A yw glas methylen yn achosi canser? Tystiolaeth tocsicoleg

Mae glas methylen wedi cynhyrchu arwyddion o diwmorau mewn arbrofion hirdymor ar anifeiliaid a chanlyniadau positif mewn sawl prawf labordy o niwed genetig. Mae'r canfyddiadau hynny'n haeddu sylw. Nid ydynt yn sefydlu'r tebygolrwydd y bydd person yn datblygu canser ar ôl amlygiad penodol.

Rhoddodd y gwerthusiad IARC a gyhoeddwyd yn 2016 las methylen yng Ngrŵp 3, sy'n golygu nad oedd modd dosbarthu ei garsinogenedd mewn pobl. Nid oedd gan y gweithgor unrhyw ddata canser dynol, a barnwyd bod y dystiolaeth o anifeiliaid yn gyfyngedig. Nid yw Grŵp 3 yn golygu ei fod wedi'i brofi'n ddiniwed. Yn yr un modd, nid yw canfyddiad mewn anifail yn gwneud pob amlygiad dynol yn achos canser sydd wedi'i ddangos.

Tri chwestiwn sydd angen atebion ar wahân

Mae carsinogenedd yn ymwneud â datblygiad tiwmorau. Gall astudiaeth hirdymor ar anifeiliaid ganfod patrymau tiwmorau ar ôl amlygiad diffiniedig. Mae genotocsigedd yn ymwneud â niwed i ddeunydd genetig neu ddigwyddiadau cellog cysylltiedig. Mae prawf treiglad positif yn darparu arwydd rhybudd, ond nid yw'n cyfrif canserau mewn pobl yn uniongyrchol. Mae risg i bobl yn ymwneud â'r tebygolrwydd o niwed o dan amodau amlygiad gwirioneddol.

Mae angen mesuriadau gwahanol ar y cwestiynau hyn. Nid yw cyfrif mwtantau bacteriol, archwilio celloedd gwaed llygod a gwneud diagnosis o diwmorau adeg necropsi yn fesurau canlyniad cyfnewidiol. Ac nid yw arbrawf triniaeth sy'n dangos bod sylwedd yn niweidio celloedd canser yn sefydlu a all amlygiad ailadroddus gychwyn tiwmorau mewn meinwe iach. Mae'r drafodaeth ar wahân am las methylen mewn ymchwil canser yn ymdrin â honiadau am driniaeth.

Cymharu astudiaethau: yr amlygiadau cronig gwirioneddol

Defnyddiodd yr arbrawf canolog trihydrad glas methylen, a roddwyd mewn methylcellwlos dyfrllyd 0.5% drwy gavage geneuol, sef rhoi swm wedi'i fesur drwy diwb i'r stumog. Roedd pob grŵp dos mewn astudiaeth gronig yn cynnwys 50 o wrywod a 50 o fenywod o bob rhywogaeth. Rhoddwyd y sylwedd bum diwrnod yr wythnos am ddwy flynedd, yn ôl adroddiad astudiaeth Auerbach a chydweithwyr.

Mae'r tabl yn cadw casgliadau'r NTP sy'n benodol i bob rhywogaeth. Mae'r symiau'n filigramau o'r deunydd a brofwyd fesul cilogram o bwysau corff yr anifail ar ddiwrnodau dosio, nid argymhellion i bobl. Derbyniodd yr anifeiliaid â dos sero y cyfrwng.

Model	Grwpiau dos, mg/kg	Llwybr a hyd	Casgliad NTP a chanfyddiad perthnasol
Llygod mawr F344/N gwrywaidd	0, 5, 25, 50	Gavage geneuol; pum diwrnod/wythnos; dwy flynedd	Peth tystiolaeth: cynyddodd adenomas celloedd ynysoedd pancreatig ac adenoma/carsinoma gyda'i gilydd.
Llygod mawr F344/N benywaidd	0, 5, 25, 50	Yr un amserlen	Dim tystiolaeth o weithgarwch carsinogenig o dan yr amodau hyn.
Llygod B6C3F1 gwrywaidd	0, 2.5, 12.5, 25	Gavage geneuol; pum diwrnod/wythnos; dwy flynedd	Peth tystiolaeth: cynyddodd carsinoma'r coluddyn bach ac adenoma/carsinoma gyda'i gilydd. Mae'n bosibl bod lymffoma malaen hefyd yn gysylltiedig.
Llygod B6C3F1 benywaidd	0, 2.5, 12.5, 25	Yr un amserlen	Tystiolaeth amwys: cynnydd ymylol mewn lymffoma malaen.

Mae “peth tystiolaeth” yn gategori NTP ar gyfer canfyddiad arbrofol positif sydd â llai o gryfder na “tystiolaeth glir”. Mae “amwys” yn disgrifio canfyddiad ansicr. Mae'r categorïau hyn yn mynegi cryfder y dystiolaeth, nid canran o risg na safle o ran pa mor gryf yw carsinogen.

Nid oedd canlyniad y llygod mawr gwrywaidd yn risiau a oedd yn codi'n gyson. Digwyddodd adenoma neu garsinoma ynysoedd pancreatig mewn 4/50 o'r rheolyddion ac mewn 9/50, 14/50 ac 8/50 o anifeiliaid wrth i'r dosau gynyddu. Mae'r papur cyhoeddedig yn adrodd arwyddocâd ystadegol ar gyfer y dos canol yn unig. Mae hyn yn gwneud naratif llinell syth syml yn anghywir; nid yw'n sefydlu bod y dos uchaf yn amddiffynnol. Tiwmor anfalaen yw adenoma, tra bod carsinoma yn falaen. Ni ddylid disgrifio mesur canlyniad cyfun fel petai pob tiwmor a gyfrifwyd yn ganser.

Pam mae crynodebau gwahanol yn swnio'n wrthgyferbyniol

Mae'r wybodaeth ragnodi gyfredol ar gyfer PROVAYBLUE yn adrodd canfyddiadau pancreatig y llygod mawr gwrywaidd ond yn disgrifio nad oedd unrhyw ganfyddiadau neoplastig cysylltiedig â'r cyffur mewn llygod. Mae'r papur ymchwil yn dweud nad oedd y cynnydd neoplastig mewn llygod yn ystadegol arwyddocaol, gan nodi tueddiadau positif ar yr un pryd. Serch hynny, neilltuodd NTP y categorïau llygod a ddangosir uchod.

Mae dadansoddiad IARC o'r astudiaeth anifeiliaid yn egluro gwahaniaeth ystadegol pwysig: roedd gan ganfyddiadau coluddol y llygod gwrywaidd dueddiadau dos arwyddocaol, ond nid oedd y grwpiau unigol a ddosiwyd yn arwyddocaol mewn cymariaethau pâr â'r rheolyddion. Mae profi patrwm cyffredinol ar draws dosau yn wahanol i brofi pob grŵp ar wahân. Dylai darllenwyr gadw'r ffynhonnell a'i geiriad yn hytrach na chywasgu'r holl ganfyddiadau hyn i naill ai “datblygodd llygod ganser” neu “roedd yr astudiaeth llygod yn negyddol”. Nid oes yr un ohonynt yn darparu cyfradd canser ddynol wedi'i mesur.

Cymharu astudiaethau: mesurau canlyniad niwed genetig

Mae adran tocsicoleg genetig Adroddiad Technegol NTP 540 yn disgrifio set wahanol o arbrofion. Cymysgedd labordy sy'n cynnwys ensymau'r afu ac a ddefnyddir i fodelu actifadu metabolaidd yw S9. Nid yw ei bresenoldeb yn troi prawf celloedd yn astudiaeth amlygiad corff cyfan.

System brawf	Amodau amlygiad gwirioneddol	Mesur canlyniad a chanlyniad
Profion treiglad bacteriol, ail lot a brofwyd	Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; gyda S9 afu llygod mawr a hebddo	Cynnydd mewn treigladau yn y straeniau a brofwyd.
Celloedd ofari bochdew Tsieineaidd mewn meithriniad	Roedd profion cyfnewid cromatid chwaer yn cynnwys 0.17–2.5 µg/mL heb S9, hyd at 5 µg/mL gyda S9; defnyddiodd profion annormaledd cromosom 4.7–22 µg/mL	Canlyniadau positif ar gyfer cyfnewid ac annormaledd cromosom.
Llygod gwrywaidd, arbrawf acíwt	Un pigiad mewnperitoneol: 25, 50 neu 150 mg/kg; samplau ar ôl 48 awr	Dim cynnydd mewn erythrocytau â microniwclews ym mêr yr esgyrn na'r gwaed.
Llygod gwrywaidd a benywaidd, arbrawf ailadroddus	Gavage geneuol: 25, 50, 100 neu 200 mg/kg; pum diwrnod/wythnos am dri mis	Dim cynnydd mewn erythrocytau â microniwclews yn y gwaed ymylol.

Corff niwclear ychwanegol bach yw microniwclews a all adlewyrchu toriad cromosom neu golli cromosom yn ystod rhaniad celloedd. Mae prawf celloedd gwaed negyddol yn ateb y cwestiwn penodol hwnnw yn y celloedd a samplwyd. Ni all eithrio pob math o niwed DNA ym mhob organ. I'r gwrthwyneb, nid yw prawf positif mewn celloedd wedi'u meithrin yn dweud wrthym pa grynodiad a gyrhaeddodd feinweoedd person.

Mae'r wybodaeth ragnodi hefyd yn cofnodi'r patrwm cyffredinol hwn: profion bacteriol a chelloedd wedi'u meithrin yn bositif, a phrofion microniwclews llygod yn negyddol. Mae galw glas methylen yn syml yn “genotocsig” neu'n “an-genotocsig” yn hepgor gwybodaeth sy'n bwysig i'r dehongliad.

Beth mae hyn yn ei olygu ar gyfer amlygiad dynol

Nid yw'r astudiaethau'n darparu trothwy dyddiol wedi'i ddilysu sy'n ddiogel o ran canser i bobl. Ni fyddai rhannu dos llygod mawr â ffactor pwysau corff yn datrys gwahaniaethau mewn amsugno, metaboledd, llwybr, amlder amlygiad na hyd gydol oes. Byddai'n cynhyrchu swm wedi'i drosi, nid prawf o ddiogelwch.

Mae arbrawf gavage dwy flynedd a thriniaeth fewnwythiennol fer dan oruchwyliaeth feddygol yn gofyn cwestiynau gwahanol. Mae'r gwahaniaeth hwnnw'n atal allosodiad rhifiadol uniongyrchol; nid yw'n dileu'r canfyddiadau mewn anifeiliaid. Mae asesiad defnyddiol yn dechrau gyda'r union gyfansoddyn a fformiwleiddiad, y swm, y llwybr, yr amlder, yr hyd a'r rheswm dros ei ddefnyddio. Mae “ychydig ddiferion” yn hepgor y crynodiad a'r cyfaint wedi'i fesur.

Os rhoddwyd glas methylen am reswm meddygol, ni all y canfyddiadau tiwmorau ar eu pen eu hunain benderfynu a oedd manteision y driniaeth honno'n drech na'i risgiau. Os ystyrir defnydd dewisol ailadroddus, ni ddylid disgrifio risg canser hirdymor sydd heb ei mesur fel sero. Ymdrinnir â materion mwy uniongyrchol, gan gynnwys rhyngweithiadau cyffuriau a thuedd i hemolysis, yn sgil-effeithiau a gwrtharwyddion.

I ddarllen ymhellach, defnyddiwch y llyfrgell ymchwil i wahaniaethu astudiaethau dynol oddi wrth arbrofion ar anifeiliaid a chelloedd. Y cwestiwn hanfodol ar gyfer pob papur yw pa amlygiad a brofwyd ganddo a pha ganlyniad a fesurwyd mewn gwirionedd.