Bluu methylene na mgbaàmà mbufụt: inflammasome, IL-6, na STAT3

Ka e were ya na ụlọ nyocha atọ kwuru na otu ngwakọta kemịkal na-acha anụnụ anụnụ na-ebelata mbufụt. Otu gosiri na IL-1beta sitere na sel macrophage belatara. Otu gosiri na enzayim iNOS belatara n'otu ụdị sel ahụ. Otu gosiri na IL-6 belatara n'ọbara nakwa na ọrụ STAT3 belatara n'ụbụrụ. Ọ dị mfe ịchọ ijikọta ihe atọ a ka ha bụrụ otu nkwupụta. Njikọta ahụ na-ekpuchi ihe nchọpụta ahụ pụtara.

Nsonaazụ ọ bụla metụtara echiche dị iche banyere nnyefe mgbaàmà, nke nwere ihe na-akpalite ya, ọkwa njikọta ya, na ihe a na-atụ iji mata nsonaazụ ya. Bluu methylene na-emetụta echiche nke ọ bụla n'ebe dị iche. Ma ihe ọ bụla n'ime ndị a ọ na-eme ka nsonaazụ ahụike ka mma bụ ajụjụ ọzọ, nke anyị tụlere na nchịkọta anyị banyere bluu methylene na mbufụt. Ibe a na-elekwasị anya n'ụzọ nnyefe mgbaàmà ndị ahụ.

Ụzọ 1: njikọta inflammasome na caspase-1

Inflammasome bụ ntọala protein a na-ewulite n'ime sel myeloid mgbe ọ dị mkpa. Ihe mejupụtara ya bụ ihe mmetụta, ihe njikọ a na-akpọ ASC, na enzayim na-arụ ọrụ a na-akpọ caspase-1. Mgbe ha jikọtara, caspase-1 na-ebipụ pro-IL-1beta na pro-IL-18 ka ha ghọọ ụdị a na-ewepụta n'èzí sel, ọ pụkwara ịkpalite pyroptosis, ụdị ọnwụ sel nke metụtara mbufụt. Ihe mmetụta ahụ na-ekpebi ụdị ya: NLRP3 na-anabata kristal na nsí ndị na-emepụta oghere, dịka nigericin na ATP; NLRC4 na-anabata flagellin nke nje bacteria; AIM2 na-anabata DNA nwere eriri abụọ n'ime cytosol; ụzọ na-abụghị nke ọkọlọtọ na-anabatakwa lipopolysaccharide dị n'ime sel.

Ịrụ ọrụ ya chọrọ mgbaàmà abụọ. Mgbaàmà nke mbụ bụ nkwadebe: ligand nke ihe nnabata yiri Toll na-akwalite ntụgharị ozi NLRP3 na pro-IL-1beta gaa na RNA nke dabere na NF-kB, ka akụkụ ndị ahụ wee dị. Mgbaàmà nke abụọ bụ njikọta: ihe mkpali nke abụọ na-eme ka ọtụtụ ASC jikọta bụrụ ụyọkọ, ka e bipụ caspase-1 bụrụ iberibe p20 ya, nakwa ka e wepụta IL-1beta p17 tozuru etozu. A maara na ụdị oxygen na-emeghachi omume sitere na mitochondria na nnabata kristal na-enye aka na mgbaàmà nke abụọ maka NLRP3.

Nnyocha macrophage nke 2017 banyere igbochi ọtụtụ ụdị inflammasome nwalere bluu methylene na mgbaàmà abụọ ahụ. N'ime sel macrophage ụmị ọkpụkpụ òké ndị lipopolysaccharide kwadebere, nigericin, ATP, na kristal monosodium urate kpalitere iwepụta IL-1beta na caspase-1, yana ịmepụta ụyọkọ ASC. Bluu methylene na 20 ruo 200 micromolar belatara ihe atọ ahụ n'ụzọ dabere n'ọnụọgụ e nyere, n'egbughị sel ndị ahụ. Flagellin na Salmonella maka NLRC4, DNA nwere eriri abụọ na Listeria maka AIM2, yana lipopolysaccharide e tinyere n'ime sel ma ọ bụ E. coli dị ndụ maka ụzọ na-abụghị nke ọkọlọtọ gosiri otu usoro nsonaazụ ahụ. Ngwakọta kemịkal ahụ naanị ya akpaliteghị iwepụta ihe ndị ahụ, efere nnwale njikwa egosighịkwa mmetụta megide nje bacteria. Ya mere, nsonaazụ ahụ metụtara mmeghachi omume ahụ na-anabata ihe mkpali ahụ.

N'ọkwa ndị dị n'ihu usoro ahụ, a tụrụ mmetụta atọ. Superoxide nke mitochondria nke rotenone kpalitere belatara mgbe e jiri bluu methylene, iwepụta IL-1beta nke rotenone kpalitekwara belatara. Nn受付 ụmụ bọọlụ na-enwu ọkụ belatara, nke kwekọrọ na mbelata phagocytosis tupu sel achọpụta kristal. Ihe na-egosi ọrụ mkpụrụ ndụ ihe nketa, nke mpaghara mmalite NLRP3 nwere ebe NF-kB abụọ na-achịkwa, gosiri mbelata ọrụ mgbe e jiri bluu methylene; ma mpaghara mmalite e belatara nke na-enweghị ebe ndị ahụ egosighị mmeghachi omume. N'ime tube na-enweghị sel, bluu methylene belatakwara ọrụ caspase-1 mmadụ e mepụtara site na usoro DNA recombinant ozugbo. Ịgbakwunye ngwakọta ahụ naanị n'oge nkwadebe ma ọ bụ naanị n'oge ịkpalite ọrụ ka belatara iwepụta IL-1beta, IL-18, na caspase-1, ya mere ọkwa abụọ ahụ so na mmetụta ahụ.

Nnwale òké kwekọrọ na nhọrọ mmetụta a. Ọnụọgụ lipopolysaccharide na-egbu egbu gburu òké njikwa n'ime awa ole na ole, ebe bluu methylene mere ka ọtụtụ lanarị; IL-1beta dị n'ime oghere afọ belatara, ma IL-6 dị n'otu mmiri ahụ agbanweghị. N'ụdị nnwale mbufụt akpụkpọ ime oghere afọ nke Listeria kpatara, IL-1beta dị n'ime oghere afọ belatara, ebe ngụkọta sel agbanweghị. Sel monocyte THP-1 mmadụ mere ka sel macrophage òké n'ụdị inflammasome anọ ahụ niile. Nsonaazụ inflammasome na-akọwa ntozu IL-1beta na IL-18, ọ bụghị cytokine ọ bụla. Nke a bụkwa ihe mere ọdịdị sel nchebe ahụ dị n'ụbụrụ na nnwale microglia na astrocyte ji aza ajụjụ dị iche na njikọta ntọala protein ahụ.

Ụzọ 2: ntụgharị ozi iNOS gaa na RNA site na njikọta NF-kB na STAT1

Enzayim na-emepụta nitric oxide mgbe a kpalitere ya, ma ọ bụ iNOS, dị ntakịrị nke ukwuu mgbe sel nọ n'ọnọdụ ezumike, a na-atụgharịkwa ozi ya gaa na RNA mgbe ọ dị mkpa. Lipopolysaccharide na-akwalite ya tumadi site na mbibi IkB-alpha, nke ntinye phosphate na NF-kB na mbata ya n'ime oghere isi sel na-esochi. Interferon-gamma na-akwalite ya tumadi site na ntinye phosphate na STAT1 nke Janus kinase na-eme, nke mbata STAT1 n'ime oghere isi sel na-esochi. Nke ọ bụla n'ime protein njikwa ndị a na-ejikọta n'ebe nke ya dị na mpaghara mmalite iNOS. Ọrụ enzayim na ịkpalite mkpụrụ ndụ ihe nketa bụ ebe njikwa dị iche, ọgwụ pụkwara ịrụ ọrụ n'otu n'ime ha ma ọ bụ na ha abụọ.

Nnyocha nke 2015 banyere ịkpalite iNOS na sel macrophage na òké nwere endotoxin n'ọbara gosiri na mmetụta ahụ dị n'ọkwa ozi mkpụrụ ndụ ihe nketa. Na sel RAW 264.7 na sel macrophage e si n'òké nweta ozugbo, bluu methylene 1 micromolar e nyere nkeji 30 tupu lipopolysaccharide, interferon-gamma, ma ọ bụ ha abụọ belatara protein iNOS na mRNA ya n'ime awa 8 ruo 24, yana nitrite dị ntakịrị n'ime mmiri a na-azụ sel, n'enweghị mbelata ike sel ịnọ ndụ. N'ime òké e nyere lipopolysaccharide 25 mg per kg, otu ọnụọgụ bluu methylene 5 mg per kg e nyere otu awa tupu ya belatara protein iNOS na mRNA ya n'akpa ume, imeju, na obi.

Ihe pụrụ iche bụ ihe ndị na-agbanweghị. Mbibi IkB-alpha, ntinye phosphate na NF-kB, ntinye phosphate na STAT1, na nchịkọta nke ọ bụla n'ime protein njikwa abụọ ahụ n'ime oghere isi sel gara n'ihu dịka ha kwesịrị. Nkwụsị ahụ mere otu ọkwa ka e mesịrị: ihe e wepụtara n'oghere isi sel gosiri njikọta NF-kB na akụkụ DNA nke ya dị ntakịrị mgbe e nyere lipopolysaccharide, yana njikọta STAT1 dị ntakịrị mgbe e nyere interferon-gamma. Usoro iji ihe mgbochi ahụ wepụta chromatin gosikwara na nke ọ bụla n'ime protein njikwa abụọ ahụ nọ n'ebe dị ntakịrị na mpaghara mmalite iNOS n'ime sel. Tumor necrosis factor alpha, nke mpaghara mmalite ya na-ejikwa NF-kB, belatakwara. A kpalitere protein njikwa ndị ahụ, ha rutekwara ebe ha kwesịrị, ma ha ejikọtaghị nke ọma na DNA ha na-elekwasị anya.

Rịba ama ọdịiche dị n'etiti nke a na ụzọ 1. Nke a metụtara njikọta protein njikwa na DNA, na-eji STAT1 kama STAT3, ma na-atụ mRNA, protein, na nitrite kama ụyọkọ ASC na iberibe caspase-1. Maapụ anyị nke ebe bluu methylene na-emetụta n'ụdị nnwale sel dị iche na-edobe ọkwa ntụgharị ozi gaa na RNA a iche na nha ọrụ enzayim kpọmkwem na nke mitochondria.

Ụzọ 3: IL-6 dị na serum ọbara na ịkpalite STAT3 n'anụ ahụ

IL-6 na-eziga mgbaàmà site n'ezinụlọ ihe nnabata gp130 gaa n'usoro Janus kinase ruo STAT3. STAT3 a tinyere phosphate na ya na-ejikọta ụzọ abụọ, na-abanye n'oghere isi sel, ma na-akwalite usoro mbufụt. IL-6 n'onwe ya bụkwa ihe NF-kB na-elekwasị anya, ya mere ha abụọ na-emepụta usoro nlọghachi mgbaàmà nke a na-akpọkarị njikọ IL-6 ruo STAT3. Ihe a na-atụkarị bụ IL-6 dị na serum ọbara n'akụkụ mbụ nke usoro ahụ, oke STAT3 a tinyere phosphate na ya ma e jiri ya tụnyere ngụkọta STAT3, na enzayim na-arụ ọrụ dịka iNOS na COX2 n'akụkụ ikpeazụ nke usoro ahụ.

Nnyocha òké nke 2023 banyere IL-6 na STAT3 mgbe e nyere lipopolysaccharide tụrụ njikọ ahụ n'akụkụ ahụ dị iche iche. Òké nwoke C57BL/6 natara lipopolysaccharide 1 mg per kg kwa ụbọchị ruo ụbọchị atọ, yana bluu methylene 5 ma ọ bụ 10 mg per kg nkeji 30 mgbe ọnụọgụ ọ bụla gasịrị. N'ụbọchị nke atọ, IL-6 dị na serum ọbara dị ala n'ìgwè bluu methylene abụọ ahụ karịa mgbe e nyere naanị lipopolysaccharide, ebe ọtụtụ cytokine ndị ọzọ a tụrụ agbanweghị n'ihi ihe e nyere. Oke STAT3 a tinyere phosphate na ya ma e jiri ya tụnyere ngụkọta STAT3 dị ala na cortex, hippocampus, na akpụkpọ ntị, yana ntụpọ Iba-1 nke na-egosi microglia dị ntakịrị, iNOS na COX2 dị ala, na mbelata arọ ahụ nke e mere ka ọ dị ntakịrị n'otu akụkụ.

Ihe ịdọ aka ná ntị abụọ dị mkpa ebe a. IL-6 dị ala na serum ọbara yana ntinye phosphate na STAT3 dị ala n'anụ ahụ kwekọrọ na ịgbanwe ọrụ njikọ ahụ, ma ọ naghị akọwapụta ebe bụ isi mmetụta ahụ sitere. Nke a bụ n'ihi na cytokine dị ntakịrị n'akụkụ mbụ nke usoro ahụ, nnyefe mgbaàmà ihe nnabata dị ntakịrị, ma ọ bụ mgbanwe ọrụ phosphatase nwere ike imepụta otu oke ahụ. Ọzọkwa, arọ ahụ n'ime ụbọchị atọ nke mkpali mberede bụ ihe a tụrụ banyere anụmanụ ahụ dum, ọ bụghị akara e ji atụ ihe mgbaàmà ọrịa ma ọ bụ ndalata ọrịa. Ọ na-agbakwunye ihe a ga-eji ghọta nsonaazụ karịa ihe nnwale blot gosiri, n'agbanweghị nsonaazụ mgbaàmà ka ọ bụrụ nkwupụta ọgwụgwọ. Usoro kemịkal dị iche nke mitochondria si ejikwa redox na-eme n'akụkụ usoro cytokine a, e kwesịghịkwa ijikọta ha ka ha bụrụ otu.

Ntụnyere ụzọ ndị ahụ: ebe mmetụta dị na ihe a tụrụ

Tebụl ahụ na-egbochi iji nsonaazụ otu ụzọ kwado ụzọ ọzọ n'ụzọ atọ na-ezighi ezi. Nsonaazụ ụyọkọ ASC anaghị egosi na nsonaazụ STAT3 bụ eziokwu. Nsonaazụ njikọta STAT1 na mpaghara mmalite iNOS anaghị egosi na nsonaazụ STAT3 bụ eziokwu, n'agbanyeghị na protein abụọ ahụ so n'ezinụlọ STAT. Nsonaazụ IL-6 dị na serum ọbara anaghị egosi mbelata njikọta inflammasome: n'nnwale oghere afọ ahụ, IL-1beta belatara ebe IL-6 agbanweghị. Ahịrị ọ bụla chọrọ ihe mkpali nke ya na ihe a tụrụ nke ya. Nke a bụ ihe mere ịgụ nnyocha bluu methylene nke sel, anụmanụ, na ndị mmadụ ji achọ ka e jikọta nkwupụta ọ bụla na ọkwa a tụrụ ya.

Ọ dịghị nke ọ bụla n'ime ihe ndị a na-egosi ọnụọgụ a ga-enye, nchekwa, ma ọ bụ uru n'ime mmadụ. Ụdị nnwale lipopolysaccharide bụ ihe mkpali a na-achịkwa iji nwalee otu usoro si arụ ọrụ, ọ bụghị ụdị ọrịa na-adịte aka e megharịrị ka ha bụrụ otu. Ịnye ngwakọta ahụ n'otu oge na ihe mkpali na-anwale igbochi mgbanwe e kpalitere, kama ịlaghachi azụ n'ọrịa dịlarị. Debe nkọwa usoro a iche na nsonaazụ ndị ọrịa, ma jiri nnyocha ndị ọrịa nke kwadoro nkwupụta ahụ kpee nkwupụta ahụike ọ bụla.