মিথিলিন ব্লুৰে ইষ্টৰ পৰীক্ষা: জীৱিত কোষ গণনা বনাম শ্বসনৰ সময় জোখা

পৰীক্ষাগাৰৰ বেঞ্চত দুটা নলী আছে। দুয়োটাই নীলা। এটাত অণুবীক্ষণ যন্ত্ৰৰ তলত নীলা কোষ দেখা মানে মৃত ইষ্ট। আনটোত নলীটো নীলাৰ পৰা বৰ্ণহীন হোৱা মানে ইষ্ট জীৱিত আৰু শ্বসন কৰি আছে। একেই ৰঞ্জক, কিন্তু বিপৰীত অৰ্থৰ ফলাফল। পৰীক্ষা দুটা গুলিয়াই পেলালে প্ৰতিটো সিদ্ধান্ত ওলোটা হৈ যায়।

এই পাৰ্থক্যটোৱেই গোটেই লেখাটোৰ মূল কথা। মিথিলিন ব্লু এটা জাৰণ-বিজাৰণ ৰঞ্জক: জাৰিত অৱস্থাত ই নীলা, বিজাৰিত অৱস্থাত ই বৰ্ণহীন লিউকোমিথিলিন ব্লু। জীৱনক্ষমতা গণনাত এই ৰাসায়নিক বৈশিষ্ট্য ব্যৱহাৰ কৰি অণুবীক্ষণ যন্ত্ৰেৰে অতি কম সময়ৰ এটা দৃশ্য পৰ্যবেক্ষণ কৰা হয়। শ্বসন পৰীক্ষাত একে বৈশিষ্ট্য ব্যৱহাৰ কৰি সমগ্ৰ মিশ্ৰণৰ বিক্ৰিয়াৰ সময় জোখা হয়। প্ৰতিটোৰ বাবে নিজা পদ্ধতি, নিজা নিয়ন্ত্ৰণ আৰু নিজা সমালোচনামূলক বিচাৰ প্ৰয়োজন।

জীৱনক্ষমতা গণনা: চমু ৰঞ্জন, সোনকালে পৰ্যবেক্ষণ

বিয়েৰ প্ৰস্তুতকাৰী প্ৰতিষ্ঠানত ব্যৱহৃত পদ্ধতিটো আটাইতকৈ মানকীকৃত সংস্কৰণ। 2% ছডিয়াম চাইট্ৰেটত 0.01% w/v মিথিলিন ব্লু প্ৰস্তুত কৰক, ইষ্টৰ নিলম্বনৰ সৈতে 1:1 অনুপাতত মিহলাওক, আৰু এটা নিৰ্দিষ্ট চমু সময়ৰ পাছত মিশ্ৰণটো পৰীক্ষা কৰক। প্ৰকাশিত পদ্ধতিত এই সময় Brewing Science Institute-ৰ হাতপুথিত 1ৰ পৰা 2 মিনিট আৰু গৱেষণাৰ পদ্ধতিত প্ৰায় 5 মিনিটলৈকে ভিন্ন হয়; OIV-ৰ ৱাইন অণুজীৱবিজ্ঞান পদ্ধতিয়ে 10 মিনিটৰ ভিতৰত পৰীক্ষা কৰাৰ নিৰ্দেশ দিয়ে। গণনাৰ মিশ্ৰণত ৰঞ্জকৰ ঘনত্ব শেষত প্ৰায় 0.005% হয়। এটা উন্নত Neubauer গণনা-কক্ষত মিশ্ৰণ ভৰাই প্ৰায় 400x বিবৰ্ধনত গাঢ় নীলা কোষক জীৱনক্ষম নহয় আৰু ৰং নলগা কোষক জীৱনক্ষম বুলি শ্ৰেণীবদ্ধ কৰক। OIV পদ্ধতিত পাতল নীলা কোষক জীৱিত বুলি গণনা কৰা হয়; ইয়াৰ পৰাই তলত আলোচনা কৰা পৰ্যবেক্ষক-নিৰ্ভৰ বিচাৰৰ সমস্যাৰ আভাস পোৱা যায়।

কোষৰ ঘনত্ব গণনা-কক্ষৰ জ্যামিতিৰ পৰা নিৰ্ণয় কৰা হয়। কেন্দ্ৰীয় 1 mm বাহুৰ সম্পূৰ্ণ বৰ্গটো গণনা কৰিলে প্ৰতি mL-ত কোষৰ সংখ্যা হয় N পূৰণ লঘুকৰণ গুণক পূৰণ 10^4, য’ত N হৈছে সেই ক্ষেত্ৰত গণনা কৰা কোষৰ সংখ্যা; ASBC-ৰ ইষ্ট পদ্ধতিত এইদৰে উল্লেখ আছে। জীৱনক্ষমতাৰ হিচাপ অধিক সহজ: ৰং নলগা কোষৰ সংখ্যা মুঠ কোষৰ সংখ্যাৰে হৰণ কৰি 100ৰে পূৰণ কৰা হয়। FEMS-ৰ বিয়েৰ প্ৰস্তুতকাৰী প্ৰতিষ্ঠানৰ তুলনামূলক অধ্যয়ন আৰু OIV-ৰ পদ্ধতি অনুসৰি জীৱনক্ষমতাৰ অনুমানৰ বাবে প্ৰায় 400টা কোষ গণনা কৰক। একেটা সীমাৰেখাৰ নিয়ম ধাৰাবাহিকভাৱে ব্যৱহাৰ কৰক; উদাহৰণস্বৰূপে, তলৰ আৰু বাঁওফালৰ জালিকাৰ ৰেখাত থকা কোষ অন্তৰ্ভুক্ত কৰক আৰু ওপৰৰ আৰু সোঁফালৰ ৰেখাত থকা কোষ বাদ দিয়ক।

গণনা আৰম্ভ কৰাৰ আগতেই মুকুলৰ বাবে এটা নিয়ম নিৰ্ধাৰণ কৰিব লাগিব। এটা প্ৰচলিত নিয়ম অনুসৰি মুকুল মাতৃকোষৰ প্ৰায় আধা আকাৰৰ হ’লে তাক পৃথক কোষ হিচাপে গণনা কৰা হয়; তাতকৈ সৰু হ’লে মাতৃকোষৰ সৈতেই গণনা কৰা হয়। যি নিয়মেই বাছি লওক, প্ৰতিটো বৰ্গত সেইটো প্ৰয়োগ কৰক আৰু কাৰ্যপত্ৰত লিখি ৰাখক, যাতে পৰৱৰ্তী ব্যক্তিয়েও একে নিয়ম অনুসৰণ কৰে।

গণনাৰ কাৰ্যপত্ৰ (এইটো ছপা কৰক)

এই কাৰ্যপত্ৰ এই লেখাটোৰ বাবে মৌলিকভাৱে প্ৰস্তুত কৰা সামগ্ৰী। ইয়াক বহীত নকল কৰক বা প্ৰতিটো নমুনাৰ বাবে এটা ছপা কৰক।

Viability (%) = 100 x unstained / (unstained + dark blue). Total cells per mL = N x dilution factor x 10^4, য’ত N নিৰ্ধাৰিত গণনা-কক্ষৰ ক্ষেত্ৰৰ পৰা লোৱা হয়। ইয়াত Viability হৈছে জীৱনক্ষমতা, unstained হৈছে ৰং নলগা কোষৰ সংখ্যা, dark blue হৈছে গাঢ় নীলা কোষৰ সংখ্যা আৰু dilution factor হৈছে লঘুকৰণ গুণক। ফলাফলৰ কাষত ৰঞ্জনৰ সময় লিখি ৰাখক, কাৰণ সময়ৰ উল্লেখ নথকা জীৱনক্ষমতাৰ মান পুনৰুৎপাদনযোগ্য নহয়।

জীৱনক্ষমতাৰ মান কিয় সলনি হয়

সময় হৈছে প্ৰথম হস্তক্ষেপকাৰী প্ৰভাৱ, আৰু ই দুয়োফালেই প্ৰভাৱ পেলায়। বিপাকীয়ভাৱে সক্ৰিয় কোষে ৰঞ্জক বিজাৰণ কৰে; সেয়ে অতি সোনকালে পৰ্যবেক্ষণ কৰিলে জীৱিত কোষে বিজাৰণ সম্পূৰ্ণ কৰাৰ আগতেই ধৰা পৰিব পাৰে আৰু ভুলকৈ মৃত বুলি শ্ৰেণীবদ্ধ হ’ব পাৰে। কিন্তু দীৰ্ঘসময়ৰ সংস্পৰ্শ নিজেই বিষাক্ত আৰু ইয়াৰ ফলত প্ৰকৃততে ক্ষতিগ্ৰস্ত নীলা কোষ সৃষ্টি হয়, যিয়ে মৃত কোষৰ মিছা ৰঞ্জন-সংকেত দিয়ে। সেইবাবে পৰীক্ষাগাৰৰ এটা শিক্ষণ পদ্ধতিয়ে 5 মিনিটৰ ভিতৰত ফলাফল নিৰ্ধাৰণ কৰিবলৈ কয়; উইস্কনচিনৰ ইষ্ট শিক্ষণ পদ্ধতিত ইয়াৰ উল্লেখ আছে। সতৰ্ক সিদ্ধান্তটো হৈছে মিথিলিন ব্লুৰে ফলাফল নিৰ্ধাৰণ সময়-নিৰ্ভৰ; সেয়ে এটা চমু সময় নিৰ্ধাৰণ কৰি এটা শৃংখলাৰ সকলো নমুনাত একেই ৰাখক।

কম জীৱনক্ষমতাৰ নমুনাত দ্বিতীয় এটা পক্ষপাত থাকে। মানকীকৃত পদ্ধতিয়ে সতৰ্ক কৰে যে প্ৰায় 80%-ৰ তলত মিথিলিন ব্লুৱে প্ৰকৃত জীৱনক্ষমতা অধিক বুলি দেখুৱাব পাৰে, কাৰণ এতিয়াও ৰঞ্জক বিজাৰণ কৰিব পৰা কোষে প্ৰজননক্ষমতা অক্ষুণ্ণ ৰাখিবই লাগিব বুলি কথা নাই। বিয়েৰ প্ৰস্তুতি-সম্পৰ্কীয় সাহিত্যতো জীৱনক্ষমতা যথেষ্ট কমি গ’লে একে অবিশ্বস্ততাৰ কথা বৰ্ণনা কৰা হৈছে। মিথিলিন ব্লুক এটা দ্ৰুত আনুমানিক মূল্যায়ন হিচাপে গণ্য কৰক, আৰু কম জীৱনক্ষমতাৰ ওপৰত নিৰ্ভৰশীল গুৰুত্বপূৰ্ণ সিদ্ধান্ত, যেনে এটা কালচাৰ পুনৰ বিয়েৰ প্ৰস্তুতিত যোগ কৰা, প্লেটত কলনি গণনা বা পৰিপূৰক ৰঞ্জনৰ সহায়ত নিশ্চিত কৰক।

মেট্ৰিক্সৰ প্ৰভাৱ তৃতীয় স্থানত আহে। OIV পদ্ধতি প্ৰায় pH 4.6-ত চলোৱা হয় আৰু ইয়াত সতৰ্ক কৰা হৈছে যে প্ৰবল বাফাৰযুক্ত কম pH-ৰ নমুনাই ৰঞ্জকক সঠিকভাৱে কাম কৰিবলৈ নিদিয়ে। লগতে চেনিৰ ঘনত্ব 100 g/L-ৰ ওপৰত হ’লে এই পৰীক্ষা নকৰিবলৈ পৰামৰ্শ দিয়া হৈছে, কাৰণ তেনে অৱস্থাত কোষ বিভ্ৰান্তিকৰভাৱে পাতল নীলা দেখা যায়। ৰঞ্জনৰ pH-ৰ এটা পৰীক্ষামূলক তুলনাত পৰীক্ষিত পৰিসৰৰ ভিতৰত সংবেদনশীলতা যথেষ্ট সলনি হোৱা দেখা গৈছিল, যিটো pH-নিৰ্ভৰ মিথিলিন ব্লু পদ্ধতিৰ অধ্যয়নৰ সৈতে সামঞ্জস্যপূৰ্ণ। আৱৰ্জনা আন এটা পৃথক ফান্দ: অপৰিষ্কাৰ মেছত ৰং লগা কণাবোৰ মৃত কোষৰ দৰে দেখা যায় আৰু পৰ্যবেক্ষকভেদে ফলাফলৰ ভিন্নতা বৃদ্ধি কৰে।

সেই ভিন্নতা কেৱল ব্যক্তিগত অভিজ্ঞতাৰ কথা নহয়; ইয়াক পৰিমাণগতভাৱে জোখা হৈছে। FEMS-ৰ ইষ্টৰ তুলনামূলক অধ্যয়নত প্ৰকাশিত বিয়েৰ প্ৰস্তুতকাৰী প্ৰতিষ্ঠানৰ ছমহীয়া পৰীক্ষাত মিথিলিন ব্লুৰ দ্বৈত জোখৰ মানক বিচ্যুতি গড়ে 6.1% আছিল, আনহাতে অক্স’নল ফ্ল’ চাইট’মেট্ৰিৰ ক্ষেত্ৰত ই আছিল 0.2%; একেটা নমুনাত দুজন পৰ্যবেক্ষকৰ ফলাফলৰ মাজত 13 শতাংশ-বিন্দু পৰ্যন্ত পাৰ্থক্য দেখা গৈছিল। জীৱনক্ষমতা নিৰ্ণয়ৰ পদ্ধতিসমূহৰ 2023 চনৰ পৰিমাণগত তুলনাত ফ্লু’ৰেছেন্স অণুবীক্ষণ আৰু ফ্ল’ চাইট’মেট্ৰি যথেষ্ট অধিক নিখুঁত বুলি পোৱা গৈছিল, লগতে ফলাফল প্ৰজাতি আৰু মেট্ৰিক্সৰ ওপৰত নিৰ্ভৰ কৰে বুলিও দেখুওৱা হৈছিল। পেইণ্টিং আৰু কিৰছপ (PMID 24430080)-ৰ পদ্ধতিৰ ধ্ৰুপদী বৰ্ণনা এতিয়াও মূল তথ্যসূত্ৰ, আৰু ইষ্টৰ জীৱনক্ষমতা আৰু জীৱনীশক্তিৰ পৰীক্ষাসমূহৰ বিস্তৃত পৰ্যালোচনাই (PMID 25154541) মিথিলিন ব্লুক চূড়ান্ত পৰীক্ষাৰ পৰিৱৰ্তে পৰিপূৰক পৰীক্ষাৰ মাজত স্থান দিয়ে। ইয়াত ট্ৰাইপেন ব্লু স্বয়ংক্ৰিয়ভাৱে উন্নত বিকল্প নহয়: ই কোষাৱৰণৰ অখণ্ডতা হেৰোৱাৰ সংকেত দিয়ে, আনহাতে মিথিলিন ব্লুৱে ৰঞ্জক গ্ৰহণৰ লগতে বিজাৰণ কাৰ্যকলাপৰ সংকেত দিয়ে; সেয়ে চাপত থকা কোষ দুয়োটা ৰঞ্জকৰ অধীনত বেলেগকৈ শ্ৰেণীবদ্ধ হ’ব পাৰে।

শ্বসন পৰীক্ষা: নীলা ৰং হেৰোৱাৰ সময় জোখক

দ্বিতীয় পৰীক্ষাত অণুবীক্ষণ যন্ত্ৰৰে চোৱা নহয়। ইষ্ট, গ্লুক’জ আৰু লঘু মিথিলিন ব্লু এটা বন্ধ নলীত ভৰোৱা হয়, আৰু নীলা ৰং হেৰাবলৈ কিমান সময় লাগে সেয়া ঘড়ীৰে জোখা হয়। কোষে বিপাক চলাওঁতে বিজাৰণ ক্ষমতা বহন কৰা উপাদান সৃষ্টি কৰে, যিবোৰে নীলা ৰঞ্জকক বৰ্ণহীন ৰূপলৈ ৰূপান্তৰিত কৰে; আনহাতে দ্ৰৱীভূত অক্সিজেনে তাক পুনৰ জাৰিত কৰে। কোষে অক্সিজেনৰ পৰিমাণ কমাই অনাৰ পাছত সামগ্ৰিকভাৱে বিজাৰণৰ প্ৰভাৱ অধিক হয় আৰু নলীটো বৰ্ণহীন হয়। সেয়ে অন্তিম বিন্দুটোৱে শ্বসন, ৰঞ্জকৰ ঘনত্ব আৰু অক্সিজেনৰ উপলব্ধতাৰ মাজৰ ভাৰসাম্য প্ৰতিফলিত কৰে। ইয়াক মিথিলিন ব্লুৰ বিজাৰণ বা বিৱৰ্ণীকৰণৰ সময় হিচাপে প্ৰতিবেদন কৰা উচিত, আণৱিক অক্সিজেন ব্যৱহাৰৰ প্ৰত্যক্ষ হাৰ হিচাপে নহয়।

জীৱনক্ষমতা পৰীক্ষাতকৈ বহু বেছি লঘু ৰঞ্জক ব্যৱহাৰ কৰক, যাতে সময়টো সুবিধাজনক পৰিসৰৰ ভিতৰত থাকে। AQA-ৰ A level বাধ্যতামূলক ব্যৱহাৰিক পৰীক্ষাৰ হাতপুথিয়ে এইটো ভালদৰে মানকীকৰণ কৰিছে: প্ৰায় 30 C-লৈ গৰম কৰা প্ৰতি 100 mL পানীত 1 g গ্লুক’জ, ব্যৱহাৰৰ ঠিক আগতে যোগ কৰা 5 g শুকান ইষ্ট, আৰু 1% মূল দ্ৰৱণৰ 0.1 mL লঘু কৰি মুঠ 100 mL কৰি প্ৰস্তুত কৰা প্ৰায় 0.001% ব্যৱহাৰযোগ্য ৰঞ্জক দ্ৰৱণ। 2 mL ইষ্ট-গ্লুক’জ নিলম্বনৰ সৈতে 2 mL ব্যৱহাৰযোগ্য ৰঞ্জক দ্ৰৱণ মিহলাওক, পৰীক্ষাৰ উষ্ণতাত সাম্যাৱস্থালৈ আনক, এবাৰ 10 ছেকেণ্ড জোকাৰক, সময় জোখা আৰম্ভ কৰক আৰু পুনৰ নোজোকাৰিব। জোকাৰিলে অক্সিজেন পুনৰ সোমায় আৰু নলীটো আকৌ নীলা হয়; এইটোৱেই পদ্ধতিৰ পৰা সৃষ্টি হোৱা আটাইতকৈ ডাঙৰ কৃত্ৰিম প্ৰভাৱ। AQA-ই উল্লেখ কৰিছে যে এই প্ৰস্তুতি সাধাৰণতে 35 C-ত প্ৰায় 5 মিনিটৰ ভিতৰত বৰ্ণহীন হোৱা উচিত; পৰীক্ষামূলক গড় সময় আছিল 20 C-ত 275 s, 35 C-ত 128 s আৰু 45 C-ত 145 s। এইবোৰ এটা নিৰ্দিষ্ট পৰীক্ষা-ব্যৱস্থাৰ উদাহৰণ, সাৰ্বজনীন মানদণ্ড নহয়। নিয়ন্ত্ৰিত অৱস্থাত বিজাৰণৰ হাৰ আৰু বিপাকীয়ভাৱে সক্ৰিয় ইষ্টৰ মাজৰ পৰিমাণগত সম্পৰ্ক বিজাৰণ-সম্পৰ্কীয় বিশেষ অধ্যয়নে সমৰ্থন কৰে; ইয়াৰ ভিতৰত PMID 25773544 হিচাপে সূচীভুক্ত কাম আৰু Yeast (2014)-ত প্ৰকাশিত প্ৰক্ৰিয়াৰ অধ্যয়নো আছে।

সময়ভিত্তিক প্ৰদৰ্শন (মৌলিক সামগ্ৰী)

তলৰ তালিকাখন এই লেখাটোৰ বাবে প্ৰস্তুত কৰা এটা মৌলিক প্ৰদৰ্শন। ইয়াত ওপৰত বৰ্ণনা কৰা AQA-ধৰণৰ ব্যৱস্থা ব্যৱহাৰ কৰা হৈছে: 2 mL ইষ্ট-গ্লুক’জ মিশ্ৰণৰ সৈতে প্ৰায় 0.001%-ৰ 2 mL ব্যৱহাৰযোগ্য ৰঞ্জক দ্ৰৱণ, এবাৰ 10 ছেকেণ্ড জোকাৰণ, তাৰ পাছত লৰচৰ নকৰাকৈ ইনকিউবেচন। তথ্যসমূহ শিক্ষাৰ্থীৰ এটা দলে নথিভুক্ত কৰা উচিত আৰ্হিত দিয়া উদাহৰণমূলক জোখ; হাৰৰ সূচক হৈছে 1ক ছেকেণ্ডত জোখা বিৱৰ্ণীকৰণৰ সময়েৰে হৰণ কৰা মান। একে ধৰণৰ নলীৰে পৰীক্ষা চলাওক আৰু এই তথ্যসমূহৰ ঠাইত জোখা মান বহুৱাওক।

A, B আৰু C নলীৰ বাবে উষ্ণতাৰ বিপৰীতে হাৰৰ সূচক অংকন কৰক। বক্ৰৰেখা প্ৰথমে ওপৰলৈ যায়, তাৰ পাছত সমতল হয় বা তললৈ নামে; এয়া প্ৰত্যাশিত এনজাইমচালিত আৰ্হি, সৰলৰেখা নহয়। D, E আৰু F নলী সেই বক্ৰৰেখাৰ তথ্যবিন্দু নহয়। সেইবোৰেই বক্ৰৰেখাৰ অৰ্থ বুজিবলৈ সহায় কৰা নিয়ন্ত্ৰণ।

প্ৰতিটো পৰীক্ষাক অৰ্থপূৰ্ণ কৰা নিয়ন্ত্ৰণ

প্ৰতিটো শ্বসন পৰীক্ষাৰ সৈতে তিনিটা নিয়ন্ত্ৰণ লাগিব। উতলোৱা বা মাৰি পেলোৱা ইষ্ট, গ্লুক’জ আৰু ৰঞ্জকৰ মিশ্ৰণ নীলা হৈ থকা উচিত; ইয়াৰ দ্বাৰা প্ৰমাণ হয় যে দ্ৰুত বিজাৰণ জীৱিত কোষৰ বিপাকৰ ওপৰত নিৰ্ভৰ কৰে। অতিৰিক্ত গ্লুক’জ নিদিয়াকৈ জীৱিত ইষ্ট আৰু ৰঞ্জকৰ মিশ্ৰণ হৈছে ছাবষ্ট্ৰেট নিয়ন্ত্ৰণ; তথাপি লাহে লাহে বিৱৰ্ণীকৰণ আশা কৰিব পাৰি, কাৰণ ইষ্টে নিজৰ সঞ্চিত উপাদান ব্যৱহাৰ কৰে। ইষ্ট নথকা গ্লুক’জ আৰু ৰঞ্জকৰ মিশ্ৰণ হৈছে ৰাসায়নিক ব্লেংক; ই অত্যাৱশ্যকীয়, কাৰণ ক্ষাৰীয় অৱস্থাত গ্লুক’জে কোনো কোষ নথকাকৈও মিথিলিন ব্লু বিজাৰণ কৰিব পাৰে।

জীৱনক্ষমতা গণনাৰ বাবে আন ধৰণৰ নিয়ন্ত্ৰণ লাগে: পদ্ধতিৰ স্থিৰতা। একেই ৰঞ্জকৰ মূল দ্ৰৱণ, একেই মিশ্ৰণৰ অনুপাত, একেই ৰঞ্জনৰ সময়, একেই গণনা-কক্ষৰ ক্ষেত্ৰ, একেই মুকুল আৰু সীমাৰেখাৰ নিয়ম ব্যৱহাৰ কৰক আৰু সম্ভৱ হ’লে নমুনাৰ পৰিচয় নজনাকৈ গণনা কৰক। দুজন পৰ্যবেক্ষকৰ ফলাফলৰ মাজত দহ শতাংশ-বিন্দুৰ পাৰ্থক্য থাকিলে কাৰ্যপত্ৰই সাধাৰণতে কাৰণটো দেখুৱায়: বেলেগ সময়, নীলা বুলি গণ্য কৰাৰ বেলেগ সীমা, বা বেলেগ মুকুলৰ নিয়ম। ৰং লগা কোষ প্ৰস্তুত আৰু পৰ্যবেক্ষণ কৰাৰ কৌশলসমূহ বেক্টেৰিয়াৰ সৰল ৰঞ্জন পদ্ধতিৰ সৈতে জড়িত; আনহাতে বিভিন্ন নমুনাত এই ৰঞ্জকে কি চিহ্নিত কৰে তাৰ বিস্তৃত আলোচনা অণুবীক্ষণ ৰঞ্জন এটলাছত আছে। নীলা ৰঙৰ তীব্ৰতা পৰিমাণগতভাৱে জোখাৰ আঁৰৰ পদাৰ্থবিজ্ঞান বুজিবলৈ, চৰ্তসমূহ উল্লেখ কৰা শোষণৰ তথ্যসূত্ৰই ব্যাখ্যা কৰে কিয় প্ৰতিটো সহগৰ সৈতে তাৰ দ্ৰাৱক, pH আৰু ঘনত্বৰ চৰ্তসমূহো উল্লেখ কৰিব লাগিব।

প্ৰশ্ন অনুসৰি পৰীক্ষা বাছি লওক। এতিয়া কিমান কোষ জীৱিত আছে, সেয়া গণনাৰ প্ৰশ্ন; অণুবীক্ষণ যন্ত্ৰ আৰু কাৰ্যপত্ৰৰ সহায়ত তাৰ উত্তৰ দিয়া হয়। এই কালচাৰে কিমান সক্ৰিয়ভাৱে শ্বসন কৰি আছে, সেয়া বিক্ৰিয়াৰ গতিসম্পৰ্কীয় প্ৰশ্ন; ষ্টপৱাচ আৰু নিয়ন্ত্ৰিত নলীৰ সহায়ত তাৰ উত্তৰ দিয়া হয়। মিথিলিন ব্লু দুয়োটা কামতে ব্যৱহাৰ হয়, কিন্তু একে সময়তে একেটা নলীত কেতিয়াও নহয়।