Artikel
Uji reduksi metilena biru kanggo susu: prinsip lan watesan
Sawijining mahasiswi ngangkat rong tabung susu. Siji dadi putih sajrone sakjam. Sijine tetep biru nganti limang jam. Dheweke nuding tabung sing biru lan kandha yen susu kuwi aman diombe.
Dudutan kuwi nuduhake cara pangerten sing kliru. Uji susu nganggo metilena biru ora ndeteksi keamanan. Uji iki nuduhake sepira cepete populasi mikroba ing tabung kuwi ngedhunake potensial redoks ing kahanan sing wis ditemtokake. Asil sing alon tegese aktivitas metabolik sakabehe ing sampel kurang. Asil kuwi ora menehi katrangan ngenani organisme apa sing ana, apa ana patogen ing antarane, utawa apa susu wis dipasteurisasi kanthi bener.
Bedane iki penting amarga uji kasebut katon ngyakinake. Werna biru ilang. Jam menehi angka. Angka bisa ndadekake wong napsirake luwih saka sing kudune. Artikel iki njaga tafsiran sing migunani lan nyegah tafsiran sing ora aman.
Apa sing sejatine diukur dening reduksi
Metilena biru wernane biru nalika kaoksidasi lan meh ora ana wernane nalika kareduksi dadi leukometilena biru. Susu seger ngandhut oksigen larut, sing njaga zat pewarna tetep biru. Bakteri sing nindakake respirasi lan fermentasi nggunakake oksigen kuwi lan ngeculake senyawa pereduksi. Nalika potensial redoks mudhun nganti cukup, zat pewarna nampa elektron lan kelangan wernane. Buku mikrobiologi persusuan saka University of Guelph nerangake urutan sing padha: oksigen disingkirake, banjur zat pereduksi kawangun sajrone metabolisme bakteri.
Panliten klasik ing Journal of Dairy Science nggambarake iki minangka proses rong tahap: flora luwih dhisik ngentekake oksigen, banjur komponen susu ngreduksi zat pewarna kanthi cepet. Mula, uji reduksi metilena biru kanggo susu luwih trep dimangerteni minangka uji fungsional aktivitas metabolik gabungan, dudu minangka piranti kanggo ngetung sel. Prilaku redoks metilena biru nerangake kimia ing mburi owah-owahan kuwi.
Oksigen mbalikke kahanan ing titik pungkasan. Zat pewarna leuko sing wis kareduksi, yen kena hawa, bakal kaoksidasi maneh lan bali dadi biru. Mula, ngocok, ngesokake, tabung sing amba, lan ruang hawa gedhe ing ndhuwur cairan bisa ndadekake asil luwih alon. Dering biru tipis kerep isih katon ing lumahing sing kena hawa sawise cairan ing njero tabung ilang wernane. Prosedur standar nampa anane dering kuwi, ora ngenteni nganti deringe ilang.
Jinis organisme nambah panyimpangan kapindho. Koliform lan akeh organisme asam laktat ngreduksi zat pewarna kanthi cepet. Akeh organisme psikrotrof lan termodurik ngreduksi kanthi alon utawa meh ora ngreduksi babar pisan. Rong sampel susu kanthi cacah koloni ing cawan sing padha bisa kelangan werna biru kanthi beda wektu nganti pirang-pirang jam. Kasunyatan iki wae wis cukup kanggo nolak konversi wektu dadi cacah koloni.
Prosedur laboratorium sing dikendhalekake
Versi lapangan lan versi buku ajar beda ing rinciane, mula asil mung sah ing lingkup metode sing ngasilake asil kasebut. Versi konvensional ing laboratorium pangan ditindakake kaya mangkene:
- Jupuk susu mentah kanthi aerasi seminimal mungkin lan enggal adhemake. Campur kanthi mbalikke wadhah alon-alon sadurunge njupuk sampel.
- Lebokake 10 mL susu menyang tabung steril kanthi 1 mL larutan zat pewarna kerja. Salah siji konsentrasi kerja sing akeh digunakake yaiku zat pewarna 0.005 persen, kanthi rasio susu marang zat pewarna 10 bandhing 1.
- Tutup tabung nganggo sumbat, walik alon-alon kaping pindho, banjur lebokake ing adus banyu sajrone sawetara menit. Inkubasi biasane ing suhu 35 nganti 38 derajat Celsius, gumantung standar sing digunakake. Cathet standar endi sing dituruti.
- Lindhungi tabung saka cahya sajrone inkubasi, amarga cahya nyepetake reduksi.
- Waca asil ing menit kaping 30, banjur ing interval tetep. Titik pungkasan yaiku wektu nalika tabung cocog karo susu sing wis digodhog minangka pembanding utawa nalika ilang warnane wis tekan kahanan sing ditemtokake ing prosedur.
- Simpen siji tabung saka susu sing padha tanpa perlakuan minangka kontrol visual yen metode kasebut mbutuhake.
Manual pengujian susu FAO menehi versi lapangan sing cetha saka urutan iki kanthi 10 mL susu ditambah 1 mL zat pewarna, ditutup nganggo sumbat, diwalik alon-alon, diinkubasi ing suhu watara 37 nganti 38 derajat, lan diwaca saben 30 menit. Tabung kontrole nggunakake susu sing wis digodhog kanggo ngrusak sistem pereduksi alami lan menehi patokan perbandingan werna.
Skema ing ndhuwur nuduhake wates kahanan sing kudu dikendhalekake. Volume padha, zat pewarna padha, suhu padha, cara nyampur padha, pangayoman saka cahya padha, aturan titik pungkasan padha. Owahana salah sijine, lan wektu sing diukur uga bakal owah. Mula, versi omahan sing nggunakake konsentrasi zat pewarna sakarepe ora bisa dibandhingake karo kelas mutu laboratorium.
Apa sing dituduhake dening wektu reduksi
Wektu sing luwih suwe tegese aktivitas sakabehe luwih sithik ing kahanan sing kasebut. Wektu sing luwih cendhak tegese aktivitas sakabehe luwih dhuwur. Tabel pasinaon persusuan menehi kelas mutu kira-kira kanggo wektu kasebut, contone 5 jam utawa luwih dianggep apik banget lan kurang saka 30 menit dianggep ala ing salah siji skema sing dijupuk saka BIS.
Variasi iki sing dadi piwulang. Asil 5 jam ora nduweni kelas mutu universal. Asil kuwi mung lumaku ing prosedur sing nemtokake. Mula, format laporan sing bisa dipertanggungjawabake yaiku:
MBRT padha karo X jam miturut metode sing kasebut, cocog karo kelas mutu ing metode kuwi.
Ora tau MBRT padha karo X unit pembentuk koloni saben mL. Pandhuan sing dijupuk saka Standard Methods nyatakake yen asil reduksi zat pewarna ora kena dilaporake minangka cacah bakteri. Prosedur pewarnaan prasaja nganggo metilena biru uga mangsuli pitakon sing beda, amarga nuduhake wujud sel ing mikroskop, dudu aktivitas sakabehe ing tabung.
Tabel tafsiran lan watesan
Tabel iki minangka rujukan asli kanggo artikel iki. Wacanen saben larik nganti rampung. Ora ana siji sel tabel sing bisa dimangerteni dhewe tanpa liyane.
| Pengamatan utawa pratelan | Apa sing dituduhake | Apa sing ora bisa dibuktekake | Faktor pangganggu utama |
|---|---|---|---|
| Werna biru ilang kanthi cepet, kurang saka 2 jam ing salah siji skema susu mentah | Aktivitas pereduksi dhuwur, cocog karo beban mikroba gedhe utawa mutu panyimpenan sing ala | Spesies, cacah sing pas, toksin, utawa kegagalan pasteurisasi | Panyimpenan anget, flora sing akeh koliforme, cahya, dosis zat pewarna sithik |
| Wektu sedheng, 2 nganti 4 jam | Aktivitas sedheng; kelas mutu mung lumaku ing skema sing kasebut | Keamanan utawa ora anane organisme pereduksi alon | Suhu inkubasi dhuwur, bedane aerasi, pamisahan lemak |
| Reduksi alon, 5 jam utawa luwih | Aktivitas sakabehe sithik ing skema kasebut | Ora anane patogen, pasteurisasi, utawa keamanan kimia | Residu antibiotik, pengawet, oksigen larut tambahan, dosis zat pewarna dhuwur |
| Dering biru tetep ana ing lumahing nalika cairan ing njero ilang wernane | Reoksidasi ing wates antarane cairan lan hawa, efek pinggiran sing lumrah | Uji gagal utawa reaksi ora rampung | Tabung amba, sumbat ora rapet, bola-bali dibukak kanggo dipriksa |
| Tabung putih sawise inkubasi susu sing wis dipanasake | Sistem pereduksi sing owah lan aktivitas sing isih lestari | Yen pemanasan kuwi padha karo pasteurisasi sing wis divalidasi | Karusakan amarga panas, pamulihan sajrone inkubasi, kontaminasi sabanjure |
| Siji nilai MBRT sing disebut tanpa metode | Kahanan pengujian ora dingerteni | Kelas mutu utawa cacah apa wae | Formulasi zat pewarna, rasio, suhu, cara nyampur, lan aturan titik pungkasan kabeh ora dilaporake |
Pamriksan adhedhasar pertumbuhan, kayata nganggo media kultur bakteri, tetep dadi cara kanggo ngetung lan ngisolasi. Tabung reduksi kanggo skrining. Cawan kanggo ngenali lan ngetung.
Apa sing ora bisa dibuktekake dening uji iki babagan keamanan
Asil sing alon ora bisa mbuktekake yen ora ana patogen. Patogen sing ana ing dosis sing nduweni teges klinis bisa mung menehi sumbangan cilik marang konsumsi oksigen sakabehe. Deteksi patogen kudu nggunakake metode khusus kanggo organisme kasebut, sing ing Standard Methods saiki dianggep minangka bidang kapisah saka skrining mutu umum.
Uji iki ora bisa verifikasi pasteurisasi. Verifikasi perlakuan panas nggunakake uji fosfatase alkali utawa metode liyane sing wis divalidasi miturut pandhuan higiene persusuan Codex. Tabung putih utawa biru ora menehi katrangan bab riwayat wektu lan suhu saka sakumpulan susu.
Uji iki ora bisa menehi sertifikasi keamanan pangan. Keamanan gumantung marang patogen, toksin sing wis kawangun sadurunge, residu obat, kontaminan kimia, riwayat rantai adhem, lan kontaminasi sawise njupuk sampel. Codex nganggep keamanan produk susu minangka rerangkening langkah pengendalian, dudu siji asil skrining.
Konteks laboratorium pangan ora padha karo pengujian ing omah
Ing laboratorium persusuan, uji iki kanggo skrining susu sing ditampa, mbandhingake pemasok saka wektu menyang wektu, utawa mulang mikrobiologi redoks kanthi pengawasan. Sampel bisa dilacak. Reagen distandardisasi. Suhu dicathet. Limbah dibuwang liwat sistem pembuangan laboratorium.
Pengujian ing omah ora nduweni kabeh kuwi. Volume ing pawon mung kira-kira. Konsentrasi zat pewarna sing didol online beda-beda banget. Inkubasi kerep ditindakake ing kamar anget, dudu ing adus banyu sing dikalibrasi. Owah-owahan werna tetep kedadeyan, mula asile katon bisa dipercaya, sanajan kabeh pengendalian sing menehi teges marang asil kuwi ora ana.
Risiko sing luwih gedhe ana ing tumindak wong. Tabung biru ing omah bisa njurung wong ngombe susu mentah sing, ing laboratorium, isih bakal dikirim kanggo penghitungan koloni ing cawan, skrining patogen, lan pamriksan residu. Uji metilena biru kanggo susu dirancang kanggo nemtokake kelas mutu susu mentah nalika ditampa, dudu kanggo nyatakake susu layak dikonsumsi. Skrining resazurin sing luwih cepet uga nduweni watesan sing padha: werna luwih cepet diwaca, nanging tetep ora menehi jawaban bab patogen.
Aturan ringkes kanggo meja laboratorium
Standardisasi zat pewarna, rasio, suhu, cara nyampur, cahya, lan titik pungkasan. Laporna wektu bebarengan karo jeneng metode lan kelas mutune. Tafsirna wektu ing menit kanthi nimbang riwayat panyimpenan, jinis flora, residu, lan mutu pangambilan sampel. Wektu sing cepet menehi tandha ana aktivitas sing perlu diselidiki. Wektu sing alon ora tau njamin keamanan.