פֿאַרוואָס מעטילען־בלוי ווערט געניצט ווי אַ זויער־פֿעסטע קעגנפֿאַרבונג

אַ לאַבאָראַטאָריע־טעכניקער באַטראַכט אַ ספּוטום־שמיר נאָך דער גאַנצער פֿאַרבונג־ריי. רויטע שטעבלעך הייבן זיך אַרויס אויף אַ בלויעם פֿעלד, און אין באַריכט שטייט אַז מע האָט געזען זויער־פֿעסטע באַצילן. דעם אַנדערן טאָג ווײַזט אַן אַנדער אָביעקטגלאָז אַן איינהייטלעך בלוי פֿעלד אָן רויטע שטעבלעך, און דער רעזולטאַט ווערט געמאָלדן ווי נעגאַטיוו פֿאַר טובערקולאָז. איינער פֿון די צוויי באַריכטן טענהט מער ווי דאָס אָביעקטגלאָז קען באַשטעטיקן, און דאָס איז נישט דער ערשטער.

די צעמישונג איז באַגריפֿלעך. דער טעכניקער האָט באַטראַכט דעם בלויען פֿאַרבשטאָף ווי אַ טייל פֿון דער כעמיע פֿון אַנטדעקונג, ווי מעטילען־בלוי וואָלט געהאָלפֿן געפֿינען די מיקאָבאַקטעריעס. עס האָט נישט געהאָלפֿן. ביז מעטילען־בלוי דערגרייכט דאָס אָביעקטגלאָז, איז דער טעסט שוין פֿאַרענדיקט. דער פֿאַרבשטאָף פֿאַרבט בלויז דעם הינטערגרונט, כּדי מע זאָל קענען אָפּלייענען דעם רעזולטאַט. דער אַרטיקל דערקלערט דעם צוועק פֿון מעטילען־בלוי אין זויער־פֿעסטער פֿאַרבונג, פֿאַרוואָס עס איז בלוי און נישט קיין אַנדער קאָליר, און וואָס רויט אויף בלוי דערלויבט אײַך צו שליסן.

דער קורצער ענטפֿער

זויער־פֿעסטע פֿאַרבונג איז אַ דיפֿערענצירנדיקער טעסט, אויפֿגעבויט אויף דרײַ געדאַנקען. קאַרבאָל־פֿוקסין, דער ערשטיקער פֿאַרבשטאָף, ווערט אַרײַנגעצוווּנגען אין יעדן צעל, אַרײַנגערעכנט וואַקסיקע מיקאָבאַקטעריעס. זויער־אַלקאָהאָל, דער אָפּפֿאַרבער, נעמט אַרויס דעם רויטן פֿאַרבשטאָף פֿון געוויינטלעכע צעלן, אָבער קען אים נישט אַרויסציען פֿון זויער־פֿעסטע צעלן. מעטילען־בלוי, די קעגנפֿאַרבונג, פֿאַרבט דערנאָך אַלץ וואָס דער אָפּפֿאַרבער האָט אויסגעליידיקט. אַזוי דערשײַנען נישט־זויער־פֿעסטע צעלן, צעלן פֿונעם באַלעבאָס־אָרגאַניזם און רעשטלעך בלוי, בשעת זויער־פֿעסטע באַצילן בלײַבן רויט. די קעגנפֿאַרבונג שאַפֿט קאָנטראַסט. זי שפּילט נישט קיין ראָלע אין דער כעמיע וואָס מאַכט אַ צעל זויער־פֿעסט.

וואָס יעדער שריט טוט

די דיאַגראַמע אונטן ווײַזט די אַרבעט־צעטיילונג. לייענט זי פֿון לינקס אויף רעכטס ווי אַ פּראָצעדור, און באַטראַכט דעם אונטערשטן פּאַס ווי אַ דערמאָנונג אַז יעדער משפּחה פֿון פֿאַרבונגען שטעלט אַן אַנדער פֿראַגע.

אַרײַנדרינגען קומט ערשט. מיקאָבאַקטעריעס שטעלן זיך קעגן געוויינטלעכע פֿאַרבשטאָפֿן אין וואַסער־לייזונגען, ווײַל זייער צעל־הילע איז אומגעוויינטלעך הידראָפֿאָביש. דערפֿאַר צווינגט דער פּראָטאָקאָל דעם פֿאַרבשטאָף אַרײַן. אין דער Ziehl-Neelsen־מעטאָד טרײַבט הייצונג מיט פּאַרע דעם פֿענאָל־האַלטיקן קאַרבאָל־פֿוקסין דורך דער וואַקסיקער וואַנט. אין דער קאַלטער Kinyoun־מעטאָד ווערט הייצונג פֿאַרביטן מיט אַ פֿיל שטאַרקערער פֿאָרמולאַציע פֿונעם ערשטיקן פֿאַרבשטאָף, און עטלעכע מאָדיפֿיצירטע וואַריאַנטן אָן הייצונג לייגן צו ייבערפֿלאַך־אַקטיווע שטאָפֿן. די פּראָטאָקאָלן פֿאַר זויער־פֿעסטער פֿאַרבונג פֿון דער אַמעריקאַנער געזעלשאַפֿט פֿאַר מיקראָביאָלאָגיע דאָקומענטירן ביידע פֿאָרמולאַציעס איינע לעבן דער אַנדערער, און דער אונטערשייד אין קאָנצענטראַציע איז בולט: בערך 0.3 g באַזישן פֿוקסין אויף 100 mL פֿאַר דער געהייצטער מעטאָד, קעגן בערך 4 g פֿאַר דער קאַלטער מעטאָד.

דיפֿערענצירונג קומט צווייט. זויער־אַלקאָהאָל, געוויינטלעך 3 mL קאָנצענטרירטע זאַלץ־זויער אין 97 mL פֿון 95 פּראָצענט עטאַנאָל, וואַשט אַרויס דעם רויטן פֿאַרבשטאָף פֿון יעדן צעל וועמענס וואַנט האָט נישט קיין באַזונדערע קעגנשטעל. צעלן מיט אַן אומבאַשעדיקטער מיקאָבאַקטעריעלער ליפּיד־הילע האַלטן דעם פֿאַרבשטאָף אין זיך. אויף דעם שריט באַזירט זיך די גאַנצע מעטאָד, און ער איז דער סאַמע שפּירעוודיקסטער צו דער אויספֿירונג־טעכניק, ווי עס ווערט באַהאַנדלט אונטן.

קאָנטראַסט קומט צום סוף. דאָס אָביעקטגלאָז האָט איצט רויטע זויער־פֿעסטע צעלן אויף אַ כּמעט קאָלירלאָזן הינטערגרונט פֿון אויסגעליידיקטע צעלן. מעטילען־בלוי בײַ 0.3 פּראָצענט w/v מאַכט דעם הינטערגרונט ווידער זעעוודיק, מיט אַ קאָליר וואָס אונטערשיידט זיך ווי ווײַט מעגלעך פֿון רויט. די קעגנפֿאַרבונג דויערט קורץ, געוויינטלעך 20 ביז 30 סעקונדעס אין דער געהייצטער מעטאָד און ביז עטלעכע מינוט אין עטלעכע וואַריאַנטן פֿון דער קאַלטער מעטאָד. די צײַט ווענדט זיך אין דעם פּראָטאָקאָל און איז נישט אַן אייגנשאַפֿט פֿונעם פֿאַרבשטאָף אַליין.

פֿאַרוואָס דווקא דער פֿאַרבשטאָף, און פֿאַרוואָס בלוי

מעטילען־בלוי איז אַ קאַטיאָנישער באַזישער פֿאַרבשטאָף. דאָס הייסט אַז זײַן פֿאַרביקער יאָן טראָגט אַ פּאָזיטיווע לאָדונג און בינדט זיך צו די נעגאַטיוו געלאָדענע ייבערפֿלאַכן פֿון אָפּגעפֿאַרבטע באַקטעריעס, צעלן פֿונעם באַלעבאָס־אָרגאַניזם און רעשטלעך. OpenStax מיקראָביאָלאָגיע באַשרײַבט די דאָזיקע לאָגיק פֿון לאָדונגען ווי דעם אַלגעמיינעם פּרינציפּ הינטער באַזישע פֿאַרבשטאָפֿן. אָבער מעטילען־בלוי איז דאָ נישט כעמיש אייגנאַרטיק. קריסטאַל־וויאָלעט און סאַפֿראַנין זענען אויך באַזישע פֿאַרבשטאָפֿן. די ברירה איז אָפּטיש, נישט כעמיש.

רויטע שטעבלעך דאַרפֿן אַ הינטערגרונט אין אַ קאָנטראַסטירנדיקן קאָליר־טאָן, און בלוי שטייט אַנטקעגן רויט אויף דעם נוצלעכסטן אופֿן פֿאַר מיקראָסקאָפּיע מיט אַ העלן פֿעלד. סאַפֿראַנין וואָלט געווען אַ שלעכטע קעגנפֿאַרבונג, ווײַל זײַן ענדגילטיקער ראָזע־רויטער קאָליר איז צו נאָענט צום פֿאַרבליבענעם קאַרבאָל־פֿוקסין און פֿאַרווישט דווקא דעם אונטערשייד וואָס די פּראָצעדור האָט געשאַפֿן. קריסטאַל־וויאָלעט וואָלט געשאַפֿן אַ טונקל־וויאָלעטן הינטערגרונט וואָס קאָנקורירט מיט די דינע רויטע באַצילן פֿאַר דער אויפֿמערקזאַמקייט. דער שטאַרקסטער באַווײַז אַז די אויפֿגאַבע איז קאָנטראַסט און נישט כעמיע איז די מעגלעכקייט פֿון פֿאַרבײַט: גרינע קעגנפֿאַרבשטאָפֿן, ווי מאַלאַכיט־גרין און בריליאַנט־גרין, ווערן געניצט אין עטלעכע וועטערינאַרישע און מאָדיפֿיצירטע פּראָטאָקאָלן, און דער טעסט אַרבעט ווײַטער, ווײַל יעדער קלאָר אַנדערער קאָליר־טאָן טוט די זעלבע אַרבעט.

דערפֿון פֿאָלגן צוויי פּראַקטישע מסקנות. ערשטנס, דער סטאַנדאַרטער רעצעפּט פֿאָדערט נישט קיין pH־צופּאַסונג. פֿאַרמישט נישט די דאָזיקע פּשוטע 0.3 פּראָצענט וואַסער־לייזונג מיט אַלקאַלישע פֿאָרמולאַציעס, ווי לעפֿלערס מעטילען־בלוי, וואָס געהערן צו אַן אַנדער פֿאַרבונג־באַגריף. צווייטנס, איבערטרײַבן שאַט. די היסטאָלאָגישע ליטעראַטור וואָרנט בפֿירוש אַז אַן איבעריק געדיכטער בלויער הינטערגרונט קען פֿאַרדעקן ווייניקצאָליקע באַצילן. האַלטן דאָס אָביעקטגלאָז אונטער פֿאַרבשטאָף לענגער ווי דער פּראָטאָקאָל דערלויבט פֿאַרערגערט דערפֿאַר די לייענבאַרקייט אָן קיין נוץ.

די כעמיע פֿון דער וואַנט וואָס מאַכט דעם טעסט מעגלעך

די סיבה פֿאַרוואָס זויער־אַלקאָהאָל קען אונטערשיידן ליגט אין דער מיקאָבאַקטעריעלער הילע. איר סטרוקטורעלער קערן איז דער מיקאָליל־אַראַבינאָגאַלאַקטאַן־פּעפּטידאָגליקאַן־קאָמפּלעקס: פּעפּטידאָגליקאַן פֿאַרבונדן מיט אַראַבינאָגאַלאַקטאַן, וועמענס אויסווייניקסטע עקן טראָגן מיקאָלישע זויערן מיט זייער לאַנגע קייטן. זיי פֿאָרמירן אַן אויסווייניקסטע מיקאָמעמבראַן, רײַך אין ליפּידן און מיט אַן אומגעוויינטלעך נידעריקער דורכלאָזיקייט. דער איבערבליק פֿון דער מיקאָבאַקטעריעלער אויסווייניקסטער מעמבראַן באַשרײַבט די דאָזיקע סטרוקטור אין פּרטים. די באַריערע אַרבעט אין ביידע ריכטונגען. זי שטעלט זיך קעגן אַרײַנדרינגען פֿון פֿאַרבשטאָף, דערפֿאַר דאַרף דאָס אַרײַנדרינגען הייצונג אָדער אַ פֿאַרשטאַרקטן ערשטיקן פֿאַרבשטאָף. זי שטעלט זיך אויך קעגן אַרויסציען פֿון פֿאַרבשטאָף, דערפֿאַר קען זויער־אַלקאָהאָל נישט אַוועקנעמען קאַרבאָל־פֿוקסין ווען עס איז שוין אינעווייניק. געוויינטלעכע באַקטעריעס האָבן נישט די דאָזיקע הילע און פֿאַרלירן דעם פֿאַרבשטאָף. זויער־פֿעסטקייט איז דערפֿאַר בעסער צו פֿאַרשטיין ווי אַ דערשײַנונג פֿון אַ ליפּיד־באַריערע, נישט ווי אַ כעמישע בינדונג פֿון פֿוקסין צו מיקאָלישער זויער.

די דאָזיקע כעמיע דערקלערט אויך אַ פֿאַרשפּרייטע רעטעניש: מיקאָבאַקטעריעס פֿאַרבן זיך שוואַך און אומפֿאָרויסזעעוודיק לויט דער גראַם־מעטאָד, און דערשײַנען אַ מאָל ווי בלאַסע קרעל־פֿאָרמיקע געשטאַלטן אָדער ווי אומגעפֿאַרבטע שאָטנס. זייער הידראָפֿאָבישע וואַנט באַגרענעצט דאָס אַרײַנדרינגען פֿון קריסטאַל־וויאָלעט. זויער־פֿעסטע פֿאַרבונג איז נישט קיין מאָדיפֿיצירטע גראַם־פֿאַרבונג. עס איז אַן אַנדער דיפֿערענצירנדיקער פּרינציפּ, אויפֿגעבויט אַרום אַן אַנדער אייגנשאַפֿט פֿון דער וואַנט, ווי דער פֿאַרגלײַך פֿון פּשוטער פֿאַרבונג מיט גראַם־פֿאַרבונג ווײַזט פֿאַר די אַנדערע צוויי מעטאָדן.

דרײַ מעטאָדן, דרײַ פֿראַגעס

פֿאַר דער ברייטערער משפּחה פֿון באַקטעריעלע מעטאָדן מיט איין פֿאַרבשטאָף, זעט דעם אַטלאַס פֿון פֿאַרבונג פֿאַר מיקראָסקאָפּיע.

וואָס רויט אויף בלוי קען נישט באַווײַזן

רויטע שטעבלעך מיינען אַז די אָרגאַניזמען האָבן אָפּגעהאַלטן קאַרבאָל־פֿוקסין בײַ דער באַהאַנדלונג מיט זויער־אַלקאָהאָל. דער געפֿינס שטימט מיט Mycobacterium tuberculosis, אָבער די CDC־אָנווײַזונגען פֿאַר דיאַגנאָז פֿון טובערקולאָז באַמערקן בפֿירוש אַז אַנדערע מיקאָבאַקטעריעס זענען אויך זויער־פֿעסט. דערפֿאַר דאַרף אידענטיפֿיקאַציע פֿונעם מין אַ קולטור און נוקלעיִנזויער־טעסטן, נישט קיין קאָליר.

טעכנישע פֿעלערן קאָנצענטרירן זיך אַרום די צוויי וואַש־שריט. צו ווייניק אָפּפֿאַרבן לאָזט הינטערגרונט־מאַטעריאַל רויט און קען פֿירן צו פֿאַלש־פּאָזיטיווע אויסלייענונגען. צו שטאַרק אָפּפֿאַרבן נעמט אַוועק דעם שוואַך אָפּגעהאַלטענעם ערשטיקן פֿאַרבשטאָף און טראָגט בײַ צו פֿאַלש־נעגאַטיווע רעזולטאַטן. צו שטאַרק אָנווענדן די קעגנפֿאַרבונג באַגראָבט ווייניקצאָליקע באַצילן אין בלוי. געדיכטע שמירן, אויסגעפֿאַלענע רעאַגענטן און פֿאַרפּעסטיקט שווענקוואַסער לייגן צו אייגענע אַרטעפֿאַקטן.

די סענסיטיוויטעט איז באַגרענעצט דורך דער צאָל אָרגאַניזמען, ווי פֿעלערפֿרײַ די טעכניק זאָל נישט זײַן. קאַנווענציאָנעלע שמיר־מיקראָסקאָפּיע דאַרף בערך 5,000 ביז 10,000 באַצילן אויף אַ מיליליטער ספּוטום, און עלטערע CDC־איבערבליקן פֿון באַווײַזן האָבן געשאַצט די סענסיטיוויטעט פֿון שמירן אויף בערך 45 ביז 80 פּראָצענט צווישן לונגען־פֿאַלן וואָס זענען באַשטעטיקט געוואָרן דורך קולטור. אַ נעגאַטיווער שמיר שליסט דערפֿאַר קיינמאָל נישט אויס טובערקולאָז. די איצטיקע CDC־אָנווײַזונגען פֿאָדערן אַ קולטור צוזאַמען מיט יעדן שמיר און רעקאָמענדירן אַ טעסט פֿאַר אַמפּליפֿיקאַציע פֿון נוקלעיִנזויער אויף כאָטש איין מוסטער פֿון די אָטעם־וועגן, ווען מע באַטראַכט די מעגלעכקייט פֿון לונגען־טובערקולאָז און דער רעזולטאַט וואָלט געביטן דאָס קלינישע האַנדלען.

פּראַקטישע אַרבעט געהערט אונטער אָטעריזירטע פּראָטאָקאָלן

לערנבאַשרײַבונגען, אַרײַנגערעכנט דער דאָזיקער אַרטיקל, געבן נישט קיין דערלויבעניש פֿאַר קלינישער אַרבעט. פֿאַר פּראַקטישער לאַבאָראַטאָריע־אַרבעט פֿאָלגט דער לאַבאָראַטאָריעס וואַלידירטער סטאַנדאַרטער אַרבעט־פּראָצעדור, אויסגעשטימט מיט איצטיקע CDC־, APHL־ אָדער CLSI־דאָקומענטן. דער CDC־רעפֿערענץ פֿאַר זויער־פֿעסטער פֿאַרבונג אין זײַן Stacks־אַרכיוו ווײַזט ווי אַזעלכע פּראָצעדורן ספּעציפֿיצירן רעאַגענטן און רעזולטאַט־אויסלייענונגען. אַרבעט מיט טובערקולאָז־מוסטערן פֿאָדערט ביאָלאָגישע אײַנדעמונג: שמירן ווערן צוגעגרייט אין אַ ביאָלאָגישן זיכערהייט־קאַבינעט, ווײַל די צוגרייטונג שאַפֿט אַעראָסאָלן און שפּריצער. די CDC־אָנווײַזונגען פֿאַר לאַבאָראַטאָריע־זיכערהייט זאָגן אַז אַפֿילו דורך הייצונג פֿיקסירטע שמירן קענען אַנטהאַלטן לעבעדיקע טובערקולאָז־באַצילן און מוזן ווײַטער באַהאַנדלט ווערן ווי פֿאַרפּעסטיקט. דער פּאָזיציע אין דער CDC־בילד־ביבליאָטעק פֿאַר עפֿנטלעכער געזונט וועגן אַ שמיר מיט קאַרבאָל־פֿוקסין און מעטילען־בלוי, אונטערזוכט אויף M. leprae, איז אַ נוצלעכע דערמאָנונג אַז די מעטאָד דערגרייכט ווײַטער ווי טובערקולאָז: דער זעלבער קאָנטראַסט פֿון רויט אויף בלוי דינט אומעטום וווּ מע זוכט זויער־פֿעסטע אָרגאַניזמען, און אַ פֿאָרזיכטיקע נעגאַטיווע אויסלייענונג איז אַליין אַ רעזולטאַט וואָס איז כּדאַי צו פֿאַרשרײַבן.

אָפּלייענען דאָס פֿאַרענדיקטע אָביעקטגלאָז

די קעגנפֿאַרבונג באַרעכטיקט איר אָרט בײַ דער ערשטיקער דורכקוק. אַ מיקראָסקאָפּיסט וואָס קוקט איבער בײַ אַ נידעריקער פֿאַרגרעסערונג ניצט ערשט דעם בלויען הינטערגרונט צו אָפּשאַצן די קוואַליטעט פֿונעם שמיר: גלײַכמעסיקע פֿאַרטיילונג פֿון צעלן, אומבאַשעדיקטע צעלן פֿונעם באַלעבאָס־אָרגאַניזם פֿאַר פֿאָקוסירן, און קיין שטאַרקן אָפּזאַץ. רויטע קאַנדידאַטן ציען דערנאָך דאָס אויג דווקא ווײַל גאָרנישט אַנדערש אויפֿן אָביעקטגלאָז איז נישט רויט. באַשטעטיקונג קומט אונטער בוימל־אימערסיע, וווּ אמתע באַצילן ווײַזן די דערוואַרטעטע דינע, אַ מאָל אַ ביסל געבויגענע אָדער קרעל־פֿאָרמיקע שטעבלעך, און נישט איינפֿאָרמיקע פֿאַרבשטאָף־רעשטלעך.

די פֿאַרבונג פֿונעם הינטערגרונט באַשטימט אויך דעם וואָקאַבולאַר פֿונעם באַריכט. אַן אָביעקטגלאָז מיט רויטע באַצילן ווערט געמאָלדן ווי זויער־פֿעסטע באַצילן געזען, אָפֿט מיט אַ האַלב־קוואַנטיטאַטיוון גראַד לויט דער לאַבאָראַטאָריעס סקאַלע. אַן אָביעקטגלאָז אָן רויטע אָרגאַניזמען ווערט געמאָלדן ווי קיין זויער־פֿעסטע באַצילן נישט געזען, קיינמאָל נישט ווי נעגאַטיוו פֿאַר טובערקולאָז. דער אונטערשייד איז וויכטיק, ווײַל דאָס בלויע פֿעלד באַווײַזט אַז די פֿאַרבונג האָט געאַרבעט, די צעלן האָבן אויפֿגענומען די קעגנפֿאַרבונג און די אָפּטיק איז געווען גענוג גוט, אָבער זאָגט גאָרנישט וועגן אָרגאַניזמען אונטער דער אַנטדעקונג־גרענעץ. אַ ליידיק בלוי פֿעלד איז אַ גילטיקער רעזולטאַט וועגן דעם אָביעקטגלאָז, נישט קיין אורטייל וועגן דעם פּאַציענט.

געדענקט די אַרבעט־צעטיילונג, און די באַריכטן שרײַבן זיך אַליין. קאַרבאָל־פֿוקסין דערקענט קאַנדידאַטן. זויער־אַלקאָהאָל פֿירט דורך דעם טעסט. מעטילען־בלוי מאַכט בלויז דעם ענטפֿער לייענבאַר: רויט האָט אָפּגעהאַלטן דעם פֿאַרבשטאָף קעגן זויער, בלוי האָט אים פֿאַרלוירן. אַלץ אַנדערש — דער מין, די צאָל אָרגאַניזמען און דער קלינישער טײַטש — קומט פֿון אַרבעט אויסער דעם אָביעקטגלאָז.