მეთილენის ლურჯის რედუქციის ტესტი ფაშვის სითხისთვის

კურსდამთავრებული ფერმიდან რეკავს და ხელში ლურჯი სინჯარა უჭირავს. მან ფაშვის სითხეს მეთილენის ლურჯი ათი წუთის წინ დაუმატა, მაგრამ ლურჯი ფერი კვლავ რჩება. ის კითხულობს, უნდა მისცეს თუ არა ძროხას მეტი საღებავი.

ეს კითხვა მცდარ წარმოდგენას ავლენს. ფაშვის სითხის მეთილენის ლურჯის რედუქციის ტესტში საღებავს სინჯარაში ამატებენ და არასდროს — ცხოველის ორგანიზმში. მთელი ანალიზი სინჯარაში მიმდინარეობს. იმის გაზომვა, თუ რამდენად სწრაფად ქრება ლურჯი ფერი, გვაწვდის ინფორმაციას ამ ნიმუშში არსებული მიკრობების შესახებ და არა იმ მკურნალობაზე, რომელიც ცხოველს სჭირდება.

დაბნეულობა გასაგებია, რადგან მეთილენის ლურჯი სამ სხვადასხვა ვეტერინარულ კონტექსტში გვხვდება. ეს სტატია მათ ერთმანეთისგან განასხვავებს და აჩვენებს, როგორ უნდა შეფასდეს რედუქციის დრო pH-ის, პროტოზოების, ნიმუშის აღების ხარისხისა და კლინიკური ნიშნების გათვალისწინებით.

რას ზომავს ტესტი სინამდვილეში

მეთილენის ლურჯი დაჟანგულ მდგომარეობაში ლურჯია, აღდგენილ მდგომარეობაში კი თითქმის უფერო. ჯანმრთელი ცხოველის ფაშვის ახალი სითხე ძლიერ აღმდგენ გარემოს წარმოადგენს, რადგან ანაერობული ბაქტერიები საკვებს აქტიურად აფერმენტირებენ. ასეთ სითხეში მცირე რაოდენობის საღებავის შერევისას ბაქტერიული მეტაბოლიზმი ფერს რამდენიმე წუთში აქრობს.

ამრიგად, მუშაობის პრინციპი მარტივია: აქტიური ანაერობული ფლორა ლურჯ ფერს სწრაფად აქრობს, ხოლო არააქტიური ან დაზიანებული ფლორა — ნელა. მოკლე დრო ამ ნიმუშის უფრო მაღალ აღმდგენ უნარს ნიშნავს. გახანგრძლივებული დრო მიუთითებს მიკრობული აქტივობის დაქვეითებაზე, თუ ნიმუში სათანადოდ იყო აღებული და დამუშავებული.

ტესტი ფაშვის ჟანგვა-აღდგენით პოტენციალს პირდაპირ არ ზომავს. მსხვილფეხა საქონელში გამოყენებული მეთოდების კვლევამ, რომელშიც რედუქციის ტესტი მილივოლტებში პირდაპირ გაზომვებს შეადარეს, რედუქციის დროსა და გაზომილ ჟანგვა-აღდგენით პოტენციალს შორის წრფივი კორელაცია ვერ გამოავლინა. კვლევის დასკვნით, ეს ორი მაჩვენებელი ერთი და იმავე ცვლადის ურთიერთჩანაცვლებად გაზომვებად არ უნდა ჩაითვალოს. სრული შედარება შეჯამებულია PubMed-ზე. რედუქციის ტესტი მიკრობული პოპულაციის ფუნქციურ ანალიზად აღიქვით და არა იაფ ელექტროდად.

Merck/MSD-ის მიერ აღწერილ მცოხნავთა მარტივ მოუნელებლობაში რედუქციის გახანგრძლივებული დრო იმავე სურათის ნაწილია, რომელშიც ფაშვის არანორმალური pH და პროტოზოების შემცირებული რაოდენობა შედის. დიაგნოზს არცერთი ცალკეული მნიშვნელობა არ განსაზღვრავს. მას ნიშნების ერთობლიობა განსაზღვრავს.

სტანდარტული პროცედურა ცხოველთან ადგილზე

სხვადასხვა სასწავლო დაწესებულების პროტოკოლები მცირედ განსხვავდება, ამიტომ ჩაიწერეთ გამოყენებული ზუსტი მოცულობები და ტემპერატურა და შედეგები მხოლოდ იმავე პროტოკოლის ფარგლებში შეადარეთ. ერთ-ერთი ფართოდ გავრცელებული სასწავლო ვარიანტი ასეთია:

1. აიღეთ ფაშვის ახალი სითხის სულ მცირე 10-დან 20 mL-მდე, ნერწყვის მინიმალური მინარევით, ჰაერთან მინიმალური კონტაქტითა და მინიმალური გაგრილებით. ტესტი დაუყოვნებლივ ჩაატარეთ.
2. მოამზადეთ მეთილენის ლურჯის 0.03 პროცენტიანი ხსნარი, რაც შეადგენს 0.3 mg-ს ყოველ mL-ზე.
3. დაამატეთ საღებავი სითხის მოცულობის 5 პროცენტის ოდენობით. ეს არის 1.0 mL საღებავი 20 mL სითხეზე, ან 0.5 mL საღებავი 10 mL სითხეზე. ორივე შემთხვევაში სითხისა და საღებავის თანაფარდობა ერთნაირია — 20-ის შეფარდება 1-თან.
4. ფერის საკონტროლოდ შეინახეთ იმავე ნიმუშიდან აღებული, საღებავის გარეშე დატოვებული სითხის მეორე სინჯარა.
5. ნაზად აურიეთ, დაუყოვნებლივ ჩართეთ ტაიმერი და სინჯარა შეინარჩუნეთ სხეულის ტემპერატურასთან ახლოს, დაახლოებით 37-დან 39 გრადუს ცელსიუსამდე, ადგილობრივი პროტოკოლის მიხედვით.
6. ჩაიწერეთ დრო, სანამ სატესტო სინჯარის ფერი საკონტროლო სინჯარის ფერს გაუტოლდება. ჰაერთან შეხების ზედაპირზე შეიძლება თხელი ლურჯი რგოლი დარჩეს, რადგან იქ ჟანგბადი საღებავს ხელახლა ჟანგავს. ამ რგოლის გაქრობას ნუ დაელოდებით.

მეთილენის ლურჯის ჟანგვა-აღდგენითი ქიმია ხსნის, რატომ არის აქ ჟანგბადი მნიშვნელოვანი. ენერგიული შენჯღრევა, ფართოდ ღია სინჯარა ან ხანგრძლივი დაყოვნება ჟანგბადის შეღწევას უწყობს ხელს და საღებავი უფრო დიდხანს რჩება ლურჯი, ვიდრე უშუალოდ ფაშვში დარჩებოდა. იმავე მიზეზით მნიშვნელოვანია ფაშვის სითხის მინარევების გარეშე აღების ტექნიკის დეტალები. ნერწყვი ნიმუშს აზავებს და pH-ს ზრდის, ამიტომ კუჭის ზონდით აღებისას ბევრი კლინიცისტი პირველ ულუფას გადაღვრის, თუ აღებული მოცულობა ამის საშუალებას იძლევა.

რას ზომავს სხვადასხვა დაკვირვება

რედუქციის დრო მხოლოდ ერთ კითხვას პასუხობს. ქვემოთ მოცემული ფაშვის შეფასება აჩვენებს, რა ინფორმაციას იძლევა ადგილზე ჩატარებული თითოეული დაკვირვება. გამოიყენეთ მთელი მწკრივი და არა ერთი უჯრა.

მთავარი სწორედ ამ ცხრილშია. რედუქციის გახანგრძლივებული დრო, მოდუნებული პროტოზოები, არანორმალური pH და სუსტი შეკუმშვები ერთად მიკრობული აქტივობის ნამდვილ დაქვეითებაზე მიუთითებს. ცალკე აღებული გახანგრძლივებული დრო ფხიზელ, მცოხნავ ცხოველში, რომლის ნიმუშშიც პროტოზოები ენერგიულად მოძრაობენ, უფრო ნიმუშის პრობლემაზე მიუთითებს და არა ფაშვისაზე. მოქმედებამდე ნიმუში ხელახლა აიღეთ.

დროის შეფასება pH-ისა და ანამნეზის გათვალისწინებით

საწყის მდგომარეობას კვების რაციონი განსაზღვრავს. კონცენტრატებით მდიდარი რაციონი სწრაფად ფერმენტირდება და საღებავის ფერი შეიძლება დაახლოებით ერთ წუთში გაქრეს, ხოლო თივით კვებისას ამას რამდენიმე წუთი დასჭირდეს, ჯანმრთელ ცხოველებშიც კი. ამიტომ მოკლე დრო თავისთავად უკეთეს ჯანმრთელობას არ ადასტურებს. ის ადასტურებს, რომ აქტიურ მიკრობებს მეტი ფერმენტირებადი სუბსტრატი შეხვდათ.

მარცვლეულით მძიმე გადატვირთვა ამ მარტივ კანონზომიერებას არღვევს. თავდაპირველად ნახშირწყლების ფერმენტაცია შეიძლება ინტენსიური იყოს, შემდეგ კი მჟავით გამოწვეული დაზიანება ნორმალურ ფლორასა და პროტოზოებს თრგუნავს და რედუქცია ხანგრძლივდება. ამიტომ ერთ-ერთი სასწავლო წესის თანახმად, ტესტი სარწმუნო არ არის, როდესაც ფაშვის pH დაახლოებით 5.5-ზე დაბალია. ამ ეტაპზე შესამოწმებელი ფლორა უკვე შეცვლილია.

სურათის შეფასების პრაქტიკული გზამკვლევი:

• ნორმალური pH და რედუქცია დაახლოებით 6 წუთის ფარგლებში ფუნქციურად აქტიურ ფლორაზე მიანიშნებს.
• ნორმალური pH და მკვეთრად გახანგრძლივებული რედუქცია მიანიშნებს უმადობით, ანტიმიკრობული ზემოქმედებით ან არასათანადო ნიმუშით გამოწვეულ უმოქმედობაზე.
• მაღალი pH და გახანგრძლივებული რედუქცია ხშირად მოსდევს ხანგრძლივ უმადობას სუბსტრატის სიმცირით, თუმცა გაითვალისწინეთ ზონდით აღებისას ნერწყვის მინარევიც.
• დაბალი pH და პროტოზოების შემცირებული აქტივობა ნახშირწყლებთან დაკავშირებული დისბიოზის ეჭვს აჩენს. აქ ფაშვის pH-ის ინტერპრეტაციის მითითებები დაგეხმარებათ. 5.5-ზე დაბალი მნიშვნელობები ორგანიზმის საერთო დათრგუნვასთან ერთად უფრო მარცვლეულით გადატვირთვასა და მძიმე აციდოზზე მიუთითებს, ვიდრე მარტივ მოუნელებლობაზე.

ყოველთვის ჩაიწერეთ ბოლოდროინდელი პერორალური ტეტრაციკლინები, საკვებში არსებული იონოფორები, სისტემური ანტიმიკრობული საშუალებების ხანგრძლივი გამოყენება, რაციონის მკვეთრი ცვლილებები, უმადობის ხანგრძლივობა და წყლის მიღება. MSD-ის სახელმძღვანელო კონკრეტულად გვაფრთხილებს, რომ პერორალურმა ტეტრაციკლინებმა შეიძლება ფაშვის მიკროფლორა მნიშვნელოვნად დათრგუნოს. იონოფორები ბაქტერიულ პოპულაციებს მიზანმიმართულად ცვლის. ამ ანამნეზის გარეშე გახანგრძლივებული დროის ინტერპრეტაცია შეუძლებელია.

ნიმუშის აღების ხარისხს თანაბარი მნიშვნელობა უნდა მიენიჭოს. კონტროლირებულმა კვლევამ აჩვენა, რომ იმავე ცხოველებიდან კუჭის ზონდით აღებულ ნიმუშებს კანულით აღებულ ნიმუშებთან შედარებით უფრო მაღალი pH და აქროლადი ცხიმოვანი მჟავების უფრო დაბალი შემცველობა ჰქონდა, ძირითადად ნერწყვის გამო. აღებიდან 60 წუთის შემდეგ რედუქციის დრო მნიშვნელოვნად გახანგრძლივდა ყველა შესწავლილი მოცულობისთვის, ყველაზე მეტად კი მცირე ნიმუშებზე იმოქმედა. აიღეთ სულ მცირე 10 mL, შეამოწმეთ 30 წუთის განმავლობაში, რედუქციის ტესტი ადრეულ ეტაპზე ჩაატარეთ, ნიმუში თბილად შეინახეთ და ჰაერთან კონტაქტი მინიმუმამდე დაიყვანეთ.

სამი გამოყენება, რომლებიც ერთმანეთში არ უნდა აგერიოთ

ერთი და იგივე საღებავი, სამი განსხვავებული სისტემა.

პირველია აქ აღწერილი ფაშვის სითხის ანალიზი. ნიმუში აღებული ფაშვის სითხეა. საღებავს ამატებენ in vitro, 0.03 პროცენტიანი კონცენტრაციით. საბოლოო მაჩვენებელი გაუფერულებამდე გასული დროა. მიზანი მიკრობების აღმდგენი აქტივობის შეფასებაა.

მეორეა მეთილენის ლურჯის შეყვანა ცოცხალ მცოხნავში. დამკვიდრებული მაგალითია ინტრავენური თერაპია ნიტრატებით ან ნიტრიტებით გამოწვეული ტოქსიკოზისას მეტჰემოგლობინემიით, როდესაც პრეპარატი ფუნქციურ ჰემოგლობინს აღადგენს. აქ მოქმედებს დოზის, ფორმულაციის, ნარჩენებისა და მოცდის პერიოდის წესები. ამ გადაწყვეტილებას სინჯარაში დროის გაზომვასთან არაფერი აქვს საერთო. თუ კონკრეტულ პროცედურაში საღებავი in vivo ტრასერად გამოიყენება, პრინციპი ისაა, სად გადაადგილდება საღებავი და არა ის, რამდენად სწრაფად აღადგენენ მას ფაშვის მიკრობები.

მესამეა რძის რედუქციის ტესტი. ნიმუში რძეა. საღებავს რძის ნიმუშს ამატებენ. ლურჯი ფერის სწრაფი გაქრობა ზოგადად უფრო მაღალ მიკრობულ აქტივობასა და შენახვის უფრო დაბალ ხარისხზე მიუთითებს, ხოლო ნელი რედუქცია — უკეთეს ხარისხზე. ეს საკვების მიკრობიოლოგიისა და რძის ხარისხის შემოწმების სფეროს ეკუთვნის და არა ფაშვის მედიცინას; ამასთან, ეს ბაქტერიების რაოდენობის დათვლა არ არის.

სახელების მკაფიოდ გამიჯვნა შეცდომას თავიდან აგაცილებთ: ფაშვის სითხის რედუქციის დრო, მეთილენის ლურჯით სისტემური თერაპია ან ტრასერად გამოყენება და რძის რედუქციის ტესტი. უსაფრთხოების წესი ერთ წინადადებაში ეტევა. ფაშვის ანალიზისთვის განკუთვნილი საღებავი ლაბორატორიულ სინჯარაში რჩება და ეს სინჯარა შემდეგ იყრება. ტესტის ჩასატარებლად მას ცხოველს არასდროს აძლევენ.

მოკლე წესი ფერმიდან მიღებული ზარისთვის

საღებავი სტანდარტულად გამოიყენეთ 0.03 პროცენტიანი კონცენტრაციით და 1 წილი საღებავის შეფარდებით 20 წილ სითხესთან; ახალი სითხე შეამოწმეთ სხეულის ტემპერატურასთან ახლოს, საღებავის გარეშე დატოვებულ საკონტროლო ნიმუშთან შედარებით, ხოლო წუთები შეაფასეთ pH-ის, პროტოზოების მოძრაობის აქტივობის, ნიმუშის აღების ხარისხის, რაციონის, პრეპარატების, შეკუმშვების, მადის, განავლისა და ჰიდრატაციის გათვალისწინებით. ცალკე აღებული რიცხვი მოუნელებლობის დიაგნოზს არასდროს ადგენს. ამას ერთმანეთთან თანხვედრილი ნიშნების ერთობლიობა აკეთებს.