Մեթիլենային կապույտի վերականգնման թեստը գանձակի հեղուկի համար

Մի նորավարտ մասնագետ զանգահարում է ֆերմայից՝ ձեռքին կապույտ պարունակությամբ փորձանոթ։ Նա տասը րոպե առաջ գանձակի հեղուկին մեթիլենային կապույտ է ավելացրել, բայց կապույտ գույնը դեռ պահպանվում է։ Նա հարցնում է՝ արդյոք պետք է կովին ավելի շատ ներկանյութ տալ։

Այդ հարցը բացահայտում է սխալ պատկերացում։ Գանձակի հեղուկում մեթիլենային կապույտի վերականգնման թեստի ժամանակ ներկանյութը լցվում է փորձանոթի մեջ, ոչ երբեք կենդանու օրգանիզմ։ Ամբողջ հետազոտությունը կատարվում է փորձանոթում։ Կապույտ գույնի անհետացման արագությունը չափելով՝ տեղեկություն եք ստանում տվյալ նմուշի մանրէների մասին, ոչ թե կենդանուն անհրաժեշտ բուժման։

Շփոթությունը հասկանալի է, քանի որ մեթիլենային կապույտը հանդիպում է անասնաբուժության երեք տարբեր համատեքստերում։ Այս հոդվածը տարանջատում է դրանք և ցույց տալիս, թե ինչպես մեկնաբանել վերականգնման ժամանակը՝ pH-ի, նախակենդանիների, նմուշառման որակի և կլինիկական նշանների հետ միասին։

Ինչ է իրականում չափում թեստը

Մեթիլենային կապույտը օքսիդացված վիճակում կապույտ է, իսկ վերականգնված վիճակում՝ գրեթե անգույն։ Առողջ կենդանուց վերցված գանձակի թարմ հեղուկն ունի ուժեղ վերականգնող հատկություն, քանի որ անաերոբ բակտերիաներն ակտիվորեն խմորում են կերը։ Երբ այդպիսի հեղուկին փոքր քանակությամբ ներկանյութ եք խառնում, բակտերիաների նյութափոխանակության արդյունքում գույնն անհետանում է մի քանի րոպեում։

Այսպիսով, աշխատանքի սկզբունքը պարզ է․ ակտիվ անաերոբ միկրոֆլորան արագ է գունազրկում կապույտը, իսկ ոչ ակտիվ կամ վնասված միկրոֆլորան՝ դանդաղ։ Կարճ ժամանակը նշանակում է, որ տվյալ նմուշն ունի ավելի մեծ վերականգնող ունակություն։ Երկարացած ժամանակը մատնանշում է մանրէային ակտիվության ընկճում՝ պայմանով, որ նմուշը պատշաճ է վերցվել և մշակվել։

Թեստն ուղղակիորեն չի չափում գանձակի օքսիդավերականգնման պոտենցիալը։ Խոշոր եղջերավոր անասունների հետազոտման մեթոդներին նվիրված մի ուսումնասիրությունում վերականգնման թեստը համեմատվել է միլիվոլտերով ուղղակի չափումների հետ։ Վերականգնման ժամանակի և չափված օքսիդավերականգնման պոտենցիալի միջև գծային հարաբերակցություն չի հայտնաբերվել, և եզրակացվել է, որ դրանք չպետք է դիտարկել որպես նույն փոփոխականի փոխարինելի ցուցանիշներ։ Ամբողջական համեմատությունն ամփոփված է PubMed-ում։ Վերականգնման թեստը դիտարկեք որպես մանրէային պոպուլյացիայի գործառութային հետազոտություն, ոչ թե էժան էլեկտրոդ։

Որոճողների պարզ մարսողության խանգարման Merck/MSD նկարագրությունում վերականգնման երկարացած ժամանակը ներկայացվում է նույն պատկերի շրջանակում, ինչ գանձակի ոչ նորմալ pH-ը և նախակենդանիների նվազած քանակը։ Առանձին վերցրած ոչ մի արժեք ախտորոշում չի տալիս։ Դա տալիս է ցուցանիշների համակցությունը։

Կենդանու մոտ կատարվող ստանդարտ ընթացակարգ

Ուսումնական հաստատությունների արձանագրությունները փոքր-ինչ տարբերվում են, ուստի գրանցեք ձեր օգտագործած ճշգրիտ ծավալներն ու ջերմաստիճանը և համեմատեք միայն նույն արձանագրությամբ ստացված արդյունքները։ Լայնորեն ուսուցանվող տարբերակներից մեկը հետևյալն է․

1. Վերցրեք առնվազն 10-ից 20 mL գանձակի թարմ հեղուկ՝ նվազագույնի հասցնելով թքի խառնվելը, օդի հետ շփումը և սառչելը։ Անմիջապես կատարեք թեստը։
2. Պատրաստեք 0.03 տոկոսանոց մեթիլենային կապույտ, որը համապատասխանում է 0.3 mg-ի՝ յուրաքանչյուր mL-ում։
3. Ավելացրեք հեղուկի ծավալի 5 տոկոսին հավասար քանակով ներկանյութ։ Դա նշանակում է 1.0 mL ներկանյութ՝ 20 mL հեղուկին, կամ 0.5 mL ներկանյութ՝ 10 mL հեղուկին։ Երկու դեպքում էլ հեղուկի և ներկանյութի հարաբերակցությունը նույնն է՝ 20-ը 1-ի։
4. Նույն նմուշից վերցված, առանց ներկանյութի հեղուկով երկրորդ փորձանոթը պահեք որպես գույնի համեմատության հսկիչ։
5. Զգուշորեն խառնեք, անմիջապես միացրեք ժամանակաչափը և փորձանոթը պահեք մարմնի ջերմաստիճանին մոտ՝ մոտավորապես 37-ից 39 աստիճան Ցելսիուսի պայմաններում՝ ըստ տեղական արձանագրության։
6. Գրանցեք այն ժամանակը, երբ փորձարկվող փորձանոթի գույնը համընկնում է հսկիչի գույնին։ Օդի հետ շփման մակերեսին կարող է պահպանվել կապույտ բարակ օղակ, քանի որ թթվածինն այնտեղ կրկին օքսիդացնում է ներկանյութը։ Մի սպասեք այդ օղակի անհետացմանը։

Մեթիլենային կապույտի օքսիդավերականգնման քիմիան բացատրում է, թե ինչու է այստեղ թթվածինը կարևոր։ Ուժեղ թափահարումը, լայն բացվածքով փորձանոթը կամ երկար սպասելը թույլ են տալիս թթվածնի ներթափանցումը, և ներկանյութը կապույտ է մնում ավելի երկար, քան կմնար հենց գանձակի պայմաններում։ Նույն պատճառով կարևոր են նաև գանձակի հեղուկի՝ առանց աղտոտման հավաքման տեխնիկայի մանրամասները։ Թուքը նոսրացնում է նմուշը և բարձրացնում pH-ը, ուստի ստամոքսային զոնդ օգտագործելիս շատ մասնագետներ առաջին բաժինը հեռացնում են, եթե հավաքված ծավալը դա թույլ է տալիս։

Ինչ են չափում տարբեր դիտարկումները

Վերականգնման ժամանակը պատասխանում է միայն մեկ հարցի։ Ստորև ներկայացված գանձակի գնահատման աղյուսակը ցույց է տալիս, թե կենդանու մոտ կատարվող յուրաքանչյուր դիտարկում ինչ տեղեկություն է տալիս։ Օգտագործեք ամբողջ տողը, ոչ թե մեկ բջիջը։

Աղյուսակն արտացոլում է հիմնական միտքը։ Վերականգնման երկարացած ժամանակը՝ նախակենդանիների թույլ շարժունակության, ոչ նորմալ pH-ի և թույլ կծկումների հետ միասին, մատնանշում է մանրէային ակտիվության իրական ընկճում։ Առույգ, որոճացող կենդանու մոտ, երբ նախակենդանիներն ակտիվորեն շարժվում են, միայն վերականգնման երկարացած ժամանակը մատնանշում է նմուշի, ոչ թե գանձակի խնդիր։ Նախքան որևէ քայլ ձեռնարկելը կրկնեք նմուշառումը։

Ժամանակի մեկնաբանումը՝ pH-ի և անամնեզի հետ միասին

Կերաբաժինը սահմանում է ելակետը։ Խտացրած կերով հարուստ կերաբաժիններն արագ են խմորվում և կարող են գունազրկել ներկանյութը մոտ մեկ րոպեում, մինչդեռ խոտով սնվելու դեպքում դա կարող է մի քանի րոպե տևել՝ նույնիսկ առողջ կենդանիների մոտ։ Ուստի կարճ ժամանակն ինքնին չի ապացուցում ավելի լավ առողջական վիճակ։ Այն ցույց է տալիս, որ ավելի շատ խմորվող սուբստրատ է հանդիպել ակտիվ մանրէների։

Հացահատիկային կերի ծանր գերբեռնվածությունը խախտում է այդ պարզ օրինաչափությունը։ Սկզբում ածխաջրերի խմորումը կարող է ինտենսիվ լինել, ապա թթվային վնասումը ճնշում է նորմալ միկրոֆլորան և նախակենդանիներին, ու վերականգնման ժամանակը երկարում է։ Այդ պատճառով ուսուցման կանոններից մեկի համաձայն՝ թեստը վավեր չէ, երբ գանձակի pH-ը մոտ 5.5-ից ցածր է։ Այդ փուլում հետազոտվող միկրոֆլորան արդեն փոխված է։

Ցուցանիշների համակցությունների գործնական ուղեցույց․

• Նորմալ pH-ը՝ մոտ 6 րոպեի սահմաններում վերականգնման հետ միասին, վկայում է գործառութային առումով ակտիվ միկրոֆլորայի մասին։
• Նորմալ pH-ը՝ վերականգնման զգալիորեն երկարացած ժամանակի հետ միասին, ենթադրում է անգործունություն՝ ախորժակի բացակայության, հակամանրէային ազդեցության կամ նմուշի որակի խաթարման պատճառով։
• Բարձր pH-ը՝ վերականգնման երկարացած ժամանակի հետ միասին, հաճախ դիտվում է երկարատև ախորժակի բացակայությունից հետո, երբ սուբստրատը քիչ է, սակայն հաշվի առեք նաև զոնդով նմուշառման ժամանակ թքի խառնվելու հնարավորությունը։
• Ցածր pH-ը՝ նախակենդանիների նվազած ակտիվության հետ միասին, մտահոգություն է առաջացնում ածխաջրերով պայմանավորված դիսբիոզի վերաբերյալ։ Այստեղ օգտակար են գանձակի pH-ի մեկնաբանման ցուցումները։ 5.5-ից ցածր արժեքները՝ կենդանու ընդհանուր վիճակի ընկճման հետ միասին, մատնանշում են ոչ թե պարզ մարսողության խանգարում, այլ հացահատիկային կերի գերբեռնվածություն և ծանր ացիդոզ։

Միշտ գրանցեք վերջերս բերանով տրված տետրացիկլինները, կերի իոնոֆորները, համակարգային հակամանրէային միջոցների երկարատև կիրառումը, կերաբաժնի կտրուկ փոփոխությունները, ախորժակի բացակայության տևողությունը և ջրի ընդունումը։ MSD ձեռնարկը հատուկ զգուշացնում է, որ բերանով տրված տետրացիկլինները կարող են էապես ընկճել գանձակի միկրոֆլորան։ Իոնոֆորները նպատակային կերպով փոխում են բակտերիաների պոպուլյացիաները։ Առանց այդ անամնեզի երկարացած ժամանակը հնարավոր չէ մեկնաբանել։

Նմուշառման որակին պետք է նույնքան կարևորություն տալ։ Վերահսկվող հետազոտությունը ցույց է տվել, որ նույն կենդանիներից ստամոքսային զոնդով վերցված նմուշների pH-ն ավելի բարձր է, իսկ ցնդող ճարպաթթուների պարունակությունը՝ ավելի ցածր, քան կանյուլայով վերցված նմուշներինը՝ հիմնականում թքի պատճառով։ Հավաքումից 60 րոպե անց վերականգնման ժամանակը զգալիորեն երկարացել է փորձարկված բոլոր ծավալների դեպքում, ընդ որում՝ առավել մեծ ազդեցությունը եղել է փոքր նմուշների վրա։ Հավաքեք առնվազն 10 mL, փորձարկեք 30 րոպեի ընթացքում, վերականգնման թեստը կատարեք հետազոտության սկզբում, նմուշը տաք պահեք և նվազագույնի հասցրեք օդի հետ շփումը։

Երեք կիրառություն, որոնք չի կարելի շփոթել

Նույն ներկանյութը՝ երեք տարբեր համակարգերում։

Առաջինը այստեղ նկարագրված գանձակի հեղուկի հետազոտությունն է։ Նմուշը հավաքված գանձակի հեղուկն է։ Ներկանյութն ավելացվում է օրգանիզմից դուրս՝ 0.03 տոկոս կոնցենտրացիայով։ Վերջնական ցուցանիշը գունազրկման ժամանակն է։ Նպատակը մանրէների վերականգնող ակտիվության գնահատումն է։

Երկրորդը կենդանի որոճողին մեթիլենային կապույտ տալն է։ Հաստատված օրինակը ներերակային բուժումն է նիտրատային կամ նիտրիտային թունավորման և մեթհեմոգլոբինեմիայի դեպքում, երբ դեղամիջոցը վերականգնում է հեմոգլոբինի գործառույթը։ Գործում են դեղաչափի, պատրաստուկի ձևի, մնացորդային քանակների և սպասման ժամկետների կանոնները։ Այդ որոշումը ոչ մի կապ չունի փորձանոթում ժամանակ չափելու հետ։ Եթե որոշակի ընթացակարգում ներկանյութն օգտագործվում է կենդանի օրգանիզմում որպես հետագծիչ, սկզբունքն այն է, թե ուր է ներկանյութը տեղաշարժվում, ոչ թե որքան արագ են գանձակի մանրէները այն վերականգնում։

Երրորդը կաթի վերականգնման թեստն է։ Նմուշը կաթն է։ Ներկանյութն ավելացվում է կաթի նմուշին։ Կապույտ գույնի արագ անհետացումն ընդհանուր առմամբ ցույց է տալիս ավելի մեծ մանրէային ակտիվություն և պահպանման ավելի ցածր որակ, մինչդեռ դանդաղ վերականգնումը՝ ավելի լավ որակ։ Այն վերաբերում է սննդային մանրէաբանությանը և կաթի որակի ստուգմանը, ոչ թե գանձակի բժշկությանը, և բակտերիաների քանակի հաշվարկ չէ։

Անվանումների հստակ օգտագործումը կանխում է սխալները․ գանձակի հեղուկի վերականգնման ժամանակ, մեթիլենային կապույտի համակարգային բուժում կամ կիրառում որպես հետագծիչ, և կաթի վերականգնման թեստ։ Անվտանգության կանոնը տեղավորվում է մեկ նախադասության մեջ։ Գանձակի հետազոտության համար նախատեսված ներկանյութը մնում է լաբորատոր փորձանոթում, իսկ այդ փորձանոթը հետո հեռացվում է։ Թեստը կատարելու նպատակով այն երբեք չի տրվում կենդանուն։

Համառոտ կանոն՝ ֆերմայից զանգի համար

Ստանդարտացրեք ներկանյութը՝ օգտագործելով 0.03 տոկոս կոնցենտրացիա և 1 մաս ներկանյութ՝ 20 մաս հեղուկին, թարմ հեղուկը փորձարկեք մարմնի ջերմաստիճանին մոտ պայմաններում՝ համեմատելով առանց ներկանյութի հսկիչ նմուշի հետ, և րոպեները մեկնաբանեք pH-ի, նախակենդանիների շարժունակության, նմուշառման որակի, կերաբաժնի, դեղերի, կծկումների, ախորժակի, կղանքի և ջրային վիճակի հետ միասին։ Առանձին թիվը երբեք չի ախտորոշում մարսողության խանգարում։ Դա անում է իրար համապատասխանող ցուցանիշների համակցությունը։