રૂમેન પ્રવાહી માટે મેથિલીન બ્લૂ રિડક્શન પરીક્ષણ

એક સ્નાતક પશુચિકિત્સક હાથમાં વાદળી ટેસ્ટ ટ્યુબ લઈને ખેતર પરથી ફોન કરે છે. તેણે દસ મિનિટ પહેલાં રૂમેન પ્રવાહીમાં મેથિલીન બ્લૂ ઉમેર્યું હતું અને વાદળી રંગ હજી યથાવત્ છે. તે પૂછે છે કે શું તેણે ગાયને વધુ રંગદ્રવ્ય આપવું જોઈએ.

આ પ્રશ્ન સમજણના ખોટા માળખાને ઉજાગર કરે છે. રૂમેન પ્રવાહી માટેના મેથિલીન બ્લૂ રિડક્શન પરીક્ષણમાં રંગદ્રવ્ય ટેસ્ટ ટ્યુબમાં ઉમેરાય છે, પ્રાણીમાં ક્યારેય નહીં. આખું પરીક્ષણ એ ટ્યુબમાં જ થાય છે. વાદળી રંગ કેટલી ઝડપથી અદૃશ્ય થાય છે તેનો સમય માપવાથી તે નમૂનાના સૂક્ષ્મજીવો વિશે માહિતી મળે છે, પ્રાણીને કઈ સારવારની જરૂર છે તે વિશે નહીં.

આ ગૂંચવણ સમજાય તેવી છે, કારણ કે મેથિલીન બ્લૂ પશુચિકિત્સાના ત્રણ અલગ સંદર્ભોમાં વપરાય છે. આ લેખ તેમને અલગ રાખે છે અને pH, પ્રોટોઝોઆ, નમૂનાની ગુણવત્તા તથા ક્લિનિકલ ચિહ્નો સાથે રિડક્શનનો સમય કેવી રીતે સમજવો તે દર્શાવે છે.

પરીક્ષણ ખરેખર શું માપે છે

મેથિલીન બ્લૂ ઓક્સિડાઇઝ થયેલું હોય ત્યારે વાદળી અને રિડ્યુસ થયેલું હોય ત્યારે લગભગ રંગહીન હોય છે. સ્વસ્થ પ્રાણીનું તાજું રૂમેન પ્રવાહી પ્રબળ રિડક્શન ક્ષમતા ધરાવે છે, કારણ કે અવાયુજીવી બેક્ટેરિયા સક્રિય રીતે ખોરાકનું આથવણ કરી રહ્યા હોય છે. આવા પ્રવાહીમાં થોડું રંગદ્રવ્ય ભેળવવાથી બેક્ટેરિયાની ચયાપચય પ્રક્રિયા થોડી મિનિટોમાં રંગ દૂર કરે છે.

એટલે કાર્યકારી સિદ્ધાંત સરળ છે: સક્રિય અવાયુજીવી સૂક્ષ્મજીવસમુદાય વાદળી રંગ ઝડપથી દૂર કરે છે, જ્યારે નિષ્ક્રિય અથવા નુકસાન પામેલો સૂક્ષ્મજીવસમુદાય તેને ધીમે દૂર કરે છે. ઓછો સમય તે નમૂનામાં વધુ રિડક્શન ક્ષમતા સૂચવે છે. લાંબો સમય સૂક્ષ્મજીવી પ્રવૃત્તિ ઘટી હોવાનો સંકેત આપે છે, જો નમૂનો યોગ્ય રીતે લેવામાં અને સંભાળવામાં આવ્યો હોય.

આ પરીક્ષણ રૂમેનનું રેડોક્સ પોટેન્શિયલ સીધું માપતું નથી. પશુઓમાં પદ્ધતિઓના એક અભ્યાસે રિડક્શન પરીક્ષણની સરખામણી સીધા મિલિવોલ્ટ માપન સાથે કરી હતી. તેમાં રિડક્શનના સમય અને માપેલા રેડોક્સ પોટેન્શિયલ વચ્ચે કોઈ રેખીય સહસંબંધ મળ્યો નહોતો, અને તારણ એવું હતું કે બંનેને એક જ ચલના પરસ્પર બદલાવી શકાય તેવા માપ તરીકે ગણવા ન જોઈએ. સંપૂર્ણ સરખામણીનો સાર PubMed પર આપેલો છે. રિડક્શન પરીક્ષણને સૂક્ષ્મજીવસમુદાયની કાર્યાત્મક તપાસ તરીકે જુઓ, સસ્તા ઇલેક્ટ્રોડ તરીકે નહીં.

વાગોળતા પ્રાણીઓમાં સામાન્ય અપચા વિશેનું Merck/MSDનું વર્ણન લાંબા રિડક્શન સમયને અસામાન્ય રૂમેન pH અને પ્રોટોઝોઆની ઘટેલી સંખ્યા સાથેની જ પેટર્નમાં મૂકે છે. કોઈ એક મૂલ્યથી નિદાન થતું નથી. સમગ્ર પેટર્નથી થાય છે.

પ્રાણીની બાજુમાં કરી શકાય તેવી પ્રમાણભૂત પ્રક્રિયા

અલગ સંસ્થાઓના પ્રોટોકોલમાં થોડો ફેરફાર હોય છે, તેથી તમે વાપરેલા ચોક્કસ જથ્થા અને તાપમાન નોંધો અને એક જ પ્રોટોકોલ હેઠળ મળેલાં પરિણામોની સરખામણી કરો. વ્યાપક રીતે શીખવાતી એક પદ્ધતિ આ છે:

1. લાળનું ભળવું, હવાના સંપર્કમાં આવવું અને ઠંડું પડવું શક્ય તેટલું ઓછું રાખીને ઓછામાં ઓછું 10 થી 20 mL તાજું રૂમેન પ્રવાહી લો. તરત પરીક્ષણ કરો.
2. 0.03 ટકા મેથિલીન બ્લૂ તૈયાર કરો, જે પ્રતિ mL 0.3 mg થાય છે.
3. પ્રવાહીના જથ્થાના 5 ટકા જેટલું રંગદ્રવ્ય ઉમેરો. એટલે 20 mL પ્રવાહીમાં 1.0 mL રંગદ્રવ્ય અથવા 10 mL પ્રવાહીમાં 0.5 mL રંગદ્રવ્ય. બંનેમાં પ્રવાહી અને રંગદ્રવ્યનો ગુણોત્તર 20 થી 1 રહે છે.
4. રંગની સરખામણી માટે એ જ નમૂનાના રંગદ્રવ્ય ઉમેર્યા વિનાના પ્રવાહીની બીજી ટ્યુબ રાખો.
5. હળવેથી ભેળવો, તરત ટાઇમર શરૂ કરો અને સ્થાનિક પ્રોટોકોલ મુજબ ટ્યુબને શરીરના તાપમાનની નજીક, આશરે 37 થી 39 degrees Celsius પર રાખો.
6. પરીક્ષણની ટ્યુબનો રંગ નિયંત્રણ ટ્યુબના રંગ સાથે મેળ ખાતો થાય ત્યાં સુધીનો સમય નોંધો. હવાના સંપર્કવાળી સપાટી પર પાતળી વાદળી વીંટી રહી શકે છે, કારણ કે ત્યાં ઓક્સિજન રંગદ્રવ્યને ફરી ઓક્સિડાઇઝ કરે છે. તે વીંટી અદૃશ્ય થાય તેની રાહ ન જુઓ.

મેથિલીન બ્લૂનું રેડોક્સ રસાયણશાસ્ત્ર અહીં ઓક્સિજન શા માટે મહત્વનો છે તે સમજાવે છે. જોરથી હલાવવાથી, પહોળા મોંની ખુલ્લી ટ્યુબ રાખવાથી અથવા લાંબો વિલંબ થવાથી ઓક્સિજન અંદર આવે છે અને રૂમેનમાં રહેવા કરતાં રંગદ્રવ્ય વધુ સમય વાદળી રહે છે. એ જ કારણથી સ્વચ્છ રીતે રૂમેન પ્રવાહી એકત્ર કરવાની પદ્ધતિની વિગતો મહત્વની છે. લાળ નમૂનાને પાતળો કરે છે અને pH વધારે છે, તેથી પેટની નળીથી નમૂનો લેતી વખતે પૂરતો જથ્થો ઉપલબ્ધ હોય તો ઘણા પશુચિકિત્સકો પહેલો ભાગ કાઢી નાખે છે.

અલગ અવલોકનો શું માપે છે

રિડક્શનનો સમય માત્ર એક જ પ્રશ્નનો જવાબ આપે છે. નીચેનું રૂમેન મૂલ્યાંકન બતાવે છે કે પ્રાણીની બાજુમાં કરેલું દરેક અવલોકન શું માહિતી આપે છે. માત્ર એક ખાનું નહીં, આખી પંક્તિનો ઉપયોગ કરો.

આ કોષ્ટક જ મુખ્ય વાત છે. લાંબો રિડક્શન સમય, સુસ્ત પ્રોટોઝોઆ, અસામાન્ય pH અને નબળા સંકોચનો સાથે જોવા મળે તો તે ખરેખર ઘટેલી સૂક્ષ્મજીવી પ્રવૃત્તિ તરફ સંકેત કરે છે. સજાગ રીતે વાગોળતા પ્રાણીમાં સક્રિય પ્રોટોઝોઆ હોવા છતાં માત્ર રિડક્શનનો સમય લાંબો હોય તો શંકા રૂમેન કરતાં નમૂના પર જાય છે. પગલું લેતા પહેલાં ફરી નમૂનો લો.

pH અને ઇતિહાસ સાથે સમયનું અર્થઘટન

આહાર આધારભૂત સ્થિતિ નક્કી કરે છે. સાંદ્ર ખોરાકથી સમૃદ્ધ આહારનું આથવણ ઝડપથી થાય છે અને તે આશરે એક મિનિટમાં રંગદ્રવ્યનો રંગ દૂર કરી શકે છે, જ્યારે સૂકા ઘાસના આહારમાં સ્વસ્થ પ્રાણીઓમાં પણ ઘણી મિનિટ લાગી શકે છે. એટલે ઓછો સમય પોતે જ વધુ સારું સ્વાસ્થ્ય સાબિત કરતો નથી. તે એટલું સાબિત કરે છે કે સક્રિય સૂક્ષ્મજીવોને વધુ આથવણક્ષમ સામગ્રી મળી.

અનાજનું ગંભીર અતિસેવન આ સરળ વલણને બદલી નાખે છે. શરૂઆતમાં કાર્બોહાઇડ્રેટનું આથવણ તીવ્ર હોઈ શકે છે, પછી અમ્લથી થતું નુકસાન સામાન્ય સૂક્ષ્મજીવસમુદાય અને પ્રોટોઝોઆને દબાવે છે, અને રિડક્શનનો સમય લાંબો થાય છે. તેથી શિક્ષણમાં વપરાતો એક નિયમ કહે છે કે રૂમેન pH આશરે 5.5 કરતાં ઓછો હોય ત્યારે પરીક્ષણ માન્ય નથી. તે સમયે પરીક્ષણ હેઠળનો સૂક્ષ્મજીવસમુદાય બદલાઈ ગયો હોય છે.

પેટર્ન સમજવા માટેની વ્યવહારુ માર્ગદર્શિકા:

• સામાન્ય pH સાથે આશરે 6 મિનિટની અંદર રિડક્શન થાય તો તે કાર્યાત્મક રીતે સક્રિય સૂક્ષ્મજીવસમુદાય સૂચવે છે.
• સામાન્ય pH સાથે રિડક્શનનો સમય સ્પષ્ટ રીતે લાંબો હોય તો તે ખોરાક ન લેવાથી, સૂક્ષ્મજીવવિરોધી દવાની અસરથી અથવા નમૂનાની ગુણવત્તા બગડવાથી આવેલી નિષ્ક્રિયતા સૂચવે છે.
• ઊંચો pH અને લાંબો રિડક્શન સમય ઘણી વાર લાંબા સમયથી ખોરાક ન લેવાથી આથવણ માટેની ઓછી સામગ્રી સાથે જોવા મળે છે, પરંતુ નળીથી લીધેલા નમૂનામાં લાળ ભળી હોવાની શક્યતા પણ વિચારો.
• નીચો pH અને પ્રોટોઝોઆની ઘટેલી પ્રવૃત્તિ કાર્બોહાઇડ્રેટ સંબંધિત સૂક્ષ્મજીવી અસંતુલનની ચિંતા ઊભી કરે છે. રૂમેન pHના અર્થઘટન અંગેનું માર્ગદર્શન અહીં ઉપયોગી છે. 5.5 કરતાં ઓછાં મૂલ્યો સાથે પ્રાણીની એકંદર સક્રિયતામાં ઘટાડો સામાન્ય અપચા કરતાં અનાજના અતિસેવન અને ગંભીર એસિડોસિસ તરફ સંકેત કરે છે.

તાજેતરમાં મોઢેથી અપાયેલી ટેટ્રાસાયક્લિન, ખોરાકમાં અપાયેલા આયોનોફોર, લાંબા સમયથી અપાતી સમગ્ર શરીર પર અસર કરતી સૂક્ષ્મજીવવિરોધી દવાઓ, ખોરાકના મિશ્રણમાં અચાનક ફેરફારો, ખોરાક ન લેવાનો સમયગાળો અને પાણીનું સેવન હંમેશાં નોંધો. MSD માર્ગદર્શિકા ખાસ ચેતવે છે કે મોઢેથી અપાતી ટેટ્રાસાયક્લિન રૂમેનના સૂક્ષ્મજીવસમુદાયને નોંધપાત્ર રીતે દબાવી શકે છે. આયોનોફોર ઇરાદાપૂર્વક બેક્ટેરિયાના સમુદાયોમાં ફેરફાર કરે છે. આ ઇતિહાસ વિના લાંબા સમયનું અર્થઘટન શક્ય નથી.

નમૂનાની ગુણવત્તાને પણ એટલું જ મહત્વ આપવું જોઈએ. નિયંત્રિત અભ્યાસમાં એ જ પ્રાણીઓમાંથી કેન્યુલા દ્વારા લીધેલા નમૂનાઓની સરખામણીમાં પેટની નળીથી લીધેલા નમૂનાઓનો pH ઊંચો અને ઉડનશીલ ફેટી એસિડનું પ્રમાણ ઓછું મળ્યું હતું, મુખ્યત્વે લાળને કારણે. પરીક્ષણ કરાયેલા દરેક જથ્થામાં નમૂનો લીધા પછી 60 મિનિટે રિડક્શનનો સમય નોંધપાત્ર રીતે વધ્યો હતો, અને નાના નમૂનાઓ પર સૌથી વધુ અસર થઈ હતી. ઓછામાં ઓછું 10 mL લો, 30 મિનિટની અંદર પરીક્ષણ કરો, રિડક્શન પરીક્ષણ વહેલું કરો, નમૂનો ગરમ રાખો અને હવાનો સંપર્ક ઓછામાં ઓછો રાખો.

ત્રણ ઉપયોગો વચ્ચે ગૂંચવણ ન થવી જોઈએ

રંગદ્રવ્ય એક જ, પરંતુ ત્રણ અલગ પ્રણાલીઓ.

પહેલો, અહીં વર્ણવેલું રૂમેન પ્રવાહીનું પરીક્ષણ. નમૂનો એકત્ર કરેલું રૂમેન પ્રવાહી છે. રંગદ્રવ્ય શરીરની બહાર 0.03 ટકા સાંદ્રતાએ ઉમેરાય છે. અંતિમ માપ રંગ અદૃશ્ય થવા સુધીનો સમય છે. હેતુ સૂક્ષ્મજીવોની રિડક્શન પ્રવૃત્તિનું મૂલ્યાંકન કરવાનો છે.

બીજો, જીવતા વાગોળતા પ્રાણીને અપાતું મેથિલીન બ્લૂ. તેનું સ્થાપિત ઉદાહરણ મેથેમોગ્લોબિનેમિયા સાથેના નાઇટ્રેટ અથવા નાઇટ્રાઇટ ઝેર માટે નસ દ્વારા અપાતી સારવાર છે, જેમાં દવા હિમોગ્લોબિનની કાર્યક્ષમતા પુનઃસ્થાપિત કરે છે. માત્રા, દવાનું સ્વરૂપ, અવશેષ અને દવા આપ્યા પછી પશુઉત્પાદનોના ઉપયોગ પહેલાંના વિરામકાળના નિયમો લાગુ પડે છે. આ નિર્ણયને ટ્યુબનો સમય માપવા સાથે કોઈ સંબંધ નથી. કોઈ ચોક્કસ પ્રક્રિયામાં રંગદ્રવ્યનો જીવતા શરીરમાં ટ્રેસર તરીકે ઉપયોગ થાય તો તેનો સિદ્ધાંત રંગદ્રવ્ય ક્યાં પહોંચે છે તે છે, રૂમેનના સૂક્ષ્મજીવો તેને કેટલી ઝડપથી રિડ્યુસ કરે છે તે નહીં.

ત્રીજો, દૂધનું રિડક્શન પરીક્ષણ. નમૂનો દૂધ છે. રંગદ્રવ્ય દૂધના નમૂનામાં ઉમેરાય છે. વાદળી રંગ ઝડપથી અદૃશ્ય થવો સામાન્ય રીતે વધુ સૂક્ષ્મજીવી પ્રવૃત્તિ અને સંગ્રહ દરમિયાન ગુણવત્તા જાળવવાની ઓછી ક્ષમતા સૂચવે છે, જ્યારે ધીમું રિડક્શન વધુ સારી ગુણવત્તા સૂચવે છે. તે ખાદ્ય સૂક્ષ્મજીવવિજ્ઞાન અને દૂધની ગુણવત્તાના પરીક્ષણનો વિષય છે, રૂમેનની ચિકિત્સાનો નહીં, અને તે બેક્ટેરિયાની ગણતરી નથી.

નામો સ્પષ્ટ રાખવાથી ભૂલ ટળી શકે છે: રૂમેન પ્રવાહીનો રિડક્શન સમય, સમગ્ર શરીર પર અસર કરતી મેથિલીન બ્લૂ સારવાર અથવા ટ્રેસર તરીકેનો ઉપયોગ, અને દૂધનું રિડક્શન પરીક્ષણ. સલામતીનો નિયમ એક જ વાક્યમાં સમાઈ જાય છે. રૂમેન પરીક્ષણ માટેનું રંગદ્રવ્ય પ્રયોગશાળાની ટ્યુબમાં જ રહે છે અને તે ટ્યુબનો નિકાલ કરવામાં આવે છે. પરીક્ષણ કરવા માટે તે પ્રાણીને ક્યારેય આપવામાં આવતું નથી.

ખેતર પરથી આવતા ફોન માટેનો સંક્ષિપ્ત નિયમ

રંગદ્રવ્યને 0.03 ટકા અને 20 ભાગ પ્રવાહી દીઠ 1 ભાગ રંગદ્રવ્યના પ્રમાણમાં પ્રમાણભૂત રાખો, શરીરના તાપમાનની નજીક તાજા પ્રવાહીનું પરીક્ષણ રંગદ્રવ્ય ઉમેર્યા વિનાના નિયંત્રણ નમૂના સામે કરો, અને મિનિટોને pH, પ્રોટોઝોઆની ગતિશીલતા, નમૂના લેવાની ગુણવત્તા, આહાર, દવાઓ, સંકોચનો, ભૂખ, મળ અને શરીરમાં પાણીની સ્થિતિ સાથે સમજો. એકલી સંખ્યા ક્યારેય અપચાનું નિદાન કરતી નથી. પરસ્પર સુસંગત પેટર્ન કરે છે.