសិការាប់បានក្នុងផ្ទៃនោះ ដូចបានកំណត់ក្នុងវិធីសាស្ត្រមេផ្សិតរបស់ ASBC។ ភាពមានជីវិតគណនាបានងាយជាងនេះ៖ ចំនួនកោសិកាមិនជាប់ពណ៌ចែកនឹងចំនួនកោសិកាសរុប គុណនឹង 100។ រាប់ប្រហែល 400 កោសិកាដើម្បីប៉ាន់ប្រមាណភាពមានជីវិត ដោយអនុវត្តតាមការសិក្សាប្រៀបធៀបក្នុងរោងផលិតស្រាបៀររបស់ FEMS និងការអនុវត្តរបស់ OIV។ ប្រើក្បួនរាប់កោសិកាលើបន្ទាត់ព្រំដែនតែមួយឱ្យជាប់លាប់ ឧទាហរណ៍ រាប់បញ្ចូលកោសិកាលើបន្ទាត់ក្រឡាខាងក្រោម និងខាងឆ្វេង ហើយមិនរាប់កោសិកាលើបន្ទាត់ខាងលើ និងខាងស្តាំ។

ត្រូវកំណត់ក្បួនសម្រាប់កោសិកាពន្លកមុនចាប់ផ្តើមរាប់។ ក្បួនដែលប្រើជាទូទៅគឺរាប់ពន្លកជាកោសិកាដាច់ដោយឡែក នៅពេលវាមានទំហំប្រហែលពាក់កណ្តាលនៃកោសិកាមេ ហើយរាប់រួមជាមួយកោសិកាមេនៅពេលវាតូចជាងនេះ។ មិនថាជ្រើសរើសក្បួនណាទេ ត្រូវអនុវត្តវាចំពោះគ្រប់ក្រឡា ហើយសរសេរវាលើសន្លឹកកត់ត្រា ដើម្បីឱ្យអ្នកបន្ទាប់អនុវត្តតាមដូចគ្នា។

សន្លឹកកត់ត្រាការរាប់ (បោះពុម្ពសន្លឹកនេះ)

សន្លឹកកត់ត្រានេះជាធនធានដើមដែលបង្កើតសម្រាប់អត្ថបទនេះ។ ចម្លងវាទៅក្នុងសៀវភៅកត់ត្រា ឬបោះពុម្ពមួយសន្លឹកសម្រាប់សំណាកនីមួយៗ។

ប្រអប់ព័ត៌មានកំណត់ត្រា
លេខសម្គាល់សំណាក និងការពង្រាវ
សូលុយស្យុងសារធាតុពណ៌ដើម (គោលដៅ 0.01% ក្នុងស៊ីត្រាត 2%)
សមាមាត្រលាយ និងរយៈពេលជ្រលក់ពណ៌ដែលបានប្រើ
ក្បួនរាប់ពន្លកដែលបានអនុវត្ត
ក្បួនរាប់កោសិកាលើព្រំដែនដែលបានអនុវត្ត
ក្រឡាមិនជាប់ពណ៌ (មានជីវិត)ខៀវចាស់ (ងាប់)កំណត់សម្គាល់ (ពន្លក កម្ទេចកម្ទី កំណកកោសិកា)
1
2
3
4
5
សរុប

Viability (%) = 100 x unstained / (unstained + dark blue). Total cells per mL = N x dilution factor x 10^4 ដោយ N ជាចំនួនរាប់បានក្នុងផ្ទៃបន្ទប់រាប់ដែលបានកំណត់។ កត់ត្រារយៈពេលជ្រលក់ពណ៌នៅក្បែរលទ្ធផល ព្រោះតម្លៃភាពមានជីវិតដែលគ្មានពេលវេលាភ្ជាប់មកជាមួយ មិនអាចធ្វើឡើងវិញឱ្យបានដូចគ្នាទេ។

ហេតុអ្វីតម្លៃភាពមានជីវិតប្រែប្រួល

ពេលវេលាជាកត្តារំខានដំបូង ហើយវាបង្កកំហុសបានទាំងពីរទិស។ កោសិកាដែលមានសកម្មភាពមេតាបូលីសធ្វើរេដុកម្មសារធាតុពណ៌ ដូច្នេះការអានឆាប់ពេកអាចសង្កេតឃើញកោសិកាមានជីវិតមុនពេលពួកវាបញ្ចប់រេដុកម្ម ហើយចាត់ថ្នាក់ខុសថាងាប់។ ប៉ុន្តែការប៉ះពាល់យូរទៅនឹងសារធាតុពណ៌មានភាពពុលដោយខ្លួនវា និងបង្កើតកោសិកាខូចខាតពិតប្រាកដដែលមានពណ៌ខៀវ នាំឱ្យការជ្រលក់ពណ៌បង្ហាញការងាប់ខុសពីស្ថានភាពដើម។ ដូច្នេះ ពិធីការបង្រៀនក្នុងមន្ទីរពិសោធន៍កំណត់ឱ្យវាយតម្លៃក្នុងរយៈពេល 5 នាទី ដូចបានកត់ត្រាក្នុងពិធីការបង្រៀនអំពីមេផ្សិតរបស់ Wisconsin។ ការពន្យល់ដែលប្រុងប្រយ័ត្នគឺថា ការវាយតម្លៃដោយមេទីឡែនខៀវអាស្រ័យលើពេលវេលា ដូច្នេះត្រូវកំណត់រយៈពេលខ្លីតែមួយ ហើយរក្សាឱ្យថេរចំពោះគ្រប់សំណាកក្នុងស៊េរីមួយ។

សំណាកដែលមានភាពមានជីវិតទាបមានលម្អៀងទីពីរ។ វិធីសាស្ត្រដែលមានស្តង់ដារព្រមានថា មេទីឡែនខៀវអាចប៉ាន់ប្រមាណភាពមានជីវិតខ្ពស់ជាងតម្លៃពិត នៅពេលវាទាបជាងប្រហែល 80% ព្រោះកោសិកាដែលនៅតែអាចធ្វើរេដុកម្មសារធាតុពណ៌ មិនប្រាកដថានៅរក្សាសមត្ថភាពបន្តពូជឡើយ។ ឯកសារស្រាវជ្រាវអំពីការផលិតស្រាបៀរពិពណ៌នាអំពីភាពមិនអាចទុកចិត្តបានដូចគ្នា នៅពេលភាពមានជីវិតថយចុះយ៉ាងខ្លាំង។ ចាត់ទុកមេទីឡែនខៀវជាវិធីប៉ាន់ប្រមាណរហ័ស និងប្រហាក់ប្រហែល ហើយផ្ទៀងផ្ទាត់ការសម្រេចចិត្តសំខាន់ៗពាក់ព័ន្ធនឹងភាពមានជីវិតទាប ដូចជាការប្រើមេផ្សិតបណ្តុះឡើងវិញសម្រាប់ការបង្កាត់ថ្មី ដោយការរាប់កូឡូនីលើចានបណ្តុះ ឬការជ្រលក់ពណ៌បន្ថែមមួយទៀត។

ឥទ្ធិពលនៃម៉ាទ្រីសសំណាកជាកត្តាទីបី។ វិធីសាស្ត្រ OIV ដំណើរការនៅជិត pH 4.6 ហើយព្រមានថា សំណាក pH ទាបដែលមានសមត្ថភាពប៊ូហ្វ័រខ្លាំងរារាំងការប្រែប្រួលត្រឹមត្រូវរបស់សារធាតុពណ៌។ វាក៏ណែនាំមិនឱ្យប្រើតេស្តនេះនៅពេលស្ករលើស 100 g/L ដែលធ្វើឱ្យកោសិកាមានពណ៌ខៀវស្រាលនាំឱ្យបកស្រាយខុស។ ការប្រៀបធៀបពិសោធន៍អំពី pH នៃការជ្រលក់ពណ៌រកឃើញថា ភាពរសើបប្រែប្រួលយ៉ាងខ្លាំងក្នុងជួរដែលបានសាកល្បង ស្របនឹងការសិក្សាវិធីសាស្ត្រមេទីឡែនខៀវដែលអាស្រ័យលើ pH។ កម្ទេចកម្ទីជាអន្ទាក់ដាច់ដោយឡែក៖ ភាគល្អិតជាប់ពណ៌ក្នុងល្បាយធញ្ញជាតិសម្រាប់ផលិតស្រាបៀរដែលមានកម្ទេចកម្ទីច្រើន មើលទៅដូចកោសិកាងាប់ ហើយបង្កើនភាពខុសគ្នារវាងអ្នកអនុវត្ត។

ភាពខុសគ្នានោះត្រូវបានវាស់ជាបរិមាណ មិនមែនគ្រាន់តែជាការរៀបរាប់តាមបទពិសោធន៍ទេ។ ក្នុងការសាកល្បងរយៈពេលប្រាំមួយខែនៅរោងផលិតស្រាបៀរ ដែលរាយការណ៍ក្នុងការប្រៀបធៀបមេផ្សិតរបស់ FEMS ការវាស់មេទីឡែនខៀវពីរដងមានគម្លាតស្តង់ដារជាមធ្យម 6.1% ធៀបនឹង 0.2% សម្រាប់ការវិភាគកោសិកាតាមលំហូរដោយប្រើអុកសូណុល ហើយអ្នកអនុវត្តពីរនាក់ផ្តល់លទ្ធផលខុសគ្នារហូតដល់ 13 ចំណុចភាគរយលើសំណាកដូចគ្នា។ ការប្រៀបធៀបជាបរិមាណនៃវិធីវាស់ភាពមានជីវិតឆ្នាំ 2023 រកឃើញថា មីក្រូទស្សន៍ហ្វ្លុយអូរ៉េសង់ និងការវិភាគកោសិកាតាមលំហូរមានភាពជាក់លាក់ខ្ពស់ជាងយ៉ាងច្រើន ខណៈបង្ហាញថាប្រសិទ្ធភាពវិធីសាស្ត្រអាស្រ័យលើប្រភេទមេផ្សិត និងម៉ាទ្រីសសំណាក។ ការពិពណ៌នាវិធីសាស្ត្របុរាណដោយ Painting និង Kirsop (PMID 24430080) នៅតែជាឯកសារយោងសំខាន់ ហើយអត្ថបទពិនិត្យទូលំទូលាយអំពីតេស្តភាពមានជីវិត និងភាពសកម្មរបស់មេផ្សិត (PMID 25154541) ចាត់មេទីឡែនខៀវជាតេស្តបំពេញបន្ថែម ជាជាងតេស្តសម្រេចច្បាស់លាស់។ ត្រីផានខៀវមិនមែនជាជម្រើសប្រសើរជាងដោយស្វ័យប្រវត្តិនៅទីនេះទេ៖ វាបង្ហាញការបាត់បង់ភាពពេញលេញនៃភ្នាស ខណៈមេទីឡែនខៀវបង្ហាញការស្រូបសារធាតុពណ៌រួមនឹងសកម្មភាពរេដុកម្ម ដូច្នេះកោសិកាដែលរងភាពតានតឹងអាចត្រូវបានចាត់ថ្នាក់ខុសគ្នាដោយសារធាតុពណ៌ទាំងពីរ។

ការពិសោធន៍ដកដង្ហើម៖ វាស់ពេលដែលពណ៌ខៀវបាត់

តេស្តទីពីរមិនពិនិត្យតាមមីក្រូទស្សន៍ទាល់តែសោះ។ ដាក់មេផ្សិតបូកគ្លុយកូសបូកមេទីឡែនខៀវពង្រាវក្នុងបំពង់បិទជិត ហើយប្រើនាឡិកាវាស់រយៈពេលដែលពណ៌ខៀវបាត់។ នៅពេលកោសិកាធ្វើមេតាបូលីស ពួកវាបង្កើតសមមូលរេដុកម្មដែលបម្លែងសារធាតុពណ៌ខៀវទៅជាទម្រង់គ្មានពណ៌ ខណៈអុកស៊ីសែនរលាយធ្វើអុកស៊ីតកម្មវាត្រឡប់មកវិញ។ នៅពេលកោសិកាប្រើអុកស៊ីសែនរហូតថយចុះ រេដុកម្មសុទ្ធមានប្រៀប ហើយបំពង់បាត់ពណ៌។ ដូច្នេះ ចំណុចបញ្ចប់ឆ្លុះបញ្ចាំងពីតុល្យភាពរវាងការដកដង្ហើម កំហាប់សារធាតុពណ៌ និងអុកស៊ីសែនដែលមាន ហើយគួររាយការណ៍ជាពេលវេលារេដុកម្ម ឬការបាត់ពណ៌របស់មេទីឡែនខៀវ មិនមែនជាអត្រាប្រើប្រាស់អុកស៊ីសែនម៉ូលេគុលដោយផ្ទាល់ទេ។

ប្រើសារធាតុពណ៌ដែលពង្រាវខ្លាំងជាងការរាប់ភាពមានជីវិត ដើម្បីឱ្យរយៈពេលវាស់ស្ថិតក្នុងចន្លោះងាយស្រួល។ សៀវភៅណែនាំការអនុវត្តចាំបាច់កម្រិត A របស់ AQA កំណត់ស្តង់ដារនេះបានច្បាស់៖ គ្លុយកូស 1 g ក្នុងទឹក 100 mL ដែលកម្តៅដល់ប្រហែល 30 C បន្ថែមមេផ្សិតស្ងួត 5 g ភ្លាមៗមុនប្រើ និងសារធាតុពណ៌សម្រាប់ប្រើដែលមានកំហាប់ជិត 0.001% រៀបចំដោយពង្រាវសូលុយស្យុងដើម 1% ចំនួន 0.1 mL ឱ្យមានមាឌសរុប 100 mL។ លាយសំណាកមេផ្សិតព្យួរក្នុងគ្លុយកូស 2 mL ជាមួយសារធាតុពណ៌សម្រាប់ប្រើ 2 mL ទុកឱ្យសីតុណ្ហភាពមានលំនឹងនៅសីតុណ្ហភាពតេស្ត អង្រួនម្តងរយៈពេល 10 វិនាទី ចាប់ផ្តើមវាស់ពេល ហើយកុំអង្រួនម្តងទៀត។ ការអង្រួនបញ្ចូលអុកស៊ីសែនឡើងវិញ ហើយធ្វើឱ្យបំពង់ត្រឡប់ជាពណ៌ខៀវ ដែលជាកំហុសបង្កឡើងដោយនីតិវិធីធំបំផុត។ AQA កត់សម្គាល់ថា ល្បាយដែលរៀបចំនេះជាធម្មតាគួរបាត់ពណ៌ក្នុងរយៈពេលប្រហែល 5 នាទីនៅ 35 C ដោយមានតម្លៃមធ្យមក្នុងការសាកល្បង 275 s នៅ 20 C, 128 s នៅ 35 C និង 145 s នៅ 45 C។ ទាំងនេះជាឧទាហរណ៍ពីការរៀបចំមួយ មិនមែនជាតម្លៃគោលសកលទេ។ ទំនាក់ទំនងជាបរិមាណរវាងអត្រារេដុកម្ម និងមេផ្សិតដែលមានសកម្មភាពមេតាបូលីសក្រោមលក្ខខណ្ឌគ្រប់គ្រង ត្រូវបានគាំទ្រដោយការសិក្សាផ្តោតលើរេដុកម្ម រួមទាំងការងារដែលមានលេខសម្គាល់ PMID 25773544 និងការសិក្សាអំពីយន្តការក្នុង Yeast (2014)។

ការបង្ហាញបម្រែបម្រួលតាមពេល (ធនធានដើម)

តារាងខាងក្រោមជាការបង្ហាញដើមដែលបង្កើតសម្រាប់អត្ថបទនេះ ដោយប្រើការរៀបចំបែប AQA ដែលបានពិពណ៌នាខាងលើ៖ ល្បាយមេផ្សិតនិងគ្លុយកូស 2 mL បូកសារធាតុពណ៌សម្រាប់ប្រើ 2 mL ដែលមានកំហាប់ជិត 0.001% អង្រួនម្តងរយៈពេល 10 វិនាទី បន្ទាប់មកបណ្តុះដោយមិនរំខាន។ ទិន្នន័យទាំងនេះជាលទ្ធផលឧទាហរណ៍តាមទម្រង់ដែលក្រុមសិស្សគួរកត់ត្រា ដោយសន្ទស្សន៍អត្រាកំណត់ជា 1 ចែកនឹងរយៈពេលបាត់ពណ៌គិតជាវិនាទី។ ធ្វើការពិសោធន៍ដោយប្រើបំពង់ដូចគ្នា ហើយជំនួសទិន្នន័យទាំងនេះដោយតម្លៃដែលវាស់បាន។

បំពង់សីតុណ្ហភាពពេលរហូតដល់បាត់ពណ៌ទាំងស្រុង (s)សន្ទស្សន៍អត្រា (1/s)ការសង្កេត
A20 C2750.0036ពណ៌ស្រកយឺត ពណ៌ខៀវនៅសល់ត្រង់ផ្ទៃកោងនៃអង្គធាតុរាវ
B35 C1280.0078លឿនបំផុត បាត់ពណ៌ស្មើគ្នា
C45 C1450.0069យឺតជាងនៅ 35 C បន្តិច ចាប់ផ្តើមមានភាពតានតឹងដោយកម្តៅ
D (សំណាកត្រួតពិនិត្យមេផ្សិតដែលបានស្ងោរ)35 Cមិនប្រែប្រួលនៅ 600 s0នៅតែខៀវ កោសិកាអសកម្ម
E (សំណាកត្រួតពិនិត្យគ្មានគ្លុយកូស)35 C3400.0029ពណ៌ស្រកយឺតដោយប្រើសារធាតុបម្រុងក្នុងកោសិកា
F (សំណាកទទេគ្មានមេផ្សិត)35 Cមិនប្រែប្រួលនៅ 600 s0នៅតែខៀវ គ្មានរេដុកម្មគីមី

គូរក្រាហ្វសន្ទស្សន៍អត្រាធៀបនឹងសីតុណ្ហភាពសម្រាប់បំពង់ A, B និង C។ ខ្សែកោងកើនឡើង រួចរាបស្មើ ឬថយចុះ ដែលជាលំនាំរំពឹងទុកសម្រាប់ដំណើរការជំរុញដោយអង់ស៊ីម មិនមែនជាបន្ទាត់ត្រង់ទេ។ បំពង់ D, E និង F មិនមែនជាចំណុចទិន្នន័យលើខ្សែកោងនោះទេ។ វាជាសំណាកត្រួតពិនិត្យដែលធ្វើឱ្យខ្សែកោងអាចបកស្រាយបាន។

សំណាកត្រួតពិនិត្យដែលធ្វើឱ្យតេស្តនីមួយៗមានអត្ថន័យ

ការពិសោធន៍ដកដង្ហើមរាល់លើកត្រូវការសំណាកបីប្រភេទអមជាមួយ។ មេផ្សិតដែលបានស្ងោរ ឬសម្លាប់ បូកគ្លុយកូស បូកសារធាតុពណ៌ គួរនៅតែមានពណ៌ខៀវ ដើម្បីបញ្ជាក់ថារេដុកម្មរហ័សអាស្រ័យលើមេតាបូលីសរបស់កោសិកាមានជីវិត។ មេផ្សិតមានជីវិតបូកសារធាតុពណ៌ដោយគ្មានបន្ថែមគ្លុយកូស ជាសំណាកត្រួតពិនិត្យស៊ុបស្ត្រាត ប៉ុន្តែគួររំពឹងថាវានឹងបាត់ពណ៌យឺតៗដែរ ព្រោះមេផ្សិតប្រើសារធាតុបម្រុងក្នុងកោសិកា។ គ្លុយកូសបូកសារធាតុពណ៌ដោយគ្មានមេផ្សិត ជាសំណាកទទេគីមីដែលចាំបាច់ ព្រោះគ្លុយកូសក្នុងលក្ខខណ្ឌអាល់កាឡាំងអាចធ្វើរេដុកម្មមេទីឡែនខៀវបានដោយគ្មានកោសិកាណាមួយ។

ការរាប់ភាពមានជីវិតត្រូវការការត្រួតពិនិត្យមួយប្រភេទផ្សេងទៀត៖ ភាពថេរនៃនីតិវិធី។ ប្រើសូលុយស្យុងសារធាតុពណ៌ដើមដូចគ្នា សមាមាត្រលាយដូចគ្នា រយៈពេលជ្រលក់ពណ៌ដូចគ្នា ផ្ទៃបន្ទប់រាប់ដូចគ្នា ក្បួនរាប់ពន្លក និងកោសិកាលើព្រំដែនដូចគ្នា ហើយរាប់ដោយមិនដឹងអត្តសញ្ញាណសំណាកនៅពេលអាចធ្វើបាន។ នៅពេលអ្នកអនុវត្តពីរនាក់ផ្តល់លទ្ធផលខុសគ្នាដប់ចំណុចភាគរយ សន្លឹកកត់ត្រាជាធម្មតាបង្ហាញមូលហេតុ៖ ពេលវេលាខុសគ្នា កម្រិតកំណត់ពណ៌ខៀវខុសគ្នា ឬក្បួនរាប់ពន្លកខុសគ្នា។ បច្ចេកទេសរៀបចំ និងពិនិត្យកោសិកាដែលជ្រលក់ពណ៌មានទំនាក់ទំនងនឹងវិធីជ្រលក់ពណ៌បាក់តេរីបែបសាមញ្ញ ខណៈការពិនិត្យទូលំទូលាយអំពីអ្វីដែលសារធាតុពណ៌នេះសម្គាល់នៅក្នុងសំណាកផ្សេងៗ មានក្នុងសៀវភៅរូបភាពយោងនៃការជ្រលក់ពណ៌សម្រាប់មីក្រូទស្សន៍។ ចំពោះរូបវិទ្យានៅពីក្រោយការអានកម្រិតពណ៌ខៀវជាបរិមាណ ឯកសារយោងអំពីការស្រូបដែលបញ្ជាក់លក្ខខណ្ឌ ពន្យល់ថាហេតុអ្វីមេគុណនីមួយៗត្រូវភ្ជាប់ជាមួយលក្ខខណ្ឌសារធាតុរំលាយ pH និងកំហាប់របស់វា។

ជ្រើសរើសតេស្តតាមសំណួរ។ តើមានកោសិកាប៉ុន្មានកំពុងមានជីវិតនៅពេលនេះ ជាសំណួរអំពីការរាប់ ដែលឆ្លើយដោយមីក្រូទស្សន៍ និងសន្លឹកកត់ត្រា។ តើមេផ្សិតដែលបណ្តុះនេះកំពុងដកដង្ហើមយ៉ាងសកម្មកម្រិតណា ជាសំណួរអំពីចលនវិទ្យា ដែលឆ្លើយដោយនាឡិកាវាស់ពេល និងបំពង់ដែលមានការគ្រប់គ្រងលក្ខខណ្ឌ។ មេទីឡែនខៀវអាចប្រើសម្រាប់ទាំងពីរ ប៉ុន្តែមិនមែនក្នុងបំពង់តែមួយនៅពេលតែមួយទេ។