EMB আগাৰত E. coli আৰু অন্যান্য কলনীৰ ৰূপ চিনাক্ত কৰা

এজন শিক্ষাৰ্থীয়ে ইঅ'চিন মিথিলিন ব্লু আগাৰত অজ্ঞাত নমুনা এটা ৰেখা টানি লগায়, ৰাতিটো ইনকিউবেট কৰে আৰু পিছদিনা সেউজীয়া জিলিকনিযুক্ত গাঢ় কলনীৰে ভৰা এখন প্লেট দেখে। টোকাবহীত লিখে, "E. coli, নিশ্চিত।" এই মন্তব্যই প্লেটখনে সমৰ্থন কৰিব পৰাতকৈ অধিক দাবী কৰে। প্লেটখনে নিৰ্দিষ্ট পৰিস্থিতিত বৃদ্ধি আৰু কিণ্বনৰ ফেন'টাইপ দেখুৱায়। প্ৰজাতিৰ পৰিচয় এক পৃথক দাবী, যাৰ বাবে পৃথক প্ৰমাণ লাগে।

এই নিৰ্দেশিকাত EMB আগাৰৰ ফলাফলক ব্যাখ্যা কৰিবলগীয়া বিষয় হিচাপে ধৰা হৈছে। ইয়াত অন্তৰ্নিহিত ধাৰণাটো বুজোৱা হৈছে, নিয়ন্ত্ৰণ নমুনাসহ উদাহৰণমূলক প্লেটৰ চিত্ৰসংকলন দিয়া হৈছে আৰু পাঠ্যপুথিৰ ছবি বিভ্ৰান্তিকৰ হ'ব পৰা পৰিস্থিতিবোৰ উল্লেখ কৰা হৈছে।

প্লেটখনৰ আঁৰৰ ধাৰণা

EMB আগাৰ নিৰ্বাচনমূলক আৰু পাৰ্থক্যসূচক দুয়োটাই। ইঅ'চিন Y আৰু মিথিলিন ব্লু ৰঞ্জকে বহুতো গ্ৰাম-পজিটিভ জীৱাণুৰ বৃদ্ধি দমন কৰে, সেয়ে এই মাধ্যমত গ্ৰাম-নেগেটিভ জীৱাণুৰ বৃদ্ধিয়ে সুবিধা পায়। একেবোৰ ৰঞ্জকে সূচক হিচাপেও কাম কৰে: কোনো জীৱাণুৱে উপলব্ধ শৰ্কৰাৰ কিণ্বন কৰি স্থানীয়ভাৱে যথেষ্ট অম্ল উৎপন্ন কৰিলে কলনীয়ে অধিক পৰিমাণে ৰঞ্জক গ্ৰহণ কৰে আৰু গাঢ় বেঙুনীয়াৰ পৰা নীলাভ ক'লা হয়। প্ৰবল অম্ল উৎপাদন হ'লে কলনীৰ পৃষ্ঠত ধাতৱ সেউজীয়া, কোণভেদে সলনি হোৱা জিলিকনি দেখা যাব পাৰে। ইঅ'চিন মিথিলিন ব্লু আগাৰ প্লেটৰ বাবে ASM-ৰ প্ৰট'কল-ত নিৰ্বাচন আৰু পাৰ্থক্য নিৰূপণৰ এই সমন্বয় বৰ্ণনা কৰা হৈছে আৰু পাঠদানৰ বাবে তুলনামূলক আলোকচিত্ৰ দিয়া হৈছে।

যিকোনো ফলাফল পঢ়াৰ আগতে এটা তথ্য গুৰুত্বপূৰ্ণ: কোনটো সংযুতি ব্যৱহাৰ কৰা হৈছে, সেয়া পৰীক্ষা কৰক। পুৰণি Holt Harris Teague সংযুতিত লেক্ট'জ আৰু চুক্ৰ'জ দুয়োটাই থাকে, কিন্তু Levine EMB-ত কেৱল লেক্ট'জ থাকে। লেক্ট'জৰ কিণ্বন নকৰাকৈ চুক্ৰ'জৰ কিণ্বন কৰা জীৱাণু, যেনে বহুতো Serratia marcescens পৃথকীকৃত নমুনা, এই দুয়োটা সংস্কৰণত বেলেগ দেখাব পাৰে। EMB মাধ্যমৰ নিৰ্মাতাৰ নথি-ত সংযুতিৰ এই পাৰ্থক্য স্পষ্টকৈ উল্লেখ কৰা হৈছে। ফলাফলৰ লগতে নিৰ্মাতা আৰু সংযুতিও টোকাবহীত লিখি ৰাখক।

প্ৰস্তুত কৰা কিন্তু বীজাণু সংযোজন নকৰা EMB আগাৰ সাধাৰণতে ৰঙচুৱা বাদামীৰ পৰা ৰঙচুৱা বেঙুনীয়া হয়; কেতিয়াবা সেউজীয়া আভা বা সূক্ষ্ম অধঃক্ষেপো থাকে। এই পটভূমিৰ ৰং বৃদ্ধি নহয়। প্ৰতিবাৰ ফলাফল পঢ়োঁতে বীজাণু সংযোজন নকৰা প্লেট বা নথিভুক্ত প্ৰাৰম্ভিক অৱস্থাৰ সৈতে তুলনা কৰক। পাঠদানৰ প্ৰট'কলত অন্য নিৰ্দেশ নাথাকিলে, 35 ৰ পৰা 37 C-ত বায়ৱীয় পৰিস্থিতিত প্ৰায় 18 ৰ পৰা 24 ঘণ্টা ইনকিউবেচনৰ পিছত প্ৰাথমিক প্লেটখন পঢ়ক। অধিক সময় ইনকিউবেচন কৰিলে কিণ্বনৰ ৰূপ সলনি হ'ব পাৰে।

প্লেটখন কেনেকৈ চাব

দুই ধৰণৰ পোহৰ ব্যৱহাৰ কৰক। প্ৰথমে প্ৰতিফলিত বা তিৰ্যক পোহৰত প্লেটখন পৰীক্ষা কৰি হেলনীয়া কৰক: ধাতৱ জিলিকনি কোণভেদে সলনি হয় আৰু চোৱাৰ কোণ অনুসৰি দেখা দিব বা নোহোৱা হ'ব পাৰে। তাৰ পিছত প্লেটৰ মাজেৰে পাৰ হোৱা পোহৰত কলনীৰ ৰং আৰু গাঢ় কেন্দ্ৰ পৰীক্ষা কৰক। ভালদৰে পৃথক হৈ থকা কলনী ব্যৱহাৰ কৰক, কাৰণ ঘনকৈ থকা আৰু ওচৰৰ কলনীবোৰে স্থানীয় অম্ল সঞ্চয় সলনি কৰে আৰু ৰং কম বা অধিক স্পষ্ট কৰি তুলিব পাৰে। ASM-ৰ ছবিসমূহ-এ এই কথা পোনপটীয়াকৈ দেখুৱায়: মিশ্ৰ কালচাৰত চাৰিওফালৰ জীৱাণুৱে অম্লীয় পৰিৱেশ সলনি কৰাৰ বাবে E. coli-ৰ প্ৰত্যাশিত জিলিকনি নোহোৱা হ'ব পাৰে।

অনুশীলনত সম্ভৱ হ'লেই নিয়ন্ত্ৰণ নমুনা অন্তৰ্ভুক্ত কৰক। পাঠদানত সাধাৰণতে ব্যৱহৃত এটা সমষ্টিত নীলাভ ক'লা ৰং আৰু ধাতৱ জিলিকনিৰ ফেন'টাইপৰ বাবে E. coli ATCC 25922, বৰ্ণহীন ফেন'টাইপৰ বাবে Salmonella Typhimurium ATCC 14028 বা Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853-ৰ দৰে কিণ্বন নকৰা জীৱাণু, আৰু বৃদ্ধি-দমনৰ নিয়ন্ত্ৰণ হিচাপে Enterococcus faecalis বা Staphylococcus aureus-ৰ দৰে গ্ৰাম-পজিটিভ জীৱাণু থাকে। এইবোৰ EMB মাধ্যমৰ মানক QC তালিকা-ত উল্লেখ কৰা হৈছে। পজিটিভ নিয়ন্ত্ৰণত জিলিকনি নাথাকিলে, অজ্ঞাত নমুনাটোক সন্দেহ কৰাৰ আগতে ইনকিউবেচন, কলনীৰ ঘনত্ব বা সংযুতিক সন্দেহ কৰক।

উদাহৰণমূলক প্লেটৰ চিত্ৰসংকলন

তলৰ প্লেটবোৰ তৈয়াৰ কৰা চিত্ৰ, প্ৰকৃত কালচাৰৰ আলোকচিত্ৰ নহয়। এইবোৰে বিচাৰিবলগীয়া ৰূপ দেখুৱায়, কোনো এটা ষ্ট্ৰেইনৰ সঠিক ৰঙৰ আভা নহয়। এইবোৰক ASM-ৰ তুলনামূলক আলোকচিত্ৰ আৰু শিক্ষণ পৰীক্ষাগাৰৰ প্ৰকৃত প্লেটৰ সৈতে তুলনা কৰক।

প্লেট 1: EMB আগাৰত Escherichia coli, প্ৰবল লেক্ট'জ কিণ্বনকাৰী

EMB আগাৰত E. coli সাধাৰণতে গাঢ় বেঙুনীয়াৰ পৰা নীলাভ ক'লা হয়; প্ৰায়ে গাঢ় কেন্দ্ৰ আৰু প্ৰবল অম্ল উৎপাদনৰ ফলত ধাতৱ সেউজীয়া জিলিকনি থাকে। এই জিলিকনিয়েই শিক্ষাৰ্থীয়ে বিচৰা বিখ্যাত লক্ষণ, কিন্তু ইয়াক সংজ্ঞা হিচাপে নহয়, সহায়ক প্ৰমাণ হিচাপে ধৰক। ষ্ট্ৰেইন, ইনকিউবেচনৰ সময়, কলনীৰ ঘনত্ব আৰু চোৱাৰ কোণ অনুসৰি জিলিকনিৰ তীব্ৰতা সলনি হয়। জিলিকনি নথকাটোৱে E. coli-ৰ উপস্থিতি নাকচ নকৰে, আৰু জিলিকনিবিহীন গাঢ় কলনীয়ে আন কেইবাটাও কিণ্বনকাৰীৰ সম্ভাৱনা সূচায়। পৰৱৰ্তী যিকোনো কামৰ বাবে ঘন কলনী থকা অংশৰ পৰা ফলাফল পঢ়াৰ সলনি ভালদৰে পৃথক হৈ থকা এটা কলনী বাছক।

প্লেট 2: EMB আগাৰত Klebsiella pneumoniae, শ্লেষ্মাসদৃশ কিণ্বনকাৰী

EMB আগাৰত Klebsiella pneumoniae-এ সাধাৰণতে গুলপীয়া বেঙুনীয়াৰ পৰা বাদামী বেঙুনীয়া আভাৰ ডাঙৰ, চিকমিকীয়া, শ্লেষ্মাসদৃশ কলনী গঠন কৰে। প্ৰায়ে গাঢ় কেন্দ্ৰ থাকে, কিন্তু সাধাৰণতে তীব্ৰ ধাতৱ জিলিকনি নাথাকে। Enterobacter-ৰ দৰে সম্পৰ্কিত কিণ্বনকাৰীৰ ক্ষেত্ৰতো একেধৰণৰ আকৃতি দেখা যায়। শ্লেষ্মাসদৃশ গঠন আৰু কলনীৰ আকাৰো ফলাফল পঢ়াৰ অংশ: সৰু আৰু সমতল গুলপীয়া কলনী এটাৰ ব্যাখ্যাগত গুৰুত্ব ডাঙৰ, গম্বুজাকৃতিৰ শ্লেষ্মাসদৃশ কলনী এটাতকৈ বেলেগ। E. coli-ৰ দৰে ইয়াতো প্লেটখনে কিণ্বনৰ এটা ফেন'টাইপৰ ইংগিত দিয়ে, আৰু প্ৰজাতিৰ নাম নিৰ্ধাৰণ কৰিবলৈ তলত বৰ্ণনা কৰা জৈৱৰাসায়নিক নিশ্চিতকৰণৰ প্ৰয়োজন।

প্লেট 3: EMB আগাৰত Salmonella আৰু অন্যান্য কিণ্বন নকৰা জীৱাণু, বৰ্ণহীন কলনী

EMB আগাৰত Salmonella আৰু Shigella তথা বহুতো Pseudomonas পৃথকীকৃত নমুনাসহ সম্পৰ্কিত লেক্ট'জৰ কিণ্বন নকৰা জীৱাণু সাধাৰণতে বৰ্ণহীনৰ পৰা অৰ্ধস্বচ্ছ বা পাতল এম্বাৰ ৰঙৰ কলনী হিচাপে বৃদ্ধি পায়। কিছুমান সংযুতি আৰু পৰিস্থিতিত সামান্য গুলপীয়া আভা দেখা যায়, সেয়ে পাতল গুলপীয়া কলনী এটাক স্বয়ংক্ৰিয়ভাৱে কিণ্বনকাৰী বুলি ধৰিব নোৱাৰি। EMB-এ Salmonella-ক Shigella বা অন্য কিণ্বন নকৰা জীৱাণুৰ পৰা পৃথক নকৰে; সেই পাৰ্থক্য পৰৱৰ্তী পৰীক্ষাৰে নিৰ্ধাৰণ কৰিব লাগে। লগতে মনত ৰাখিব যে E. coli-ৰ দৰে ধাতৱ জিলিকনিযুক্ত কলনী গঠন কৰা লেক্ট'জ-পজিটিভ Salmonella ষ্ট্ৰেইন নথিভুক্ত হৈছে। এখন প্লেটেই চূড়ান্ত সিদ্ধান্ত দিব নোৱাৰাৰ এইটোও এটা কাৰণ।

প্লেট 4: Serratia marcescens আৰু সংযুতিৰ বিভ্ৰান্তি

Serratia marcescens-ৰ বাবে পৃথক অংশ ৰখা হৈছে, কাৰণ শিক্ষাৰ্থীয়ে প্ৰায়ে ৰঙা কলনী আশা কৰে আৰু তাৰ পিছত প্লেটৰ ভুল ব্যাখ্যা কৰে। অধিকাংশ ক্লিনিকেল পৃথকীকৃত নমুনাই লেক্ট'জৰ কিণ্বন নকৰে, সেয়ে Levine EMB-ত সাধাৰণতে পাতলৰ পৰা সামান্য ৰঙীন দেখা যায়। বহুতো পৃথকীকৃত নমুনাই চুক্ৰ'জৰ কিণ্বন কৰে বাবে চুক্ৰ'জযুক্ত সংযুতিত অধিক গাঢ় বা অম্লৰ সৈতে অধিক সম্পৰ্কিত প্ৰতিক্ৰিয়া দেখা যাব পাৰে। 35 ৰ পৰা 37 C-ত পৰিচিত ৰঙা প্ৰডিজিঅ'চিন ৰঞ্জকো আশা নকৰিব; ইনকিউবেটৰৰ তাপমাত্ৰাত ৰঞ্জক উৎপাদন নিৰ্ভৰযোগ্য নহয়। প্ৰট'কলত EMB আগাৰত Serratia marcescens-ৰ কথা উল্লেখ থাকিলে, সেই মন্তব্যত কোনটো সংযুতি ধৰা হৈছে, সেয়া পৰীক্ষা কৰক। Serratia-ৰ বিপাকৰ এক পৰ্যালোচনা-ত এই বিভ্ৰান্তিৰ আঁৰৰ লেক্ট'জ-নেগেটিভ আৰু চুক্ৰ'জৰ ক্ষেত্ৰত পৰিৱৰ্তনশীল ৰূপৰ সাৰাংশ দিয়া হৈছে।

প্লেট 5: নিয়ন্ত্ৰণ নমুনা আৰু বৃদ্ধি দমন হোৱা জীৱাণু

Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus আৰু Bacillus-ৰ দৰে গ্ৰাম-পজিটিভ জীৱাণুৰ বৃদ্ধি সাধাৰণতে EMB আগাৰত ৰোধ হয় বা যথেষ্ট দমন হয়, যদিও সকলো ষ্ট্ৰেইনৰ ক্ষেত্ৰত এই ৰোধ সম্পূৰ্ণ নহয়। নিয়ন্ত্ৰণ নমুনাৰ এটা সমষ্টিয়ে ফলাফলৰ ব্যাখ্যাক যথাযথ কৰি ৰাখে: E. coli নিয়ন্ত্ৰণত নীলাভ ক'লা ৰং আৰু জিলিকনিসহ ভাল বৃদ্ধি দেখা যাব লাগে, কিণ্বন নকৰা জীৱাণুৰ নিয়ন্ত্ৰণত বৰ্ণহীন বৃদ্ধি দেখা যাব লাগে আৰু বৃদ্ধি-দমনৰ নিয়ন্ত্ৰণত অতি কম বৃদ্ধি বা একেবাৰে বৃদ্ধি নথকা দেখা যাব লাগে। বৃদ্ধি-দমনৰ নিয়ন্ত্ৰণত ভাল বৃদ্ধি হ'লে নিৰ্বাচনমূলক ধাপটো বিফল হৈছে, আৰু সেই বেচৰ আন সকলো ফলাফল সন্দেহজনক। ৰঞ্জন পদ্ধতিয়ে কালচাৰ মাধ্যমতকৈ বেলেগ প্ৰশ্নৰ উত্তৰ দিয়ে; পৰীক্ষাগাৰত স্লাইড ৰঞ্জনৰ বিষয়ে জানিবলৈ মিথিলিন ব্লু ৰঞ্জনৰ চিত্ৰসংকলন চাওক।

সীমা মনত ৰাখি তুলনা

বিভ্ৰান্তিকৰ ৰূপবোৰ তিনিটা বাক্যত সামৰি ক'ব পাৰি। গাঢ় মানেই E. coli নহয়, কাৰণ Klebsiella, Enterobacter আৰু অন্যান্য কিণ্বনকাৰীয়ে জিলিকনিবিহীন গাঢ় কেন্দ্ৰ গঠন কৰে। গুলপীয়া মানেই Klebsiella নহয়, কাৰণ মজলীয়া বা লেহেমীয়া কিণ্বনকাৰী আৰু কিণ্বন নকৰা বুলি সাধাৰণতে শ্ৰেণীভুক্ত কিছুমান জীৱাণুও গুলপীয়া বা পাতল বেঙুনীয়া দেখা যায়। জিলিকনি মানেই নিশ্চিত E. coli নহয়, কাৰণ অন্য প্ৰবল কিণ্বনকাৰীয়েও ইয়াক সৃষ্টি কৰিব পাৰে। পাঠদানৰ প্ৰট'কল আৰু ইয়াৰ মিশ্ৰ কালচাৰৰ চিত্ৰসমূহ-এ এই প্ৰতিটো সীমাবদ্ধতা দেখুৱায়।

নিশ্চিতকৰণৰ সীমা

EMB আগাৰে এটা ফেন'টাইপ দেখুৱায়, প্ৰজাতি নহয়। বেলেগ বেলেগ জীৱাণুৰ কলনীৰ ৰূপ একে হ'ব পাৰে, আৰু একেটা জীৱাণুৰ ৰূপো ষ্ট্ৰেইন, বয়স, কলনীৰ ঘনত্ব, সংযুতি আৰু ইনকিউবেচনৰ বাবে পাঠ্যপুথিৰ ছবিৰ পৰা পৃথক হ'ব পাৰে। সেইবাবেই শিক্ষণ আৰু ক্লিনিকেল কৰ্মপ্ৰবাহত EMB-ৰ কলনীৰ আকৃতিক প্ৰাথমিক অনুমানৰ ভিত্তি হিচাপে ধৰা হয়।

এজন শিক্ষাৰ্থীৰ বাবে যুক্তিসংগত কৰ্মপ্ৰবাহ হ'ল: পৃথক কলনীটোৰ বৰ্ণনা লিখক (আকাৰ, ৰং, কেন্দ্ৰ, তিৰ্যক পোহৰত জিলিকনি, শ্লেষ্মাসদৃশ বৈশিষ্ট্য), সংযুতি, ইনকিউবেচনৰ সময় আৰু তাপমাত্ৰা, লগতে নিয়ন্ত্ৰণ নমুনাৰ তথ্য লিপিবদ্ধ কৰক; তাৰ পিছত যিকোনো নিশ্চিতকৰণ পৰীক্ষাৰ আগতে ভালদৰে পৃথক হৈ থকা এটা কলনীৰ উপকালচাৰ কৰি বিশুদ্ধ কালচাৰ প্ৰস্তুত কৰক। পৰৱৰ্তী সাধাৰণ পৰীক্ষাৰ ভিতৰত প্ৰাথমিকভাৱে অনুমিত E. coli আৰু কলিফৰ্ম চিনাক্তকৰণৰ বাবে গ্ৰাম ৰঞ্জনৰ লগতে IMViC প্ৰতিক্ৰিয়া, আৰু আন্ত্ৰিক জীৱাণুৰ বাবে TSI বা KIA তথা জীৱাণু-নিৰ্দিষ্ট জৈৱৰাসায়নিক পৰীক্ষাৰ সমষ্টি থাকে। কামটোৰ প্ৰয়োজন অনুসৰি চিৰ'লজিকেল, MALDI TOF বা অন্য বৈধতা পৰীক্ষিত চিনাক্তকৰণ পদ্ধতিও ব্যৱহাৰ কৰা হয়। নিৰ্বাচনমূলক আৰু পাৰ্থক্যসূচক আন্ত্ৰিক মাধ্যমৰ মাজত EMB-ৰ স্থান বুজিবলৈ আন্ত্ৰিক কালচাৰ মাধ্যমৰ পৰিচয়মূলক আলোচনা আৰু গ্ৰাম ৰঞ্জনৰ পৰৱৰ্তী পৰীক্ষা চাওক। নীলা স্লাইড ৰঞ্জনে কি প্ৰমাণ কৰিব পাৰে আৰু কি নোৱাৰে, সেই সম্পৰ্কিত প্ৰশ্নৰ ক্ষেত্ৰত মিথিলিন ব্লু ৰঞ্জনৰ চিত্ৰসংকলন-এ একে নীতিৰে পৰ্যবেক্ষণ আৰু সিদ্ধান্তক পৃথক কৰি ৰাখে।

সিদ্ধান্তৰ আগতে পৰ্যবেক্ষণ লিখক। "24 ঘণ্টাত Levine EMB-ত চোৱাৰ কোণ অনুসৰি সলনি হোৱা সেউজীয়া জিলিকনিযুক্ত গাঢ় নীলাভ ক'লা কলনী, যি প্ৰবল লেক্ট'জ কিণ্বনৰ সৈতে সামঞ্জস্যপূৰ্ণ" বুলি লিখাটো যুক্তিসংগত। "E. coli, নিশ্চিত" বুলি লিখিবলৈ নিশ্চিতকৰণৰ সেই ধাপটোৰ প্ৰয়োজন, যিটো কেৱল প্লেটখনে পূৰণ কৰিব নোৱাৰে।