ሜቲሊን ብሉ እና ናይትሪክ ኦክሳይድ፦ NOS፣ cGMP እና የደም ሥሮች ምልክት ልውውጥ

ጥያቄው ቀላል ይመስላል፦ ሜቲሊን ብሉ ናይትሪክ ኦክሳይድን ይገታል? በላቦራቶሪ ውስጥ መልሱ በአራት የተለያዩ ጥያቄዎች ይከፈላል፤ እያንዳንዳቸውም የተለየ የሙከራ ፈተና አላቸው። እነዚህን መደባለቅ፣ ስለ ሜቲሊን ብሉ እና ናይትሪክ ኦክሳይድ የሚጻፉ ጽሑፎች እርግጠኛ በሆነ ቃና ቢቀርቡም ግልጽ ያልሆኑበት ዋነኛ ምክንያት ነው።

የናይትሪክ ኦክሳይድ ምልክቱን አራት ማያያዣዎች ያሉት ሰንሰለት አድርገው ያስቡት። ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ እንዲሠራ የጂን መረጃ ወደ RNA ይገለበጣል። ኢንዛይሙ አርጊኒንን ወደ ናይትሪክ ኦክሳይድ ይቀይራል። ጋዙ ከሌላ ነገር ጋር ምላሽ ከመስጠቱ በፊት ወደ ዒላማው ይሰራጫል። የሚሟሟ ጓኒሌት ሳይክሌዝ ጋዙን ይለያል፣ ሳይክሊክ GMPም ያመነጫል። በእያንዳንዱ ማያያዣ ላይ የሜቲሊን ብሉ ተፅዕኖዎች በጥናቶች ታትመዋል፤ ሆኖም ማስረጃዎቹ ከተለያዩ የሙከራ ዝግጅቶች፣ የክምችት መጠኖች እና አይዞፎርሞች የመጡ ናቸው። በአንድ ማያያዣ ላይ የተገኘ ውጤት በሌላው ላይ እርምጃ መኖሩን አያረጋግጥም።

መደበኛው ሰንሰለት፣ በግልጽ አነጋገር

በደም ሥር ግድግዳ ውስጥ መደበኛው ቅደም ተከተል እንዲህ ነው። አንድ ማነቃቂያ በኢንዶቴሊያል ሕዋስ ላይ ይሠራል። eNOS ወይም NOS3 የሚባለው ኢንዶቴሊያል ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ አነስተኛና አጭር የናይትሪክ ኦክሳይድ ልቀት ያመነጫል። ጋዙ ወደ አጎራባቹ ለስላሳ ጡንቻ ሕዋስ ይሰራጫል፣ የሚሟሟ ጓኒሌት ሳይክሌዝ በሬዱክሽን ሁኔታ ያለውን ብረት የያዘ ሄም ይያያዛል፣ GTP ወደ ሳይክሊክ GMP የሚቀየርበትንም ሂደት ያፋጥናል። ሳይክሊክ GMP ፕሮቲን ኪኔዝ Gን ያነቃል፣ የካልሲየም አያያዝ ይለወጣል፣ ጡንቻውም ይለሳለሳል።

በተለየ መመልከት ያለበት ሁለተኛ ሰንሰለትም አለ። በኢንፌክሽን ጊዜ ወይም ሕዋሳት ለሳይቶካይኖች ሲጋለጡ፣ ሌላ ኢንዛይም ለማምረት የጂን መረጃን ይገለብጣሉ። ይህ በማነቃቂያ የሚመረት ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ፣ ወይም iNOS ሲሆን፣ NOS2 ተብሎም ይጠራል። ከeNOS የበለጠና ረዘም ላለ ጊዜ የሚቆይ የናይትሪክ ኦክሳይድ ፍሰት ያመነጫል። ሦስተኛው አይዞፎርም፣ የነርቭ ሕዋሳት NOS ወይም nNOS፣ ደግሞ የሌላ አውድ አካል ነው። አንድ ጥናት አይዞፎርሙን ሳይገልጽ ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ ሲል፣ ቆም ብለው የትኛው እንደተለካ ያረጋግጡ። ሜቲሊን ብሉ ኤሌክትሮኖችን እንዴት እንደሚያንቀሳቅስ የሚያብራራው አጠቃላይ ጽሑፍ፣ በአጠቃላይ ለሬዶክስ ዒላማዎችም ይህንኑ ነጥብ ያስገነዝባል፦ አስተላላፊው ብቻውን ምንም አያደርግም፤ ውጤቱን የሚወስነው በእያንዳንዱ ጫፍ ያለው አጋር ነው።

የተለካው ሳይክሊክ GMPም የተዋሃደ ውጤት አመልካች እንጂ፣ የኢንዛይም እንቅስቃሴ ቀጥተኛ ፈተና አይደለም። መጠኑ በሳይክሌዝ የሚመረተውን፣ በፎስፎዳይኤስተሬዞች የሚፈርሰውን በመቀነስ ያንጸባርቃል፤ በደም ሥሮች ለስላሳ ጡንቻ ውስጥ በተለይ PDE5 አስፈላጊ ነው። ስለዚህ የሳይክሊክ GMP መቀነስ ወደ ምልክቱን የሚለየው አካል የደረሰው ምልክት ያነሰ መሆኑን ያመለክታል። ብቻውን ግን የትኛው ማያያዣ እንደተበላሸ አይገልጽም።

ማያያዣ 1፦ ያነሰ የiNOS ኢንዛይም ይመረታል

በባክቴሪያ ሊፖፖሊሳካራይድ፣ በኢንተርፌሮን ጋማ ወይም በሁለቱም በተነቃቁ የአይጥ ማክሮፋጆች ውስጥ፣ ሜቲሊን ብሉ የiNOS ፕሮቲን ይኖራል ተብሎ የተጠበቀውን ጭማሪ አስቀርቷል። በማክሮፋጅ የጂን መረጃ መገልበጥ ሙከራዎች ውስጥም የiNOS መልእክተኛ RNAን በእጅጉ አፍኗል። ጠቃሚው ክፍል ግን ያልተለወጠው ነገር ነው። የአጋጁ I ካፓ B አልፋ መፍረስ፣ የNF ካፓ B እና STAT1 ፎስፎሪሌሽን፣ እንዲሁም እነዚህ ፋክተሮች ወደ ሕዋስ ኒውክሊየስ መግባታቸው በአብዛኛው ሳይለወጡ ቀርተዋል። የቀነሰው ከDNA ጋር የሚያደርጉት ትስስር ነው፤ ይህም በiNOS ፕሮሞተር ላይ ያላቸው መያዣ መቀነሱን ባሳየ የክሮማቲን ኢሚውኖፕሪሲፒቴሽን ፈተና ተረጋግጧል።

ይህ የኢንዛይሙን ብዛት ከሚወስነው ደረጃ በፊት የሚፈጠር የጂን ቁጥጥር ተፅዕኖ እንጂ፣ ቀድሞ ያለን ኢንዛይም በአጭር ጊዜ በቀጥታ መግታት አይደለም። የጂን መረጃ መገልበጥ ፋክተሮች ፕሮቲን ከመፈጠሩ በፊት ከፕሮሞተር ጋር መያያዝ በሚኖርባቸው የእብጠት ምልክት ልውውጥ ሂደቶች ውስጥ ይካተታል። በእረፍት ሁኔታ ባለ የደም ሥር ውስጥ ስለሚገኘው በመደበኛነት የሚመረት eNOS በቀጥታ ምንም አይናገርም፤ ስለዚህም በዚህ ወሰን ውስጥ መገለጽ አለበት።

ማያያዣ 2፦ ቀድሞ ያለው የNOS ኢንዛይም በዝግታ ይሠራል

በአይጦች ላይ የተደረገ አንድ ጥናት ሌላ ደረጃን ፈትኗል። ንቃተ ህሊና ያላቸው ወንድ አይጦች ሊፖፖሊሳካራይድ በደም ሥር ተሰጣቸው፤ ከሦስት ሰዓት በኋላ ደግሞ የጨው መፍትሄ ወይም ሜቲሊን ብሉ በ3 mg per kg በደም ሥር ተሰጣቸው። በየሃይፖታላመስ NOS እንቅስቃሴ ጥናት ውስጥ፣ በሃይፖታላመስ መካከለኛ ታችኛው ክፍል ያለው የናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ እንቅስቃሴ፣ ምልክት የተደረገበት አርጊኒን ወደ ሲትሩሊን በሚቀየርበት መጠን ተለካ። ጭንቀት ከጨው መፍትሄ ጋር ብቻ በካልሲየም ላይ ያልተመሠረተ የተወሰነ እንቅስቃሴ አነሳ፤ ሊፖፖሊሳካራይድም እስከ ቁጥጥር ቡድኑ ደረጃ በግምት አሥር እጥፍ አሳደገው። ሜቲሊን ብሉ በማነቃቂያ የተፈጠሩትን ሁለቱንም ክፍሎች አስወገደ። በዚያ ሕብረ ሕዋስ፣ በዚያ መጠን እና በዚያ የጊዜ ነጥብ፣ በካልሲየም ላይ የተመሠረተው በመደበኛነት ያለ እንቅስቃሴ አልተለወጠም።

ይህን ውጤት እንደተጻፈው ብቻ ይረዱት፦ በእነዚያ ሁኔታዎች የተለካውን የiNOS ዓይነት እንቅስቃሴ አፍኗል። የጂን መገለጥ ልኬት አይደለም፤ እንዲሁም ከeNOS ወይም nNOS ይልቅ iNOSን ሁልጊዜ በመምረጥ እንደሚገታ ማስረጃ አይደለም። በተጣራ ኢንዛይም ላይ የተደረጉ ጥናቶች ይህን ጥንቃቄ የበለጠ ያጠናክራሉ። በተጣራ NOS እና ጓኒሌት ሳይክሌዝ ንጽጽር እንደተዘገበው፣ የተጣራ ናይትሪክ ኦክሳይድ ሲንቴዝ በቀጥታ ሲፈተን፣ ሜቲሊን ብሉ በ30 micromolar የሲትሩሊን መፈጠርን ሙሉ በሙሉ ገትቷል። ግማሽ እንቅስቃሴውን የሚገታበት የክምችት መጠን፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙቴዝ በሌለበት በ5.3 micromolar አካባቢ፣ ባለበት ደግሞ 9.2 micromolar ነበር። በተጣራ nNOS ላይ የተደረገ ሌላ ጥናት፣ ከኢንዛይሙ ጋር የተያያዘው ሄም ኦክሲዴሽን በሂደቱ እንደሚሳተፍ ጠቁሟል። ተግባራዊው ትምህርት፣ በተነጠሉ ሥርዓቶች ውስጥ NOSን በቀጥታ መግታት እውነት መሆኑ ነው። ሆኖም የሃይፖታላመስ ውጤቱን በመዘርጋት፣ ሜቲሊን ብሉ በሁሉም ቦታ ያሉ በመደበኛነት የሚመረቱ NOS ዓይነቶችን አይገታም የሚል አጠቃላይ ድምዳሜ ማውጣት አይቻልም።

ማያያዣ 3፦ ናይትሪክ ኦክሳይድ ከመድረሱ በፊት ይጠፋል

ከኢንዛይም መገታት ውጭ ያለ ሂደት የሳይክሊክ GMP መቀነስን ሊያብራራ እንደሚችል የሚያሳየው እጅግ ግልጽ ማስረጃ፣ በባህል ውስጥ ካደጉ የጥንቸል የሳንባ ደም ወሳጅ ሥር ለስላሳ ጡንቻ ሕዋሳት መጥቷል። የሙከራው ንድፍ የናይትሪክ ኦክሳይድ ለጋሾችን በቀጥታ በመጨመር፣ በሕዋሱ ውስጥ ያለውን NOS ሙሉ በሙሉ አልፎ ሄደ። ከዚያም በየደም ሥር ለስላሳ ጡንቻ ሱፐርኦክሳይድ ጥናት ውስጥ፣ ሜቲሊን ብሉ የሳይክሊክ GMP ምላሹን አሁንም ያፍን እንደሆነ ተፈተነ።

ሦስት ለጋሾች ከ1 እስከ 100 micromolar ተፈትነዋል፦ S ናይትሮሶ L ሲስቴይን፣ ሶዲየም ናይትሮፕሩሳይድ እና MPANO የሚባል፣ የአሚን ቡድኑ የተወገደ የተረጋጋ ተመሳሳይ ውህድ። ሁሉም ሳይክሊክ GMPን በግምት ከ1.5 እጥፍ እስከ 12 እጥፍ አሳድገዋል። ሜቲሊን ብሉ በ10 micromolar የመጀመሪያዎቹን ሁለት ምላሾች ከ51 እስከ 100 በመቶ ገትቷል፤ የMPANO ምላሽን ግን ሳይለውጥ ትቶታል። ሜቲሊን ብሉ የሳይክሌዝን የካታሊሲስ ቦታ ብቻ እየገታ ቢሆን ኖሮ፣ ይህን በለጋሾቹ መካከል የሚታይ መራጭነት ማብራራት አስቸጋሪ ይሆን ነበር፤ ምክንያቱም ሦስቱም በቀጣዩ ደረጃ በአንድ ዓይነት ኢንዛይም ላይ ይገናኛሉ።

ከዚያ ሦስት የቁጥጥር ሙከራዎች የአሠራር መንገዱን ከሱፐርኦክሳይድ ጋር አገናኙት። በመጀመሪያ፣ ዛንቲን እና ዛንቲን ኦክሲዴዝን በመጠቀም ከሕዋስ ውጭ ሱፐርኦክሳይድ ማመንጨት ያንኑ የውጤት ንድፍ ደግሞ አሳየ፦ የCYSNO እና የናይትሮፕሩሳይድ ምላሾች ተገቱ፣ የMPANO ግን አልተገታም። ሁለተኛ፣ ሜቲሊን ብሉ በመጠንና በጊዜ ላይ የተመሠረተ የሱፐርኦክሳይድ ምርት ከለስላሳ ጡንቻ ሕዋሳቱ እንዲወጣ አደረገ፤ ይህም በሳይቶክሮም c ሬዱክሽን ተለካ። ሦስተኛ፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙቴዝ መገታቱን ሙሉ በሙሉ አስቀረ፣ ካታሌዝ ግን አላስቀረም። ይህም በዚያ የሙከራ ዝግጅት ውስጥ ተፅዕኖውን በቀጥታ የሚያስከትለው ኬሚካላዊ ዝርያ ከሃይድሮጂን ፔሮክሳይድ ይልቅ ሱፐርኦክሳይድ መሆኑን ይጠቁማል።

ሁለቱን የሕዋስ ዓይነቶች በጋራ በማሳደግ የተደረገውን የሙከራ ስሪት መግለጽ ጠቃሚ ነው፤ ምክንያቱም ተፅዕኖው የሚፈጠርበትን ቦታ ይለያል። በቀጭን የመሸፈኛ መስታወቶች ላይ ያሉ ኢንዶቴሊያል ሕዋሳት ከለስላሳ ጡንቻ ሕዋሳት ጋር ለአጭር ጊዜ በጋራ አደጉ። በዚህም በመሠረታዊ ሁኔታ የሚለቀቀው ኢንዶቴሊያል ፋክተር፣ የለስላሳ ጡንቻውን ሳይክሊክ GMP ከሦስት እስከ ስምንት እጥፍ አሳደገ። ከሁለቱ የሕዋስ ክፍሎች አንዱን ቀድሞ በሜቲሊን ብሉ ማከም ያንን ምልክት ቀነሰው፤ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙቴዝም ኢንዶቴሊያል ሕዋሳቱን ቀድሞ ከማከም የመጣውን ተፅዕኖ በከፊል መለሰው። በሌላ አነጋገር፣ ሜቲሊን ብሉ ምልክቱን በሚለየው ለስላሳ ጡንቻ ሕዋስ ውስጥ መሥራት አያስፈልገውም። መልእክተኛውን በመንገድ ላይ በማስወገድ ምልክቱን ሊቀንስ ይችላል። የሜቲሊን ብሉ ምርምርን ለማንበብ የተዘጋጀው መመሪያ ይህን እንደ አጠቃላይ መርህ ይወስደዋል፦ ሞለኪውላዊ ዒላማውን ከመጥቀስዎ በፊት፣ ጣልቃ ገብነቱ የተደረገበትን ክፍል ይግለጹ።

ይህን NOSን መግታት ብሎ መጥራት ስህተት ይሆናል። ለጋሾቹ እንዲሠሩ የሲንቴዝ ደረጃ አላስፈለገም፤ ሆኖም ምልክቱ አሁንም ቀንሷል።

ማያያዣ 4፦ ምልክቱን የሚለየው አካል ራሱ ያነሰ ምላሽ ይሰጣል

በሚሟሟ ጓኒሌት ሳይክሌዝ ላይ ቀጥተኛ ተፅዕኖዎች አሉ፤ የክምችት መጠኖቹ ግን አስፈላጊ ናቸው። ከላይ በተጠቀሰው የተጣራ ኢንዛይም ንጽጽር፣ በናይትሪክ ኦክሳይድ የተነቃቃውን ሳይክሌዝ ግማሽ እንቅስቃሴ ለመግታት በግምት 60 micromolar ሜቲሊን ብሉ አስፈልጓል። ይህም የNOS ግማሽ እንቅስቃሴ ከተገታበት ከ5 እስከ 9 micromolar አካባቢ ጋር ይነጻጸራል። 1 millimolar እንኳን ቢሆን፣ በከፍተኛው የመግታት ደረጃ ላይ ያመጣው ከፊል መገታት ብቻ ነበር። ይህ በግምት ከስድስት እስከ አሥራ አንድ እጥፍ ልዩነት ነው። ስለዚህ በዝቅተኛ micromolar መጠን ሳይክሊክ GMPን የሚቀንስ የሕዋስ ሙከራ፣ በሳይክሊክ GMP ቁጥሩ ብቻ ተመሥርቶ ሳይክሌዝን በመምረጥ መግታት ተብሎ ሊገለጽ አይችልም።

በኋላ የተደረገ የሬዶክስ ጥናት ሁለተኛ የጥንቃቄ ነጥብ ጨምሯል፦ ሜቲሊን ብሉ፣ በናይትሪክ ኦክሳይድ የተነቃቃውን ሳይክሌዝ፣ የሄም ብረት በአየር ከሚደረግበት ቀላል ኦክሲዴሽን በተለየ የአሠራር መንገድ አቦዝኖታል። ስለዚህ ምልክቱን የሚለየው አካል ሊዳከም ይችላል፤ ኬሚካላዊ ሂደቱ ግን ገና በሙሉ አልተወሰነም። የክምችት መጠኖቹ ልዩነትም፣ በዝቅተኛ micromolar ተጋላጭነት ላይ የሱፐርኦክሳይድ እና የNOS ተፅዕኖዎች በመጀመሪያ መለየትና ከማብራሪያው ማስወገድ እንዳለባቸው ያመለክታል። የፎስፎዳይኤስተሬዝ ቁጥጥርም የሚካተተው እዚህ ነው። የመፍረስ ሂደቱ ካልተለካ ወይም ካልተገታ፣ የሳይክሊክ GMP ክምችት መቀነስ ከቀነሰ ምርት፣ ከፈጠነ መፍረስ ወይም ከሁለቱም ጋር ሊስማማ ይችላል።

ይህን ወደ አንድ የደም ግፊት አባባል ማጠቃለል የማይቻልበት ምክንያት

እያንዳንዱ ማያያዣ በተለየ ሥርዓት ውስጥ ተረጋግጧል። በማክሮፋጅ ውስጥ የጂን መረጃ መገልበጥ፣ በሃይፖታላመስ ውስጥ የኢንዛይም እንቅስቃሴ አይደለም። ከሊፖፖሊሳካራይድ በኋላ የሚታየው የሃይፖታላመስ እንቅስቃሴ፣ በእረፍት ሁኔታ ያለው ኢንዶቴሊያል ቶን አይደለም። በጋራ በሚያድጉ ሕዋሳት ውስጥ በመሠረታዊ ሁኔታ የሚለቀቀው ኢንዶቴሊያል ፋክተር፣ በአጎኒስት የሚነቃቃ የደም ሥር መስፋት አይደለም። በ10 micromolar ሜቲሊን ብሉ ላይ ያሉ፣ በባህል ውስጥ ያደጉ የሳንባ ደም ወሳጅ ሥር ሕዋሳት፣ የሰው የደም ዝውውር አይደሉም። እነዚህን ሁሉ «ሜቲሊን ብሉ ናይትሪክ ኦክሳይድን በመግታት የደም ግፊትን ያሳድጋል» በሚል አባባል ማጠቃለል፣ የቁጥጥር ሙከራዎቹ እንዲጠበቁ የተዘጋጁላቸውን ልዩነቶች በትክክል መተው ነው።

ሦስት ማረጋገጫዎች ማብራሪያው ለማስረጃው ታማኝ እንዲሆን ያደርጉታል። በመጀመሪያ፣ አይዞፎርሙን ይግለጹ፦ በእረፍት ሁኔታ ላለው የደም ሥር ቶን eNOS፣ በማነቃቂያ ለሚፈጠር የእብጠት ፍሰት iNOS፣ ለነርቭ ሕዋሳት እና ለአንዳንድ የተጣራ ኢንዛይም አውዶች nNOS። ሁለተኛ፣ የናይትሪክ ኦክሳይድ ምልክቱ እንዴት እንደቀረበ ይግለጹ፦ በሕዋሱ ውስጥ መመረት፣ በመሠረታዊ ሁኔታ ከኢንዶቴሊየም መለቀቅ፣ ወይም እንደ CYSNO፣ ናይትሮፕሩሳይድ ወይም MPANO ባለ ተወስኖ በተጠቀሰ ለጋሽ መሰጠት። ይህ አስፈላጊ የሆነው፣ የተረጋጋው ለጋሽ በሜቲሊን ብሉ ሳይገታ፣ በቀላሉ የሚፈርሱት ግን ስለተገቱ ነው። ሦስተኛ፣ የክምችት መጠኑን እና ምላሹን የመለሰውን ሁኔታ ይግለጹ፦ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙቴዝ ምላሹን መመለሱ ሱፐርኦክሳይድ ተሳታፊ መሆኑን ያመለክታል፤ ካታሌዝ አለመሳካቱ በዚያ ዝግጅት ውስጥ ሃይድሮጂን ፔሮክሳይድ ምክንያት መሆኑን የሚቃወም ማስረጃ ይሰጣል፤ ዛንቲን ኦክሲዴዝ ተመሳሳይ ውጤት ማሳየቱ ሱፐርኦክሳይድ ለውጤቱ በቂ መሆኑን ያሳያል፤ የተጣራ ኢንዛይም ፈተናዎችም በካታሊሲስ ላይ ያሉ ቀጥተኛ ተፅዕኖዎችን፣ በመጓጓዣ ጊዜ ከሚከሰቱ የምልክት መጥፋቶች ይለያሉ።

አጭሩ የተዋሃደ ማጠቃለያ ይህ ነው። ሜቲሊን ብሉን ሳይክሌዝን በመምረጥ የሚገታ አካል ከማለት ይልቅ፣ ከናይትሪክ ኦክሳይድ ወደ ሳይክሊክ GMP የሚሄደውን የምልክት ልውውጥ በብዙ ቦታዎች የሚለውጥ አካል አድርጎ መመልከት ይሻላል። እንደ ሙከራው ዝግጅት እና የክምችት መጠኑ፣ የiNOS ጂን መረጃ መገልበጥ ፋክተሮችን ትስስር ሊቀንስ፣ የNOS ኢንዛይሞችን በቀጥታ ሊገታ፣ ሱፐርኦክሳይድ በማመንጨት የናይትሪክ ኦክሳይድን ተገኝነት ሊቀንስ፣ እንዲሁም በናይትሪክ ኦክሳይድ የተነቃቃውን ሳይክሌዝ ሊያዳክም ይችላል። በደም ሥር ጥናቶች ውስጥ የሳይክሊክ GMP ምልክት ልውውጥ ሚና እና በሕዋስ ፈተናዎች ውስጥ የሚጠቀሙባቸው የናይትሪክ ኦክሳይድ ለጋሾች ንጽጽር እያንዳንዳቸው ከእነዚህ ቅርንጫፎች አንዱን በበለጠ ዝርዝር ይዳስሳሉ። የሬዶክስ ተፅዕኖዎችን ከኢንዛይም ተፅዕኖዎች ለመለየት የሚጠቀሙባቸው ዘዴዎች ደግሞ፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙቴዝ፣ ካታሌዝ እና የተረጋጋ ለጋሽ ቁጥጥር በእነዚህ ሳይንሳዊ ጽሑፎች ውስጥ በተደጋጋሚ አብረው የሚታዩበትን ምክንያት ያብራራሉ።

ከሜቲሊን ብሉ በኋላ የሚታይ ዝቅተኛ የሳይክሊክ GMP እሴት፣ ሰንሰለቱ መቋረጡን ያመለክታል። የትኛው ማያያዣ እንደተቋረጠ የሚገልጹት የቁጥጥር ሙከራዎቹ ብቻ ናቸው።