মিথিলিন ব্লুৰ পৰীক্ষাত প্ৰতিক্ৰিয়াশীল অক্সিজেন প্ৰজাতিৰ পৰিমাপ

দুটা পৰীক্ষাগাৰে এনে পৰীক্ষা চলায়, যাক দুয়োটাই মিথিলিন ব্লুৰ এণ্টিঅক্সিডেণ্ট পৰীক্ষা বুলি কয়। এটাই জনায় যে ৰঞ্জকটোৱে প্ৰতিক্ৰিয়াশীল অক্সিজেন প্ৰজাতি দমন কৰে। আনটোৱে জনায় যে ই সেইবোৰ উৎপন্ন কৰে। দুয়োটাই স্পষ্ট মাত্ৰা-সঁহাৰি বক্ৰ দেখুৱায়। দুয়োটাই আন্তৰিক। এই পাৰ্থক্যৰ কাৰণ প্ৰৱঞ্চনা বা অদক্ষতা নহয়। কাৰণটো হ’ল, দল দুটাই ভিন্ন পোহৰত ভিন্ন বস্তু জুখিছিল, ভিন্ন প্ৰশ্নৰ উত্তৰ দিয়া প্ৰোব ব্যৱহাৰ কৰিছিল, আৰু তাৰ পিছত দুয়োটা উত্তৰকে একেটা শব্দৰে বৰ্ণনা কৰিছিল: ROS।

মিথিলিন ব্লুক সঠিকভাৱে জোখা কঠিন, কাৰণ ই যি ৰাসায়নিক প্ৰক্ৰিয়া নিৰীক্ষণ কৰাৰ কথা, সেই প্ৰক্ৰিয়াত নিজেও অংশ লয়। আন্ধাৰত ই দাতা আৰু গ্ৰাহকৰ মাজত ইলেক্ট্ৰন আদান-প্ৰদান কৰি পুনৰ নিজৰ আৰম্ভণিৰ ৰূপলৈ ঘূৰি আহে, আৰু আকৌ চক্ৰটো চলাবলৈ সাজু হয়। পোহৰত ই আলোক-সংবেদক হৈ পৰে আৰু উত্তেজিত ট্ৰিপলেট অৱস্থাত উপনীত হয়। সেই অৱস্থাৰ পৰা ই অক্সিজেনলৈ শক্তি দি ছিংলেট অক্সিজেন সৃষ্টি কৰিব পাৰে, অথবা ইলেক্ট্ৰন স্থানান্তৰ কৰি ৰেডিকেল আৰু হাইড্ৰজেন পেৰক্সাইড সৃষ্টি কৰিব পাৰে। সেই ব্যৱস্থাত যোগ কৰা যিকোনো প্ৰোবক ৰঞ্জকটোৱে নিজেই জাৰিত, বিজাৰিত, বিবৰ্ণ বা আলোকীয়ভাৱে আচ্ছাদিত কৰিব পাৰে। সেয়ে যিকোনো ROS ফলাফলৰ ক্ষেত্ৰত প্ৰথম প্ৰশ্নটো কেতিয়াও সংখ্যাটো কিমান সেয়া নহয়। প্ৰশ্নটো হ’ল, পৰীক্ষাটোৱে প্ৰকৃততে কি ধৰা পেলায়, আৰু ৰঞ্জকটোৱে পৰীক্ষাটোৰ ওপৰত কি প্ৰভাৱ পেলায়।

Amplex Red: এটা মানাংকিত হাইড্ৰজেন পেৰক্সাইড পৰীক্ষা

সঠিকভাৱে প্ৰস্তুত কৰিলে মিথিলিন ব্লু আৰু Amplex Red-ৰ সংযোজন এই গৱেষণা-সাহিত্যত আটাইতকৈ যুক্তিসংগত যোৰ। ইয়াৰ ৰাসায়নিক প্ৰক্ৰিয়া নিৰ্দিষ্ট: হৰ্ছৰেডিছ পেৰক্সিডেজে হাইড্ৰজেন পেৰক্সাইড ব্যৱহাৰ কৰি Amplex ছাবষ্ট্ৰেটক প্ৰায় একৰ বিপৰীতে এক ষ্টইকিঅ’মেট্ৰিক অনুপাতত ৰেচ’ৰুফিন নামৰ এটা প্ৰতিদীপ্তিশীল উৎপাদলৈ জাৰিত কৰে। নমুনাৰ পেৰক্সাইড ডিটেক্টৰত প্ৰতিদীপ্তিৰ ৰূপ লয়। প্ৰচলিত ROS পৰিয়ালৰ আন কোনো সদস্যই এই বিক্ৰিয়া পোনপটীয়াকৈ ঘটাব নোৱাৰে।

ইয়াৰ নিৰ্ণায়ক সুবিধা হ’ল মানাংকন। এজন সতর্ক কৰ্মীয়ে একে বাফাৰ, একে পেৰক্সিডেজ আৰু ছাবষ্ট্ৰেটৰ ঘনত্ব, একে ইনকিউবেচন সময় আৰু একে আলোকীয় ছেটিংছত জ্ঞাত পেৰক্সাইড মানদণ্ড পৰীক্ষা কৰে, তাৰ পিছত সেই বক্ৰৰ ভিত্তিত নমুনাবোৰৰ মান নিৰ্ণয় কৰে। এই পদ্ধতিৰ ভিত্তি হিচাপে থকা পৃথক কৰা মগজুৰ মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ অধ্যয়নটোত লেখকসকলে ঠিক সেইটোৱেই কৰিছিল। প্ৰতিবাৰ পৰীক্ষাৰ শেষত তেওঁলোকে জ্ঞাত পৰিমাণৰ পেৰক্সাইড যোগ কৰিছিল, আৰু সংখ্যাবোৰ ইচ্ছামতে নিৰ্ধাৰিত প্ৰতিদীপ্তি এককত নহয়, প্ৰতি মিলিগ্ৰাম প্ৰ’টিনৰ বাবে প্ৰতি মিনিটত পিক’ম’ল হিচাপে হাৰত প্ৰকাশ কৰিছিল। এইদৰেই এটা জ্যোতি পৰিমাপলৈ ৰূপান্তৰিত হয়।

সেই অধ্যয়নৰ তিনিটা দিশ অনুসৰণযোগ্য। প্ৰথমতে, লেখকসকলে পেৰক্সাইড ধ্বংস কৰা কেটালেজৰ সহায়ত সংকেতটো যাচাই কৰিছিল। কেটালেজ যোগ কৰাৰ লগে লগে মিথিলিন ব্লুৱে সৃষ্টি কৰা প্ৰতিদীপ্তিৰ বৃদ্ধি বন্ধ হৈছিল। ইয়াৰ পৰা নিশ্চিত হৈছিল যে সংকেতটো পেৰক্সাইডৰ, কোনো আলোকীয় কৃত্ৰিম প্ৰভাৱৰ নহয়। দ্বিতীয়তে, তেওঁলোকে উত্তেজক ৰশ্মি শ্বাটাৰেৰে নিয়ন্ত্ৰণ কৰি আলোকৰ প্ৰভাৱ পোনপটীয়াকৈ পৰীক্ষা কৰিছিল, যাতে নমুনাই স্বাভাৱিক আলোক-মাত্ৰাৰ এক অষ্টমাংশহে পায়। তেতিয়া সংকেত মাত্ৰ ন শতাংশ কমিছিল। তেওঁলোকে জনোৱা পেৰক্সাইডৰ নব্বৈ শতাংশতকৈও অধিক অংশ পৰিমাপৰ পোহৰৰ পৰা স্বাধীন আছিল। তৃতীয়তে, তেওঁলোকে ইলেক্ট্ৰ’ডেৰে পেৰক্সাইড অপসাৰণ পৃথকভাৱে জুখি দেখিছিল যে ৰঞ্জকটোৱে উৎপাদন বঢ়োৱাৰ লগতে অপসাৰণো লেহেম কৰে। কেৱল নিট প্ৰতিদীপ্তি জনোৱা প্ৰোবে এই দুটা প্ৰভাৱক একেটা বুলি ধৰি ল’লেহেঁতেন।

তথাপি এই পৰীক্ষাত ভুল ফল দিয়াৰ সম্ভাৱনা থাকে, আৰু মিথিলিন ব্লুৱে তেনে কেইবাটাও পৰিস্থিতি সৃষ্টি কৰে। ৰেচ’ৰুফিনে যি ৰঙা বৰ্ণালীয় অঞ্চলত পোহৰ নিৰ্গত কৰে, ৰঞ্জকটোৱেও সেই অঞ্চলত ব্যাপকভাৱে পোহৰ শোষণ কৰে। সেয়ে ৰঞ্জকৰ ঘনত্ব বেছি হ’লে আভ্যন্তৰীণ ফিল্টাৰ প্ৰভাৱৰ জৰিয়তে নমুনাই নিজৰ সংকেত নিজেই ঢাকি পেলাব পাৰে। গতিকে মানদণ্ড নমুনাতো পৰীক্ষাৰ নমুনাৰ সমান ৰঞ্জক-ঘনত্ব থাকিব লাগে। Amplex Red নিজেও আলোক-জাৰিত হ’ব পাৰে, আৰু ইয়াৰ উৎপাদ ৰেচ’ৰুফিনে আলোক-ৰেডক্স চক্ৰত অংশ লৈ ছুপাৰঅক্সাইড আৰু পেৰক্সাইড সৃষ্টি কৰিব পাৰে। পৰীক্ষাত আলোক-সংবেদক এটাকো পোহৰ দিয়া হ’লে এই কথাটো অতি গুৰুত্বপূৰ্ণ হয়। ব্যৱহাৰিক সমাধান হ’ল, ৰঞ্জক আৰু প্ৰোবক একেলগে পোহৰ দিয়াৰ সলনি প্ৰথমে মিথিলিন ব্লুৰ নমুনাবোৰক পোহৰ দিয়া, তাৰ পিছত সেইবোৰৰ নিৰ্দিষ্ট অংশ Amplex বিকাৰকৰে আন্ধাৰত পৰীক্ষা কৰা। শেষত, ছুপাৰঅক্সাইড ডিছমিউটেজে Amplex সংকেত কেৱল দমন নকৰে: ছুপাৰঅক্সাইডক পেৰক্সাইডলৈ ৰূপান্তৰ কৰিলে সংকেত বাঢ়িব পাৰে। প্ৰতিদীপ্তি বৃদ্ধি কৰা SOD নিয়ন্ত্ৰণ পৰীক্ষা বিফল হোৱা নাই। ই ছুপাৰঅক্সাইডক বিক্ৰিয়া-শৃংখলৰ আগৰ ধাপৰ প্ৰজাতি হিচাপে চিনাক্ত কৰিছে।

DCFDA: এটা অনিৰ্দিষ্ট জাৰণ সূচক

মিথিলিন ব্লু আৰু DCFDA-ৰ যোৰেই অধিকাংশ বিভ্ৰান্তিৰ উৎস। DCFH-DA কোষৰ ভিতৰলৈ প্ৰৱেশ কৰোৱা এটা পূৰ্বসূৰী যৌগ। কোষৰ ভিতৰৰ এষ্টেৰেজে ইয়াৰ এচিটেট গোটবোৰ আঁতৰাই অপ্ৰতিদীপ্তিশীল DCFH সৃষ্টি কৰে, আৰু DCFH-ৰ জাৰণে প্ৰতিদীপ্তিশীল DCF উৎপন্ন কৰে। ইয়াক জাৰিত কৰিব পৰা পদাৰ্থৰ তালিকাখন দীঘল: হাইড্ৰক্সিল ৰেডিকেল, পেৰক্সিডেজ আৰু হিম মধ্যৱৰ্তী পদাৰ্থ, নাইট্ৰ’জেন ডাইঅক্সাইড, হাইপ’ক্ল’ৰাছ এচিড আৰু পেৰক্সিনাইট্ৰাইটৰ পৰা উৎপন্ন ৰেডিকেল। কেৱল হাইড্ৰজেন পেৰক্সাইডে ইয়াক কোনো ব্যৱহাৰযোগ্য হাৰত পোনপটীয়াকৈ জাৰিত নকৰে; পেৰক্সাইড-নিৰ্ভৰ প্ৰতিদীপ্তিৰ বাবে সাধাৰণতে বিক্ৰিয়া-শৃংখলত লোহা, হিম প্ৰ’টিন বা পেৰক্সিডেজ-সম্পৰ্কীয় ৰাসায়নিক প্ৰক্ৰিয়া লাগে।

প্ৰতিটো পদ্ধতি-বিৱৰণত উদ্ধৃত কৰা উচিত সমালোচনাটো আহিছে কল্যাণৰামন আৰু সহকৰ্মীসকলৰ প্ৰোব হিচাপে DCFH-ৰ বিশ্লেষণৰ পৰা। এই কাৰণতে DCFDA নাকচ কৰা মগজুৰ মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ অধ্যয়নটোত সেই বিশ্লেষণৰ সাৰাংশ দিয়া হৈছে। তেওঁলোকে দেখুৱাইছিল যে ৰঞ্জকটোৱে লাহে লাহে বিক্ৰিয়া কৰে, ইয়াৰ ষ্টইকিঅ’মেট্ৰি নিৰ্ধাৰিত নহয়, বৈধ মানাংকন নাই, আৰু ই ROS নোহোৱা যৌগৰ সৈতেও বিক্ৰিয়া কৰে। প্ৰোবটোৱে যিটো জোখে, সেইটোক বৃদ্ধি কৰেও: DCFH-ৰ এক-ইলেক্ট্ৰন জাৰণে এটা DCF ৰেডিকেল সৃষ্টি কৰে, যিয়ে অক্সিজেনৰ সৈতে বিক্ৰিয়া কৰি ছুপাৰঅক্সাইড উৎপন্ন কৰে। সেই ছুপাৰঅক্সাইডৰ ডিছমিউটেচনৰ ফলত অতিৰিক্ত পেৰক্সাইড সৃষ্টি হয়। অৰ্থাৎ, পৰিমাপ-পদ্ধতিটোৱে যি ৰাসায়নিক প্ৰক্ৰিয়াৰ ফল জনায়, তাৰ কিছু অংশ নিজেই সৃষ্টি কৰে।

এইবোৰৰ কোনো কথাই DCFDA-ক অকামিলা নকৰে। ইয়াক চিনাক্তকৰণৰ পদ্ধতি নহয়, এটা প্ৰাথমিক বাছনি-পৰীক্ষা হিচাপে প্ৰতিষ্ঠা কৰে। DCF প্ৰতিদীপ্তি বৃদ্ধি পোৱাৰ অৰ্থ হ’ল জাৰক-নিৰ্ভৰ প্ৰোব জাৰণ বৃদ্ধি পাইছে। ইয়াৰ অৰ্থ পেৰক্সাইড বৃদ্ধি পোৱা নহয়, আৰু নিশ্চয়কৈ মুঠ ROS বৃদ্ধি পোৱাও নহয়; কোনো এটা প্ৰোবেই সেই মুঠ পৰিমাণ জুখিব নোৱাৰে। মিথিলিন ব্লুৰ আগৰ যিবোৰ গৱেষণাই এক মাইক্ৰ’ম’লাৰতকৈ অধিক ঘনত্বত DCF জাৰণৰ ওপৰত নিৰ্ভৰ কৰিছিল, সেইবোৰে প্ৰ’অক্সিডেণ্ট প্ৰভাৱৰ কথা জনাইছিল। একে সময়ৰ আন ব্যৱস্থাবোৰত আকৌ পেৰক্সাইডে সৃষ্টি কৰা কোষ-মৃত্যুৰ পৰা সুৰক্ষাৰ কথা জনোৱা হৈছিল। ভিন্ন ৰেডক্স পৰিস্থিতিত একেটা ৰঞ্জকৰ ক্ষেত্ৰত দুয়োটা পৰ্যবেক্ষণ সত্য হ’ব পাৰে, আৰু কেৱল DCF-ৰ ফলাফলে কোন জাৰকে সংকেতটো সৃষ্টি কৰিছিল সেয়া ক’ব নোৱাৰে। আগৰ মগজুৰ মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ গৱেষণাৰ গুৰুত্ব ইয়াতেই যে ই এই বাছনি-পৰীক্ষাৰ সলনি এটা মানাংকিত পেৰক্সাইড পৰিমাপ ব্যৱহাৰ কৰি পেৰক্সাইডৰ বোজা পোনপটীয়াকৈ ধৰা পেলাইছিল: মাত্ৰ এশ নেন’ম’লাৰ ৰঞ্জকেও পৰীক্ষা কৰা প্ৰতিটো ছাবষ্ট্ৰেট আৰু শ্বসন অৱস্থাত পেৰক্সাইড নিৰ্গমন কেইবাগুণো বৃদ্ধি কৰিছিল।

DCFDA-ৰ সৈতে মিথিলিন ব্লু-নিৰ্দিষ্ট আৰু এটা ফান্দ আছে। ৰঞ্জকটো গাঢ় ৰঙৰ আৰু ৰেডক্স-সক্ৰিয়, সেয়ে ই প্ৰতিদীপ্তি বিবৰ্ণ কৰিব পাৰে, নিৰ্গত পোহৰ প্ৰশমিত কৰিব পাৰে, অথবা কোষীয় ROS-ৰ পৰা স্বাধীনভাৱে প্ৰোবৰ ৰাসায়নিক ব্যৱস্থাক জাৰিত কৰিব পাৰে। ৰঞ্জক আৰু প্ৰোব থকা, কিন্তু কোষ নথকা কোষবিহীন নিয়ন্ত্ৰণ পৰীক্ষা কেৱল ঐচ্ছিক সংযোজন নহয়। ৰঞ্জকটোৱে প্ৰোবৰ সৈতে পোনপটীয়াকৈ ক্ৰিয়া কৰে নে নকৰে, সেইটো জনোৱা পৰীক্ষাই এইটো।

স্পিন ট্ৰেপিং আৰু অক্সিজেন গ্ৰহণ: পৰিচয় আৰু প্ৰবাহ

প্ৰতিদীপ্তিশীল প্ৰোবে জাৰিত হ’ব পৰা কিবা এটা উপস্থিত হোৱা বুলি জনায়। তাৰ বিপৰীতে স্পিন ট্ৰেপৰ সৈতে ইলেক্ট্ৰন স্পিন ৰেজ’নেন্সে সেই বস্তুটো কি আছিল, তাৰ অধিক নিৰ্দিষ্ট উত্তৰ দিয়ে। মিথিলিন ব্লুৰ ধ্ৰুপদী আলোক-ৰসায়ন অধ্যয়নটোত ৰঞ্জক, এছক’ৰবেট আৰু পোহৰৰ পৰা এছক’ৰবেট ৰেডিকেল ধৰা পেলাবলৈ ESR ব্যৱহাৰ কৰা হৈছিল। তাৰ পিছত অক্সিজেন গ্ৰহণৰ পৰীক্ষাত পেৰক্সাইড গঠন আৰু স্পিন ট্ৰেপিং পৰীক্ষাত লোহাৰ অনুঘটনত হাইড্ৰক্সিল ৰেডিকেল গঠন দেখুওৱা হৈছিল। প্ৰতিটো প্ৰযুক্তিয়ে আনবোৰে উত্তৰ দিব নোৱাৰা প্ৰশ্নৰ উত্তৰ দিছিল: ESR-এ ৰেডিকেলৰ পৰিচয় দিছিল, অক্সিজেন গ্ৰহণে কোনো প্ৰতিদীপ্তিশীল প্ৰোবৰ ওপৰত নিৰ্ভৰ নকৰাকৈ বিক্ৰিয়াৰ প্ৰবাহ দেখুৱাইছিল, আৰু দুয়োটাৰ সংযোজনে একেটা আলোকিত ব্যৱস্থাত ছিংলেট অক্সিজেন আৰু ৰেডিকেল—দুয়োটা পথেই সক্ৰিয় থকা দেখুৱাইছিল।

1984 চনৰ সেই ফলাফল আজিও এটা সতৰ্কবাণীৰ দৰে। পোহৰ আৰু এটা বিজাৰক পদাৰ্থৰ উপস্থিতিত ৰঞ্জকটোৱে পেৰক্সাইড সৃষ্টি কৰিছিল, আৰু লোহা উপস্থিত থাকিলে ব্যৱস্থাটোৱে সেই গোটৰ আটাইতকৈ প্ৰতিক্ৰিয়াশীল প্ৰজাতি হাইড্ৰক্সিল ৰেডিকেল উৎপন্ন কৰিছিল। লেখকসকলে ইয়াক চকুত থকা এছক’ৰবেটৰ সৈতে সংযোগ কৰিছিল আৰু চকুত নিৰ্বিচাৰ ব্যৱহাৰক লৈ প্ৰশ্ন তুলিছিল। আধুনিক পাঠকে চৰ্তবোৰ মনত ৰাখিব লাগে: পোহৰ, বিজাৰক আৰু লোহা। এইবোৰৰ যিকোনো এটা আঁতৰালে পথটো দুৰ্বল হয় বা নোহোৱা হয়।

অক্সিজেন ইলেক্ট্ৰ’ডৰ গুৰুত্ব বেলেগ। ক্লাৰ্ক-প্ৰকাৰৰ ইলেক্ট্ৰ’ডে নিট অক্সিজেন ব্যয় জোখে। ইয়াৰ পৰা নিশ্চিত হয় যে ৰঞ্জক-চালিত ৰেডক্স প্ৰক্ৰিয়াই আণৱিক অক্সিজেন ব্যয় কৰিছে, আৰু ই এনে গতিবিদ্যাৰ তথ্য দিয়ে যাক কোনো প্ৰতিদীপ্তি-জনিত কৃত্ৰিম প্ৰভাৱে নকল কৰিব নোৱাৰে। কিন্তু ই উৎপাদ চিনাক্ত নকৰে। পেৰক্সাইড, ছুপাৰঅক্সাইড আৰু পানী গঠন, লগতে ছিংলেট অক্সিজেনৰ ক্ষয়—এই সকলোতে অক্সিজেন ব্যয় হয়। পৰিচয়বিহীন প্ৰবাহ যিমান অসম্পূৰ্ণ, প্ৰবাহবিহীন পৰিচয়ো সিমানেই অসম্পূৰ্ণ। সেইবাবেই শক্তিশালী গৱেষণা-পত্ৰবোৰে ইলেক্ট্ৰ’ডৰ সৈতে এটা মানাংকিত পেৰক্সাইড পৰীক্ষা বা এটা ট্ৰেপ ব্যৱহাৰ কৰে।

এণ্টিঅক্সিডেণ্ট ফলাফল কিয় পৰস্পৰবিৰোধী হয়

এই তিনিটা পৰিমাপৰ ফল কাষে কাষে ৰাখিলে মিথিলিন ব্লুৰ গৱেষণা-সাহিত্যৰ আপাত বিৰোধবোৰ পদ্ধতিৰ পাৰ্থক্য আৰু তিনিটা জৈৱিক তথ্যৰে বুজিব পৰা যায়।

প্ৰথমতে, ৰঞ্জকটো ইলেক্ট্ৰন পৰিবাহক আৰু পেৰক্সাইডৰ উৎস—দুয়োটাই। যিবোৰ শ্বসনস্থলত অক্সিজেন অন্যথা ছুপাৰঅক্সাইডলৈ পৰিণত হ’লহেঁতেন, সেইবোৰৰ পৰা ইলেক্ট্ৰন অন্য দিশলৈ নিয়াৰ জৰিয়তে ই এটা ROS কমাব পাৰে। একে সময়তে ইয়াৰ বিজাৰিত ৰূপে অক্সিজেনক পোনপটীয়াকৈ পেৰক্সাইডলৈ বিজাৰিত কৰি আন এটা ROS বঢ়াব পাৰে। সেয়ে মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ ৰেডক্স ৰসায়ন আৰু ইয়াৰ বিকল্প পথৰ ভূমিকা অধ্যয়ন কৰা পৰীক্ষাগাৰে প্ৰোব-নিৰ্ভৰ উত্তৰ আশা কৰা উচিত: একেটা কিউভেটত ছুপাৰঅক্সাইড-সংবেদনশীল সংকেত কমে, অথচ পেৰক্সাইডৰ সংকেত বাঢ়ে।

দ্বিতীয়তে, কম মাত্ৰাত পেৰক্সাইড কেৱল ক্ষতিৰ কাৰণ নহয়, এটা সংকেতো। আগৰ গৱেষণাৰ পিছত কৰা নিগনিৰ মগজুৰ মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ অধ্যয়নটোত মাত্ৰ পঞ্চাশ নেন’ম’লাৰ ৰঞ্জকৰ পৰাই পেৰক্সাইড উৎপন্ন হোৱা, অথচ চিকিৎসামূলক স্তৰত মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ DNA-ত ক্ষত নোহোৱা দেখা গৈছিল। লগতে পূৰ্ব-প্ৰয়োগৰ পিছত ৰ’টেন’নে সৃষ্টি কৰা ক্ষতৰ পৰা সুৰক্ষা দেখা গৈছিল। চিকিৎসামূলক পৰিসৰতকৈ বহু ওপৰৰ এশ মাইক্ৰ’ম’লাৰতহে ৰঞ্জকটোৱে নিৰ্বাচিত DNA খণ্ডৰ ক্ষতি কৰিছিল, আৰু ৰঙা পোহৰৰ সৈতে বিশ মাইক্ৰ’ম’লাৰ ৰঞ্জকে সৃষ্টি কৰা ছিংলেট অক্সিজেনে পৰীক্ষা কৰা সকলো খণ্ডৰ ক্ষতি কৰিছিল। প্ৰস্তাৱিত প্ৰক্ৰিয়াটো হৰ্মেটিক: মৃদু পেৰক্সাইড উৎপাদনে Nrf2-সংযুক্ত এণ্টিঅক্সিডেণ্ট প্ৰতিৰক্ষা আৰু মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ জৈৱসৃষ্টি সক্ৰিয় কৰে। সেয়ে দীৰ্ঘম্যাদী এণ্টিঅক্সিডেণ্ট ফলাফলৰ আগতে হ্ৰস্বম্যাদী প্ৰ’অক্সিডেণ্ট সংকেত দেখা যায়। এঘণ্টাৰ পিছত লোৱা পৰীক্ষাৰ ফল আৰু এদিনৰ পিছত লোৱা ফলৰ মাজত অমিল হ’ব পাৰে, কাৰণ এই সময়ৰ ভিতৰত জৈৱিক অৱস্থা সলনি হৈছে।

তৃতীয়তে, আনকি কোনটো অণু উপস্থিত থাকিব, সেয়াও পোহৰে নিৰ্ধাৰণ কৰে। পোহৰৰ প্ৰভাৱত ৰঞ্জকৰ ডিমিথাইলেচন হৈ Azure B আৰু আন সম্পৰ্কিত উৎপাদ সৃষ্টি হয়, আৰু পাত্ৰৰ ওপৰত থকা অণুবীক্ষণ যন্ত্ৰৰ লেম্পটোৱেই ইয়াক আলোক-সংবেদিত কৰিবলৈ যথেষ্ট। আন্ধাৰ আৰু পোহৰত কৰা পৰীক্ষা বেলেগ বেলেগ পৰীক্ষা, আৰু যিকোনো প্ৰট’কলৰ আলোক আৰু ৰঞ্জক পৰিচালনাৰ নিয়ন্ত্ৰণ অংশই সেইবোৰক তেনেদৰেই বিবেচনা কৰা উচিত।

ন্যূনতম নিয়ন্ত্ৰণ-পৰীক্ষাৰ সমষ্টি, আৰু যিকোনো দাবী কেনেকৈ পঢ়িব

তলৰ তুলনাখন এই প্ৰবন্ধৰ বাবে প্ৰস্তুত কৰা মৌলিক সন্দৰ্ভ-সমল। মিথিলিন ব্লুৰ যিকোনো ROS ফলাফল গ্ৰহণ কৰাৰ আগতে লেখকসকলে কোনটো শাৰীৰ পৰীক্ষা সম্পূৰ্ণ কৰিছে আৰু কোনটো বাদ দিছে, সেয়া পৰীক্ষা কৰক।

ইয়াৰ পৰা পঢ়াৰ এটা ব্যৱহাৰিক নিয়ম ওলায়। পেৰক্সিডেজসহ, মানাংকিত আৰু কেটালেজেৰে যাচাই কৰা Amplex পৰীক্ষাই পেৰক্সাইডৰ বিষয়ে প্ৰমাণ দিয়ে। DCFDA-ই অনিৰ্দিষ্ট প্ৰোব জাৰণৰ বিষয়ে প্ৰমাণ দিয়ে, ইয়াতকৈ বেছি একো নহয়। স্কেভেঞ্জাৰ নিয়ন্ত্ৰণসহ স্পিন ট্ৰেপিঙে ৰেডিকেলৰ পৰিচয়ৰ বিষয়ে প্ৰমাণ দিয়ে। অক্সিজেন গ্ৰহণে প্ৰবাহৰ বিষয়ে প্ৰমাণ দিয়ে। কোনো বাক্যই যদি নিজৰ পৰীক্ষাই সমৰ্থন কৰিব পৰাতকৈ অধিক দাবী কৰে, তেন্তে যিমানেই আত্মবিশ্বাসেৰে লিখা নহওক, সেই বাক্য ৰঞ্জকৰ বিষয়ে নহয়, প্ৰোবৰ বিষয়েহে। মাত্ৰা-নিৰ্ভৰতা আৰু হৰ্মেটিক পৰিসৰ, মাইট’কণ্ড্ৰিয়াৰ ইলেক্ট্ৰন প্ৰবাহ, ৰঞ্জিত নমুনাত পৰীক্ষাৰ হস্তক্ষেপ, আৰু অণুবীক্ষণৰ আলোক-জনিত কৃত্ৰিম প্ৰভাৱৰ সম্পৰ্কিত আলোচনাই এই প্ৰতিটো দিশ অধিক বিস্তাৰ কৰে। প্ৰতিটোৰ অস্থায়ী সন্দৰ্ভ প্ৰতিস্থাপন কৰাৰ পিছতো এই কথাবোৰ বৈধ হৈ থাকে।