Արդյո՞ք մեթիլեն կապույտը քաղցկեղ է առաջացնում․ թունաբանական տվյալները

Մեթիլեն կապույտը երկարատև կենդանական փորձերում ցույց է տվել ուռուցքային ազդանշաններ, իսկ գենետիկական վնասի մի շարք լաբորատոր թեստերում տվել է դրական արդյունքներ։ Այդ տվյալներն արժանի են ուշադրության։ Սակայն դրանք չեն սահմանում այն հավանականությունը, որ որոշակի ազդեցությունից հետո մարդու մոտ քաղցկեղ կզարգանա։

2016 թվականին հրապարակված IARC-ի գնահատումը մեթիլեն կապույտը դասակարգել է Group 3-ում, ինչը նշանակում է, որ մարդկանց համար դրա քաղցկեղածին լինելը հնարավոր չի եղել դասակարգել։ Աշխատանքային խումբը մարդկանց մոտ քաղցկեղի վերաբերյալ տվյալներ չուներ և կենդանիների վերաբերյալ ապացույցները գնահատել էր որպես սահմանափակ։ Group 3-ը չի նշանակում, որ նյութի անվնաս լինելն ապացուցված է։ Նույն կերպ, կենդանիների մոտ հայտնաբերված արդյունքը չի նշանակում, որ մարդկանց յուրաքանչյուր ազդեցություն ապացուցված կերպով քաղցկեղ է առաջացնում։

Երեք հարց, որոնք առանձին պատասխաններ են պահանջում

Քաղցկեղածին լինելը վերաբերում է ուռուցքների զարգացմանը։ Կենդանիների երկարատև ուսումնասիրությունը կարող է բացահայտել ուռուցքների առաջացման օրինաչափություններ՝ սահմանված ազդեցությունից հետո։ Գենոտոքսիկությունը վերաբերում է գենետիկական նյութի վնասմանը կամ դրա հետ կապված բջջային երևույթներին։ Մուտացիաների թեստի դրական արդյունքը նախազգուշացնող ազդանշան է տալիս, սակայն այն ուղղակիորեն չի հաշվարկում մարդկանց մոտ քաղցկեղի դեպքերը։ Մարդու համար ռիսկը վերաբերում է իրական ազդեցության պայմաններում վնասի առաջացման հավանականությանը։

Այս հարցերը տարբեր չափումներ են պահանջում։ Բակտերիալ մուտանտների հաշվարկը, մկների արյան բջիջների ուսումնասիրությունը և դիահերձման ժամանակ ուռուցքների ախտորոշումը փոխարինելի վերջնակետեր չեն։ Նույնպես, բուժման փորձը, որը ցույց է տալիս, որ նյութը վնասում է քաղցկեղային բջիջները, չի հաստատում՝ արդյոք կրկնվող ազդեցությունը կարող է առողջ հյուսվածքներում ուռուցքների առաջացման պատճառ դառնալ։ Մեթիլեն կապույտը քաղցկեղի հետազոտություններում առանձին քննարկումը վերաբերում է բուժման մասին պնդումներին։

Ուսումնասիրությունների համեմատություն․ իրական քրոնիկական ազդեցությունները

Հիմնական փորձարկման մեջ օգտագործվել է մեթիլեն կապույտի տրիհիդրատ, որը 0.5% ջրային մեթիլցելյուլոզում ներմուծվել է բերանային գավաժով՝ չափված քանակը խողովակով ստամոքս հասցնելու եղանակով։ Քրոնիկական ուսումնասիրության յուրաքանչյուր դոզային խմբում յուրաքանչյուր տեսակից եղել է 50 արու և 50 էգ կենդանի։ Նյութը տրվել է շաբաթական հինգ օր՝ երկու տարվա ընթացքում՝ համաձայն Auerbach-ի և գործընկերների ուսումնասիրության զեկույցի։

Աղյուսակում պահպանված են NTP-ի՝ տեսակներին հատուկ եզրակացությունները։ Քանակները ներկայացնում են փորձարկված նյութի միլիգրամները կենդանու մարմնի քաշի մեկ կիլոգրամի հաշվով՝ դոզավորման օրերին, և մարդկանց համար առաջարկություններ չեն։ Զրոյական դոզայի կենդանիները ստացել են կրիչ նյութը։

Մոդել	Դոզային խմբեր, mg/kg	Ներմուծման ուղին և տևողությունը	NTP-ի եզրակացությունը և համապատասխան արդյունքը
Արու F344/N առնետներ	0, 5, 25, 50	Բերանային գավաժ; շաբաթական հինգ օր; երկու տարի	Որոշ ապացույցներ․ ավելացել են ենթաստամոքսային գեղձի կղզյակային բջիջների ադենոմաները և ադենոմա/կարցինոմա համակցված ցուցանիշը։
Էգ F344/N առնետներ	0, 5, 25, 50	Նույն սխեման	Այս պայմաններում քաղցկեղածին ակտիվության ապացույց չի հայտնաբերվել։
Արու B6C3F1 մկներ	0, 2.5, 12.5, 25	Բերանային գավաժ; շաբաթական հինգ օր; երկու տարի	Որոշ ապացույցներ․ ավելացել են բարակ աղիքի կարցինոման և ադենոմա/կարցինոմա համակցված ցուցանիշը։ Չարորակ լիմֆոման նույնպես կարող էր կապված լինել ազդեցության հետ։
Էգ B6C3F1 մկներ	0, 2.5, 12.5, 25	Նույն սխեման	Ոչ միանշանակ ապացույցներ․ չարորակ լիմֆոմայի սահմանային աճ։

«Որոշ ապացույցներ»-ը NTP-ի կատեգորիա է, որը վերաբերում է դրական փորձարարական արդյունքին, սակայն ունի ավելի թույլ ապացուցողական ուժ, քան «հստակ ապացույցներ»-ը։ «Ոչ միանշանակ»-ը նկարագրում է անորոշ արդյունք։ Այս կատեգորիաները արտահայտում են ապացույցների ուժը, ոչ թե ռիսկի տոկոսային մեծությունը կամ նյութերի դասակարգումն ըստ քաղցկեղածին ուժգնության։

Արու առնետների արդյունքը դոզայի աճին զուգահեռ կայուն աճող հաջորդականություն չէր։ Ենթաստամոքսային գեղձի կղզյակային ադենոմա կամ կարցինոմա արձանագրվել է 4/50 վերահսկիչ կենդանիների և աճող դոզաներով համապատասխանաբար 9/50, 14/50 և 8/50 կենդանիների մոտ։ Հրապարակված հոդվածը վիճակագրական նշանակալիություն է նշում միայն միջին դոզայի համար։ Այդ պատճառով պարզ ուղիղ գծային մեկնաբանությունը ճշգրիտ չէ, սակայն սա չի հաստատում, որ ամենաբարձր դոզան պաշտպանիչ ազդեցություն է ունեցել։ Ադենոման բարորակ ուռուցք է, իսկ կարցինոման՝ չարորակ։ Համակցված վերջնակետը չպետք է նկարագրվի այնպես, կարծես հաշվարկված յուրաքանչյուր ուռուցք քաղցկեղ էր։

Ինչու են տարբեր ամփոփագրերը հակասական թվում

PROVAYBLUE-ի գործող նշանակման տեղեկատվությունը ներկայացնում է արու առնետների ենթաստամոքսային գեղձի արդյունքները, սակայն մկների մոտ դեղամիջոցի հետ կապված նորագոյացական փոփոխություններ չի նկարագրում։ Հետազոտական հոդվածում նշվում է, որ մկների մոտ նորագոյացությունների աճը վիճակագրական նշանակալի չէր, թեև դրական միտումներ էին դիտարկվել։ Այդուհանդերձ, NTP-ն մկների համար սահմանել է վերևում ներկայացված կատեգորիաները։

IARC-ի կենդանիների ուսումնասիրությունների վերլուծությունը պարզաբանում է կարևոր վիճակագրական տարբերությունը․ արու մկների աղիքային արդյունքները ցույց են տվել դոզայից կախված նշանակալի միտումներ, սակայն առանձին դոզային խմբերը վերահսկիչ խմբերի հետ զույգային համեմատություններում նշանակալի չէին։ Դոզաների ամբողջ միջակայքում ընդհանուր օրինաչափության ստուգումը տարբերվում է յուրաքանչյուր խմբի առանձին ստուգումից։ Ընթերցողները պետք է պահպանեն սկզբնաղբյուրը և դրա ձևակերպումները՝ այս բոլոր արդյունքները չպարզեցնելով մինչև «մկների մոտ քաղցկեղ զարգացավ» կամ «մկների ուսումնասիրությունը բացասական էր» ձևակերպումների։ Դրանցից ոչ մեկը մարդկանց մոտ քաղցկեղի չափված հաճախականություն չի տրամադրում։

Ուսումնասիրությունների համեմատություն․ գենետիկական վնասի վերջնակետերը

NTP Technical Report 540-ի գենետիկական թունաբանության բաժինը նկարագրում է փորձերի այլ շարք։ S9-ը լյարդային ֆերմենտներ պարունակող լաբորատոր խառնուրդ է, որն օգտագործվում է նյութափոխանակային ակտիվացումը մոդելավորելու համար։ Դրա առկայությունը բջջային թեստը չի վերածում ամբողջ օրգանիզմի ազդեցության ուսումնասիրության։

Թեստային համակարգ	Իրական ազդեցության պայմանները	Չափված վերջնակետը և արդյունքը
Բակտերիալ մուտացիաների թեստեր, փորձարկված երկրորդ խմբաքանակ	Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; առնետի լյարդի S9-ով և առանց դրա	Փորձարկված շտամներում մուտացիաների քանակն ավելացել է։
Չինական համստերի ձվարանի կուլտիվացված բջիջներ	Քույր քրոմատիդների փոխանակման թեստը ներառել է 0.17–2.5 µg/mL առանց S9-ի, մինչև 5 µg/mL՝ S9-ով; քրոմոսոմային շեղումների թեստում օգտագործվել է 4.7–22 µg/mL	Փոխանակման և քրոմոսոմային շեղումների դրական արդյունքներ։
Արու մկներ, սուր փորձ	Մեկ ներպերիտոնեալ ներարկում՝ 25, 50 կամ 150 mg/kg; նմուշառում 48 ժամ անց	Ոսկրածուծում կամ արյան մեջ միկրոկորիզավոր էրիթրոցիտների ավելացում չի հայտնաբերվել։
Արու և էգ մկներ, կրկնվող փորձ	Բերանային գավաժ՝ 25, 50, 100 կամ 200 mg/kg; շաբաթական հինգ օր՝ երեք ամիս	Ծայրամասային արյան միկրոկորիզավոր էրիթրոցիտների ավելացում չի հայտնաբերվել։

Միկրոկորիզը փոքր լրացուցիչ կորիզային մարմին է, որը կարող է արտացոլել բջջային բաժանման ընթացքում քրոմոսոմի կոտրվածք կամ կորուստ։ Արյան բջիջների բացասական թեստը պատասխանում է հենց այդ հարցին՝ տվյալ նմուշառված բջիջների համար։ Այն չի կարող բացառել ԴՆԹ-ի վնասման յուրաքանչյուր տեսակ՝ յուրաքանչյուր օրգանում։ Հակառակ կողմից՝ կուլտիվացված բջիջների դրական թեստը չի ասում, թե մարդու հյուսվածքներում ինչ կոնցենտրացիա է իրականում հասել։

Նշանակման տեղեկատվությունը նույնպես արձանագրում է այս ընդհանուր պատկերը՝ դրական բակտերիալ և կուլտիվացված բջիջների թեստեր, բացասական մկների միկրոկորիզի թեստեր։ Մեթիլեն կապույտը պարզապես «գենոտոքսիկ» կամ «ոչ գենոտոքսիկ» անվանելը բաց է թողնում մեկնաբանության համար կարևոր տեղեկատվությունը։

Ինչ է սա նշանակում մարդու ազդեցության համար

Այս ուսումնասիրությունները մարդկանց համար քաղցկեղի տեսանկյունից անվտանգ օրական շեմ չեն սահմանում։ Առնետի դոզան մարմնի քաշի գործակցով բաժանելը չի վերացնի ներծծման, նյութափոխանակության, ներմուծման ուղու, ազդեցության հաճախականության կամ ամբողջ կյանքի ընթացքում ազդեցության տևողության տարբերությունները։ Դա կտա փոխարկված քանակ, ոչ թե անվտանգության ապացույց։

Երկու տարվա գավաժային փորձը և կարճատև, բժշկական հսկողությամբ ներերակային բուժումը տարբեր հարցերի են պատասխանում։ Այդ տարբերությունը թույլ չի տալիս ուղղակի թվային արտածում կատարել, սակայն չի վերացնում կենդանիների ուսումնասիրությունների արդյունքները։ Օգտակար գնահատումը սկսվում է ճշգրիտ միացությունից և ձևակերպումից, քանակից, ներմուծման ուղուց, հաճախականությունից, տևողությունից և օգտագործման պատճառից։ «Մի քանի կաթիլ»-ը չի նշում ո՛չ կոնցենտրացիան, ո՛չ էլ չափված ծավալը։

Եթե մեթիլեն կապույտը կիրառվել է բժշկական նպատակով, միայն ուռուցքային արդյունքներով հնարավոր չէ որոշել՝ տվյալ բուժման օգուտներն արդյոք գերազանցել են դրա ռիսկերը։ Եթե դիտարկվում է կրկնվող ընտրովի օգտագործում, չչափված երկարաժամկետ քաղցկեղային ռիսկը չպետք է ներկայացվի որպես զրոյական։ Ավելի անմիջական հարցերը, ներառյալ դեղային փոխազդեցությունները և հեմոլիզի նկատմամբ զգայունությունը, քննարկվում են կողմնակի ազդեցությունների և հակացուցումների բաժնում։

Լրացուցիչ ընթերցման համար օգտագործեք հետազոտությունների գրադարանը՝ մարդկանց մասնակցությամբ ուսումնասիրությունները կենդանիների և բջիջների փորձերից տարբերակելու համար։ Յուրաքանչյուր հոդվածի դեպքում հիմնական հարցն այն է, թե ինչպիսի ազդեցություն է ուսումնասիրվել և իրականում ինչ արդյունք է չափվել։