Ble metilèn ak siyalizasyon enflamatwa: enflamasòm, IL-6, ak STAT3

Ann sipoze twa laboratwa rapòte menm konpoze ble a gen efè anti-enflamatwa. Youn montre makwofaj yo pwodui mwens IL-1beta. Youn montre mwens anzim iNOS nan menm kalite selil la. Youn montre mwens IL-6 nan san ak mwens aktivite STAT3 nan sèvo. Li fasil pou yon moun tante mete twa rezilta sa yo ansanm nan yon sèl deklarasyon. Men, lè yo mete yo ansanm konsa, sa kache sa etid yo te jwenn.

Chak rezilta koresponn ak yon konsèp siyalizasyon diferan, ki gen pwòp deklanchè li, etap asanblaj li, ak endikatè yo mezire pou li. Ble metilèn aji sou chak konsèp nan yon pwen diferan. Kesyon pou konnen si nenpòt nan sa yo amelyore yon rezilta sante se yon kesyon apa, nou trete nan apèsi nou sou ble metilèn ak enflamasyon. Paj sa a rete sou chemen siyalizasyon yo.

Chemen 1: asanblaj enflamasòm ak caspase-1

Yon enflamasòm se yon estrikti pwoteyin ki konstwi selon bezwen anndan yon selil myeloyid. Pati li yo se yon detektè, yon adaptè ki rele ASC, ak yon anzim efektè ki rele caspase-1. Yon fwa estrikti a fin reyini, caspase-1 koupe pro-IL-1beta ak pro-IL-18 pou fè yo tounen fòm yo sekrete yo, epi li ka deklanche piwoptoz, yon fòm lanmò selilè enflamatwa. Se detektè a ki defini kalite a: NLRP3 reyaji ak kristal ak toksin ki fòme pò, tankou nigericin ak ATP; NLRC4 reyaji ak flajelin bakteri; AIM2 reyaji ak ADN ki gen de chenn nan sitozòl la; epi chemen ki pa kanonik la reyaji ak lipopolisakarid anndan selil la.

Aktivasyon an bezwen de siyal. Premye siyal la se preparasyon: yon ligan pou yon reseptè ki sanble ak Toll deklanche transkripsyon NLRP3 ak pro-IL-1beta ki depann de NF-kB, pou pati yo ka egziste. Dezyèm siyal la se asanblaj: yon dezyèm deklanchè fè ASC reyini an oligomè pou fòme ti amas, fè caspase-1 koupe pou bay fragman p20 li a, epi fè IL-1beta p17 ki matirite a libere. Yo konnen espès reyaktif oksijèn ki soti nan mitokondri ak absòpsyon kristal kontribye nan dezyèm siyal la pou NLRP3.

Etid 2017 sou anpèchman plizyè kalite enflamasòm nan makwofaj te teste ble metilèn nan toude siyal yo. Nan makwofaj mwèl zo sourit yo te prepare ak lipopolisakarid, nigericin, ATP, ak kristal irat monosodyòm te chak pwovoke liberasyon IL-1beta ak caspase-1 ansanm ak fòmasyon ti amas ASC. Ble metilèn nan 20 rive 200 micromolar te diminye tout twa nan yon fason ki depann de dòz la, san li pa touye selil yo. Flajelin ak Salmonella pou NLRC4, ADN ki gen de chenn ak Listeria pou AIM2, ansanm ak lipopolisakarid yo te mete nan selil yo pa transfeksyon oswa E. coli vivan pou chemen ki pa kanonik la, te montre menm tandans lan. Konpoze a poukont li pa t deklanche liberasyon, epi plak kontwòl yo pa t montre okenn efè anti-bakteri. Donk, rezilta a konsène repons òganis lame a.

Nan etap ki vini anvan yo, yo te mezire twa entèvansyon. Sipèwoksid mitokondri rotenone te pwovoke a te diminye ak ble metilèn, epi liberasyon IL-1beta rotenone te deklanche a te diminye tou. Absòpsyon ti boul fliyoresan te diminye, sa ki mache ak yon rediksyon nan fagositoz anvan deteksyon kristal yo. Yon sistèm rapòtè ki te anba kontwòl pwomotè NLRP3 ki gen de sit NF-kB te montre mwens aktivite ak ble metilèn, tandiske yon pwomotè yo te rakousi pou retire sit sa yo pa t reyaji. Nan yon tib san selil, ble metilèn te diminye aktivite caspase-1 imen rekombinan dirèkteman tou. Lè yo te ajoute konpoze a sèlman nan etap preparasyon an oswa sèlman nan etap aktivasyon an, li te toujou diminye liberasyon IL-1beta, IL-18, ak caspase-1. Donk, toude etap yo enplike.

Tès sou sourit yo te mache ak selektivite sa a. Yon dòz lipopolisakarid ki letal te touye sourit kontwòl yo nan kèk èdtan, tandiske ble metilèn te amelyore siviv; IL-1beta nan peritwàn nan te diminye, men IL-6 nan menm likid la pa t diminye. Nan yon modèl peritonit ak Listeria, IL-1beta nan peritwàn nan te diminye, tandiske kantite total selil yo pa t chanje. Monosit imen THP-1 yo te konpòte yo tankou makwofaj sourit yo pou tout kat kalite enflamasòm yo. Yon rezilta sou enflamasòm esplike matirasyon IL-1beta ak IL-18, se pa tout sitokin. Se poutèt sa tou fòm selil iminitè sèvo yo nan eksperyans sou mikwogli ak astwosit reponn yon kesyon diferan de asanblaj estrikti a.

Chemen 2: transkripsyon iNOS atravè lyezon NF-kB ak STAT1

Sentaz oksid nitrik endiktib, oswa iNOS, prèske pa prezan lè selil la an repo, epi transkripsyon li fèt selon bezwen. Lipopolisakarid deklanche li sitou atravè degradasyon IkB-alpha, apre sa fosforilasyon NF-kB ak antre li nan nwayo a. Entèferon-gamma deklanche li sitou atravè fosforilasyon STAT1 pa kinaz Janus, apre sa antre STAT1 nan nwayo a. Chak faktè vin mare nan sit pa li sou pwomotè iNOS la. Aktivite anzim nan ak endiksyon jèn nan se pwen kontwòl apa, epi yon medikaman ka aji sou youn oswa sou toude.

Etid 2015 sou endiksyon iNOS nan makwofaj ak sourit ki gen andotoksin nan san te lokalize efè a nan nivo mesaj jenetik la. Nan selil RAW 264.7 ak makwofaj primè sourit, 1 micromolar ble metilèn yo te bay 30 minit anvan lipopolisakarid, entèferon-gamma, oswa toude, te diminye pwoteyin iNOS ak mRNA sou yon peryòd 8 rive 24 èdtan, avèk mwens nitrit nan mwayen kilti a epi san diminisyon nan kapasite selil yo pou yo rete vivan. Nan sourit yo te bay 25 mg lipopolisakarid pou chak kg, yon sèl dòz 5 mg pou chak kg yon èdtan anvan te diminye pwoteyin iNOS ak mRNA nan poumon, fwa, ak kè.

Detay ki fè diferans lan se sa ki pa t chanje. Degradasyon IkB-alpha, fosforilasyon NF-kB, fosforilasyon STAT1, ak akimilasyon chak faktè nan nwayo a te rete entak. Entèripsyon an te rive yon etap apre: ekstrè nwayo yo te montre mwens lyezon NF-kB ak eleman ADN pa li apre lipopolisakarid, ak mwens lyezon STAT1 apre entèferon-gamma. Iminopresipitasyon kwomatin te konfime chak faktè te okipe mwens sit sou pwomotè iNOS la anndan selil yo. Faktè nekwoz timè alpha, ki gen yon pwomotè ki itilize NF-kB tou, te diminye tou. Faktè yo te aktive epi yo te rive, men yo te mare mal ak ADN sib yo a.

Remake diferans lan ak chemen 1. Sa konsène lyezon faktè yo ak ADN, li sèvi ak STAT1 olye de STAT3, epi li mezire mRNA, pwoteyin, ak nitrit olye de ti amas ASC ak fragman caspase-1. Kat nou sou sib ble metilèn nan diferan modèl selil kenbe nivo transkripsyon sa a apa de mezi dirèk sou anzim ak mitokondri.

Chemen 3: IL-6 nan sewòm ak aktivasyon STAT3 nan tisi

IL-6 transmèt siyal atravè fanmi reseptè gp130 la pou antre nan kaskad ki soti nan kinaz Janus rive nan STAT3. STAT3 ki fosforile a fòme dimè, antre nan nwayo a, epi deklanche pwogram enflamatwa, tandiske IL-6 li menm se yon sib NF-kB. Konsa, de yo fòme yon bouk retwoaksyon yo souvan rele aks IL-6 pou rive nan STAT3. Endikatè estanda yo se IL-6 nan sewòm nan etap ki vini anvan yo, rapò STAT3 fosforile sou STAT3 total, ak anzim efektè tankou iNOS ak COX2 nan etap ki vini apre yo.

Etid 2023 sou IL-6 ak STAT3 apre lipopolisakarid nan sourit te mezire aks la nan diferan konpatiman. Sourit mal C57BL/6 te resevwa 1 mg lipopolisakarid pou chak kg chak jou pandan twa jou, avèk 5 oswa 10 mg ble metilèn pou chak kg 30 minit apre chak dòz. Sou twazyèm jou a, IL-6 nan sewòm nan te pi ba nan toude gwoup ble metilèn yo pase ak lipopolisakarid poukont li, tandiske pifò lòt sitokin nan seri tès la pa t chanje ak tretman an. Rapò STAT3 fosforile sou STAT3 total yo te pi ba nan kòtèks, ipokanp, ak po zòrèy, avèk mwens makaj Iba-1 nan mikwogli, mwens iNOS ak COX2, ak yon pèt pwa ki te pasyèlman redui.

Gen de prekosyon pou pran isit la. Mwens IL-6 nan sewòm ansanm ak mwens fosforilasyon STAT3 nan tisi mache ak yon modilasyon aks la, men sa pa idantifye pwen prensipal kote aksyon an fèt. Mwens sitokin nan etap ki vini anvan yo, mwens siyalizasyon reseptè, oswa yon chanjman nan aktivite fosfataz kapab chak pwodui menm rapò a. Epi pwa pandan twa jou apre yon deklanchman egi se yon endikatè pou bèt la antye, se pa yon nòt sentòm oswa remisyon. Sa ajoute kontèks pi lwen pase yon tès blot san li pa fè yon rezilta siyalizasyon tounen yon deklarasyon sou tretman. Chimi apa ki regle pwosesis oksidorediksyon nan mitokondri mache an paralèl ak deskripsyon sa a sou sitokin, epi yo pa dwe melanje yo.

Konparezon chemen yo: pwen entèvansyon ak endikatè mezire

Tablo a anpeche twa transfè ki pa valab. Yon rezilta sou ti amas ASC pa pwouve yon rezilta sou STAT3. Yon rezilta sou lyezon STAT1 ak pwomotè iNOS la pa pwouve yon rezilta sou STAT3, menm si toude pwoteyin yo fè pati fanmi STAT la. Yon rezilta sou IL-6 nan sewòm pa pwouve asanblaj enflamasòm diminye: nan eksperyans sou peritwàn nan, IL-1beta te diminye tandiske IL-6 pa t diminye. Chak liy bezwen pwòp deklanchè li ak pwòp endikatè li, se poutèt sa lekti etid sou ble metilèn nan selil, bèt, ak moun mande pou chak deklarasyon koresponn ak nivo yo te mezire a.

Okenn nan sa yo pa etabli dòz, sekirite, oswa benefis pou moun. Modèl lipopolisakarid yo sèvi kòm deklanchè kontwole pou teste yon mekanis; yo pa kopi maladi kwonik. Epi lè yo bay dòz la ansanm ak deklanchè a, sa teste prevansyon yon chanjman yo pwovoke olye de ranvèsman yon maladi ki deja etabli. Kenbe deskripsyon mekanis sa a apa de rezilta sou pasyan, epi evalye nenpòt deklarasyon sou sante selon etid sou pasyan ki soutni li a.