Մեթիլենային կապույտը վերքերի հետազոտություններում․ վիրակապեր, լույս և ապաքինման արդյունքներ

Կապույտ ներկված վիրակապը և կապույտ հեղուկով կաթոցիկ շիշը կարող են նույն միջամտությունը թվալ։ Վերքերի հետազոտություններում դրանք նույնը չեն։ Մեկը ֆիքսված քանակի ներկանյութ պարունակող, արտադրական եղանակով պատրաստված վիրակապ է, որը փորձարկվում է որպես պատրաստի սարք։ Մյուսը ձեռքով կիրառվող լուծույթ է, որի կոնցենտրացիան, ծավալը և շփման տևողությունը յուրաքանչյուր կիրառման ժամանակ տարբեր են։ Այս երկուսի ուսումնասիրությունները պատասխանում են տարբեր հարցերի, և համապատասխանաբար տարբեր են նաև դրանց արդյունքային ցուցանիշները։

Այս ակնարկում դրանք դիտարկվում են առանձին։ Այն ներկայացնում է, թե ինչ են կիրառել հետազոտողները, ինչի վրա են կիրառել և ինչ են չափել՝ վերքի մակերեսը, փակման արագությունը, բակտերիաների քանակը կամ լաբորատոր փոխարինող ցուցանիշ, օրինակ՝ լաբորատոր անոթում քերծվածքի փակումը։

Հետազոտությունների երեք ուղղությունները՝ պարզ ձևակերպմամբ

Մեթիլենային կապույտով վերքերի հետազոտություններն ունեն երեք ուղղություն։ Յուրաքանչյուրն իր պատկերացումն ունի ներկանյութի դերի մասին։

Առաջինը ներկանյութ պարունակող փրփրային վիրակապերն են։ Այնպիսի արտադրանքներում, ինչպիսին է մեթիլենային կապույտով և գենտիան մանուշակագույնով ներծծված պոլիվինիլային սպիրտի փրփուրը, որը վաճառվում է որպես Hydrofera Blue հակաբակտերիալ փրփուր, ներկանյութերը կապված են վիրակապի մատրիցի ներսում։ Նշվող մեխանիզմը վիրակապի հետ կապված հակաբակտերիալ ակտիվությունն է, որի նպատակն է օգնել կառավարել վերքի միջավայրում բակտերիալ ծանրաբեռնվածությունը, մինչ փրփուրը կլանում է արտազատուկը։ Նման արտադրանքով բուժման որոշումները կայացնում է կոնկրետ վերքի համար վիրակապ ընտրող կլինիկական մասնագետը․ կիրառման տևողությունն ու փոխման հաճախականությունը սահմանում է վիրակապի օգտագործման հրահանգը, այլ ոչ թե կապույտ ներկանյութի որևէ ընդհանուր բաղադրատոմս։

Երկրորդը մեթիլենային կապույտով ֆոտոդինամիկ թերապիան է։ Այստեղ մեթիլենային կապույտի լուծույթը կիրառվում է որպես լուսազգայունացուցիչ, այնուհետև լուսավորվում՝ սովորաբար ներկանյութի կլանման գագաթնակետին մոտ կարմիր լույսով։ Լույսն ու թթվածինը մասնակցում են մանրէները վնասող ռեակտիվ մասնիկների առաջացմանը։ Սա այլ քիմիական գործընթաց է, քան մաշկի խնամքի մարքեթինգում կիրառվող հակաօքսիդանտային հիմնավորումը․ այդ տարբերությունը նշված է նաև մաշկի խնամքում մեթիլենային կապույտի մասին մեր ուղեցույցում։ Միջամտությունը ներկանյութի, լույսի դոզայի և թթվածնի համակցությունն է, և այս երեքից որևէ մեկի փոփոխությունը փոխում է միջամտությունը։

Երրորդը մեթիլենային կապույտի կիրառումն է առանց լույսի՝ բջիջներում և կենդանիների մոտ։ Այս փորձերը ուսումնասիրում են, թե արդյոք հենց ներկանյութը փոխում է ֆիբրոբլաստների վարքը, մատրիցային սպիտակուցները կամ փորձարարական վերքերի փակումը։ Դրանք մեխանիզմի ուսումնասիրություններ են, ոչ թե վիրակապերի փորձարկումներ։

Ուսումնասիրությունների և մոդելների քարտեզ․ ինչ է փորձարկվել, ինչի վրա և ինչ է փոխվել

Այս աղյուսակը ծառայում է որպես հոդվածի քարտեզ։ Յուրաքանչյուր տող կարդացեք ձախից աջ՝ նյութը, մոդելը և այն արդյունքային ցուցանիշը, որը տվյալ տողը կարող է հիմնավորել։ Ոչ մի տող չի հիմնվում մեկ այլ տողի արդյունքային ցուցանիշի վրա։

Վիրակապեր․ պատրաստի սարք, ոչ թե ներկանյութի բաղադրատոմս

Վերքերի խնամքի ուսումնասիրություններում կիրառվող փրփրային վիրակապերը արտադրական եղանակով պատրաստված սարքեր են։ Արտադրողի արտադրանքի էջում նկարագրված Hydrofera Blue տեսականին երկու ներկանյութերը համակցում է ստերիլ փրփուրի մեջ․ պոլիվինիլային սպիրտի CLASSIC տարբերակը յուրաքանչյուր գրամ փրփուրում պարունակում է յուրաքանչյուր ներկանյութից առավելագույնը 0.00025 g, իսկ պոլիուրեթանային READY տարբերակը՝ առավելագույնը 0.00035 g յուրաքանչյուր գրամում։ Քանի որ ներկանյութերը ներմուծվում են արտադրության ընթացքում, յուրաքանչյուր վիրակապ պարունակում է հայտնի քանակ, իսկ կլինիկական զեկույցներում արտադրանքը նկարագրվում է անվամբ, կիրառման տևողությամբ և փոխման ժամանակացույցով։

Սրանք օգտագործման թույլտվություն ստացած բժշկական սարքեր են, ոչ թե հաստատված դեղեր։ Սկզբնական վիրակապն ունի FDA-ի՝ 2002 թվականի K013462 թույլտվությունը, պոլիուրեթանային Hydrofera Blue տարբերակը՝ 2014 թվականի K130670 թույլտվությունը, իսկ եզրագոտիով READY տարբերակը՝ 2019 թվականի K190268 թույլտվությունը։ 510(k) ընթացակարգով թույլտվությունը հաստատում է նախկին սարքի հետ էական համարժեքությունը․ այն արդյունավետության հաստատում չէ։ Սարքի փաստաթղթերում հակամանրէային պնդումները հիմնականում հիմնվում են վիրակապի ներսում և լաբորատոր փորձարկումներում դիտված ակտիվության վրա։ Դրանք չպետք է մեկնաբանվեն որպես պնդում, թե վիրակապը ստերիլացնում է վարակված հյուսվածքը՝ ապահովելով բակտերիաների քանակի որոշակի լոգարիթմական նվազում։

Հրապարակված կլինիկական փորձը հիմնականում բաղկացած է փոքր, չվերահսկվող դեպքերի շարքերից։ Woo-ի և Heil-ի՝ 29 քրոնիկ վերքերի հեռանկարային ուսումնասիրությունում, որտեղ Hydrofera Blue Classic-ը չորս շաբաթ շարունակ փոխվել է շաբաթական երեք անգամ, վերքի միջին մակերեսը նվազել է 21.4-ից մինչև 12.3 cm²՝ 42.5% նվազում, իսկ PUSH գնահատականները՝ 13.3-ից մինչև 10.7։ Coutts-ի, Ryan-ի և Sibbald-ի՝ ստորին վերջույթների 15 վերքերի դեպքերի շարքում չորս շաբաթ անց վերքի չափի նվազում է արձանագրվել գնահատման ենթակա 14 վերքերից 8-ում, իսկ որոշ հիվանդների մոտ նվազել է ցավը, հատկապես դիաբետիկ ոտնաթաթի խոցեր ունեցողների շրջանում։ Lullove-ի ներկայացրած՝ 53 վերքերի հետահայաց կոհորտային ուսումնասիրությունում փրփուրը համակցվել է ոչխարի կոլագենային մատրիցի հետ, ուստի տասներկու շաբաթում մակերեսի միջին 91.3% նվազումը չի կարող վերագրվել միայն փրփուրին։ Hurd-ի՝ լայնածավալ ծրագրի հետահայաց վերլուծությունը հաղորդել է ավելի արագ ապաքինման մասին այն դեպքերում, երբ վիրակապերը կիրառվել են խնամքի ստանդարտացված միջոցառումների փաթեթի շրջանակում․ սա կրկին փորձարկում է ամբողջ փաթեթը, ոչ թե ներկանյութը։

Բոլոր այս ուսումնասիրություններն ունեն մեկ ընդհանուր սահմանափակում․ բակտերիալ ծանրաբեռնվածությունը ներկայացված է վարակի կլինիկական գնահատականներով կամ քսուքների կիսաքանակական հետազոտություններով, այլ ոչ թե հյուսվածքային նմուշների հաջորդական քանակական ցանքերով։ Ճշգրիտ ամփոփումն այն է, որ երկու ներկանյութով փրփուրի ուսումնասիրությունները հաղորդում են մակերեսի նվազման, վերքի հատակի գնահատականների բարելավման և երբեմն ցավի նվազման մասին՝ առանց հաստատելու մեթիլենային կապույտին հատուկ դոզա–արձագանք կապ կամ հյուսվածքում բակտերիաների ոչնչացման չափված արագություն։ Եվ վիրակապերի ուսումնասիրություններում ոչինչ չի հաստատում, որ կաթոցիկի լուծույթով թանզիֆը թրջելը համարժեք է դրանց։ Կոնցենտրացիան, բաշխումը, արտազատման արագությունը, ստերիլությունը և կիրառման տևողությունը բոլորն էլ տարբեր են։

Լույս և ներկանյութ․ վերքերի ֆոտոդինամիկ ուսումնասիրություններ

Վերքերի ֆոտոդինամիկ հետազոտությունները արձանագրությանը ավելացնում են լուսավորում։ Մարդկանց ուսումնասիրություններում մեթիլենային կապույտի կոնցենտրացիաները սովորաբար 0.01%-ից մինչև 1% են, իսկ կարմիր լույսի ալիքի երկարությունը՝ մոտ 635-ից մինչև 660 nm, էներգիայի մակերեսային խտությամբ՝ մի քանի ջոուլից մինչև հարյուրից ավելի ջոուլ մեկ քառակուսի սանտիմետրի համար։ Վերահսկիչ խմբերը տարբեր են․ որոշ ուսումնասիրություններ համեմատում են ստանդարտ խնամքի հետ, մյուսները ներկայացնում են նույն վերքերում բակտերիաների քանակը միջամտությունից առաջ և հետո։

Մարդկանց ուսումնասիրություններում առավել հետևողական դիտարկումները վերաբերում են վերքի վիճակին ու մակերեսին, այլ ոչ թե բակտերիաների քանակին։ Carrinho-ի և գործընկերների՝ 12 դիաբետիկ խոցերի վերահսկվող ուսումնասիրությունում 0.01% մեթիլենային կապույտը՝ 660 nm լույսի և 6 J/cm² էներգիայի մակերեսային խտության հետ համակցված, շաբաթական երեք անգամ՝ տասը սեանսի ընթացքում, ապահովել է մակերեսի զգալիորեն ավելի մեծ նվազում, քան վերահսկիչ բուժումը։ Shen-ի և գործընկերների՝ հինգ վարակված վերքերի դեպքերի շարքում հաղորդվել է ամբողջական ապաքինման մասին՝ միջինում չորս սեանսից հետո, 1% ներկանյութի և 635 nm լույսի կիրառմամբ, առանց բակտերիաների քանակական արդյունքային ցուցանիշների։ Մինչ օրս ամենամեծ պատահականացված փորձարկումը՝ Chagas-ի և գործընկերների՝ դիաբետիկ ոտնաթաթի խոցեր ունեցող 94 մասնակցով կրկնակի կույր փորձարկումը, հայտնաբերել է Bates-Jensen վերքի գնահատականների բարելավում՝ երրորդ սեանսից մինչև երեսունօրյա հետագա դիտարկումը, 1% ներկանյութի և 660 nm լազերի կիրառմամբ, առանց բուժման հետ կապված անցանկալի երևույթների, սակայն կրկին առանց բակտերիալ ծանրաբեռնվածության քանակական արդյունքային ցուցանիշի։

Երկու վերապահում օգնում է այս գրականությունը ճշգրիտ մեկնաբանել։ Նախ՝ անդամահատման վերաբերյալ տպավորիչ արդյունքը, որը երբեմն մեջբերվում է Tardivo-ի և գործընկերների ուսումնասիրությունից, ստացվել է մեթիլենային կապույտը տոլուիդինային կապույտի հետ համակցելով, ուստի այն չի կարող վերագրվել միայն մեթիլենային կապույտին։ Երկրորդ՝ լուսավորման սեանսից հետո ապաքինումը չի կարելի ինքնաբերաբար վերագրել հակամանրէային ֆոտոքիմիային, քանի որ կարմիր լույսն ինքնին կարող է փոփոխել վերականգնումը։ Sperandio-ի և գործընկերների՝ առնետների վերքերի փորձարկման մեջ, որտեղ կային միայն ներկանյութի, միայն լույսի, համակցված և վերահսկիչ խմբեր, միայն լազերի կիրառումն ինքնուրույն ազդել է ապաքինման վրա։ Արդյունքը բակտերիաների ոչնչացմանը վերագրելու համար անհրաժեշտ են մանրէաբանական տվյալներ և համապատասխան վերահսկիչ խմբեր։ Կենդանիների ուսումնասիրություններն այս առումով ավելի հստակ են․ Pérez-ի և գործընկերների՝ մկների վարակված վերքերի մոդելում ֆոտոդինամիկ թերապիան տվել է ապաքինման լավագույն տեսանելի արդյունքը, մինչդեռ մուպիրոցինն ապահովել է բակտերիաների քանակի ամենամեծ նվազումը՝ հստակ տարանջատելով այս երկու արդյունքային ցուցանիշները։ Մեթիլենային կապույտի և կարմիր լույսի վերաբերյալ ապացույցների մեր ակնարկը վերքերի այս արձանագրությունները ներկայացնում է լույսի՝ վերքերին չառնչվող կիրառությունների կողքին, որպեսզի ընդհանուր ֆոտոքիմիան սխալմամբ չընկալվի որպես ընդհանուր ցուցում։

Բջիջներ և մաշկի մոդելներ․ որտեղից է սկսվում ապաքինման ազդակը

Վերքերի ապաքինման մասին պնդման լաբորատոր հիմքը Xiong-ի և գործընկերների՝ 2017 թվականի ուսումնասիրությունն է, որն իրականացվել է մարդու դերմալ ֆիբրոբլաստների և վերակառուցված մաշկի վրա։ Երկու դոնորներից ստացված ֆիբրոբլաստները, որոնք նախապես մշակվել էին 100 nM մեթիլենային կապույտով, 24 ժամվա ընթացքում զգալիորեն ավելի արագ են վերալցրել քերծվածքի բացվածքը, քան չմշակված բջիջները։ Ամբողջ հաստությամբ վերակառուցված մաշկում ավելի երկար ազդեցությունը բարձրացրել է խոնավության չափված մակարդակն ու դերմայի հաստությունը, իսկ մատրիցի փոփոխությունների թվում եղել է էլաստինի և COL2A1-ի էքսպրեսիայի բարձրացում։

Սրանք վերքերի համար իսկապես կարևոր արդյունքային ցուցանիշներ են, և դրանք վերաբերում են իրենց մոդելներին։ Քերծվածքի փորձը չափում է բջիջների համատեղ միգրացիան լաբորատոր անոթում առաջացած բացվածքի միջով։ Այն չի ներառում իմունային պատասխան, բակտերիալ գաղութացում, արտազատուկ կամ վիրակապ։ Վերակառուցված մաշկն ավելացնում է հյուսվածքային կառուցվածք, սակայն դեռ չունի արյան շրջանառություն և ապաքինման ամբողջական հաջորդական գործընթացը։ Ոչ մի մոդել չի փորձարկում փրփրային վիրակապ կամ ֆոտոդինամիկ արձանագրություն, և ոչ մեկը չի սահմանում տնային կիրառման կոնցենտրացիա։

Մեթիլենային կապույտ պարունակող հատուկ ձևակերպումներ փորձարկվել են նաև կրծողների վերքերի վրա։ Farmoudeh-ի և գործընկերների ուսումնասիրած նիոսոմային 0.005% գելը արագացրել է առնետների հյուսվածքի հեռացմամբ առաջացրած վերքերի վաղ փակումը՝ ազատ ներկանյութի և կրող հիմքի համեմատ, ավելի բարենպաստ հյուսվածաբանական և օքսիդատիվ սթրեսի ցուցանիշներով։ Gao-ի և գործընկերների՝ դիաբետիկ մկների մոտ ուսումնասիրած 0.1 mg/mL նանոէմուլսիան արագացրել է փակումը՝ անգիոգենեզի մարկերների ավելացմամբ և օքսիդատիվ ու ապոպտոտիկ ազդակների նվազումով։ Երկու դեպքում էլ ձևակերպումը կարևոր է․ արդյունքներից ոչ մեկն ինքնաբերաբար չի տարածվում սովորական ջրային ներկանյութի լուծույթի վրա։

Եվ ազդեցության ուղղությունը համընդհանուր չէ։ Dinc-ի և գործընկերների՝ առնետների անաստոմոզի փորձարկման մեջ որովայնի խոռոչում տեղադրված 1% մեթիլենային կապույտը երրորդ օրը նվազեցրել է անաստոմոզի պատռման ճնշումն ու հիդրօքսիպրոլինի մակարդակը՝ ցույց տալով այդ դոզայի և կիրառման ուղու դեպքում ապաքինման վաղ փուլում ամրության խանգարում։ Կոնցենտրացիան, հյուսվածքը, ձևակերպումը և կիրառման ուղին որոշում են արդյունքը։

Ինչ հարցեր տալ վերքերի վերաբերյալ ցանկացած պնդման մասին

Մեթիլենային կապույտի վերաբերյալ յուրաքանչյուր պնդում, որը վերաբերում է վերքերին, պետք է դիմանա չորս հարցի։ Նախ՝ կոնկրետ ինչ է կիրառվել․ անվանում ունեցող արտադրական վիրակա՞պ, լուսազգայունացուցիչի և լույսի հստակ արձանագրությո՞ւն, թե՞ չճշտված լուծույթ։ Երկրորդ՝ ինչի՞ վրա․ բջիջների՞, կենդանու վերքի՞, թե՞ մարդկանց՝ նշված տեսակի վերքերի։ Երրորդ՝ ինչի՞ հետ է համեմատվել և ի՞նչ տևողությամբ։ Չորրորդ՝ ի՞նչ արդյունքային ցուցանիշ է չափվել․ մակերեսի փոփոխությո՞ւն, փակո՞ւմ, բակտերիաների քանա՞կ, թե՞ լաբորատոր փոխարինող ցուցանիշ։

Առաջին հարցը մթագնող պնդումներն ամենատարածված սխալն են։ Ներկանյութ պարունակող փրփուրով ստացված արդյունքը չի հիմնավորում վերքը կապույտ ներկելը, իսկ ֆոտոդինամիկ սեանսից հետո դիտված հակամանրէային ազդակը չի հիմնավորում առանց լույսի լուծույթ քսելը։ Մեթիլենային կապույտի՝ վերքերին վերաբերող պնդումները գնահատելու առաջիկա ուղեցույցում այս ստուգաթերթը կունենա մշտական տեղ՝ վերլուծված օրինակներով․ մինչ այդ վերևի աղյուսակը ծառայում է որպես քարտեզ։

Խորը, տարածվող, տհաճ հոտով, ջերմությամբ ուղեկցվող կամ չբարելավվող վերքերը պահանջում են կլինիկական գնահատում, ոչ թե ներկանյութ։ Այստեղ ներկայացված հետազոտություններին արժե հետևել հենց այն պատճառով, որ դրանք հստակ նշում են նյութերը, մոդելները և չափումները։ Այս երեքը կապեք յուրաքանչյուր պնդման հետ, և ոլորտը հստակ կընկալվի։