Àpilẹ̀kọ

Ta ló ṣe àgbékalẹ̀ àbàwọ́n ẹ̀jẹ̀ àlùkò? Methylene blue, Malachowski, Romanowsky, àti Giemsa

Ta ló ṣe àgbékalẹ̀ àbàwọ́n ẹ̀jẹ̀ àlùkò? Methylene blue, Malachowski, Romanowsky, àti Giemsa

Eosin jẹ́ pupa. Methylene blue jẹ́ búlúù. Da àwọn méjèèjì pọ̀, fi àdàlù náà sí fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ ẹ̀jẹ̀ tí ó ti gbẹ, àwọn apá kan nínú fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ náà yóò sì di àlùkò.

Kì í ṣe gbogbo apá. Nínú àpẹẹrẹ tí a ti pèsè dáadáa, àwọn núkílíọ̀sì sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ funfun ń gba àwọ̀ pupa-àlùkò, kírómátínì inú párásáìtì ibà sì ń gba àwọ̀ kan náà, nígbà tí àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ pupa tó yí i ká ṣì jẹ́ pínkì, sáítópílásímù sì ṣì jẹ́ eérú-búlúù. Àwọ̀ àlùkò náà ló ń jẹ́ kí a lè fi ìyàtọ̀ hàn láàárín àwọn irú sẹ́ẹ̀lì.

Kò sí àlùkò nínú èyíkéyìí lára àwọn ìgò méjèèjì. Àwọ̀ náà máa ń farahàn kìkì nígbà tí ọ̀kan pàtó lára àwọn ohun tó ń jáde nígbà tí methylene blue bá ń fọ́ túútúú bá eosin pàdé lórí gíláàsì àyẹ̀wò. Ní àwọn ọdún 1880 àti 1890, kò sí ẹni tó mọ̀ pé ohun náà wà, ká má ṣẹ̀ṣẹ̀ sọ pé wọ́n mọ ohun tí ó jẹ́. Àwọn tó ń lépa àwọ̀ náà ń ṣiṣẹ́ pẹ̀lú àwọn àwọ̀ aláìmọ́, ní ọ̀kọ̀ọ̀kan, láìsí ọ̀nà tó ṣeé gbẹ́kẹ̀ lé láti mọ ohun tó wà nínú ìgò kan lẹ́yìn tí ó ti jókòó lórí àtẹ̀ fún oṣù méjì.

Ìdí nìyẹn tí ìbéèrè inú àkọlé fi ní ju ìdáhùn kan lọ tí a lè gbèjà, àti ìdí tí ìdáhùn náà fi yí padà ní 2011.

Ohun tí a rí yí padà bí àdàlù náà ṣe yí padà

Kì í ṣe pé ẹnì kan dá àbàwọ́n náà sílẹ̀ lẹ́ẹ̀kan ṣoṣo. Ó ń dàgbà díẹ̀díẹ̀ ni. Ìyípadà kọ̀ọ̀kan sí àdàlù náà mú ohun tuntun kan ṣoṣo tí ojú lè rí jáde, títẹ̀lé bí àwọn ohun wọ̀nyí ṣe farahàn sì ni ọ̀nà tó ṣe kedere jù láti ka ìtàn náà.

ỌdúnOhun tó wà nínú àwoOhun tí o lè rí
1865Picric acid, àwọ̀ àkọ́kọ́ tí a ṣe ní ọ̀nà kẹ́míkà tí a sì lò lórí ẹ̀jẹ̀, láti ọwọ́ Wilhelm ErbÀpẹẹrẹ tó dà bí aṣọ àwọ̀n nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ pupa kan.
1876Methylene blue, láti ọwọ́ Heinrich Caro àti Adolf von Baeyer ní BASFÀwọn kokoro bacilli ikọ́ ẹ̀gbẹ, ní ọwọ́ Robert Koch. Àwọn sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ ní ìwọ̀n búlúù kan ṣoṣo.
1880Methylene blue pẹ̀lú acid fuchsin, àbàwọ́n aláìṣojúsàájú EhrlichÀwọn sẹ́ẹ̀lì pupa àti àwọn ẹ̀ka kéékèèké eosinophil jẹ́ pupa, àwọn núkílíọ̀sì jẹ́ búlúù tó jinlẹ̀, sáítópílásímù lymphocyte jẹ́ búlúù fẹ́ẹ́rẹ́, àwọn ẹ̀ka kéékèèké àlùkò dúdú sì gba àwọ̀ méjèèjì. Ìdí nìyẹn tí a fi ń pe sẹ́ẹ̀lì náà ní neutrophil. Ìṣírò àkọ́kọ́ tí ó ya àwọn irú sẹ́ẹ̀lì ẹ̀jẹ̀ funfun sọ́tọ̀.
1888Methylene blue pẹ̀lú eosin. Czesław ChęcińskiPárásáìtì fúnra rẹ̀: àwọn ìrísí búlúù tó dà bí òdòdó daisy (Plasmodium malariae) àti àwọn ìrísí tó dà bí dòjé (àwọn gametocyte P. falciparum). Kì í ṣe núkílíọ̀sì rẹ̀.
1890Methylene blue púpọ̀ sí i, ọtí díẹ̀ sí i, pẹ̀lú potassium hydroxide. Albert PlehnOnírúurú àwọ̀ tó pọ̀ sí i tí ó sì jinlẹ̀ sí i, pẹ̀lú àwọn sẹ́ẹ̀lì pupa àti ẹ̀ka kéékèèké eosinophil tí wọ́n ní àwọ̀ róòsì. Pupa àti búlúù nìkan ṣì ni.
1890Eosin pẹ̀lú methylene blue tí a fi borax sọ di alíkáláìnì. Ernst MalachowskiKírómátínì pupa-àlùkò nínú párásáìtì, tí a lè ya núkílíọ̀sì rẹ̀ sọ́tọ̀ kúrò ní sáítópílásímù. Ó mọ̀ọ́mọ̀ ṣe é, gẹ́gẹ́ bí àlàyé rẹ̀ sì ṣe sọ, ó ṣeé tún ṣe.
1891Eosin pẹ̀lú methylene blue láti inú ìgò kan tí àmùwódù hù sí, tí ó sì ti lé ní oṣù méjì. Dmitri RomanowskyÀlùkò kan náà, lẹ́ẹ̀kan, nípasẹ̀ ọ̀nà tí àwọn ẹlòmíràn kò lè tún ṣe.
1898 sí 1902Àwọ̀ onírúurú tí a yọ jáde pẹ̀lú chloroform (Nocht); methanol (Jenner); títún ìsàlẹ̀ tí ó ṣubú kúrò nínú ojútùú tú sínú ọtí (Leishman, Reuter, Wright); àwọn àwọ̀ tí a wọn pẹ̀lú glycerol (Giemsa)Àlùkò nígbà tí a bá fẹ́ ẹ, nínú ọjà tí ó hùwà bákan náà ní yàrá ìdánwò mìíràn. Ẹ̀yà Jenner, tí kò ní àwọ̀ tí a ti sọ di onírúurú, kò mú àlùkò jáde.
1940 sí 1943Lillie, Roe àti Wilcox ya àwọn èròjà sọ́tọ̀, wọ́n sì dán wọn wò lọ́kọ̀ọ̀kanAzure B, kì í ṣe àdàlù náà, ni èròjà tó ń mú àlùkò jáde.

Àpẹẹrẹ tó wà nínú ọ̀wọ̀n ìkẹyìn ni ohun tó ṣe pàtàkì. Ìlọsíwájú kọ̀ọ̀kan mú onírúurú àwọ̀ pọ̀ sí i, ìbísí kọ̀ọ̀kan sì mú kí ìṣètò kan sí i ṣeé rí. Àlùkò kì í ṣe ohun ọ̀ṣọ́ lórí ọ̀nà náà; òun ni ìyàtọ̀ láàárín rírí pé párásáìtì kan wà àti rírí ohun tí ó para pọ̀ di í. Bí àwọ̀ náà fúnra rẹ̀ ṣe kúrò ní ilé iṣẹ́ àwọ̀ BASF tí ó sì wọ inú ìṣègùn jẹ́ ìtàn tó gùn sí i tí ó ní àwọn ìwé ẹ̀rí tirẹ̀. Gbogbo ìtẹ̀lé tó wà lókè, pẹ̀lú orísun tó ṣe àtìlẹ́yìn fún ohun kọ̀ọ̀kan, wà nínú ìtẹ̀lé àkókò àwọn olùkópa tó ní àwọn ìjápọ̀ sí orísun.

Àwòrán àlàyé àwọn àdàlù àbàwọ́n ẹ̀jẹ̀ mẹ́fà tí a tò láti òsì sí ọ̀tún lórí ìlà àkókò onídáṣì láti 1865 sí 1902. Àyíká kọ̀ọ̀kan tí a fa ààlà rẹ̀ ní àwọn àwọ̀ inú àdàlù náà gẹ́gẹ́ bí àwọn àmì oníwọ̀: yéélò fún picric acid, búlúù fún methylene blue, lẹ́yìn náà pupa àti búlúù fún acid fuchsin àti lẹ́ẹ̀kan sí i fún eosin, lẹ́yìn náà àlùkò àti pupa níbi tí borax ti mú búlúù náà dàgbà, lẹ́yìn náà àlùkò, búlúù àti pupa fún azure tí a wọn ní 1902 pẹ̀lú eosin. Lábẹ́ àyíká kọ̀ọ̀kan, àwọn onígun kéékèèké fi àwọn àwọ̀ tí àdàlù náà mú jáde nínú fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ ẹ̀jẹ̀ hàn, onígun pupa-àlùkò sì kọ́kọ́ farahàn ní 1890.

Àwòrán: àwọn àdàlù mẹ́fà kan náà tí a yà gẹ́gẹ́ bí ohun tó wà nínú àwo àti ohun tó jáde láti inú rẹ̀. Àwọn àyíká náà ní àwọn àwọ̀ inú; àwọn onígun tó wà lábẹ́ wọn ní àwọn àwọ̀ tí àwọn àwọ̀ yẹn lè mú jáde nínú fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ ẹ̀jẹ̀. Kò sí ohun tó ṣáájú 1890 tí ó fi onígun pupa-àlùkò hàn, kò sì sí èyí tó wá lẹ́yìn rẹ̀ tí kò ní irú onígun bẹ́ẹ̀.

Ọkùnrin tó mọ̀ọ́mọ̀ lo borax

Ernst Malachowski jẹ́ oníṣègùn ní Breslau, tí a ń pè ní Wrocław báyìí, tó lo gbogbo àsìkò iṣẹ́ rẹ̀ nínú iṣẹ́ ìṣègùn aládàáni àti ní ilé ìtọ́jú kékeré kan tí òun àti ẹlẹgbẹ́ rẹ̀ ń darí, tí ó sì ń ṣe iṣẹ́ yàrá ìdánwò ní àsìkò tirẹ̀. A bí i ní Strzelno ní 12 Oṣù Kẹta 1857, ó kẹ́kọ̀ọ́ ìṣègùn ní University of Breslau, ó sì ṣiṣẹ́ láti 1882 sí 1887 gẹ́gẹ́ bí olùrànlọ́wọ́ ní ìṣègùn àwọn àìsàn inú ara ní All Saints Hospital, tí ó jẹ́ ilé ìwòsàn kejì tó tóbi jù ní Germany nígbà náà.

Ó bẹ̀rẹ̀ ní 1888 pẹ̀lú àbàwọ́n méjì ti Chęciński àti Plehn. Nínú àpẹẹrẹ kan tí a pèsè ní 1889, ó rí i pé kírómátínì núkílíọ̀sì plasmodium gba àwọ̀ tó yàtọ̀ sí ti sáítópílásímù, lẹ́yìn náà ó rí i pé òun kò lè tún àbájáde náà ṣe. Ó gbìyànjú láti sọ methylene blue di ásíìdì, èyí sì mú kí ohun gbogbo burú sí i. Ó gbìyànjú láti fi borax sọ ọ́ di alíkáláìnì, èyí sì ṣiṣẹ́ ní gbogbo ìgbà. Ó fi ọ̀nà náà hàn ní gbangba ní 15 Oṣù Kẹfà 1890, ó sì tẹ àlàyé tó kún sí i jáde ní Oṣù Kẹjọ 1891, pẹ̀lú ìtọ́ni nípa borax. Ó ṣàkíyèsí pé fífi àwọ̀ náà ṣe àbàwọ́n gba wákàtí mẹ́rìnlélógún àti pé ó rọrùn láti tún àwọn àbájáde náà ṣe.

Wákàtí mẹ́rìnlélógún jẹ́ àsìkò tó gùn nínú yàrá ìdánwò fún àyẹ̀wò àìsàn, ìwé rẹ̀ kò sì tẹnu mọ́ àwọ̀ àlùkò-pupa núkílíọ̀sì párásáìtì náà. Ohun yòówù kó fa á, kò sí ẹni tó bẹ̀rẹ̀ sí í mọ̀ọ́mọ̀ sọ methylene blue di alíkáláìnì títí Nocht fi tún ṣe é ní 1898. Malachowski kò tún kọ̀wé nípa ṣíṣe àbàwọ́n ẹ̀jẹ̀ mọ́.

Ìdí tí a fi mọ díẹ̀ nípa rẹ̀ títí di àìpẹ́ yìí jẹ́ ọ̀ràn àwọn àkọsílẹ̀ ìpamọ́, kì í ṣe ohun ìjìnlẹ̀. Ó fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ pé kò sí àkọsílẹ̀ ìgbésí ayé rẹ̀ tó yè nínú àwọn ìwé ìṣègùn, ohun tó sì yè wá láti ọ̀nà kan ṣoṣo. Marie, ọmọbìnrin rẹ̀, fi Germany sílẹ̀ lọ sí London ní 1939, ó ṣiṣẹ́ nínú Ẹgbẹ́ Ọmọ Ogun Britain, ó sì tẹ̀dó sí Canada; àkójọpọ̀ àwọn ìwé ìdílé rẹ̀ sì parí sí Leo Baeck Institute ní New York. A pa Leo, arákùnrin rẹ̀, nínú Ogun Àgbáyé Kìíní. A lé Eva, arábìnrin rẹ̀, kúrò ní Breslau lọ sí ibùdó ìrékọjá Izbica ní Oṣù Kẹrin 1942, kò sì padà mọ́. Hedwig, ìyá rẹ̀, pa ara rẹ̀ ní 22 Oṣù Kẹrin 1942 dípò kí ó dúró de irú ìléjáde kan náà. Malachowski ti kú ní 1934, kí gbogbo ìṣẹ̀lẹ̀ wọ̀nyí tó ṣẹlẹ̀.

Ìtàn ìdílé tó parí lọ́nà yẹn jẹ́ ìtàn ìdílé tí àwọn ènìyàn dáwọ́ títọ́ka sí dúró. Àwọn ìwé méjì tí wọ́n tún fi Malachowski sínú ìtàn ìdàgbàsókè àbàwọ́n náà, tí a tẹ àwọn méjèèjì jáde ní 2011, ni a kó jọ láti inú àwọn ìwé ìpamọ́ ní Poznań àti Wrocław àti àwọn ìwé Marie ní New York.

Ìgò tí àmùwódù hù sí àti ọmọ Russia tó ní oríire

Dmitri Romanowsky kẹ́kọ̀ọ́ ìṣègùn ní Military Medical Academy ní St Petersburg, ó sì ṣiṣẹ́ lórí ibà fún èyí tó pọ̀ jù nínú àsìkò iṣẹ́ rẹ̀. Ní 1890, ó tẹ ọ̀nà kan jáde tí, gẹ́gẹ́ bí a ṣe kọ ọ́ sílẹ̀, ó fẹ́rẹ̀ẹ́ jẹ́ ọ̀kan náà pẹ̀lú ti Chęciński: methylene blue tí a kò yí padà àti eosin, pẹ̀lú eosin díẹ̀ sí i.

Ní Oṣù Kẹsàn-án 1891, ó tẹ ọ̀nà tí ó mú kí orúkọ rẹ̀ di mímọ̀ jáde, a sì fi kókó tó ṣe pàtàkì pamọ́ sínú àwọn ìtọ́ni. Àwọn àbájáde rẹ̀ tó dára jù wá láti ojútùú methylene blue tí a ti pèsè sílẹ̀, ojútùú methylene blue tí a ti pa mọ́ fún ohun tó lé ní oṣù méjì tí àmùwódù sì ń hù lórí rẹ̀. Àmùwódù náà àti àsìkò tí ojútùú náà fi dúró ti yọ díẹ̀ nínú àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò nínú àwọ̀ náà. Romanowsky kò mọ èyí, kò sì lè ṣàkóso rẹ̀, àwọn òṣìṣẹ́ mìíràn tó gbìyànjú ọ̀nà rẹ̀ kò sì lè rí àlùkò náà. Ó ti fi ìwé ìwádìí rẹ̀ sílẹ̀ ní St Petersburg ní Oṣù Kẹfà 1891, èyí ló jẹ́ kí àlàyé tí a sábà máa ń gba fi 1891 ṣe ọdún ìṣàwárí náà.

Malachowski ti fi tirẹ̀ hàn ní Oṣù Kẹfà 1890, ohun tó lé ní ọdún kan ṣáájú, ọ̀nà rẹ̀ sì ṣiṣẹ́ bí ó ti mọ̀ọ́mọ̀ pinnu.

Ìdí tí a fi sọ ọ́ ní orúkọ ẹni tí kò tọ́

Kristine Krafts, Ernst Hempelmann àti Barbara Oleksyn ni wọ́n kó ẹ̀rí tó ṣe àtìlẹ́yìn fún Malachowski jọ, ó sì sinmi lórí ohun mẹ́rin. Ọjọ́ tí ó fi í hàn ní gbangba, Oṣù Kẹfà 1890, ní ìfiwéra pẹ̀lú Oṣù Kẹsàn-án 1891. Ọ̀rọ̀ mọ̀ọ́mọ̀ ní ìfiwéra pẹ̀lú ọ̀rọ̀ láìròtẹ́lẹ̀. Òtítọ́ pé Malachowski tẹ ọ̀nà rẹ̀ jáde, pẹ̀lú borax àti gbogbo ohun mìíràn, nígbà tí ti Romanowsky gbára lé ohun tó ń yí padà tí a kò ṣàkóso. Àti àkíyèsí pé àlàyé nípa núkílíọ̀sì plasmodium, pẹ̀lú àlùkò tó fi í hàn, fẹ́rẹ̀ẹ́ pòórá nínú àwọn ìwé fún ọdún méje, nítorí pé kò sí ẹni tó lè tún ẹ̀yà tí ó ṣẹlẹ̀ láìròtẹ́lẹ̀ náà ṣe.

Wọn kò fi ọ̀rọ̀ sí abẹ́ ahọ́n nípa ìparí ọ̀ràn náà. Nínú ìwé ìtàn ìgbésí ayé náà, wọ́n pe fífi ìyìn náà fún un ní "yíyí òtítọ́ po lọ́nà ẹlẹ́gàn", wọ́n sì fa ọ̀rọ̀ Ralph Lillie yọ, ẹni tó kọ ní 1978 pé "bóyá ó yẹ kí a máa pe àkójọpọ̀ àwọn àbàwọ́n yìí ní àwọn àbàwọ́n Malachowski".

Àwọn ènìyàn tako ẹ̀sùn náà, bí wọ́n ṣe sábà máa ń tako ẹ̀sùn pé ẹnì kan ló kọ́kọ́ ṣe ohun kan, ó sì yẹ kí a ṣàlàyé bí àríyànjiyàn náà ṣe rí dípò kí a pinnu ẹni tó ṣẹ́gun. Àríyànjiyàn nípa ẹni tó kọ́kọ́ ṣe ohun kan gbọ́dọ̀ sọ ohun tí ìṣàwárí náà jẹ́. Bí ìṣàwárí náà bá jẹ́ àwọ̀ àlùkò, Malachowski ni ẹ̀rí àkọsílẹ̀ pé ó fi í hàn ṣáájú. Bí ìṣàwárí náà bá jẹ́ ọ̀nà tí a tẹ jáde, àwọn ọkùnrin méjèèjì tẹ tirẹ̀ jáde ní 1891, a sì sọ ọ́ ní orúkọ Romanowsky. Bí ìṣàwárí náà bá jẹ́ àlàyé ohun tó ń ṣẹlẹ̀, kò sí èyíkéyìí lára wọn tó lè sọ pé òun ló ṣe é, nítorí pé kò sí èyíkéyìí tó mọ̀ pé dídàgbà àwọ̀ náà jẹ́ yíyọ àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò, kò sì sí èyíkéyìí tó lè sọ ìdí tí àwọ̀ náà fi farahàn rárá. Kókó ìkẹyìn yẹn ni àwọn àlàyé tó gbajúmọ̀ máa ń fo kọjá. Èròjà tó ń ṣiṣẹ́ náà jẹ́ ohun àìmọ́ tí kò sí ẹni tó ti dá mọ̀, ẹni àkọ́kọ́ tó mọ̀ọ́mọ̀ mú àwọ̀ náà jáde sì ṣe é nípasẹ̀ àdàlù tí ìrírí fi hàn pé ó ṣeé tún ṣe, kì í ṣe nípasẹ̀ òye ohun tí àdàlù náà ń ṣe.

Àwọn ìwé méjì ti 2011 ni àlàyé tó pé jù tí a ti tẹ jáde nípa ẹ̀rí tó ṣe àtìlẹ́yìn fún Malachowski, a sì lè ka àwọn méjèèjì lọ́fẹ̀ẹ́ ní PubMed: àyẹ̀wò gígùn náà ní PMID 21235291 àti ìwé ìtàn ìgbésí ayé náà ní PMID 21660627. Àkọsílẹ̀ PubMed fún àyẹ̀wò náà tún ṣe àtòkọ àlàyé kan lórí rẹ̀, tí a tẹ jáde nínú ìwé ìmọ̀ kan náà nígbà tó yá ní ọdún náà ní 86(5):366, èyí tó jẹ́ ìránnilétí tó yẹ pé a tako àríyànjiyàn náà nínú ìtẹ̀jáde ní kété tí ó farahàn.

Ohun tí awuyewuye náà kì í ṣe ni àìfohùnṣọ̀kan nípa kẹ́mísírì. Gbogbo àwọn tó kópa fohùn ṣọ̀kan nípa ohun tí àlùkò náà jẹ́ àti àwọn èròjà tó ń mú un jáde. Àìfohùnṣọ̀kan náà jẹ́ nípa ẹni tó kọ́kọ́ dé ibẹ̀, àti bóyá ìṣẹ̀lẹ̀ àìròtẹ́lẹ̀ tí kò sí ẹni tó lè tún ṣe yẹ kí a kà sí dídé ibẹ̀ rárá.

Ohun tí àwọn orúkọ tó wá lẹ́yìn mú wá

Bí Malachowski bá kọ́kọ́ mú àlùkò náà jáde, kí ló dé tí àbàwọ́n náà fi ń jẹ́ orúkọ Romanowsky, Wright àti Giemsa?

Nítorí pé àbàwọ́n tó ṣiṣẹ́ lẹ́ẹ̀kan ní ọwọ́ ẹni tó dá a sílẹ̀ kì í ṣe ohun èlò ìdánwò tó ṣeé gbẹ́kẹ̀ lé. Iṣẹ́ tó wá lẹ́yìn sọ àdàlù tí ìhùwàsí rẹ̀ kò dúró ṣinṣin di ohun tí òṣìṣẹ́ yàrá ìdánwò ní orílẹ̀-èdè mìíràn lè lò ní ọjọ́ Ìṣẹ́gun kan.

Nocht dé ibẹ̀ nípasẹ̀ ìrònú. Lẹ́yìn tí kò lè rí àbájáde tó ṣeé gbẹ́kẹ̀ lé láti inú àwọ̀ aláìṣojúsàájú kan tó rọrùn, ó pinnu pé àlùkò náà gbọ́dọ̀ wá láti ohun kan nínú methylene blue tí kì í ṣe methylene blue, ó sì lọ wá a. Unna ti ṣàkíyèsí tẹ́lẹ̀ pé àwọn ojútùú methylene blue tí ó ti pẹ́ ń sọ àwọn ẹ̀ka kéékèèké inú sẹ́ẹ̀lì mast di pupa, ó sì dábàá pé ohun tuntun kan ń dá sílẹ̀ bí àwọ̀ náà ṣe ń dàgbà. Bernthsen ti fi hàn ní 1885 pé ipò alíkáláìnì ń yọ àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò nínú methylene blue, àti pé àwọn ohun tó ń jáde wọ̀nyí ni ohun tí a ń pè ní àwọn azure báyìí. Nocht fi chloroform yọ apá tó ń ṣiṣẹ́ jáde, ohun kan ṣoṣo tó sì lè pè é ni pupa láti methylene blue; Michaelis sọ ọ́ ní azure I ní 1901. Jenner yanjú ìṣòro ìpèsè àti lílò. Títún ohun tó ṣubú kúrò nínú àdàlù methylene blue àti eosin tú sínú methanol tí kò ní omi mú ojútùú kan ṣoṣo tó dúró ṣinṣin jáde, tí ó ń mú fẹ́lẹ́fẹ́lẹ́ ẹ̀jẹ̀ náà dúró bí ó ṣe ń fi àwọ̀ sí i, ó sì fòpin sí lílo ooru láti mú un dúró. Leishman àti Reuter da àwọ̀ tí a ti sọ di onírúurú pọ̀ mọ́ ohun olótìí tó ń tú ohun mìíràn, wọ́n sì rí ìdúróṣinṣin àti àlùkò papọ̀. Wright fi wákàtí kan nínú èéfín omi tó ń ṣàn rọ́pò fífi àdàlù náà sí 65 °C fún wákàtí méjìlá àti fífi í dúró fún ọjọ́ mẹ́wàá. Giemsa dáwọ́ gbígbára lé ojútùú tó dàgbà láìsí ìṣàkóso dúró pátápátá, ó ń lo ìwọ̀n tí a díwọ̀n ti àwọn àwọ̀ tí a mọ̀, pẹ̀lú glycerol nínú methanol kí ọjà náà lè fara da ooru ilẹ̀ olóoru. Kò tẹ bí ó ṣe ṣe methylene azure mímọ́ jáde rí. Ó tà á fún yàrá ìdánwò Dr Grübler ní Leipzig, tí ó tà á sí ọjà gẹ́gẹ́ bí azure I, tí ó sì sọ pé ẹ̀yà òun nìkan ni àbàwọ́n Giemsa ojúlówó.

A ṣì ń jiyàn nípa ohun tí azure yẹn jẹ́ gan-an. Àwọn kan gbà pé methylene blue tí a ti sọ di onírúurú lásán ni, àwọn mìíràn sì gbà pé azure B pọ̀ nínú rẹ̀. Ìdáhùn náà jáde láti inú ogun kan. Nígbà tí a kò lè rí àwọn àwọ̀ Germany rà mọ́, ẹgbẹ́ kan láti United States Public Health Service, Ralph Lillie pẹ̀lú Maurice Roe àti Aimee Wilcox, rí i pé àbàwọ́n tó dára jù wá láti àwọn èròjà mẹ́ta tí a yà sọ́tọ̀: methylene blue tí a kò yí padà, azure B tí ó jẹ́ ohun tó jáde láti inú rẹ̀ lẹ́yìn yíyọ àwọn ẹgbẹ́ methyl kúrò, àti eosin. Azure B rọ́pò azure I tí kò ṣeé rí, àwọn èròjà mẹ́ta wọ̀nyẹn sì ṣì jẹ́ ìpìlẹ̀ àbàwọ́n tí a ń lò láti ṣàyẹ̀wò ibà lónìí.

Kẹ́mísírì bí àwọn èròjà mẹ́ta wọ̀nyẹn ṣe ń bá ara wọn ṣiṣẹ́ lórí gíláàsì àyẹ̀wò jẹ́ ìbéèrè ọ̀tọ̀ àti ojú ìwé mìíràn. Ojú ìwé nípa àwọn ipa àwọ̀ àti kẹ́mísírì àwọn àbàwọ́n irú Romanowsky ṣàlàyé ohun tí azure B àti eosin ń ṣe lọ́kọ̀ọ̀kan àti ìdí tí àwọn méjèèjì papọ̀ fi ń mú àwọ̀ kan jáde tí kò sí èyíkéyìí tó lè mú jáde fúnra rẹ̀. Ohun tí ojú ìwé àwọn ìlò nínú àyẹ̀wò pẹ̀lú ẹ̀rọ amúgbòòrò àti yàrá ìdánwò ṣàlàyé ni apá ìṣe: ohun tí àpẹẹrẹ kan tí a pèsè ń fi hàn, àti bí a ṣe lè ṣe ìdájọ́ bóyá ọjà kan bá ọ̀nà tí o fẹ́ lò mu.

Apá ìtàn náà tó ṣì kan àsìkò wa

Kókó kan nínú ìtàn yìí kò dáwọ́ jíjẹ́ òtítọ́ dúró ní 1902. Fún nǹkan bí àádọ́ta ọdún, èròjà tó ṣe pàtàkì jù nínú àbàwọ́n ìbà tí gbogbo ayé ń lò gẹ́gẹ́ bí ìlànà jẹ́ ohun àìmọ́ tí kò ní orúkọ. Ó wà níbẹ̀ láìròtẹ́lẹ̀, ìwọ̀n rẹ̀ yàtọ̀ láti ìgò kan sí òmíràn, ohun tí ó jẹ́ gan-an sì jẹ́ àṣírí òwò fún apá kan nínú àsìkò náà, a sì jiyàn nípa ìpín rẹ̀ títí di àwọn ọdún 1940. Kì í ṣe pé àwọn tó ń lo àbàwọ́n náà kò ṣọ́ra. Wọn kò ní ọ̀nà láti mọ ohun tó wà nínú ìgò náà.

Ẹ̀yà ìṣòro kan náà ní àsìkò òde òní ni àlàyé ìlànà tó ṣàpèjúwe apá kan ṣoṣo nínú ohun èlò náà. Bíbámu pẹ̀lú USP ni ọ̀nà sí ìmọ́ tó ga jù tí ọjà ń pèsè, nítorí pé ó jẹ́ ìlànà tó pé tí a tẹ jáde dípò ìwọ̀n kan ṣoṣo: ìdánimọ̀, ìmọ́, àwọn ohun àìmọ́ aládàpọ̀ erogba pẹ̀lú àwọn àwọ̀ azure, àwọn ohun tó ń tú ohun mìíràn tí ó ṣẹ́kù, àwọn ohun àìmọ́ láti inú àwọn èròjà ìpìlẹ̀, ohun tó ṣẹ́kù lẹ́yìn sísun, àwọn ààlà fún àwọn ohun alààyè kéékèèké àti àwọn endotoxin bakitéríà. Blupreme ń gba methylene blue rẹ̀ láti ọ̀dọ̀ olùṣelọpọ ohun èlò ìṣègùn, ó sì ń tẹ ẹ̀rí ìtúpalẹ̀ tó pé jáde, kí a lè yẹ gbogbo ìlà àtòkọ yẹn wò dípò kí a kàn sọ pé wọ́n bá ìlànà mu. Ẹ̀rí kan tó ròyìn àbájáde irin wúwo tí ó sì pè é ní bíbámu pẹ̀lú USP jẹ́ ohun tó dọ́gba ní àsìkò òde òní pẹ̀lú ìgò kan tí a kọ "methylene blue tí ó ti dàgbà" sí: ó lè jẹ́ ohun èlò ìdánwò tó dára, ṣùgbọ́n àmì orúkọ náà kò sọ ohun tó wà nínú rẹ̀ fún ọ.