Kiyès ki devlope kolorasyon vyolèt san an? Ble metilèn, Malachowski, Romanowsky ak Giemsa

Eyozin wouj. Ble metilèn ble. Melanje yo, aplike melanj lan sou yon kouch mens san ki fin sèch, epi kèk pati nan kouch la vin vyolèt.

Se pa tout pati yo. Nan yon bon preparasyon, nwayo globil blan yo pran yon koulè wouj-vyolèt, epi andedan yon parazit malarya, kwomatin nan pran menm koulè a, pandan globil wouj ki antoure l yo rete woz epi sitoplasm nan rete gri-ble. Se koulè vyolèt la ki pèmèt nou distenge kalite selil yo.

Okenn nan de boutèy yo pa gen koulè vyolèt ladan l. Koulè a parèt sèlman lè yon pwodui espesifik ki soti nan dekonpozisyon ble metilèn rankontre eyozin sou lam nan, epi nan ane 1880 yo ak ane 1890 yo, pèsonn pa t konnen pwodui sa a te egziste, alewè pou yo ta konnen sa li te ye. Moun ki t ap chèche koulè a t ap travay poukont yo ak koloran ki te gen enpirte, san okenn mwayen fyab pou konnen sa ki te nan yon boutèy apre li te pase de mwa sou yon etajè.

Se poutèt sa kesyon ki nan tit la gen plis pase yon repons yo ka defann, epi se poutèt sa repons lan te chanje an 2011.

Yon rezilta obsèvasyon ki te chanje selon melanj lan

Kolorasyon an pa t yon envansyon ki fèt yon sèl kou. Li te devlope ti kras pa ti kras. Chak chanjman nan melanj lan te bay egzakteman yon nouvo enfòmasyon vizib, epi lòd enfòmasyon sa yo se fason ki pi klè pou konprann istwa a.

Se evolisyon ki nan dènye kolòn nan ki enpòtan. Chak pwogrè te elaji seri koulè yo, epi chak elajisman te fè yon lòt estrikti vin vizib. Koulè vyolèt la pa yon dekorasyon nan teknik la; se li ki fè diferans ant wè yon parazit prezan ak wè sa ki fòme l. Fason koloran an li menm te soti nan yon izin koloran BASF pou l antre nan medsin se yon istwa ki pi long ki gen pwòp dokiman pa l. Tout sekans ki anwo a, ak sous ki sipòte chak antre, disponib nan yon kwonoloji kontribitè ki gen lyen sou sous yo.

Figi: menm sis melanj yo reprezante selon sa ki te nan resipyan an ak sa ki te soti ladan l. Sèk yo montre koloran yo; blòk ki anba yo montre koulè koloran sa yo te kapab pwodui nan yon kouch mens san. Pa gen okenn blòk wouj-vyolèt anvan 1890, epi pa gen okenn melanj apre sa ki pa gen youn.

Nonm ki te sèvi ak boraks espre a

Ernst Malachowski te yon doktè nan Breslau, ki rele Wrocław jodi a. Li te pase karyè li nan pratik prive ak nan yon ti klinik li te dirije ak yon kòlèg, pandan li t ap fè travay laboratwa nan tan lib li. Li te fèt nan Strzelno 12 mas 1857, li te etidye medsin nan Inivèsite Breslau, epi li te travay soti 1882 rive 1887 kòm asistan nan medsin entèn nan Lopital Tout Sen yo, ki te dezyèm pi gwo lopital nan Almay lè sa a.

Li te kòmanse an 1888 ak kolorasyon doub Chęciński ak Plehn lan. Nan yon preparasyon li te fè an 1889, li te wè kwomatin nwayo Plasmodium nan pran yon koulè diferan ak sitoplasm nan, men apre sa li te jwenn li pa t kapab repwodui rezilta a. Li te eseye rann ble metilèn nan pi asid, sa ki te fè bagay yo vin pi mal. Li te eseye rann li alkalin ak boraks, sa ki te mache chak fwa. Li te fè yon demonstrasyon piblik metòd la 15 jen 1890 epi li te pibliye yon deskripsyon pi konplè nan mwa out 1891, ak enstriksyon sou boraks la ladan l. Li te note kolorasyon an te pran vennkat èdtan epi rezilta yo te fasil pou repwodui.

Vennkat èdtan se anpil tan nan yon laboratwa dyagnostik, epi atik li a pa t rete anpil sou koulè vyolèt-wouj nwayo parazit la. Kèlkeswa rezon an, pèsonn pa t reprann lide rann ble metilèn alkalin espre a jiskaske Nocht te fè sa ankò an 1898. Malachowski pa t janm ekri sou kolorasyon san ankò.

Rezon ki fè yo te konnen si piti sou li jiska dènyèman gen plis rapò ak achiv pase ak mistè. Prèske pa t rete okenn tras lavi li nan literati medikal la, epi sa ki te rete a te pase nan yon sèl chemen. Pitit fi li Marie te kite Almay pou Lond an 1939, li te sèvi nan Lame Britanik la epi li te al viv Kanada. Koleksyon dokiman fanmi li te rive nan Enstiti Leo Baeck nan New York. Frè li Leo te mouri nan Premye Gè Mondyal la. Sè li Eva te depòte soti Breslau pou ale nan kan tranzit Izbica an avril 1942 epi li pa t janm retounen. Manman li Hedwig te touye tèt li 22 avril 1942 olye li te tann menm depòtasyon an. Malachowski te mouri an 1934, anvan tout sa.

Yon istwa fanmi ki fini konsa se yon istwa fanmi moun sispann site. De atik ki te remete Malachowski nan istwa devlopman kolorasyon an, toude pibliye an 2011, te fèt apati dokiman achiv nan Poznań ak Wrocław ak dokiman Marie yo nan New York.

Yon boutèy ki gen mwazi ak yon Ris ki te gen chans

Dmitri Romanowsky te etidye medsin nan Akademi Medikal Militè nan St Petersburg epi li te travay sou malarya pandan pi fò nan karyè li. An 1890, li te pibliye yon metòd ki, sou papye, te prèske menm ak metòd Chęciński a: ble metilèn ki pa t modifye ak eyozin, ak yon ti jan plis eyozin.

Nan mwa septanm 1891, li te pibliye metòd ki te fè non li vin popilè a, epi detay ki te enpòtan an te kache nan enstriksyon yo. Pi bon rezilta li yo te soti nan solisyon ble metilèn ki te nan rezèv la, yon solisyon ki te rete plis pase de mwa ak mwazi k ap grandi sou li. Mwazi a ak tan li te rete a te retire yon pati nan gwoup metil koloran an. Romanowsky pa t konnen sa epi li pa t kapab kontwole l, epi lòt moun ki te eseye metòd li a pa t kapab jwenn koulè vyolèt la. Li te soumèt tèz li nan St Petersburg an jen 1891, se poutèt sa istwa yo rakonte an jeneral la konsidere 1891 kòm ane dekouvèt la.

Demonstrasyon Malachowski a te fèt an jen 1890, plis pase yon ane anvan, epi metòd li a te bay rezilta a espre.

Poukisa yo te bay kolorasyon an non moun ki pa t merite a

Kristine Krafts, Ernst Hempelmann ak Barbara Oleksyn te rasanble agiman ki bay Malachowski priyorite a, epi li chita sou kat bagay. Dat demonstrasyon piblik la: jen 1890 kont septanm 1891. Mo espre kont mo pa chans. Lefèt ke Malachowski te pibliye metòd li a, ak boraks la ladan l, pandan metòd Romanowsky a te depann de yon varyab li pa t kontwole. Epi obsèvasyon ki montre deskripsyon nwayo Plasmodium nan, ansanm ak koulè vyolèt ki te fè li vizib la, te prèske disparèt nan literati a pandan sèt ane, paske pèsonn pa t kapab repwodui vèsyon aksidantèl la.

Yo pa pase nan detou pou bay konklizyon yo. Nan atik biyografik la, yo rele atribisyon an "yon defòmasyon grav", epi yo site Ralph Lillie, ki te ekri an 1978: "petèt nou ta dwe rele fanmi kolorasyon sa yo kolorasyon Malachowski".

Reklamasyon sa a gen moun ki konteste l, jan sa rive souvan lè yo diskite kiyès ki te premye. Fason diskisyon an fèt merite yon eksplikasyon olye nou eseye tranche l. Yon agiman sou priyorite dwe defini sa dekouvèt la te ye. Si dekouvèt la se koulè vyolèt la, Malachowski gen demonstrasyon dokimante ki pi ansyen an. Si dekouvèt la se metòd ki te pibliye a, toude mesye yo te pibliye an 1891, epi se non Romanowsky yo te bay kolorasyon an. Si dekouvèt la se eksplikasyon an, okenn nan de mesye yo pa ka reklame l, paske okenn pa t konnen matirasyon an se te demetilasyon, epi okenn pa t kapab di poukisa koulè a te parèt. Se dènye pwen sa a istwa yo rakonte pou piblik la souvan sote. Engredyan aktif la se te yon enpirte pèsonn pa t idantifye, epi premye moun ki te pwodui koulè a espre te fè sa ak yon resèt anpirik yo te ka repwodui, pa paske li te konprann sa resèt la t ap fè.

De atik 2011 yo se prezantasyon pibliye ki pi konplè sou agiman pou Malachowski a, epi ou ka li toude gratis sou PubMed: gwo revizyon an nan PMID 21235291 ak atik biyografik la nan PMID 21660627. Fich PubMed pou revizyon an bay tou yon kòmantè sou li, ki te pibliye nan menm jounal la pita nan menm ane a nan 86(5):366. Sa raple nou avèk jistès ke yo te konteste agiman an nan piblikasyon depi li te parèt.

Diskisyon sa a pa yon dezakò sou chimi. Tout moun ki ladan l dakò sou sa koulè vyolèt la ye ak sou konpozan ki pwodui li yo. Dezakò a se sou kiyès ki te rive jwenn li an premye, epi sou si yon aksidan pèsonn pa t kapab repwodui ka konte kòm yon reyisit.

Sa travay moun ki te vini apre yo te pote

Si Malachowski te pwodui koulè vyolèt la an premye, poukisa kolorasyon an pote non Romanowsky, Wright ak Giemsa?

Paske yon kolorasyon ki mache yon sèl fwa nan men moun ki envante l la poko yon reyaktif. Travay ki te fèt apre yo te transfòme yon melanj kaprisye an yon bagay yon teknisyen nan yon lòt peyi te ka itilize nenpòt madi.

Nocht te rive jwenn li avèk rezònman. Apre li pa t kapab jwenn yon rezilta fyab ak yon senp koloran net, li te konkli koulè vyolèt la dwe soti nan yon bagay ki te nan ble metilèn nan men ki pa t ble metilèn, epi li te al chèche l. Unna te deja remake solisyon ble metilèn ki te fin vye te kolore granil mastosit yo an wouj, epi li te pwopoze yon nouvo sibstans te fòme pandan koloran an t ap matirite. Bernthsen te montre an 1885 kondisyon alkalin yo retire gwoup metil nan ble metilèn, epi pwodui sa yo se sa nou rele azir yo jodi a. Nocht te ekstrè fraksyon aktif la ak klowofòm epi li te kapab rele l sèlman wouj ki soti nan ble metilèn; Michaelis te rele l azir I an 1901. Jenner te rezoud pwoblèm lojistik la. Lè li te redizoud presipite ble metilèn ak eyozin nan metanòl absoli, li te jwenn yon sèl solisyon estab ki te fikse kouch la pandan li t ap kolore l, sa ki te mete fen nan fiksasyon ak chalè. Leishman ak Reuter te melanje koloran ki te vin polikwòm ak yon sòlvan alkòl, epi yo te jwenn estabilite ak koulè vyolèt la ansanm. Wright te ranplase yon enkibasyon douz èdtan nan 65 °C ak dis jou repo avèk yon èdtan nan yon kouran vapè. Giemsa te sispann depann nèt sou yon solisyon ki te matirite o aza. Li te itilize kantite mezire koloran yo te konnen, ak gliseròl nan metanòl la, pou pwodui a te reziste chalè twopikal. Li pa t janm pibliye fason li te fè azir metilèn pi a. Li te vann li bay laboratwa Dr Grübler nan Leipzig, ki te vann li sou non azir I epi ki te deklare se sèlman vèsyon pa li a ki te vrè kolorasyon Giemsa a.

Yo toujou ap diskite sou idantite azir sa a. Gen moun ki kwè se te sèlman ble metilèn ki te vin polikwòm, lòt yo kwè li te rich an Azure B. Se yon lagè ki te fè repons lan parèt. Lè yo pa t kapab jwenn koloran alman yo ankò, yon ekip Sèvis Sante Piblik Etazini, Ralph Lillie ansanm ak Maurice Roe ak Aimee Wilcox, te jwenn pi bon kolorasyon an te soti nan twa konpozan separe: ble metilèn ki pa t modifye, Azure B ki se pwodui dekonpozisyon li apre demetilasyon, ak eyozin. Azure B te ranplase azir I ki pa t disponib la, epi twa konpozan sa yo toujou sèvi kòm baz kolorasyon yo itilize pou dyagnostike malarya jodi a.

Chimi ki esplike kijan twa konpozan sa yo reyaji youn ak lòt sou yon lam se yon lòt kesyon ki sou yon lòt paj. Paj sou wòl koloran yo ak chimi kolorasyon tip Romanowsky yo esplike sa Azure B ak eyozin fè chak apa, epi poukisa de yo ansanm pwodui yon koulè okenn pa pwodui poukont li. Paj sou mikwoskopi ak aplikasyon nan laboratwa a kouvri aspè pratik la: sa yon preparasyon espesifik montre, ak fason pou evalye si yon pwodui patikilye apwopriye pou metòd ou gen entansyon itilize a.

Pati nan istwa a ki toujou valab jodi a

Gen yon detay nan istwa sa a ki pa t sispann vre an 1902. Pandan anviwon senkant ane, konpozan ki te pi enpòtan nan kolorasyon estanda pou malarya nan lemonn se te yon enpirte ki pa t gen non. Li te la pa aksidan, kantite li te varye soti nan yon boutèy ale nan yon lòt, idantite li te yon sekrè komèsyal pandan yon pati nan tan sa a, epi yo te diskite sou pwopòsyon li jouk nan ane 1940 yo. Moun ki t ap itilize kolorasyon an pa t neglijan. Yo pa t gen mwayen pou konnen sa ki te nan boutèy la.

Vèsyon modèn menm pwoblèm sa a se yon spesifikasyon ki dekri sèlman yon pati nan materyèl la. Konfòmite ak USP se chemen pou jwenn pi wo nivo pite mache a ofri, paske se yon estanda konplè ki pibliye olye yon sèl mezi: idantite, pite, enpirte òganik ki gen ladan koloran azir yo, sòlvan rezidyèl, enpirte elemantè, rezidi apre kalsinasyon, limit mikwobyèn ak andotoksin bakteri. Blupreme jwenn ble metilèn li nan men yon manifakti famasetik epi li pibliye sètifika analiz konplè a, pou yo ka verifye chak liy nan lis sa a olye yo sèlman deklare li. Yon sètifika ki rapòte yon rezilta pou metal lou epi ki rele sa konfòmite ak USP se ekivalan jodi a yon boutèy ki make "ble metilèn ki fin matirite": li ka yon bon reyaktif, men etikèt la pa di ou sa ki ladan l.