Kas metüleensinine põhjustab vähki? Toksikoloogilised tõendid

Metüleensinine on pikaajalistes loomkatsetes andnud kasvajasignaale ja mitmes geneetilise kahjustuse laborikatses positiivseid tulemusi. Need leiud väärivad tähelepanu. Need ei näita, kui suur on tõenäosus, et inimesel tekib pärast konkreetset kokkupuudet vähk.

2016. aastal avaldatud IARC hinnang paigutas metüleensinise rühma 3, mis tähendab, et selle kantserogeensust inimesele ei olnud võimalik klassifitseerida. Töörühmal puudusid andmed inimeste vähijuhtude kohta ning loomkatsete tõendusmaterjali hinnati piiratuks. Rühm 3 ei tähenda tõendatud ohutust. Samuti ei tähenda loomkatses leitud seos, et iga kokkupuude inimesel oleks tõendatud vähktõve põhjus.

Kolm küsimust, millele tuleb vastata eraldi

Kantserogeensus puudutab kasvajate teket. Pikaajaline loomkatse võib tuvastada kasvajamustreid pärast kindlaksmääratud kokkupuudet. Genotoksilisus puudutab geneetilise materjali kahjustusi või nendega seotud rakulisi sündmusi. Positiivne mutatsioonitest annab hoiatussignaali, kuid ei mõõda otseselt vähijuhtude arvu inimestel. Risk inimesele puudutab kahju tekkimise tõenäosust tegelikes kokkupuutetingimustes.

Need küsimused nõuavad erinevaid mõõtmisi. Bakteriaalsete mutantide loendamine, hiire vererakkude uurimine ja lahangul kasvajate diagnoosimine ei ole omavahel asendatavad tulemusnäitajad. Samuti ei näita ravikatse, milles aine kahjustab vähirakke, kas korduv kokkupuude võib algatada kasvajate tekke terves koes. Eraldi käsitlus metüleensinisest vähiuuringutes käsitleb raviväiteid.

Uuringute võrdlus: tegelikud kroonilised kokkupuuted

Põhiuuringus kasutati metüleensinise trihüdraati, mida manustati 0.5% metüültselluloosi vesilahuses suukaudse sondiga ehk mõõdetud kogusena toru kaudu makku. Igas kroonilise uuringu annuserühmas oli kummastki liigist 50 isast ja 50 emast looma. Vastavalt Auerbachi ja kolleegide uuringuaruandele manustati ainet kahe aasta jooksul viis päeva nädalas.

Tabel säilitab NTP liigispetsiifilised järeldused. Kogused on testitud aine milligrammides looma kehakaalu kilogrammi kohta manustamispäevadel, mitte soovitused inimestele. Nullannusega loomad said kandjalahust.

Mudel	Annuserühmad, mg/kg	Manustamisviis ja kestus	NTP järeldus ja asjakohane leid
Isased F344/N rotid	0, 5, 25, 50	Suukaudne sond; viis päeva/nädal; kaks aastat	Mõningane tõendus: pankrease saarekeste adenoomide ning adenoomide/kartsinoomide koondnäitaja suurenemine.
Emased F344/N rotid	0, 5, 25, 50	Sama ajakava	Nendes tingimustes kantserogeense aktiivsuse kohta tõendeid ei leitud.
Isased B6C3F1 hiired	0, 2.5, 12.5, 25	Suukaudne sond; viis päeva/nädal; kaks aastat	Mõningane tõendus: peensoole kartsinoomi ning adenoomide/kartsinoomide koondnäitaja suurenemine. Seotud võis olla ka pahaloomuline lümfoom.
Emased B6C3F1 hiired	0, 2.5, 12.5, 25	Sama ajakava	Ebaselge tõendus: pahaloomulise lümfoomi piiripealne suurenemine.

„Mõningane tõendus” on NTP kategooria positiivse eksperimentaalse leiu kohta, mille tõendusjõud on väiksem kui „selgel tõendusel”. „Ebaselge” kirjeldab ebakindlat leidu. Need kategooriad väljendavad tõendusmaterjali tugevust, mitte riskiprotsenti ega kantserogeeni toime tugevuse järjestust.

Isaste rottide tulemus ei suurenenud annuse kasvades ühtlaselt. Pankrease saarekeste adenoomi või kartsinoomi esines 4/50 kontrollrühma loomal ning kasvavate annuste korral vastavalt 9/50, 14/50 ja 8/50 loomal. Avaldatud artiklis teatatakse statistilisest olulisusest ainult keskmise annuse puhul. Seetõttu ei ole lihtne sirgjooneline tõlgendus täpne; see ei tõenda, et suurim annus oli kaitsev. Adenoom on healoomuline kasvaja, kartsinoom aga pahaloomuline. Koondnäitajat ei tohi kirjeldada nii, nagu oleks iga loendatud kasvaja olnud vähk.

Miks erinevad kokkuvõtted näivad vastuolulised

Praegune PROVAYBLUE ravimiinfo kirjeldab isaste rottide pankrease leide, kuid märgib, et hiirtel ravimiga seotud neoplastilisi leide ei täheldatud. Teadusartiklis öeldakse, et hiirte neoplastiliste leidude suurenemine ei olnud statistiliselt oluline, kuid märgitakse positiivseid suundumusi. NTP määras hiirtele siiski eespool esitatud kategooriad.

IARC loomkatsete analüüs selgitab olulist statistilist erinevust: isaste hiirte sooleleiud näitasid annuse suurenedes statistiliselt olulist trendi, kuid üksikud annuserühmad ei erinenud paarikaupa kontrollrühmast statistiliselt oluliselt. Üldise annuseülese mustri testimine erineb iga rühma eraldi testimisest. Lugejad peaksid säilitama allika ja selle täpse sõnastuse, selle asemel et taandada kõik need leiud väitele „hiirtel tekkis vähk” või „hiirte uuring oli negatiivne”. Ükski neist ei anna mõõdetud vähiriski määra inimestel.

Uuringute võrdlus: geneetilise kahjustuse tulemusnäitajad

NTP tehnilise aruande 540 geneetilise toksikoloogia osa kirjeldab teistsuguseid katseid. S9 on maksaensüüme sisaldav laborisegu, mida kasutatakse metaboolse aktivatsiooni modelleerimiseks. Selle olemasolu ei muuda rakukatset kogu organismi kokkupuute uuringuks.

Katsesüsteem	Tegelikud kokkupuutetingimused	Mõõdetud tulemusnäitaja ja tulemus
Bakteriaalsed mutatsioonitestid, teine testitud partii	Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; roti maksa S9-ga ja ilma	Mutatsioonide arv suurenes testitud tüvedes.
Kultiveeritud hiina hamstri munasarjarakud	Õdekromatiidivahetuse test hõlmas 0.17–2.5 µg/mL ilma S9-ta, kuni 5 µg/mL S9-ga; kromosoomaberratsioonide testis kasutati 4.7–22 µg/mL	Positiivsed tulemused nii vahetuse kui ka kromosoomaberratsioonide osas.
Isased hiired, akuutne katse	Ühekordne intraperitoneaalne süst: 25, 50 või 150 mg/kg; proovid 48 tunni pärast	Mikrotuumadega erütrotsüütide arv luuüdis ega veres ei suurenenud.
Isased ja emased hiired, korduvkatse	Suukaudne sond: 25, 50, 100 või 200 mg/kg; viis päeva/nädal kolme kuu jooksul	Perifeerse vere mikrotuumadega erütrotsüütide arv ei suurenenud.

Mikrotuum on väike täiendav tuumakeha, mis võib viidata kromosoomi katkemisele või kadumisele raku jagunemise ajal. Negatiivne vererakkude test vastab sellele konkreetsele küsimusele uuritud rakkudes. See ei saa välistada kõiki DNA kahjustuse liike kõigis elundites. Samuti ei näita positiivne kultiveeritud rakkude test, millise kontsentratsioonini aine inimese kudedes jõudis.

Ravimiinfos kirjeldatakse samuti sama üldist mustrit: positiivsed bakteriaalsed ja kultiveeritud rakkude testid ning negatiivsed hiirte mikrotuumatestid. Metüleensinise nimetamine lihtsalt „genotoksiliseks” või „mittegenotoksiliseks” jätab kõrvale tõlgendamiseks olulise teabe.

Mida see tähendab inimese kokkupuute puhul

Uuringud ei anna inimestele valideeritud vähiohutu päevase kokkupuute lävendit. Roti annuse jagamine kehakaaluteguriga ei lahendaks erinevusi imendumises, ainevahetuses, manustamisviisis, kokkupuute sageduses ega eluea pikkuses. Tulemuseks oleks teisendatud kogus, mitte ohutuse tõend.

Kaheaastane sondiga manustamise katse ja lühiajaline meditsiinilise järelevalve all tehtud intravenoosne ravi käsitlevad erinevaid küsimusi. See erinevus takistab otsest arvulist ekstrapoleerimist; see ei muuda loomkatsete leide olematuks. Kasulik hindamine algab täpsest ühendist ja ravimvormist, kogusest, manustamisviisist, sagedusest, kestusest ning kasutamise põhjusest. „Mõni tilk” ei täpsusta ei kontsentratsiooni ega mõõdetud mahtu.

Kui metüleensinist manustati meditsiinilisel põhjusel, ei saa üksnes kasvajaleidude põhjal otsustada, kas selle ravi kasu kaalus riskid üles. Kui kaalutakse korduvat vabatahtlikku kasutamist, ei tohiks mõõtmata pikaajalist vähiriski kirjeldada nullina. Vahetumaid küsimusi, sealhulgas ravimite koostoimeid ja vastuvõtlikkust hemolüüsile, käsitletakse artiklis kõrvaltoimed ja vastunäidustused.

Lisalugemiseks kasuta uuringute kogu, et eristada inimuuringuid loom- ja rakukatsetest. Iga artikli puhul on põhiküsimus, millist kokkupuudet selles uuriti ja millist tulemust tegelikult mõõdeti.