EMB ئاگارىدىكى E. coli ۋە باشقا كولونىيەلەرنىڭ كۆرۈنۈشىنى ئوقۇش

بىر ئوقۇغۇچى نامەلۇم ئەۋرىشكىنى ئېئوزىن مېتىلېن كۆك ئاگارىغا سىزىقلاپ تېرىپ، بىر كېچە ئىنكۇباتسىيە قىلىدۇ؛ قايتىپ كەلگەندە تەخسىدە يېشىل پارقىرايدىغان قېنىق رەڭلىك كولونىيەلەرنى كۆرىدۇ. خاتىرىسىگە «E. coli، جەزملەشتۈرۈلدى» دەپ يازىدۇ. بۇ خاتىرە تەخسە تەمىنلىيەلەيدىغان دەلىلدىن ئېشىپ كەتكەن يەكۈننى ئوتتۇرىغا قويىدۇ. تەخسە پەقەت بەلگىلىك شارائىتتىكى ئۆسۈش ۋە ئېچىتىش فېنوتىپىنى كۆرسىتىدۇ. تۈرنىڭ كىملىكى بولسا ئايرىم دەلىل تەلەپ قىلىدىغان ئايرىم يەكۈن.

بۇ قوللانما EMB ئاگارىنىڭ نەتىجىلىرىنى ئىزاھلاش ۋەزىپىسى سۈپىتىدە بىر تەرەپ قىلىدۇ. ئۇ ئاساسىي پرىنسىپنى چۈشەندۈرىدۇ، كونتروللار بىلەن بىللە تەسۋىرىي تەخسە ئاتلاسىنى قەدەممۇقەدەم تونۇشتۇرىدۇ ۋە دەرسلىكتىكى كۆرۈنۈش ئادەمنى قايمۇقتۇرىدىغان ئەھۋاللارنى كۆرسىتىدۇ.

تەخسىنىڭ ئارقىسىدىكى پرىنسىپ

EMB ئاگارى ھەم تاللىغۇچى، ھەم پەرقلەندۈرگۈچى ئوزۇقلۇق مۇھىتىدۇر. ئېئوزىن Y ۋە مېتىلېن كۆك بوياقلىرى نۇرغۇن گرام مۇسبەت مىكروئورگانىزملارنى چەكلەيدۇ، شۇڭا بۇ مۇھىت گرام مەنپىي مىكروئورگانىزملارنىڭ ئۆسۈشىگە پايدىلىق. شۇ بوياقلار كۆرسەتكۈچ رولىنىمۇ ئوينايدۇ: مىكروئورگانىزم مۇھىتتىكى شېكەرنى ئېچىتىپ، يەرلىك مۇھىتتا يېتەرلىك كىسلاتا ھاسىل قىلغاندا، كولونىيە بوياقنى كۆپ سۈمۈرۈپ، قېنىق بىنەپشەدىن كۆك-قاراغىچە بولغان رەڭگە كىرىدۇ. كىسلاتا كۈچلۈك ھاسىل بولغاندا، كولونىيە يۈزىدە مېتالسىمان يېشىل رەڭدار پارقىراقلىق كۆرۈلۈشى مۇمكىن. ئېئوزىن مېتىلېن كۆك ئاگار تەخسىلىرىگە ئائىت ASM تەرتىپنامىسى تاللاش بىلەن پەرقلەندۈرۈشنىڭ بۇ بىرىكمىسىنى چۈشەندۈرىدۇ ۋە ئوقۇتۇشقا ئىشلىتىلىدىغان پايدىلىنىش فوتوسۈرەتلىرىنى تەمىنلەيدۇ.

ھەرقانداق نەتىجىنى ئوقۇشتىن بۇرۇن بىر تەپسىلات مۇھىم: قايسى تەركىب فورمۇلاسى ئىشلىتىلگەنلىكىنى تەكشۈرۈڭ. كونا Holt Harris Teague فورمۇلاسىدا لاكتوزا بىلەن ساخاروزا بار، Levine EMB دە بولسا پەقەت لاكتوزا بار. نۇرغۇن Serratia marcescens ئايرىلمىلىرىغا ئوخشاش، ساخاروزىنى ئېچىتىپ، لاكتوزىنى ئېچىتمايدىغان مىكروئورگانىزملار بۇ ئىككى نۇسخىدا ئوخشىمىغان كۆرۈنۈش بېرىشى مۇمكىن. ئىشلەپچىقارغۇچىنىڭ EMB مۇھىتلىرىغا ئائىت ھۆججىتى بۇ تەركىب پەرقىنى ئېنىق بايان قىلىدۇ. نەتىجە بىلەن بىللە ئىشلەپچىقارغۇچىنى ۋە تەركىب فورمۇلاسىنى خاتىرىگە يېزىڭ.

تەييارلانغان، ئەمما تېرىلمىغان EMB ئاگارى ئادەتتە قىزىل-قوڭۇردىن قىزغۇچ بىنەپشەگىچە بولىدۇ، بەزىدە يېشىلغا مايىل تۈس ياكى ئىنچىكە چۆكمە كۆرۈلىدۇ. بۇ ئارقا كۆرۈنۈش رەڭگى ئۆسۈش ئەمەس. ھەر بىر ئوقۇشنى تېرىلمىغان تەخسە ياكى خاتىرىلەنگەن باشلانغۇچ ھالەت بىلەن سېلىشتۇرۇڭ؛ ئوقۇتۇش تەرتىپنامىسىدا باشقىچە بەلگىلەنمىگەن بولسا، دەسلەپكى تەخسىنى 35 دىن 37 C غىچە بولغان تېمپېراتۇرىدا، ئوكسىگېنلىق شارائىتتا تەخمىنەن 18 دىن 24 سائەتكىچە ئىنكۇباتسىيە قىلغاندىن كېيىن ئوقۇڭ. ئىنكۇباتسىيە ۋاقتىنى ئۇزارتىش ئېچىتىشنىڭ كۆرۈنۈشىنى ئۆزگەرتىشى مۇمكىن.

تەخسىنى قانداق كۆزىتىش كېرەك

ئىككى خىل يورۇقلۇقنى ئىشلىتىڭ. ئالدى بىلەن تەخسىنى قايتقان ياكى يانتۇ يورۇقلۇقتا تەكشۈرۈپ، ئۇنى قىيسايتىڭ: مېتالسىمان پارقىراقلىق رەڭدار بولۇپ، كۆرۈش بۇلۇڭىغا قاراپ پەيدا بولۇشى ياكى يوقىلىشى مۇمكىن. ئاندىن كولونىيە رەڭگى ۋە قېنىق مەركىزىنى باھالاش ئۈچۈن، تەخسىدىن ئۆتكەن يورۇقلۇقتا تەكشۈرۈڭ. ياخشى ئايرىلغان كولونىيەلەرگە ئاساسلىنىڭ، چۈنكى زىچلىق ۋە قوشنا كولونىيەلەر يەرلىك كىسلاتا توپلىنىشىنى ئۆزگەرتىپ، رەڭنى سۇسلاشتۇرۇشى ياكى كۈچەيتىشى مۇمكىن. ASM سۈرەتلەر توپلىمى بۇنى بىۋاسىتە كۆرسىتىدۇ: ئارىلاش ئۆستۈرمىدىكى E. coli ئەتراپتىكى مىكروئورگانىزملار كىسلاتالىق مۇھىتنى ئۆزگەرتكەنلىكتىن، كۈتۈلگەن پارقىراقلىقىنى يوقىتىشى مۇمكىن.

مەشىق شارائىتى يول قويغاندا كونتروللارنى قوشۇڭ. كۆپ ئۇچرايدىغان ئوقۇتۇش كونترول توپلىمىدا، كۆك-قارا رەڭ ۋە مېتالسىمان پارقىراقلىق فېنوتىپى ئۈچۈن E. coli ATCC 25922، رەڭسىز فېنوتىپ ئۈچۈن Salmonella Typhimurium ATCC 14028 ياكى Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 غا ئوخشاش ئېچىتمايدىغان باكتېرىيە، چەكلەش كونترولى ئۈچۈن Enterococcus faecalis ياكى Staphylococcus aureus غا ئوخشاش گرام مۇسبەت باكتېرىيە ئىشلىتىلىدۇ؛ بۇلار EMB مۇھىتلىرىنىڭ ئۆلچەملىك سۈپەت كونترول جەدۋەللىرىدە كۆرسىتىلگەن. مۇسبەت كونترولدا پارقىراقلىق بولمىسا، نامەلۇم ئەۋرىشكىدىن گۇمانلىنىشتىن بۇرۇن، ئىنكۇباتسىيە، زىچلىق ياكى تەركىب فورمۇلاسىدىن گۇمانلىنىڭ.

تەسۋىرىي تەخسە ئاتلاسى

تۆۋەندىكى تەخسىلەر ھەقىقىي ئۆستۈرمىلەرنىڭ فوتوسۈرەتلىرى ئەمەس، بەلكى ھاسىل قىلىنغان تەسۋىرلەر. ئۇلار بىرەر شىتاممىنىڭ ئېنىق رەڭ تۈسىنى ئەمەس، كۆزىتىشكە تېگىشلىك ئەندىزىنى كۆرسىتىدۇ. ئۇلارنى ASM پايدىلىنىش فوتوسۈرەتلىرى ۋە ئوقۇتۇش تەجرىبىخانىسىدىكى ھەقىقىي تەخسىلەر بىلەن سېلىشتۇرۇڭ.

تەخسە 1: EMB ئاگارىدىكى Escherichia coli، لاكتوزىنى كۈچلۈك ئېچىتىدىغان باكتېرىيە

EMB ئاگارىدىكى E. coli ئادەتتە قېنىق بىنەپشەدىن كۆك-قاراغىچە بولىدۇ؛ كۆپىنچە قېنىق مەركىزى ۋە كۈچلۈك كىسلاتا ھاسىل قىلىشتىن كېلىپ چىققان مېتالسىمان يېشىل پارقىراقلىقى بولىدۇ. بۇ پارقىراقلىق ئوقۇغۇچىلار ئىزدەيدىغان داڭلىق بەلگە، ئەمما ئۇنى ئېنىقلىما ئەمەس، قوللاش دەلىلى دەپ قاراڭ. پارقىراقلىقنىڭ كۈچلۈكلۈكى شىتامما، ئىنكۇباتسىيە ۋاقتى، كولونىيە زىچلىقى ۋە كۆرۈش بۇلۇڭىغا قاراپ ئۆزگىرىدۇ. پارقىراقلىقنىڭ بولماسلىقى E. coli نى چەتكە قاقمايدۇ؛ پارقىراقلىقى يوق قېنىق كولونىيە بولسا باشقا بىر قانچە ئېچىتىدىغان باكتېرىيەنىمۇ كۆرسىتىشى مۇمكىن. كېيىنكى ھەر قانداق خىزمەت ئۈچۈن زىچ رايوندىكى كۆرۈنۈشكە تايانماي، ياخشى ئايرىلغان بىر كولونىيەنى تاللاڭ.

تەخسە 2: EMB ئاگارىدىكى Klebsiella pneumoniae، شىلىمشىق ئېچىتىدىغان باكتېرىيە

EMB ئاگارىدىكى Klebsiella pneumoniae ئادەتتە ھالرەڭ-بىنەپشەدىن قوڭۇر-بىنەپشەگىچە بولغان تۈستە، چوڭ، يالتىراق، شىلىمشىق كولونىيەلەرنى ھاسىل قىلىدۇ؛ كۆپىنچە مەركىزى قېنىق بولىدۇ، ئەمما ئادەتتە كۈچلۈك مېتالسىمان پارقىراقلىقى بولمايدۇ. Enterobacter غا ئوخشاش يېقىن تۈردىكى ئېچىتىدىغان باكتېرىيەلەردىمۇ ئوخشاش مورفولوگىيە كۆرۈلىدۇ. شىلىمشىق خۇسۇسىيەت ۋە كولونىيە چوڭلۇقىمۇ ئوقۇشنىڭ بىر قىسمى: كىچىك، ياپىلاق ھالرەڭ كولونىيەنىڭ دەلىل قىممىتى چوڭ، گۈمبەزسىمان شىلىمشىق كولونىيە بىلەن ئوخشىمايدۇ. E. coli دىكىگە ئوخشاش، تەخسە پەقەت ئېچىتىش فېنوتىپىنى كۆرسىتىدۇ؛ تۈر دەرىجىسىدە نام بېرىش ئۈچۈن تۆۋەندە چۈشەندۈرۈلگەن بىيوخىمىيىلىك جەزملەشتۈرۈش كېرەك.

تەخسە 3: EMB ئاگارىدىكى Salmonella ۋە باشقا ئېچىتمايدىغان باكتېرىيەلەر، رەڭسىز كولونىيەلەر

EMB ئاگارىدىكى Salmonella ۋە Shigella ھەمدە نۇرغۇن Pseudomonas ئايرىلمىلىرىنى ئۆز ئىچىگە ئالغان مۇناسىۋەتلىك لاكتوزىنى ئېچىتمايدىغان باكتېرىيەلەر ئادەتتە رەڭسىز، يېرىم سۈزۈك ياكى سۇس كەھرىۋا رەڭلىك كولونىيە بولۇپ ئۆسىدۇ. بەزى تەركىبلەر ۋە شارائىتلار سۇس ھالرەڭگە مايىل تۈس بېرىدۇ، شۇڭا سۇس ھالرەڭ كولونىيەنى بىۋاسىتە ئېچىتىدىغان باكتېرىيە دەپ قاراشقا بولمايدۇ. EMB Salmonella نى Shigella دىن ياكى باشقا ئېچىتمايدىغان باكتېرىيەلەردىن پەرقلەندۈرەلمەيدۇ؛ بۇ پەرقلەندۈرۈش كېيىنكى سىناقلارنىڭ ۋەزىپىسى. يەنە E. coli غا ئوخشاش مېتالسىمان كولونىيەلەر ھاسىل قىلىدىغان، لاكتوزا مۇسبەت Salmonella شىتاممىلىرىنىڭ ھۆججەتلەنگەنلىكىگە دىققەت قىلىڭ؛ بۇمۇ بىرلا تەخسە بىلەن ئاخىرقى يەكۈن چىقارغىلى بولمايدىغانلىقىنىڭ يەنە بىر سەۋەبى.

تەخسە 4: Serratia marcescens ۋە تەركىب فورمۇلاسىنىڭ قايمۇقتۇرۇشى

Serratia marcescens ئايرىم بۆلۈمگە لايىق، چۈنكى ئوقۇغۇچىلار دائىم قىزىل كولونىيەلەرنى كۈتۈپ، ئاندىن تەخسىنى خاتا ئوقۇيدۇ. كۆپىنچە كلىنىكىلىق ئايرىلمىلار لاكتوزىنى ئېچىتمايدۇ، شۇڭا Levine EMB دە ئادەتتە سۇس ياكى ئاجىز رەڭلىك كۆرۈنىدۇ. نۇرغۇن ئايرىلمىلار ساخاروزىنى ئېچىتىدىغان بولغاچقا، ساخاروزا بار فورمۇلا تېخىمۇ قېنىق ياكى كىسلاتاغا تېخىمۇ مۇناسىۋەتلىك رېئاكسىيە بېرىشى مۇمكىن. 35 دىن 37 C غىچە بولغان تېمپېراتۇرىدىمۇ تىپىك قىزىل پرودىگىئوزىن پىگمېنتىنى كۈتمەڭ؛ ئىنكۇباتور تېمپېراتۇرىسىدا پىگمېنت ھاسىل بولۇشى ئىشەنچلىك ئەمەس. تەرتىپنامىدە EMB ئاگارىدىكى Serratia marcescens تىلغا ئېلىنغاندا، بۇ باياننىڭ قايسى فورمۇلاغا ئاساسلانغانلىقىنى تەكشۈرۈڭ. Serratia مېتابولىزمىغا ئائىت ئوبزور بۇ قايمۇقتۇرۇشنىڭ ئارقىسىدىكى لاكتوزا مەنپىي، ساخاروزا نەتىجىسى ئۆزگىرىشچان بولغان ئەندىزىنى خۇلاسىلەيدۇ.

تەخسە 5: كونتروللار ۋە ئۆسۈشى چەكلەنگەن مىكروئورگانىزملار

Staphylococcus، Enterococcus، Streptococcus ۋە Bacillus غا ئوخشاش گرام مۇسبەت مىكروئورگانىزملارنىڭ ئۆسۈشى EMB ئاگارىدا ئادەتتە چەكلىنىدۇ ياكى كۆرۈنەرلىك بېسىلىدۇ، ئەمما بۇ چەكلەش ھەر بىر شىتاممىدا مۇتلەق ئەمەس. كونتروللار توپلىمى ئوقۇشنى ئىشەنچلىك قىلىدۇ: E. coli كونترولى كۆك-قارا رەڭ ۋە پارقىراقلىق بىلەن ياخشى ئۆسۈشى، ئېچىتمايدىغان باكتېرىيە كونترولى رەڭسىز ئۆسۈش كۆرسىتىشى، چەكلەش كونترولى ناھايىتى ئاز ئۆسۈشى ياكى ئۆسمەسلىكى كېرەك. ئەگەر چەكلەش كونترولى ياخشى ئۆسسە، تاللاش باسقۇچى مەغلۇپ بولغان بولىدۇ ۋە شۇ تۈركۈمدىكى باشقا بارلىق ئوقۇشلار گۇمانلىق بولىدۇ. بوياش ئۇسۇللىرى ئۆستۈرۈش مۇھىتلىرىدىن پەرقلىق سوئالغا جاۋاب بېرىدۇ؛ تەجرىبىخانىدىكى ئەينەك سىلايد بوياشقا ئائىت مەزمۇن ئۈچۈن مېتىلېن كۆك بوياش ئاتلاسىنى كۆرۈڭ.

چەك دائىرىسىدىكى سېلىشتۇرۇش

قايمۇقتۇرىدىغان كۆرۈنۈشلەرنى ئۈچ جۈملە خۇلاسىلەيدۇ. قېنىق رەڭ E. coli دېگەنلىك ئەمەس، چۈنكى Klebsiella، Enterobacter ۋە باشقا ئېچىتىدىغان باكتېرىيەلەردە پارقىراقلىقسىز قېنىق مەركەز پەيدا بولىدۇ. ھالرەڭ Klebsiella دېگەنلىك ئەمەس، چۈنكى ئوتتۇراھال ياكى ئاستا ئېچىتىدىغان باكتېرىيەلەر ۋە ئېچىتمايدۇ دەپ قارىلىدىغان بەزى باكتېرىيەلەر ھالرەڭ ياكى سۇس بىنەپشە كۆرۈنىدۇ. پارقىراقلىق E. coli نىڭ ئېنىق جەزملەشتۈرۈلگەنلىكى دېگەنلىك ئەمەس، چۈنكى باشقا كۈچلۈك ئېچىتىدىغان باكتېرىيەلەرمۇ ئۇنى ھاسىل قىلالايدۇ. ئوقۇتۇش تەرتىپنامىسى ۋە ئۇنىڭ ئارىلاش ئۆستۈرمە سۈرەتلىرى بۇ خاتا يەكۈنلەرنىڭ ھەر بىرىنى كۆرسىتىدۇ.

جەزملەشتۈرۈشنىڭ چەكلىرى

EMB ئاگارى تۈرنى ئەمەس، فېنوتىپنى كۆرسىتىدۇ. ئوخشىمىغان مىكروئورگانىزملارنىڭ كولونىيە كۆرۈنۈشى ئوخشاش بولۇشى مۇمكىن؛ بىر مىكروئورگانىزممۇ شىتامما، ياش، زىچلىق، تەركىب فورمۇلاسى ۋە ئىنكۇباتسىيەگە قاراپ دەرسلىكتىكى كۆرۈنۈشىدىن چەتنىشى مۇمكىن. شۇڭا ئوقۇتۇش ۋە كلىنىكىلىق خىزمەت جەريانلىرى EMB مورفولوگىيەسىنى دەسلەپكى پەرەز دەپ قارايدۇ.

ئوقۇغۇچىلار ئۈچۈن دەلىل بىلەن قوغدىغىلى بولىدىغان خىزمەت جەريانى مۇنداق: ئايرىلغان كولونىيەنى تەسۋىرلەش (چوڭلۇقى، رەڭگى، مەركىزى، يانتۇ يورۇقلۇقتىكى پارقىراقلىقى، شىلىمشىق خۇسۇسىيىتى)، تەركىب فورمۇلاسى، ئىنكۇباتسىيە ۋاقتى ۋە تېمپېراتۇرىسى، كونتروللارنى خاتىرىلەش؛ ئاندىن ھەر قانداق جەزملەشتۈرۈش سىنىقىدىن بۇرۇن، ياخشى ئايرىلغان بىر كولونىيەنى قايتا تېرىپ ساپ ئۆستۈرمە ئېلىش. كۆپ ئۇچرايدىغان كېيىنكى سىناقلار E. coli ۋە كولىفورم باكتېرىيەلەرنى دەسلەپكى پەرەز بويىچە پەرقلەندۈرۈش ئۈچۈن گرام بوياش ۋە IMViC رېئاكسىيەلىرىنى، ئۈچەي مىكروئورگانىزملىرى ئۈچۈن TSI ياكى KIA ۋە مىكروئورگانىزمغا خاس بىيوخىمىيىلىك سىناق توپلاملىرىنى ئۆز ئىچىگە ئالىدۇ؛ ۋەزىپە تەلەپ قىلغاندا سېرولوگىيەلىك، MALDI TOF ياكى باشقا دەلىللەنگەن پەرقلەندۈرۈش ئۇسۇللىرىمۇ قوللىنىلىدۇ. EMB نىڭ تاللىغۇچى ۋە پەرقلەندۈرگۈچى ئۈچەي باكتېرىيە مۇھىتلىرى ئارىسىدىكى ئورنى ھەققىدە ئارقا كۆرۈنۈش ئۇچۇرى ئۈچۈن، ئۈچەي باكتېرىيە ئۆستۈرۈش مۇھىتلىرىغا ئائىت تونۇشتۇرۇشلارنى ۋە گرام بوياشتىن كېيىنكى تەكشۈرۈشنى كۆرۈڭ. ئەينەك سىلايدتىكى كۆك بوياشنىڭ نېمىنى ئىسپاتلىيالايدىغانلىقى ۋە نېمىنى ئىسپاتلىيالمايدىغانلىقىغا ئائىت مۇناسىۋەتلىك سوئالدا، مېتىلېن كۆك بوياش ئاتلاسى مۇ ئوخشاش پرىنسىپ بىلەن كۆزىتىشنى يەكۈندىن ئايرىيدۇ.

يەكۈندىن بۇرۇن كۆزىتىشنى يېزىڭ. «Levine EMB دە 24 سائەتتە كۆرۈلگەن، بۇلۇڭغا قاراپ ئۆزگىرىدىغان يېشىل پارقىراقلىقى بار قېنىق كۆك-قارا كولونىيەلەر، لاكتوزىنىڭ كۈچلۈك ئېچىتىلىشىغا ماس كېلىدۇ» دېگەن باياننى دەلىل بىلەن قوغدىغىلى بولىدۇ. «E. coli، جەزملەشتۈرۈلدى» دېيىش ئۈچۈن بولسا، تەخسە يالغۇز تەمىنلىيەلمەيدىغان جەزملەشتۈرۈش باسقۇچى كېرەك.