Edemede
Methylene blue na ịka nká mkpụrụ ndụ: ihe nnwale fibroblast na-atụ
Nghọtahie a na-ahụkarị na-adị otu a. Akwụkwọ nnyocha na-akọ na methylene blue mere ka ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ fibroblast a zụlitere bawanye okpukpu abụọ ihe karịrị ugboro 20 ọzọ, onye na-agụ ya wee kwubie na ọ na-ewepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká ma ọ bụ na-agbatị ndụ mmadụ n'otu oke ahụ. Nkwubi okwu ahụ yiri ihe ezi uche dị na ya. Ma ọ dịkwa njọ n'akụkụ abụọ dị iche iche.
Nsogbu dị n'okpuru ya metụtara nghọta echiche, ọ bụghị ọnụọgụ. Okpukpu abụọ nke ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ, ihe nrịbama ịka nká mkpụrụ ndụ, na nha telomere na-aza ajụjụ dị iche iche. Ụzọ kacha mma isi gụọ ọrụ nnyocha methylene blue na fibroblast bụ ịhụ ya dị ka nnyocha banyere igbu oge tupu otu ụdị mkpụrụ ndụ dị n'efere nnwale abanye n'ọnọdụ ịka nká, nke nha mitochondria na-akwado. Nke ahụ dị iche na ịhọrọ ma wepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká, ọ dịkwa iche ọzọ na ịka nká nke ihe dị ndụ n'ozuzu ya. Ihe gbara ọdịiche ahụ gburugburu so na otú nnyefe elektrọn n'ime mitochondria si emetụta ike mkpụrụ ndụ na otú e si akọwa nkwupụta nnyocha methylene blue.
Okpukpu abụọ nke ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ na-agụ akụkọ uto, ọ bụghị ntorobịa
Ọtụtụ n'ime nsonaazụ ndị bụ isi sitere na mkpụrụ ndụ IMR90, otu ụdị fibroblast nkịtị sitere na ngụgụ nwa mmadụ nọ n'afọ, nke nwere ikike nkewa mkpụrụ ndụ nwere oke. Na nnyocha mbụ banyere methylene blue na ogologo ndụ nkewa mkpụrụ ndụ n'ime fibroblast IMR90, a na-ebufe mkpụrụ ndụ a zụlitere n'usoro oge, a na-edekọkwa ngụkọta ugboro ọnụ ọgụgụ ha mụbara okpukpu abụọ ruo mgbe ha kwụsịrị ikewa. Ịgwọ ha n'ọkwa nanomolar, nke lekwasịrị anya na 100 nM, mere ka ha nweta ihe karịrị ugboro 20 ọzọ nke mmụba okpukpu abụọ tupu nkewa akwụsị.
Mmụba ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ okpukpu abụọ bụ nkeji eji edekọ ihe. Ọ na-edekọ ugboro ole ọnụ ọgụgụ ahụ mụbara ihe dị ka okpukpu abụọ. Ọ naghị akọ kpọmkwem ma otu mkpụrụ ndụ akaala nká, nọ n'ọnọdụ izu ike, aghọọla ụdị mkpụrụ ndụ pụrụ iche, ma ọ bụ nwụọla. Mkpụrụ ndụ a zụlitere nwere ike nweta mmụba okpukpu abụọ ndị ọzọ n'ihi na mkpụrụ ndụ na-anọgide nwee ike ikewa ogologo oge, n'ihi na mkpụrụ ndụ ole na ole na-akwụsị ikewa n'oge n'ihi nrụgide, ma ọ bụ n'ihi na ọnọdụ nnwale na-enye otu obere ìgwè na-amụba amụba ohere karịa ndị ọzọ. Ngụkọta ahụ naanị enweghị ike ịmata ọdịiche dị n'etiti ụzọ ndị ahụ.
Ọ bụ ya mere e ji ejikọta ngụkọta mmụba okpukpu abụọ na ihe nrịbama. Ngụkọta ahụ na-egosi ogologo oge mmụba mkpụrụ ndụ gara n'ihu. Ihe nrịbama na-egosi ọnọdụ mkpụrụ ndụ ndị kwụsịrị ikewa ma ọ bụ ndị ka dị ndụ banyere.
Ntuziaka ihe a na-atụ: ihe nrịbama nke ọ bụla na-egosi
Ịka nká mkpụrụ ndụ a zụlitere bụ ọdịdị a na-achọpụta site n'ọtụtụ nha dị iche iche. Ọ dịghị otu ntụpọ agba ma ọ bụ protein na-egosi ya nke ọma naanị ya.
Ịkwụsị uto na enweghị mmepụta DNA. A na-enyocha nkwụsị na-adịgide adịgide site na mbelata nnabata BrdU ma ọ bụ EdU n'ime DNA, ọdịdị dị larịị, na enweghị ike ịmaliteghachi uto mgbe e bughachiri mkpụrụ ndụ n'efere ọzọ. Nke a na-ekewa nkwụsị n'ihi ịka nká na izu ike nwa oge.
Beta galactosidase metụtara ịka nká mkpụrụ ndụ. SA-beta-gal na-eji agba egosi ọrụ lysosome n'akụkụ pH 6.0. Fibroblast ndị kaarala nká na-egosikarị ntụpọ agba ahụ ka oke lysosome na-abawanye. Ọ bụghị naanị ịka nká ka ọ na-egosi, ya mere a na-atụle ya na mmụba mkpụrụ ndụ na ihe nrịbama molekụla.
Ụzọ p16 na p21. p16 na-arụ ọrụ site na CDK4 na CDK6 na ụzọ RB. A na-akpalikarị p21 site na p53. Ọkwa ha na-arị elu na-akwado nkwụsị nkewa, ma ọ dịghị nke ọ bụla n'ime protein abụọ ahụ metụtara naanị ịka nká mkpụrụ ndụ.
Ọnọdụ nzuzo ihe. Ọdịdị nzuzo ihe metụtara ịka nká mkpụrụ ndụ, ma ọ bụ SASP, na-ezo aka na mgbanwe n'otú mkpụrụ ndụ si ewepụta cytokine, chemokine, ihe na-akpalite uto, na protease. Nnwale RNA ma ọ bụ protein maka ihe ndị so na SASP na-akọwa otú mkpụrụ ndụ si ezigara ndị agbata obi ha ozi. Ha anaghị atụ ikike nkewa mkpụrụ ndụ kpọmkwem.
Ihe na-akpata oxidation na nha mitochondria. Akwụkwọ nnyocha methylene blue na-agbakwụnye akụkụ mitochondria: oke na ọrụ complex IV, iji oxygen eme ihe, mmepụta heme, oke akpụkpọ, ọdịiche voltaji gafee akpụkpọ, ATP, na akara ihe na-akpata oxidation. Ihe ndị a na-akọwa ọnọdụ metabolism nke na-eso igbu oge nkwụsị nkewa. Ha anaghị akọwa ịka nká mkpụrụ ndụ naanị ha, ma ha na-anwale usoro a tụrụ aro. A kọwara usoro ntụgharị redox, ebe NAD(P)H na-enye methylene blue elektrọn, cytochrome c wee napụ ya elektrọn ọzọ, n'otu nnyocha IMR90 ahụ jikọtara ntụgharị redox na mmepụta ihe na-akpata oxidation dị ala. A tụlere echiche ndị metụtara oke a na-enye na nkesa ya na nkọwa ọgwụ methylene blue na otú anụ ahụ si enweta ya.
Ọnụego mbelata telomere. Nkeji ziri ezi bụ ọnụ ọgụgụ ụzọ abụọ nke ntọala DNA na-efunahụ kwa mmụba okpukpu abụọ n'ime izu dị iche iche, ọ bụghị ogologo telomere n'otu oge. Mbelata ji nwayọọ na-aga pụtara na obere ogologo na-efu kwa nkewa mkpụrụ ndụ. Ọ pụtaghị na telomere na-agbatị, nrụgide nwekwara ike ime ka mkpụrụ ndụ IMR90 kwụsị ikewa n'enweghị nnukwu mgbanwe telomere.
Ntụnyere usoro nnwale fibroblast atọ
Ihe e kere kpọmkwem maka ibe a bụ ntụnyere dị n'okpuru. Ọ na-etinye ụdị mkpụrụ ndụ, ihe e nyere ha, ihe a tụrụ, na oke ihe a pụrụ ikwubi n'otu ebe.
| Nnyocha | Mkpụrụ ndụ na ihe e nyere ha | Ihe a tụrụ | Ihe ọ na-enweghị ike igosi |
|---|---|---|---|
| Atamna na ndị ọzọ, FASEB J 2008 | Fibroblast IMR90 nkịtị, methylene blue n'ọkwa nanomolar ruo ogologo oge, 100 nM dị ka ọnọdụ ọkọlọtọ | Ngụkọta mmụba okpukpu abụọ, oke complex IV, iji oxygen eme ihe mụbara 37 ruo 70 pasent, mmepụta heme, igbochi ịka nká tupu oge ya nke hydrogen peroxide ma ọ bụ cadmium kpatara, enzyme nke oge 2 n'ime mkpụrụ ndụ HepG2 | Enweghị nnwale iwepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká. Enweghị nha ogologo ndụ anụmanụ ma ọ bụ mmadụ. Ogologo ndụ nkewa mkpụrụ ndụ ebe a pụtara mmụba okpukpu abụọ n'efere nnwale. |
| Atamna na ndị ọzọ, Redox Biology 2015, nke a kọwara na nnyocha sochirinụ banyere usoro AMPK na mmepụta complex IV | Fibroblast IMR90, tumadi methylene blue 100 nM, na AICAR dị ka ihe ntụnyere na-akpalite AMPK ruo ogologo oge | Mgbanwe n'oke NAD ma e jiri ya tụnyere NADH ka oge na-aga, phosphorylation AMPK nwa oge, ịkpalite PGC-1alpha na SURF1, mmụba ọrụ complex IV karịrị 100 pasent, ihe na-akpata oxidation dị ala 28 pasent, mbelata telomere ji nwayọọ na-aga, ihe dị ka mmụba okpukpu abụọ 18 ọzọ ma e jiri ya tụnyere ihe dị ka 2 na AICAR, enweghị mmetụta n'usoro ndụ mkpụrụ ndụ | Oke AICAR e ji mee ntụnyere dị iche ihe dị ka okpukpu 1000, ọ dịkwa iche n'ihe ọ na-elekwasị anya, ya mere ọ na-anwale usoro ịkpalite ọrụ kama ike ọrụ e mere ka ha kwekọọ. Nsonaazụ telomere metụtara mkpụrụ ndụ a zụlitere na-ekewa n'ime izu dị iche iche. |
| Xiong na ndị ọzọ, Aging Cell 2016, nke a kọrọ na nnyocha fibroblast progeria banyere iweghachi ọnọdụ mitochondria na nucleus | Fibroblast akpụkpọ e nwetara kpọmkwem n'aka ndị nwere progeria Hutchinson-Gilford, tinyere mkpụrụ ndụ nkịtị kwekọrọ na ha maka ntụnyere, tumadi 100 nM maka izu 5 ruo 12 | Ọdịdị mitochondria site na microscopy fluorescence na elektrọn, mmegharị site na onyonyo mkpụrụ ndụ dị ndụ, superoxide, ọdịiche voltaji gafee akpụkpọ, ATP, PGC-1alpha, ihe nrịbama mmụba na ịka nká mkpụrụ ndụ, tinyere ọzịza dị n'akpụkpọ nucleus, ebe progerin nọ, heterochromatin, na ngosipụta mkpụrụ ndụ ihe nketa | Usoro ihe atụ ịka nká tupu oge ya metụtara otu ọrịa, ọ bụghị ịka nká nkịtị. Iweghachi ọdịdị na ihe nrịbama abụghị iwepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká. Enweghị nha irè n'anụmanụ ma ọ bụ nha nsonaazụ ụlọ ọgwụ. |
| Xue na ndị ọzọ, ntụle Cells 2021, nke a chịkọtara na ntụle methylene blue dị ka ihe nwere ike igbochi ịka nká | Nchịkọta akwụkwọ nnyocha gbasara ịka nká ụbụrụ, mmebi mkpụrụ ndụ akwara, akpụkpọ, ọgwụgwọ ọnya, na progeria | Na-akọwa methylene blue dị ka ihe na-akwalite ntụgharị redox nke nwere ike ịgafe akụkụ ụfọdụ nke nnyefe elektrọn na complex I na III, ma jiri nke a tụnyere echiche banyere free radical na ịka nká | Ọ bụ naanị nchịkọta nkọwa. Ọ na-ahazi echiche ndị a tụrụ aro ma gosi ebe ihe akaebe ụlọ ọgwụ ka na-erubeghị nkwubi okwu doro anya. |
Usoro yiri ibe ya n'ahịrị ndị a dị mkpa karịa otu ahịrị ọ bụla. A na-ejikọta methylene blue n'oke dị ala ugboro ugboro na ogologo oge mmụba mkpụrụ ndụ, ọrụ complex IV dị elu, akara ihe na-akpata oxidation dị ala, na ọdịdị ka mma. Usoro nnwale ahụ ka bụ nke na-eso mgbanwe ka oge na-aga: malite na mkpụrụ ndụ na-ekewa, nye ha ihe ahụ mgbe ha na-amụba, ma dekọọ ogologo oge nkewa gara n'ihu. Usoro ahụ nwere ike ịkwado nkwupụta igbu oge. Ọ pụghị ịkwado nkwupụta iwepụ mkpụrụ ndụ ma ọ bụrụ na e jighị usoro ọzọ.
Igbu oge ịka nká mkpụrụ ndụ abụghị iwepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká
Igbu oge pụtara na mkpụrụ ndụ na-ekewa na-anọgide na-ekewa ogologo oge tupu ha akwụsị. Iwepụ, nke a na-akpọkarị mmetụta senolytic, pụtara na a na-ahọrọ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká ma gbuo ha ma ọ bụ belata ọnụ ọgụgụ ha, ebe mkpụrụ ndụ agbata obi ha na-amụba amụba ka dị ndụ.
Akwụkwọ nnyocha methylene blue na fibroblast na-anwale usoro nke mbụ. Mkpụrụ ndụ a zụlitere na-amalite n'ọnọdụ mmụba, na-enweta ihe ahụ mgbe a na-ebufe ha ugboro ugboro, ma na-akwụsị ikewa mgbe oge gafere karịa. Ya mere, ihe nrịbama dịka SA-beta-gal, p16, p21, na ihe ndị so na SASP na-apụta mgbe e mesịrị ma ọ bụ n'ọkwa dị ala n'otu ọkwa mbufe. A na-atụ anya usoro ahụ mgbe ọ bụla mmalite ịka nká gbanwere oge. Ọ naghị egosi na e wepụla mkpụrụ ndụ ọ bụla nke ịka nká ya guzosirila ike.
Nkwupụta mmetụta senolytic ga-achọ usoro dị iche: buru ụzọ mee ka mkpụrụ ndụ a zụlitere banye n'ọnọdụ ịka nká e gosipụtara nke ọma, nyezie ha ihe ahụ, ma gosi ọnwụ ma ọ bụ mbelata ahọpụtara nke mkpụrụ ndụ ndị ahụ ma e jiri ha tụnyere mkpụrụ ndụ ntụnyere na-amụba amụba, tinyere nha kpọmkwem nke ịdị ndụ na ọnwụ. Mbelata otu ihe nrịbama ezughị n'ihi na ngosipụta ya nwere ike ịgbanwe n'enweghị ọnwụ mkpụrụ ndụ, mkpụrụ ndụ fọdụrụ na-amụba amụba nwekwara ike jupụta efere ahụ. Ọ dịghị nke ọ bụla n'ime isi mmalite anọ e zoro aka na ha jiri usoro mbelata ahọpụtara ahụ nwalee methylene blue, ya mere aha ziri ezi ka bụ ọrụ igbu oge ịka nká mkpụrụ ndụ ma ọ bụ igbochi ya n'ime nnwale ụlọ nyocha, ọ bụghị mmetụta senolytic. A kọwakwuru akụkụ nrụgide oxidation nke ọdịiche a na otú mkpụrụ ndụ si achịkwa ụdị oxygen na-emeghachi omume ngwa ngwa.
Nsonaazụ banyere nnyefe ozi nwa oge na-eme ka isi okwu a dokwuo anya. N'ọrụ IMR90 nke 2015, methylene blue mere ka oke NAD ma e jiri ya tụnyere NADH rịa elu nwa oge, meekwa ka phosphorylation AMPK dị nwa oge, emesịa ọ kpalitere PGC-1alpha na SURF1, nke abụọ jikọtara na mmepụta complex IV. Ịkpalite AMPK ruo ogologo oge site na AICAR nwetara mmụba okpukpu abụọ ndị ọzọ pere nnọọ mpe ma e jiri ya tụnyere nke ahụ.
Ogologo ndụ nkewa mkpụrụ ndụ abụghị ogologo ndụ mmadụ
Ogologo ndụ nkewa mkpụrụ ndụ na-agụ ugboro ọnụ ọgụgụ mkpụrụ ndụ mụbara okpukpu abụọ tupu nkewa akwụsị n'efere nnwale a na-achịkwa, ebe oxygen, ihe eji azụ mkpụrụ ndụ, na usoro oge mbufe anaghị agbanwe. Ogologo ndụ mmadụ na-agụnye ọtụtụ iri afọ nke mmepe, usoro nchekwa ahụ, akwara ọbara, gburugburu mkpụrụ ndụ ntọala, omume, na ọrịa. Otu ihe nwere ike ịgbatị nke mbụ n'enweghị mgbanwe na nke abụọ, ọtụtụ na-emekwa otú ahụ.
Fibroblast progeria nwere mgbanwe LMNA a maara nke ọma nke na-emepụta progerin, yana mitochondria gbajiri n'iberibe ma na-emegharị obere, ATP dị ala, nucleus nwere ọdịdị na-adịghị mma, na ọnwụ heterochromatin. Methylene blue n'ọkwa nanomolar mere ka nha mitochondria dị mma ma weghachi ọnọdụ nucleus nke ukwuu, gụnyere ịtọhapụ progerin n'akpụkpọ ya. Nke ahụ bụ iweghachi ọnọdụ dị ịrịba ama n'ọkwa mkpụrụ ndụ. Ọ ka bụ nsonaazụ fibroblast, ndị dere akwụkwọ ahụ kọwakwara nnwale anụmanụ dị ka ọrụ a ga-eme n'ọdịnihu. A tụlere usoro ihe atụ ọrịa ahụ n'onwe ya ọzọ na methylene blue na progeria na usoro ihe atụ ịka nká tupu oge ya.
Nke a na-eduga na ndepụta ihe bara uru a ga-enyocha mgbe a na-agụ nnyocha.
- Jụọ ma a malitere inye ihe ahụ tupu nkewa akwụsị ma ọ bụ mgbe nkwụsị ahụ guzosirila ike. Ịmalite tupu ya na-akwado igbu oge. Ịmalite mgbe ya gasịrị, tinyere data ọnwụ mkpụrụ ndụ ahọpụtara, dị mkpa iji kwado iwepụ.
- Jụọ otú eserese mmụba okpukpu abụọ nke mkpụrụ ndụ ntụnyere si dị. Ọ bụrụ na enweghị ngụkọta mmụba okpukpu abụọ, mgbanwe ihe nrịbama enweghị ihe doro anya e ji jikọta ha.
- Rịọ maka opekata mpe ụdị ihe nrịbama abụọ, dịka ihe na-egosi mmụba mkpụrụ ndụ tinyere p16 ma ọ bụ p21 na SA-beta-gal, kama ịdabere naanị n'otu ntụpọ agba.
- Jụọ otú e si kọọ nha telomere. Ọnụego kwa mmụba okpukpu abụọ ka oge na-aga nwere ihe ọ pụtara. Otu nha ogologo n'otu oge enweghị nke ahụ.
- Jụọ ihe ndị e mere ka ha ghara ịgbanwe. Njupụta mkpụrụ ndụ mgbe a na-ebufe ha, oxygen, ịgbanwe ihe eji azụ mkpụrụ ndụ, na iji methylene blue ọhụrụ ma ọ bụ nke nọgoro ogologo oge na-agbanwe nkwụsị nkewa fibroblast.
Mgbe a gụrụ ya n'ụzọ a, akwụkwọ nnyocha fibroblast na-enye methylene blue ọrụ kwekọrọ ma nwee oke: ihe a na-enye n'oke dị ala nke na-arụ ọrụ redox ma na-egbu oge ịka nká sitere na nkewa ugboro ugboro n'ime fibroblast mmadụ a zụlitere, ma na-eme ka nha mitochondria dị mma. Nkọwa usoro kacha sie ike metụtara nnyefe ozi ike nwa oge na mmepụta complex IV, akwụkwọ ndị a egosighịkwa iwepụ mkpụrụ ndụ ndị kaarala nká ma ọ bụ ịgbatị ogologo ndụ mmadụ.