લેખ

જાંબલી રક્તરંજક કોણે વિકસાવ્યું? મેથિલીન બ્લુ, માલાખોવ્સ્કી, રોમાનોવ્સ્કી અને ગીમ્સા

જાંબલી રક્તરંજક કોણે વિકસાવ્યું? મેથિલીન બ્લુ, માલાખોવ્સ્કી, રોમાનોવ્સ્કી અને ગીમ્સા

ઇઓસિન લાલ છે. મેથિલીન બ્લુ વાદળી છે. બંનેને ભેળવો, મિશ્રણને રક્તના સુકાયેલા પાતળા પડ પર લગાવો, અને પડના કેટલાક ભાગો જાંબલી થઈ જાય છે.

દરેક ભાગ નહીં. સારી રીતે તૈયાર કરેલા નમૂનામાં શ્વેત રક્તકોષોના કેન્દ્રકો લાલ-જાંબલી રંગ ધારણ કરે છે, અને મલેરિયાના પરોપજીવીની અંદરનું ક્રોમેટિન પણ એ જ રંગ ધારણ કરે છે, જ્યારે આસપાસના લાલ રક્તકોષો ગુલાબી અને કોષરસ રાખોડી-વાદળી રહે છે. આ જાંબલી રંગથી જ કોષોના વિવિધ પ્રકારો એકબીજાથી અલગ ઓળખાય છે.

બંનેમાંથી કોઈ બોટલમાં જાંબલી રંગ નથી. આ રંગ ત્યારે જ દેખાય છે જ્યારે મેથિલીન બ્લુના વિઘટનથી બનેલો એક ચોક્કસ પદાર્થ સ્લાઇડ પર ઇઓસિનને મળે છે. 1880 અને 1890ના દાયકાઓમાં કોઈને આ પદાર્થના અસ્તિત્વની પણ ખબર નહોતી, તે શું હતો એ જાણવાની તો વાત જ દૂર રહી. આ રંગની શોધમાં લાગેલા લોકો અશુદ્ધ રંજકો સાથે એકલા કામ કરતા હતા. બોટલ બે મહિના સુધી છાજલી પર પડી રહ્યા પછી તેમાં શું હતું તે જાણવાનો તેમની પાસે કોઈ વિશ્વસનીય રસ્તો નહોતો.

આથી જ શીર્ષકમાં પૂછાયેલા પ્રશ્નના એક કરતાં વધુ સમર્થન કરી શકાય એવા જવાબ છે, અને આથી જ 2011માં જવાબ બદલાયો.

મિશ્રણ સાથે બદલાતું દૃશ્ય પરિણામ

આ રંજકની શોધ એક જ વારમાં થઈ નહોતી. તે તબક્કાવાર વિકસ્યું. મિશ્રણમાં થયેલા દરેક ફેરફારે દેખાતી માહિતીમાં ચોક્કસ એક નવી બાબત ઉમેરી, અને આ બાબતોનો ક્રમ જ તેનો ઇતિહાસ સમજવાનો સૌથી સ્પષ્ટ રસ્તો છે.

વર્ષપાત્રમાં શું હતુંશું જોઈ શકાતું હતું
1865પિક્રિક ઍસિડ, રક્ત પર વપરાયેલું પ્રથમ કૃત્રિમ રંજક, વિલ્હેલ્મ એર્બ દ્વારાકેટલાક લાલ રક્તકોષોની અંદર જાળીદાર રચના.
1876મેથિલીન બ્લુ, BASF ખાતે હાઇનરિખ કારો અને આડોલ્ફ ફોન બેયર દ્વારારોબર્ટ કોખના પ્રયોગોમાં ક્ષયના દંડાણુઓ. વાદળીના એક જ રંગછટામાં રક્તકોષો.
1880મેથિલીન બ્લુ અને ઍસિડ ફુક્સિન, એર્લિખનું તટસ્થ રંજકલાલ રક્તકોષો અને ઇઓસિનોફિલના કણો લાલ, કેન્દ્રકો ઘેરા વાદળી, લિમ્ફોસાઇટનો કોષરસ આછો વાદળી, અને બંને રંજકો ગ્રહણ કરનારા ઘેરા જાંબલી કણો. આથી જ આ કોષને ન્યુટ્રોફિલ કહેવાય છે. શ્વેત રક્તકોષોની પ્રથમ પ્રકારવાર ગણતરી.
1888મેથિલીન બ્લુ અને ઇઓસિન. ચેસ્વાવ ખેન્ચિન્સ્કીપરોપજીવી પોતે: વાદળી ડેઇઝી ફૂલ જેવા આકારો (Plasmodium malariae) અને દાતરડા જેવા આકારો (P. falciparumના ગેમેટોસાઇટ્સ). તેનું કેન્દ્રક નહીં.
1890વધુ મેથિલીન બ્લુ, ઓછો આલ્કોહોલ અને પોટેશિયમ હાઇડ્રોક્સાઇડ. આલ્બર્ટ પ્લેનવધુ વ્યાપક અને ઘેરી રંગશ્રેણી, જેમાં ગુલાબી લાલ રક્તકોષો અને ગુલાબી ઇઓસિનોફિલ કણોનો સમાવેશ થતો હતો. હજી પણ માત્ર લાલ અને વાદળી.
1890ઇઓસિન અને બોરેક્સથી ક્ષારીય બનાવેલું મેથિલીન બ્લુ. એર્ન્સ્ટ માલાખોવ્સ્કીપરોપજીવીની અંદર લાલ-જાંબલી ક્રોમેટિન, કોષરસથી અલગ ઓળખાતું કેન્દ્રક. ઇરાદાપૂર્વક મેળવેલું અને તેમના જણાવ્યા મુજબ પુનરુત્પાદન કરી શકાય એવું.
1891ઇઓસિન અને બે મહિનાથી વધુ જૂની, ફૂગ લાગેલી બોટલમાંથી લીધેલું મેથિલીન બ્લુ. દિમિત્રી રોમાનોવ્સ્કીએ જ જાંબલી રંગ, એક વાર, એવી પદ્ધતિથી જેનું અન્ય લોકો પુનરુત્પાદન કરી શક્યા નહીં.
1898 થી 1902ક્લોરોફોર્મથી નિષ્કર્ષિત પોલીક્રોમ રંજક (નોખ્ટ); મિથેનોલ (જેનર); અવક્ષેપને આલ્કોહોલમાં ફરી ઓગાળવો (લીશમેન, રોઇટર, રાઇટ); ગ્લિસરોલ સાથે માપેલી માત્રામાં રંજકો (ગીમ્સા)જરૂર પડે ત્યારે જાંબલી રંગ, એવા ઉત્પાદનમાં જે બીજી પ્રયોગશાળામાં પણ એકસરખું વર્તતું હતું. પોલીક્રોમ કરેલા રંજક વિનાનું જેનરનું સંસ્કરણ જાંબલી રંગ આપતું નહોતું.
1940 થી 1943લિલી, રો અને વિલકોક્સે ઘટકો અલગ કર્યા અને એક પછી એક તેમનું પરીક્ષણ કર્યુંજાંબલી રંગ ઉત્પન્ન કરનાર ઘટક Azure B છે, આખું મિશ્રણ નહીં.

છેલ્લી કૉલમમાં દેખાતો ક્રમ મહત્ત્વનો છે. દરેક પ્રગતિએ રંગશ્રેણીને વિસ્તારી, અને દરેક વિસ્તરણથી એક વધુ રચના દેખાતી થઈ. જાંબલી રંગ આ પદ્ધતિનું માત્ર સુશોભન નથી; તે પરોપજીવી હાજર છે એટલું જોવામાં અને તે શાનો બનેલો છે તે જોવામાં રહેલો તફાવત છે. રંજક પોતે BASFના રંજક કારખાનામાંથી ચિકિત્સા ક્ષેત્રમાં કેવી રીતે પહોંચ્યું તેની વધુ લાંબી કહાની છે, જેના પોતાના દસ્તાવેજો છે. ઉપરનો સંપૂર્ણ ક્રમ, દરેક નોંધના આધારરૂપ સ્રોત સાથે, સ્રોતોની કડીઓ ધરાવતી યોગદાનકર્તાઓની સમયરેખા તરીકે સચવાયેલો છે.

1865 થી 1902 સુધીની તૂટક સમયરેખા પર ડાબેથી જમણે ગોઠવાયેલા છ રક્તરંજક મિશ્રણોનું આલેખ. દરેક રૂપરેખાવાળા વર્તુળમાં તે મિશ્રણના રંજકો રંગીન બિંદુઓ તરીકે દર્શાવેલા છે: પિક્રિક ઍસિડ માટે પીળો, મેથિલીન બ્લુ માટે વાદળી, પછી ઍસિડ ફુક્સિન માટે લાલ અને વાદળી અને ફરી ઇઓસિન માટે એ જ, પછી જ્યાં બોરેક્સ વાદળી રંજકને પરિપક્વ કરે છે ત્યાં જાંબલી અને લાલ, અને પછી 1902ના ઇઓસિન સાથે માપેલી માત્રામાં એઝ્યોર માટે જાંબલી, વાદળી અને લાલ. દરેક વર્તુળની નીચે નાના ખંડો તે મિશ્રણે રક્તના પડમાં ઉત્પન્ન કરેલા રંગો દર્શાવે છે, અને લાલ-જાંબલી ખંડ પ્રથમ વખત 1890માં દેખાય છે.

આકૃતિ: એ જ છ મિશ્રણોને પાત્રમાં શું હતું અને તેનાથી શું મળ્યું તેના રૂપમાં દર્શાવ્યાં છે. વર્તુળો રંજકો દર્શાવે છે; નીચેના ખંડો તે રંજકો રક્તના પડમાં ઉત્પન્ન કરી શકતા રંગો દર્શાવે છે. 1890 પહેલાં ક્યાંય લાલ-જાંબલી ખંડ નથી, અને ત્યાર પછી ક્યાંય તે ગેરહાજર નથી.

બોરેક્સનો ઇરાદાપૂર્વક ઉપયોગ કરનાર વ્યક્તિ

એર્ન્સ્ટ માલાખોવ્સ્કી બ્રેસ્લાઉમાં, જે હવે વ્રોત્સ્વાવ છે, એક ચિકિત્સક હતા. તેમણે પોતાની કારકિર્દી ખાનગી પ્રેક્ટિસમાં અને એક સહકર્મી સાથે ચલાવતા નાના ક્લિનિકમાં વિતાવી, અને પોતાના ફાજલ સમયમાં પ્રયોગશાળાનું કામ કર્યું. તેમનો જન્મ 12 માર્ચ 1857ના રોજ સ્ત્ર્ઝેલ્નોમાં થયો હતો. તેમણે બ્રેસ્લાઉ યુનિવર્સિટીમાં ચિકિત્સાશાસ્ત્રનો અભ્યાસ કર્યો અને 1882 થી 1887 સુધી ઑલ સેન્ટ્સ હૉસ્પિટલમાં આંતરિક ચિકિત્સાના સહાયક તરીકે કામ કર્યું. તે સમયે આ જર્મનીની બીજી સૌથી મોટી હૉસ્પિટલ હતી.

તેમણે 1888માં ખેન્ચિન્સ્કી અને પ્લેનની દ્વિ-રંજક પદ્ધતિથી શરૂઆત કરી. 1889માં તૈયાર કરેલા એક નમૂનામાં તેમણે જોયું કે પ્લાઝ્મોડિયમના કેન્દ્રકનું ક્રોમેટિન કોષરસથી અલગ રંગાયું હતું, પરંતુ પછી તેઓ એ પરિણામ ફરી મેળવી શક્યા નહીં. તેમણે મેથિલીન બ્લુને અમ્લીય બનાવવાનો પ્રયાસ કર્યો, જેનાથી પરિસ્થિતિ વધુ બગડી. તેમણે બોરેક્સથી તેને ક્ષારીય બનાવવાનો પ્રયાસ કર્યો, જે દર વખતે સફળ રહ્યો. તેમણે 15 જૂન 1890ના રોજ જાહેરમાં આ પદ્ધતિનું પ્રદર્શન કર્યું અને ઑગસ્ટ 1891માં બોરેક્સ વાપરવાની સૂચના સહિત વધુ સંપૂર્ણ વર્ણન પ્રકાશિત કર્યું. તેમણે નોંધ્યું કે રંગાવવાની પ્રક્રિયામાં ચોવીસ કલાક લાગતા હતા અને પરિણામો સરળતાથી ફરી મેળવી શકાતા હતા.

નિદાન માટેની પ્રયોગશાળામાં ચોવીસ કલાક લાંબો સમય છે, અને તેમના લેખમાં પરોપજીવીના કેન્દ્રકના જાંબલી-લાલ રંગની વિસ્તૃત ચર્ચા નહોતી. કારણ ગમે તે હોય, 1898માં નોખ્ટે ફરી તેમ કર્યું ત્યાં સુધી કોઈએ મેથિલીન બ્લુને ઇરાદાપૂર્વક ક્ષારીય બનાવવાની રીત અપનાવી નહીં. માલાખોવ્સ્કીએ ફરી ક્યારેય રક્ત રંગવા વિશે લખ્યું નહીં.

તાજેતર સુધી તેમના વિશે આટલું ઓછું જાણીતું હતું તેનું કારણ રહસ્યમય નહીં, પરંતુ અભિલેખોને લગતું છે. ચિકિત્સા સાહિત્યમાં તેમના જીવનના લગભગ કોઈ પુરાવા બચ્યા નહોતા, અને જે બચ્યા તે એક જ માર્ગે આવ્યા. તેમની પુત્રી મારી 1939માં જર્મની છોડીને લંડન ગઈ, બ્રિટિશ સેનામાં સેવા આપી અને કેનેડામાં સ્થાયી થઈ. તેના પારિવારિક દસ્તાવેજોનો સંગ્રહ આખરે ન્યૂ યોર્કની લિઓ બેક ઇન્સ્ટિટ્યૂટમાં પહોંચ્યો. તેનો ભાઈ લિઓ પ્રથમ વિશ્વયુદ્ધમાં માર્યો ગયો હતો. તેની બહેન એવાને એપ્રિલ 1942માં બ્રેસ્લાઉથી ઇઝ્બિત્સા ટ્રાન્ઝિટ કેમ્પમાં દેશનિકાલ કરવામાં આવી હતી અને તે ક્યારેય પાછી આવી નહીં. તેની માતા હેડવિગે એવા જ દેશનિકાલની રાહ જોવાને બદલે 22 એપ્રિલ 1942ના રોજ પોતાનું જીવન સમાપ્ત કર્યું. માલાખોવ્સ્કીનું 1934માં, આ બધું બન્યું તે પહેલાં જ અવસાન થયું હતું.

આ રીતે અંત પામતો પારિવારિક ઇતિહાસ એવો ઇતિહાસ બની જાય છે જેનો ઉલ્લેખ થતો બંધ થઈ જાય છે. રંજકના વિકાસમાં માલાખોવ્સ્કીને ફરી સ્થાન આપતા બંને લેખ 2011માં પ્રકાશિત થયા હતા. તેઓ પોઝ્નાન અને વ્રોત્સ્વાવના અભિલેખીય દસ્તાવેજો તથા ન્યૂ યોર્કમાં રહેલા મારીના દસ્તાવેજોના આધારે તૈયાર કરાયા હતા.

ફૂગ લાગેલી બોટલ અને એક નસીબદાર રશિયન

દિમિત્રી રોમાનોવ્સ્કીએ સેન્ટ પીટર્સબર્ગની મિલિટરી મેડિકલ એકેડેમીમાં ચિકિત્સાશાસ્ત્રનો અભ્યાસ કર્યો અને પોતાની કારકિર્દીના મોટા ભાગ દરમિયાન મલેરિયા પર કામ કર્યું. 1890માં તેમણે એક પદ્ધતિ પ્રકાશિત કરી જે કાગળ પર ખેન્ચિન્સ્કીની પદ્ધતિ જેવી લગભગ એકસરખી હતી: અપરિવર્તિત મેથિલીન બ્લુ અને ઇઓસિન, જેમાં ઇઓસિન થોડું વધારે હતું.

સપ્ટેમ્બર 1891માં તેમણે એવી પદ્ધતિ પ્રકાશિત કરી જેનાથી તેમનું નામ જાણીતું થયું, અને મહત્ત્વની વિગત સૂચનાઓમાં દટાયેલી હતી. તેમને શ્રેષ્ઠ પરિણામો સંગ્રહિત મેથિલીન દ્રાવણથી મળ્યાં હતાં, એટલે કે મેથિલીન બ્લુનું એવું સંગ્રહિત દ્રાવણ જે બે મહિનાથી વધુ સમયથી પડ્યું હતું અને જેના પર ફૂગ ઊગી હતી. ફૂગ અને પડ્યા રહેવાના સમયને કારણે રંજકનું આંશિક ડિમેથિલેશન થયું હતું. રોમાનોવ્સ્કીને તેની ખબર નહોતી અને તેઓ તેને નિયંત્રિત કરી શકતા નહોતા. તેમની પદ્ધતિ અજમાવનારા અન્ય સંશોધકો જાંબલી રંગ મેળવી શક્યા નહીં. તેમનો શોધપ્રબંધ જૂન 1891માં સેન્ટ પીટર્સબર્ગમાં રજૂ થઈ ચૂક્યો હતો, તેથી પ્રચલિત વર્ણન 1891ને શોધનું વર્ષ માને છે.

માલાખોવ્સ્કીનું પ્રદર્શન જૂન 1890માં, એક વર્ષથી પણ વધુ સમય પહેલાં થયું હતું, અને તેમની પદ્ધતિ ઇરાદાપૂર્વક એ પરિણામ આપતી હતી.

નામકરણનો શ્રેય ખોટી વ્યક્તિને કેમ મળ્યો

માલાખોવ્સ્કીની તરફેણમાં દલીલ ક્રિસ્ટીન ક્રાફ્ટ્સ, એર્ન્સ્ટ હેમ્પેલમાન અને બાર્બરા ઓલેક્સિને તૈયાર કરી હતી, અને તે ચાર બાબતો પર આધારિત છે. જાહેર પ્રદર્શનની તારીખ: સપ્ટેમ્બર 1891ની સામે જૂન 1890. આકસ્મિકની સામે ઇરાદાપૂર્વક શબ્દ. માલાખોવ્સ્કીએ બોરેક્સ સહિત પોતાની પદ્ધતિ પ્રકાશિત કરી હતી, જ્યારે રોમાનોવ્સ્કીની પદ્ધતિ અનિયંત્રિત પરિબળ પર આધારિત હતી તે હકીકત. અને એ નિરીક્ષણ કે પ્લાઝ્મોડિયમના કેન્દ્રકનું વર્ણન, તેને દેખાડનારા જાંબલી રંગ સાથે, સાત વર્ષ માટે સાહિત્યમાંથી લગભગ ગાયબ થઈ ગયું હતું, કારણ કે કોઈ આકસ્મિક રીતે મળેલા પરિણામનું પુનરુત્પાદન કરી શક્યું નહીં.

તેઓ નિષ્કર્ષ સ્પષ્ટ શબ્દોમાં મૂકે છે. જીવનચરિત્રાત્મક લેખમાં તેઓ આ શ્રેય આપવાની બાબતને "ન્યાયની ઠેકડી" કહે છે અને રાલ્ફ લિલીને ટાંકે છે, જેમણે 1978માં લખ્યું હતું કે "કદાચ આપણે રંજકોના આ સમૂહને માલાખોવ્સ્કી રંજકો તરીકે ઓળખાવવો જોઈએ".

અગ્રતાના દાવાઓ સામાન્ય રીતે વિવાદિત હોય છે, તેમ આ દાવો પણ વિવાદિત છે, અને આ વિવાદનો નિર્ણય કરવા કરતાં તેનું સ્વરૂપ સમજાવવું વધુ યોગ્ય છે. અગ્રતા અંગેની દલીલે શોધ શું હતી તે સ્પષ્ટ કરવું પડે. જો શોધ જાંબલી રંગ હોય, તો માલાખોવ્સ્કીનું દસ્તાવેજિત પ્રદર્શન અગાઉનું છે. જો શોધ પ્રકાશિત પદ્ધતિ હોય, તો બંનેએ 1891માં પ્રકાશિત કર્યું હતું અને નામકરણનો શ્રેય રોમાનોવ્સ્કીને મળ્યો. જો શોધ સમજૂતી હોય, તો બંનેમાંથી કોઈનો દાવો બનતો નથી, કારણ કે બંનેમાંથી કોઈ જાણતું નહોતું કે પરિપક્વ થવાની પ્રક્રિયા ડિમેથિલેશન હતી, અને રંગ કેમ દેખાયો તે પણ બંનેમાંથી કોઈ કહી શકતું નહોતું. લોકપ્રિય વર્ણનો આ છેલ્લી બાબત ચૂકી જાય છે. સક્રિય ઘટક એવી અશુદ્ધિ હતી જેને કોઈએ ઓળખી નહોતી, અને ઇરાદાપૂર્વક રંગ ઉત્પન્ન કરનાર પ્રથમ વ્યક્તિએ એવું પુનરુત્પાદન કરી શકાય તેવી અનુભવાધારિત વિધિથી કર્યું હતું, એ વિધિ શું કરતી હતી તેની સમજથી નહીં.

2011ના આ બંને લેખો માલાખોવ્સ્કીની તરફેણમાં દલીલનું સૌથી સંપૂર્ણ પ્રકાશિત રજૂઆત છે, અને બંને PubMed પર મફતમાં વાંચી શકાય છે: વિસ્તૃત સમીક્ષા PMID 21235291 પર અને જીવનચરિત્રાત્મક લેખ PMID 21660627 પર. સમીક્ષાની PubMed નોંધમાં તેના પરની એક ટિપ્પણી પણ સૂચિબદ્ધ છે, જે એ જ વર્ષે પછીથી એ જ સામયિકમાં 86(5):366 પર પ્રકાશિત થઈ હતી. આ યોગ્ય રીતે યાદ અપાવે છે કે દલીલ પ્રકાશિત થતાં જ મુદ્રિત સાહિત્યમાં તેનો વિરોધ થયો હતો.

આ વિવાદ રસાયણશાસ્ત્ર અંગેનો મતભેદ નથી. જાંબલી રંગ શું છે અને કયા ઘટકો તેને ઉત્પન્ન કરે છે તે અંગે સંબંધિત સૌ સહમત છે. મતભેદ એ છે કે ત્યાં સૌપ્રથમ કોણ પહોંચ્યું, અને એવો અકસ્માત જે કોઈ ફરી દોહરાવી શક્યું નહીં તેને ત્યાં પહોંચવું ગણાય કે નહીં.

પછીનાં નામોએ શું ઉમેર્યું

જો માલાખોવ્સ્કીએ જાંબલી રંગ સૌપ્રથમ ઉત્પન્ન કર્યો હતો, તો રંજક સાથે રોમાનોવ્સ્કી, રાઇટ અને ગીમ્સાનાં નામ કેમ જોડાયેલાં છે?

કારણ કે પોતાના શોધકના હાથમાં એક વાર કામ કરતું રંજક હજી પ્રયોગશાળામાં ઉપયોગયોગ્ય અભિકર્મક નથી. પછીના કામે અસ્થિર વર્તન કરતા મિશ્રણને એવી વસ્તુમાં ફેરવ્યું જે બીજા દેશનો ટેક્નિશિયન કોઈ મંગળવારે વાપરી શકે.

નોખ્ટ તર્કના આધારે ત્યાં પહોંચ્યા. સાદા તટસ્થ રંજકમાંથી વિશ્વસનીય પરિણામ ન મળતાં તેમણે નિષ્કર્ષ કાઢ્યો કે જાંબલી રંગ મેથિલીન બ્લુમાં રહેલા એવા કોઈ પદાર્થમાંથી આવતો હોવો જોઈએ જે પોતે મેથિલીન બ્લુ નહોતો, અને તેમણે તેને શોધવાનું શરૂ કર્યું. ઉન્નાએ અગાઉ જ નોંધ્યું હતું કે જૂનાં મેથિલીન બ્લુ દ્રાવણો માસ્ટ કોષોના કણોને લાલ રંગે છે, અને સૂચવ્યું હતું કે રંજક પરિપક્વ થાય ત્યારે નવો પદાર્થ બને છે. બર્ન્થસેને 1885માં બતાવ્યું હતું કે ક્ષારીય પરિસ્થિતિઓ મેથિલીન બ્લુમાંથી મિથાઇલ સમૂહો દૂર કરે છે, અને આ ઉત્પાદનો જ આજે આપણે એઝ્યોર તરીકે ઓળખીએ છીએ. નોખ્ટે ક્લોરોફોર્મથી સક્રિય અંશનું નિષ્કર્ષણ કર્યું અને તેને માત્ર મેથિલીન બ્લુમાંથી મળેલો લાલ રંગ કહી શક્યા; માઇકલિસે 1901માં તેને એઝ્યોર I નામ આપ્યું. જેનરે વ્યવહારુ મુશ્કેલીઓ ઉકેલી. મેથિલીન બ્લુ અને ઇઓસિનના અવક્ષેપને નિર્જળ મિથેનોલમાં ફરી ઓગાળવાથી એક જ સ્થિર દ્રાવણ મળ્યું, જે રંગાવવાની સાથે પડનું સ્થિરીકરણ કરતું હતું અને ગરમીથી સ્થિરીકરણની જરૂરિયાતનો અંત લાવ્યું. લીશમેન અને રોઇટરે પોલીક્રોમ કરેલા રંજકને આલ્કોહોલિક દ્રાવક સાથે જોડીને સ્થિરતા અને જાંબલી રંગ બંને મેળવ્યાં. રાઇટે 65 °C પર બાર કલાક રાખવા અને દસ દિવસ પડ્યું રહેવા દેવાની પ્રક્રિયાને બદલે વહેતી વરાળમાં એક કલાક રાખવાની રીત અપનાવી. ગીમ્સાએ અનિશ્ચિત રીતે પરિપક્વ થયેલા દ્રાવણ પર આધાર રાખવાનું સંપૂર્ણપણે બંધ કર્યું. તેમણે મિથેનોલમાં ગ્લિસરોલ સાથે જાણીતા રંજકોની માપેલી માત્રાઓ વાપરી, જેથી ઉત્પાદન ઉષ્ણકટિબંધીય ગરમીમાં પણ ટકી રહે. શુદ્ધ મેથિલીન એઝ્યોર તેઓ કેવી રીતે બનાવતા હતા તે તેમણે ક્યારેય પ્રકાશિત કર્યું નહીં. તેમણે તેને લાઇપઝિગની ડૉ. ગ્ર્યુબ્લરની પ્રયોગશાળાને વેચ્યું, જેણે તેને એઝ્યોર I તરીકે બજારમાં મૂક્યું અને દાવો કર્યો કે માત્ર તેનું સંસ્કરણ જ અસલ ગીમ્સા રંજક હતું.

તે એઝ્યોરની ઓળખ અંગે આજે પણ વિવાદ છે. કેટલાક માને છે કે તે માત્ર પોલીક્રોમ કરેલું મેથિલીન બ્લુ હતું, જ્યારે અન્ય માને છે કે તેમાં Azure B વધુ પ્રમાણમાં હતું. જવાબ એક યુદ્ધને કારણે મળ્યો. જ્યારે જર્મન રંજકો મળતા બંધ થયા, ત્યારે યુનાઇટેડ સ્ટેટ્સ પબ્લિક હેલ્થ સર્વિસની ટીમમાં મૉરિસ રો અને એમી વિલકોક્સ સાથે રાલ્ફ લિલીએ શોધ્યું કે શ્રેષ્ઠ રંગાવવું ત્રણ અલગ કરેલા ઘટકોથી મળતું હતું: અપરિવર્તિત મેથિલીન બ્લુ, ડિમેથિલેશનથી બનેલું તેનું વિઘટન ઉત્પાદન Azure B, અને ઇઓસિન. ઉપલબ્ધ ન રહેલા એઝ્યોર Iનું સ્થાન Azure Bએ લીધું, અને આજે મલેરિયાના નિદાન માટે વપરાતા રંજકનો આધાર હજી પણ આ ત્રણ ઘટકો જ છે.

આ ત્રણ ઘટકો સ્લાઇડ પર કેવી રીતે પરસ્પર ક્રિયા કરે છે તેનું રસાયણશાસ્ત્ર અલગ પ્રશ્ન છે અને અલગ પૃષ્ઠનો વિષય છે. રોમાનોવ્સ્કી પ્રકારનાં રંજકોમાં રંજકોની ભૂમિકાઓ અને રસાયણશાસ્ત્રમાં Azure B અને ઇઓસિન શું કરે છે અને આ જોડી એવો રંગ કેમ ઉત્પન્ન કરે છે જે બંનેમાંથી કોઈ એકલું ઉત્પન્ન કરતું નથી તે સમજાવ્યું છે. સૂક્ષ્મદર્શક અને પ્રયોગશાળાના ઉપયોગોનું પૃષ્ઠ વ્યવહારુ પાસું આવરી લે છે: કોઈ ચોક્કસ તૈયારી શું બતાવે છે, અને તમે વાપરવા માગતા હો તે પદ્ધતિ માટે કોઈ ચોક્કસ ઉત્પાદન યોગ્ય છે કે નહીં તે કેવી રીતે નક્કી કરવું.

ઇતિહાસનો એ ભાગ જે આજે પણ પ્રસ્તુત છે

આ કહાનીની એક વિગત 1902માં અપ્રસ્તુત થઈ ગઈ નહોતી. લગભગ પચાસ વર્ષ સુધી, મલેરિયા માટેના વિશ્વના પ્રમાણભૂત રંજકનો સૌથી મહત્ત્વનો ઘટક એક અનામ અશુદ્ધિ હતો. તે અકસ્માતે હાજર હતો, તેની માત્રા બોટલ પ્રમાણે બદલાતી હતી, એ સમયના કેટલાક ભાગ દરમિયાન તેની ઓળખ વેપારી રહસ્ય હતી, અને 1940ના દાયકા સુધી તેના પ્રમાણ અંગે વિવાદ ચાલતો રહ્યો. રંજક વાપરતા લોકો બેદરકાર નહોતા. બોટલમાં શું હતું તે જાણવાનો તેમની પાસે કોઈ રસ્તો નહોતો.

આ જ સમસ્યાનું આધુનિક સ્વરૂપ એવું ગુણવત્તા નિર્દેશન છે જે સામગ્રીના માત્ર અમુક ભાગનું વર્ણન કરે છે. બજારમાં ઉપલબ્ધ સર્વોચ્ચ શુદ્ધતા મેળવવાનો માર્ગ USP અનુરૂપતા છે, કારણ કે તે એક જ માપન નહીં, પરંતુ સંપૂર્ણ પ્રકાશિત ધોરણ છે: ઓળખ, શુદ્ધતા, એઝ્યોર રંજકો સહિતની કાર્બનિક અશુદ્ધિઓ, અવશેષ દ્રાવકો, તત્ત્વીય અશુદ્ધિઓ, પ્રજ્વલન પછીનો અવશેષ, સૂક્ષ્મજીવ મર્યાદાઓ અને બેક્ટેરિયલ એન્ડોટોક્સિન્સ. Blupreme પોતાનું મેથિલીન બ્લુ ઔષધ ઉત્પાદક પાસેથી મેળવે છે અને વિશ્લેષણનું સંપૂર્ણ પ્રમાણપત્ર પ્રકાશિત કરે છે, જેથી આ યાદીની દરેક બાબતનો માત્ર દાવો કરવાને બદલે તેને ચકાસી શકાય. ભારે ધાતુના પરિણામની જાણ કરીને તેને USP અનુપાલન કહેતું પ્રમાણપત્ર આજના સમયમાં "પરિપક્વ કરેલું મેથિલીન બ્લુ" લખેલી બોટલ જેવું છે: કદાચ ઉત્તમ અભિકર્મક હોય, પરંતુ લેબલ તમને તેમાં શું છે તે જણાવતું નથી.