Prawf Rhydwytho Glas Methylen ar gyfer Hylif y Rwmen

Mae un sydd newydd raddio yn galw o fferm â thiwb glas yn ei llaw. Ychwanegodd las methylen at hylif y rwmen ddeg munud yn ôl ac mae'r lliw glas yn dal yno. Mae'n gofyn a ddylai roi rhagor o liw i'r fuwch.

Mae'r cwestiwn hwnnw'n datgelu dealltwriaeth anghywir. Yn y prawf rhydwytho glas methylen ar gyfer hylif y rwmen, mae'r lliw yn mynd i'r tiwb, byth i'r anifail. Y tiwb yw'r prawf cyfan. Mae mesur pa mor gyflym y mae'r lliw glas yn diflannu yn dweud rhywbeth wrthych am y microbau yn y sampl honno, nid am driniaeth sydd ei hangen ar yr anifail.

Mae'r dryswch yn ddealladwy gan fod glas methylen yn ymddangos mewn tri chyd-destun milfeddygol gwahanol. Mae'r erthygl hon yn eu cadw ar wahân ac yn dangos sut i ddehongli amser rhydwytho ynghyd â pH, protosoa, ansawdd samplu ac arwyddion clinigol.

Beth mae'r prawf yn ei fesur mewn gwirionedd

Mae glas methylen yn las pan fydd wedi'i ocsidio a bron yn ddi-liw pan fydd wedi'i rydwytho. Mae hylif ffres y rwmen o anifail iach yn rhydwythol iawn gan fod bacteria anaerobig wrthi'n eplesu porthiant. Pan fyddwch yn cymysgu ychydig bach o liw i hylif o'r fath, mae metaboledd bacteriol yn tynnu'r lliw o fewn ychydig funudau.

Felly mae'r egwyddor weithredol yn syml: mae fflora anaerobig gweithredol yn clirio'r lliw glas yn gyflym, ac mae fflora anweithredol neu wedi'i niweidio yn ei glirio'n araf. Mae amser byr yn golygu bod mwy o allu rhydwythol yn y sampl honno. Mae amser estynedig yn awgrymu gweithgarwch microbaidd isel, ar yr amod bod y sampl wedi'i chasglu a'i thrin yn dda.

Nid yw'n mesur potensial rhydocs y rwmen yn uniongyrchol. Canfu astudiaeth o ddulliau mewn gwartheg, a gymharodd y prawf rhydwytho â mesuriadau milifolt uniongyrchol, nad oedd cydberthyniad llinol rhwng amser rhydwytho a'r potensial rhydocs a fesurwyd. Daeth i'r casgliad na ddylid trin y ddau fel darlleniadau cyfnewidiol o'r un newidyn. Ceir crynodeb o'r gymhariaeth lawn ar PubMed. Meddyliwch am y prawf rhydwytho fel prawf swyddogaethol o'r boblogaeth ficrobaidd, nid fel electrod rhad.

Mae disgrifiad Merck/MSD o ddiffyg traul syml mewn anifeiliaid cnoi cil yn gosod amser rhydwytho estynedig yn yr un patrwm â pH annormal y rwmen a niferoedd llai o brotosoa. Nid yw unrhyw werth unigol yn pennu'r diagnosis. Y patrwm sy'n gwneud hynny.

Gweithdrefn safonol wrth ochr yr anifail

Mae protocolau'n amrywio ychydig rhwng sefydliadau addysgu, felly cofnodwch yr union gyfeintiau a thymheredd rydych yn eu defnyddio a chymharwch ganlyniadau o fewn y protocol hwnnw'n unig. Dyma un fersiwn a addysgir yn eang:

Casglwch o leiaf 10 i 20 mL o hylif ffres y rwmen, gan leihau halogiad gan boer, cyswllt ag aer ac oeri gymaint â phosibl. Profwch yn brydlon.
Paratowch las methylen 0.03 y cant, sef 0.3 mg fesul mL.
Ychwanegwch liw sy'n cyfateb i 5 y cant o gyfaint yr hylif. Hynny yw, 1.0 mL o liw at 20 mL o hylif, neu 0.5 mL o liw at 10 mL o hylif. Mae'r ddau'n rhoi'r un gymhareb hylif i liw o 20 i 1.
Cadwch ail diwb o hylif heb ei drin o'r un sampl fel y rheolydd lliw.
Cymysgwch yn ysgafn, dechreuwch yr amserydd ar unwaith, a chadwch y tiwb yn agos at dymheredd y corff, tua 37 i 39 gradd Celsius yn ôl y protocol lleol.
Cofnodwch yr amser nes bod y tiwb prawf yn cyfateb i'r rheolydd. Gall cylch glas tenau barhau ar yr arwyneb sydd mewn cysylltiad â'r aer gan fod ocsigen yn ailocsidio'r lliw yno. Peidiwch ag aros i'r cylch hwnnw ddiflannu.

Mae cemeg rhydocs glas methylen yn esbonio pam mae ocsigen yn bwysig yma. Mae ysgwyd yn egniol, tiwb â cheg lydan agored, neu oedi hir yn gadael ocsigen i mewn ac yn cadw'r lliw yn las yn hwy nag y byddai'r rwmen ei hun. Mae manylion am dechneg casglu hylif y rwmen heb halogiad yn bwysig am yr un rheswm. Mae poer yn gwanhau'r sampl ac yn codi'r pH, felly wrth ddefnyddio tiwb stumog mae llawer o glinigwyr yn taflu'r gyfran gyntaf pan fo digon o hylif ar gael.

Beth mae gwahanol arsylwadau'n ei fesur

Dim ond un cwestiwn y mae amser rhydwytho'n ei ateb. Mae'r asesiad o'r rwmen isod yn dangos beth mae pob arsylwad wrth ochr yr anifail yn ei gyfrannu. Defnyddiwch y rhes gyfan, nid un gell.

Arsylwad	Beth mae'n ei fesur	Canfyddiad nodweddiadol wrth ochr yr anifail	Ffactorau drysu cyffredin
Amser rhydwytho glas methylen	Gweithgarwch rhydwythol swyddogaethol bacteria anaerobig yn y sampl	Yn aml 2 i 6 munud mewn gwartheg; yn aml yn gyflymach mewn defaid a geifr, gyda 6 munud yn cael ei ddefnyddio fel trothwy ymarferol ar gyfer gweithgarwch digonol ac amseroedd dros 10 munud yn amlwg annormal	Sampl oer, wedi'i gadael yn rhy hir, wedi'i hawyru, neu wedi'i gwanhau gan boer; ychydig o swbstrad ar ôl cyfnod hir o ddiffyg archwaeth; cyffuriau gwrthficrobaidd drwy'r geg; cymharu cymarebau lliw neu dymheredd gwahanol
pH y rwmen	Yr amgylchedd cemegol, llwyth asid neu alcali	Yn aml tua 6.0 i 7.2 mewn gwartheg sy'n cael porthiant bras; mae testunau ar anifeiliaid cnoi cil bach yn aml yn nodi tua 6.5 i 7.5; mae'r deiet a'r amser ers bwydo yn newid y gwerth	Mae halogiad gan boer yn codi'r pH mewn samplau o diwb stumog; colli carbon deuocsid ar ôl casglu; mae bwydo grawn yn gostwng y pH
Nifer a symudedd protosoa	Cyflwr y boblogaeth o organebau ciliedig, yn enwedig ffurfiau mawr sy'n sensitif i aflonyddwch	Llawer o organebau o sawl maint yn symud yn egniol i gyfeiriadau penodol mewn diferyn cynnes, ffres	Mae oeri'n arafu symudiad; gall asidosis difrifol ddileu protosoa; mae oedi'n gwneud i sampl arferol ymddangos yn swrth
Arogl, lliw a chysondeb	Nodweddion eplesu a halogiad	Hylif ychydig yn aromatig, yn frown gwyrddlas ac ychydig yn ludiog	Arogl pydredig neu sur gyda dysbiosis difrifol; hylif dyfrllyd neu â llawer o boer ynddo ar ôl casglu gwael
Cyfangiadau'r rwmen ac archwaeth	Gweithrediad y blaenstumog a chymeriant bwyd yr anifail cyfan	Cyfangiadau rheolaidd a chnoi cil cyson mewn anifail effro	Newid diweddar yn y dogn bwyd, poen, dadhydradiad, salwch systemig

Y tabl yw'r pwynt. Mae amser rhydwytho estynedig ynghyd â phrotosoa swrth, pH annormal a chyfangiadau gwan yn awgrymu bod gweithgarwch microbaidd yn wirioneddol isel. Mae amser estynedig ar ei ben ei hun mewn anifail effro sy'n cnoi cil ac sydd â phrotosoa egnïol yn awgrymu mai'r sampl yw'r broblem, nid y rwmen. Casglwch sampl arall cyn gweithredu.

Dehongli amser ynghyd â pH a hanes

Y deiet sy'n pennu'r llinell sylfaen. Mae dognau sy'n gyfoethog mewn dwysfwyd yn eplesu'n gyflym a gallant glirio'r lliw mewn tua munud, tra gall deietau gwair gymryd sawl munud, hyd yn oed mewn anifeiliaid iach. Felly nid yw amser byr ynddo'i hun yn profi gwell iechyd. Mae'n profi bod mwy o swbstrad y gellir ei eplesu wedi dod i gysylltiad â microbau gweithredol.

Mae gorlwytho difrifol â grawn yn torri'r duedd syml honno. Gall eplesu carbohydradau fod yn ddwys yn gynnar, yna mae niwed asid yn atal y fflora arferol a'r protosoa, ac mae'r amser rhydwytho'n ymestyn. Dyna pam mae un rheol addysgu'n nodi nad yw'r prawf yn ddilys pan fo pH y rwmen yn is na thua 5.5. Ar y pwynt hwnnw mae'r fflora sy'n cael ei brofi wedi newid.

Canllaw ymarferol i batrymau:

Mae pH arferol gyda rhydwytho o fewn tua 6 munud yn awgrymu fflora sy'n weithredol yn swyddogaethol.
Mae pH arferol gyda rhydwytho sydd wedi ymestyn yn sylweddol yn awgrymu anweithgarwch oherwydd diffyg archwaeth, effaith cyffur gwrthficrobaidd, neu sampl sydd wedi'i chyfaddawdu.
Mae pH uchel gyda rhydwytho estynedig yn aml yn dilyn cyfnod hir o ddiffyg archwaeth heb lawer o swbstrad, ond ystyriwch halogiad gan boer o'r tiwb.
Mae pH isel gyda llai o weithgarwch protosoa yn peri pryder am ddysbiosis sy'n gysylltiedig â charbohydradau. Mae canllawiau ar ddehongli pH y rwmen yn helpu yma. Mae gwerthoedd o dan 5.5 ynghyd â dirywiad systemig yn awgrymu gorlwytho â grawn ac asidosis difrifol yn hytrach na diffyg traul syml.

Cofnodwch bob amser ddefnydd diweddar o detrasyclinau drwy'r geg, ionofforau mewn porthiant, defnydd hir o gyffuriau gwrthficrobaidd systemig, newidiadau sydyn mewn dognau bwyd, hyd y cyfnod o ddiffyg archwaeth, a chymeriant dŵr. Mae llawlyfr MSD yn rhybuddio'n benodol y gall tetrasyclinau drwy'r geg leihau gweithgarwch microfflora'r rwmen yn sylweddol. Mae ionofforau'n newid poblogaethau bacteriol yn fwriadol. Heb yr hanes hwnnw, ni ellir dehongli amser estynedig.

Mae ansawdd samplu'n haeddu'r un pwyslais. Canfu gwaith dan reolaeth fod gan samplau o diwb stumog pH uwch a lefelau is o asidau brasterog anweddol na samplau o ganwla o'r un anifeiliaid, yn bennaf oherwydd poer. Roedd amser rhydwytho wedi ymestyn yn sylweddol erbyn 60 munud ar ôl casglu ar gyfer pob cyfaint a brofwyd, gyda'r effaith fwyaf ar samplau bach. Casglwch o leiaf 10 mL, profwch o fewn 30 munud, gwnewch y prawf rhydwytho'n gynnar, cadwch y sampl yn gynnes, a lleihewch gyswllt ag aer gymaint â phosibl.

Tri defnydd na ddylid eu cymysgu

Yr un lliw, tair system wahanol.

Yn gyntaf, y prawf hylif y rwmen a ddisgrifir yma. Y sbesimen yw hylif a gasglwyd o'r rwmen. Ychwanegir lliw in vitro ar 0.03 y cant. Y pwynt terfyn yw'r amser hyd at ddadliwio. Y diben yw asesu gweithgarwch rhydwythol microbaidd.

Yn ail, glas methylen a roddir i anifail cnoi cil byw. Yr enghraifft sefydledig yw therapi mewnwythiennol ar gyfer gwenwyndra nitrad neu nitraid gyda methemoglobinemia, lle mae'r cyffur yn adfer hemoglobin swyddogaethol. Mae rheolau ynghylch dos, fformiwleiddiad, gweddillion a chyfnodau cadw'n ôl yn berthnasol. Nid oes gan y penderfyniad hwnnw unrhyw beth i'w wneud â mesur amser mewn tiwb. Os defnyddir lliw fel olrheiniwr in vivo mewn gweithdrefn benodol, yr egwyddor yw i ble mae'r lliw'n teithio, nid pa mor gyflym y mae microbau'r rwmen yn ei rydwytho.

Yn drydydd, y prawf rhydwytho llaeth. Llaeth yw'r sbesimen. Ychwanegir lliw at y sampl llaeth. Yn gyffredinol, mae colli'r lliw glas yn gyflym yn dangos mwy o weithgarwch microbaidd ac ansawdd cadw gwaeth, tra bod rhydwytho araf yn dangos gwell ansawdd. Mae'n perthyn i ficrobioleg bwyd a phrofi ansawdd llaeth, nid meddygaeth y rwmen, ac nid yw'n gyfrif bacteriol.

Mae cadw'r enwau'n benodol yn atal camgymeriadau: amser rhydwytho hylif y rwmen, therapi systemig â glas methylen neu ddefnydd fel olrheiniwr, a'r prawf rhydwytho llaeth. Mae'r rheol ddiogelwch yn ffitio mewn un frawddeg. Mae'r lliw ar gyfer prawf y rwmen yn aros yn y tiwb labordy a chaiff y tiwb hwnnw ei waredu. Ni chaiff byth ei roi i'r anifail er mwyn gwneud y prawf.

Rheol gryno ar gyfer galwad o'r fferm

Safonwch y lliw ar 0.03 y cant ac 1 rhan o liw i 20 rhan o hylif, profwch hylif ffres yn agos at dymheredd y corff yn erbyn rheolydd heb ei drin, a dehonglwch y munudau ynghyd â pH, symudedd protosoa, ansawdd casglu, deiet, cyffuriau, cyfangiadau, archwaeth, carthion a hydradiad. Nid yw rhif ar ei ben ei hun byth yn rhoi diagnosis o ddiffyg traul. Mae patrwm cyson yn gwneud hynny.