ዓንቀጽ

ኣብ ፈተነታት ሜቲሊን ብሉ ግብረ-ንጡፋት ዓይነታት ኦክስጅን ምዕቃን

ኣብ ፈተነታት ሜቲሊን ብሉ ግብረ-ንጡፋት ዓይነታት ኦክስጅን ምዕቃን

ክልተ ቤተ-ምርምራት፣ ነፍሲ ወከፈን ናይ ሜቲሊን ብሉ ጸረ-ኦክሲደሽን ፈተነ ኢለን ዝጽውዕኦ የካይዳ። ሓንቲ፣ እቲ ሕብሪ ግብረ-ንጡፋት ዓይነታት ኦክስጅን ከም ዝገትእ ትገልጽ። እታ ካልኣይቲ ድማ ከም ዘፍርዮም ትገልጽ። ክልቲአን ንጹራት ናይ መጠንን ምላሽን ኩርባታት የርእያ። ክልቲአን ብቅንዕና ይሰርሓ። እቲ ፍልልይ ምጭብርባር ወይ ብቕዓት ምጉዳል ኣይኮነን። እቶም ክልተ ጉጅለታት ኣብ ትሕቲ ዝተፈላለየ ብርሃን፣ ንዝተፈላለዩ ሕቶታት ብዝምልሱ መርመሪ ንጥረ ነገራት፣ ዝተፈላለዩ ነገራት ስለ ዝዓቀኑ እዩ። ድሕሪኡ ድማ ንክልቲኦም መልስታት ብሓደ ቃል ገሊጾምዎም፦ ROS።

ሜቲሊን ብሉ ክዕዘቦ ኣብ ዝግባእ ኬሚካዊ መስርሕ ባዕሉ ስለ ዝሳተፍ፣ ብልክዕ ንምዕቃን ኣጸጋሚ ሞለኪዩል እዩ። ኣብ ጸልማት፣ ኤሌክትሮናት ኣብ መንጎ ለገስትን ተቐበልትን የመላልስ፣ ዳግማይ ዑደት ንምክያድ ድማ ናብ መጀመርታ መልክዑ ይምለስ። ኣብ ትሕቲ ብርሃን፣ ብብርሃን ዝነጥፍ ኣተባባዒ ግብረመልሲ ይኸውን። ናብ ዝተነቓቐሐ ትሪፕሌት ኩነታት ብምብጻሕ፣ ካብኡ ጸዓት ናብ ኦክስጅን ብምሕላፍ ሲንግሌት ኦክስጅን ከፍሪ፣ ወይ ኤሌክትሮናት ብምትሕልላፍ ራዲካላትን ሃይድሮጅን ፐሮክሳይድን ከፍሪ ይኽእል። ኣብዚ ስርዓት ዝኣቱ ዝኾነ መርመሪ ንጥረ ነገር፣ በቲ ሕብሪ ባዕሉ ኦክሲደሽን ወይ ሪዳክሽን ክገብር፣ ክሃስስ፣ ወይ ብኦፕቲካዊ መንገዲ ክሽፈን ይኽእል። ስለዚ ናይ ዝኾነ ROS ንባብ ቀዳማይ ሕቶ፣ እቲ ቁጽሪ ክንደይ ምዃኑ ፈጺሙ ኣይኮነን። እቲ መርመራ ብሓቂ እንታይ ከም ዝረክብን እቲ ሕብሪ ነቲ መርመራ እንታይ ከም ዝገብሮን እዩ።

Amplex Red፦ ካሊብሬሽን ዝተገብረሉ መርመራ ሃይድሮጅን ፐሮክሳይድ

እቲ ሜቲሊን ብሉን Amplex Redን ዘጣምር ኣገባብ፣ ብትኽክል ምስ ዝዳሎ፣ ኣብዚ ስነ-ጽሑፍ እቲ ዝያዳ ብመርትዖ ክድገፍ ዝኽእል ጥምረት እዩ። እቲ ኬሚካዊ ግብረመልሲ ፍሉይ እዩ፦ ሆርስራዲሽ ፐሮክሲዳዝ፣ ሃይድሮጅን ፐሮክሳይድ ተጠቒሙ፣ ነቲ Amplex ሰብስትሬት ኦክሲደሽን ብምግባር ረዞሩፊን ዝተባህለ ፍሎረሰንስ ዘውጽእ ውጽኢት ይፈጥር፤ እቲ ስቶይኪዮሜትሪ ድማ ብግምት ሓደ ንሓደ እዩ። ካብቲ ናሙና ዝመጽእ ፐሮክሳይድ፣ ኣብቲ መለለዪ ናብ ፍሎረሰንስ ይቕየር። ካብቶም ብልሙድ ኣብ ስድራ ROS ዝምደቡ ካልኦት ንጥረ ነገራት፣ ነዚ ግብረመልሲ ብቐጥታ ዘካይድ የለን።

እቲ ወሳኒ ብልጫ ካሊብሬሽን እዩ። ጥንቃቐ ዝገብር ተመራማሪ፣ ዝፍለጥ መጠን ዘለዎም መወከሲ ፐሮክሳይዳት ኣብ ተመሳሳሊ ባፈር፣ ብተመሳሳሊ ክምችት ፐሮክሲዳዝን ሰብስትሬትን፣ ብተመሳሳሊ ግዜ ኢንኩቤሽንን ኦፕቲካዊ ቅጥዕታትን ይምርምር። ድሕሪኡ ነቶም ናሙናታት ምስቲ ኩርባ ብምንጽጻር የንብቦም። ኣብቲ ነዚ ኣገባብ መሰረት ዝኾነ፣ ብዝተነጸሉ ናይ ሓንጎል ማይቶኮንድርያታት ዝተኻየደ መጽናዕቲ፣ እቶም ደረስቲ ብልክዕ ከምዚ ገይሮም። ኣብ መወዳእታ ነፍሲ ወከፍ ፈተነ ዝፍለጥ መጠን ፐሮክሳይድ ወሲኾም፣ እቶም ቁጽርታት ድማ ብዘይ ካሊብሬሽን ዝወሃቡ ኣሃዱታት ፍሎረሰንስ ዘይኮነስ፣ ብፒኮሞል ኣብ ደቒቕ ንነፍሲ ወከፍ ሚሊግራም ፕሮቲን ከም ፍጥነት መስርሕ ተገሊጾም። ንብርሃን ናብ መለክዒ ዝቕይሮ እዚ እዩ።

ካብቲ መጽናዕቲ ሰለስተ ዝርዝራት ክስዓቡ ይግባእ። ቀዳማይ፣ እቶም ደረስቲ ነቲ ምልክት፣ ፐሮክሳይድ ብዘፍርስ ካታላዝ ኣረጋጊጾምዎ። ሜቲሊን ብሉ ዘስዓቦ ምውሳኽ ፍሎረሰንስ፣ ካታላዝ ምስ ተወሰኸ ደው ኢሉ። እዚ ድማ እቲ ምልክት ፐሮክሳይድ እምበር ኦፕቲካዊ ኣርቲፋክት ከም ዘይኮነ ኣረጋጊጹ። ካልኣይ፣ ነቲ ናይ ምንቕቓሕ ጩራ ብምዕጻውን ምኽፋትን፣ እቶም ናሙናታት ካብቲ ንቡር መጠን ብርሃን ሓደ ስምንተኛ ጥራይ ክቕበሉ ብምግባር፣ ጽልዋ ብርሃን ብቐጥታ ፈቲኖም። እቲ ምልክት ድማ ብትሽዓተ ሚእታዊት ጥራይ ጎዲሉ። ካብቲ ዝገለጽዎ ፐሮክሳይድ ልዕሊ ተስዓ ሚእታዊት፣ ካብ ብርሃን መለክዒ ነጻ ነይሩ። ሳልሳይ፣ ምውጋድ ፐሮክሳይድ ብኤሌክትሮድ በይኑ ዓቂኖም፣ እቲ ሕብሪ ምፍራይ ከም ዘወስኽን ምውጋድ ድማ ከም ዘዘግይን ረኺቦም። ዝተረፈ ንጹህ መጠን ፍሎረሰንስ ጥራይ ዝገልጽ መርመሪ ንጥረ ነገር፣ ነዞም ክልተ ጽልዋታት ምሓወሶም ነይሩ።

እዚ መርመራ ገና ዘይሰርሓሎም ኩነታት ኣለዉዎ፣ ሜቲሊን ብሉ ድማ ሓያሎ ካብኣቶም የስዕብ። እቲ ሕብሪ፣ ረዞሩፊን ብርሃን ኣብ ዘውጽኣሉ ተመሳሳሊ ቀይሕ ክልል፣ ብሰፊሑ ብርሃን ይምጠጥ። ስለዚ ክምችት ሕብሪ ልዑል ምስ ዝኸውን፣ እቲ ናሙና ብጽልዋታት ውሽጣዊ ማጽረዪ ነቲ ናቱ ምልክት ክሽፍኖ ይኽእል። ስለዚ እቶም መወከሲ ናሙናታት፣ ምስቶም ዝምርመሩ ናሙናታት ተመሳሳሊ ክምችት ሕብሪ ክህልዎም ይግባእ። Amplex Red ባዕሉ እውን ብብርሃን ኦክሲደሽን ክገብር ይኽእል። ውጽኢቱ ረዞሩፊን ድማ ሱፐርኦክሳይድን ፐሮክሳይድን ናብ ዘፍሪ ናይ ፎቶሬዶክስ ዑደት ክኣቱ ይኽእል። እቲ ፈተነ ብብርሃን ዝነጥፍ ኣተባባዒ ግብረመልሲ እውን ንብርሃን ዘቃልዕ ምስ ዝኸውን፣ እዚ ኣዝዩ ኣገዳሲ እዩ። እቲ ተግባራዊ መፍትሒ፣ ነቶም ናይ ሜቲሊን ብሉ ናሙናታት መጀመርታ ንጩራ ብርሃን ምቅላዕ፣ ድሕሪኡ ዝተወሰኑ ክፋላቶም ብናይ Amplex ሪኤጀንታት ኣብ ጸልማት ምምርማር እዩ፤ ሕብርን መርመሪ ንጥረ ነገርን ብሓባር ንብርሃን ምቅላዕ ኣይኮነን። ኣብ መወዳእታ፣ ሱፐርኦክሳይድ ዲስሙታዝ ንናይ Amplex ምልክት ጥራይ ኣይገትኦን፦ ሱፐርኦክሳይድ ናብ ፐሮክሳይድ ምቕያር ነቲ ምልክት ከወስኾ ይኽእል። ፍሎረሰንስ ዘወስኽ ናይ SOD ቁጽጽር ፈተነ ኣይፈሸለን። ሱፐርኦክሳይድ ኣብ ቀደም ዝበለ ደረጃ መስርሕ ከም ዘሎ ለልዩ እዩ።

DCFDA፦ ፍሉይነት ዘይብሉ ኣመልካቲ ኦክሲደሽን

እቲ ሜቲሊን ብሉን DCFDAን ዘጣምር ኣገባብ፣ ምንጪ መብዛሕትኡ ምድንጋር እዩ። DCFH-DA ናብ ዋህዮ ዝኣቱ ቅድመ-ንጥረ ነገር እዩ። ኣብ ውሽጢ ዋህዮ ዘለዉ ኤስተራዛት፣ ናይ ኣሰቴት ጉጅለታቱ የውግዱ፣ ፍሎረሰንስ ዘየውጽእ DCFH ድማ ይተርፍ። DCFH ኦክሲደሽን ምስ ዝገብር፣ ፍሎረሰንስ ዘውጽእ DCF ይፍጠር። ኦክሲደሽን ከም ዝገብር ዝገብሩዎ ነገራት ብዙሓት እዮም፦ ሃይድሮክሲል ራዲካላት፣ ናይ ፐሮክሲዳዝን ሂምን ማእከላይ ውጽኢታት፣ ናይትሮጅን ዳይኦክሳይድ፣ ሃይፖክሎረስ ኣሲድን ካብ ፐሮክሲናይትራይት ዝመነጩ ራዲካላትን። ሃይድሮጅን ፐሮክሳይድ በይኑ፣ ብዝኾነ ጠቓሚ ፍጥነት ብቐጥታ ኦክሲደሽን ኣየካይደሉን፤ ኣብ ፐሮክሳይድ ዝምርኮስ ፍሎረሰንስ፣ ብሓፈሻ ኣብቲ መስርሕ ሓጺን፣ ሂም ዘለዎም ፕሮቲናት፣ ወይ ናይ ፐሮክሲዳዝ ኬሚካዊ ግብረመልሲ የድልዮ።

ነፍሲ ወከፍ ናይ ኣገባባት ክፍሊ ክጠቕሶ ዝግባእ ነቐፌታ፣ ካብቲ ካልያናራማንን መሳርሕቱን DCFH ከም መርመሪ ንጥረ ነገር ዝተንተንዎ ትንታነ ዝመጽእ እዩ። ከምቲ ኣብ በዚ ምኽንያት DCFDA ዝነጸገ ናይ ሓንጎል ማይቶኮንድርያ መጽናዕቲ ተጠቓሊሉ ዘሎ፣ እቲ ሕብሪ ብዝሑል ፍጥነት፣ ብዘይተገለጸ ስቶይኪዮሜትሪ፣ ብዘይ ቅቡል ካሊብሬሽን፣ ምስ ROS ዘይኮኑ ውህዶታት እውን ግብረመልሲ ከም ዝገብር ኣርእዮም። እቲ መርመሪ ንጥረ ነገር ነቲ ዝዕቅኖ እውን የዕብዮ፦ DCFH ሓደ ኤሌክትሮን ብምስኣን ኦክሲደሽን ምስ ዝገብር፣ ምስ ኦክስጅን ግብረመልሲ ብምግባር ሱፐርኦክሳይድ ዘፍሪ DCF ራዲካል ይፍጠር። እቲ ሱፐርኦክሳይድ ድማ ብዲስሙቴሽን ተወሳኺ ፐሮክሳይድ ይፈጥር። እቲ ንባብ፣ ካብቲ ዝገልጾ ኬሚካዊ መስርሕ ክፋል ባዕሉ የፍሪ።

ካብዚ ዝኾነ ነገር DCFDA ዘይጠቅም ኣይገብሮን። ናይ መጀመርታ መጻረዪ መርመራ እምበር መለለዪ ከም ዘይኮነ እዩ ዘርኢ። ናይ DCF ፍሎረሰንስ ምውሳኽ፣ ኣብ ኦክሲዳንት ዝምርኮስ ኦክሲደሽን መርመሪ ንጥረ ነገር ከም ዝወሰኸ ማለት እዩ። ፐሮክሳይድ ወሲኹ ማለት ኣይኮነን፣ ብርግጽ ድማ ጠቕላላ ROS ወሲኹ ማለት ኣይኮነን፤ ጠቕላላ ROS ብሓደ መርመሪ ንጥረ ነገር ጥራይ ዝዕቀን መጠን ኣይኮነን። ኣብ ልዕሊ ሓደ ማይክሮሞላር ብኦክሲደሽን DCF ዝተማርኮሰ ቀደም ዝበለ ምርምር ሜቲሊን ብሉ፣ ኦክሲደሽን ዘተባብዑ ጽልዋታት ገሊጹ። ኣብ ተመሳሳሊ ዘመን ዝተመርመሩ ካልኦት ስርዓታት ግን፣ ፐሮክሳይድ ካብ ዘስዕቦ ሞት ዋህዮ ሓለዋ ከም ዘሎ ገሊጾም። እዞም ክልተ ትዕዝብታት፣ ኣብ ዝተፈላለዩ ናይ ሬዶክስ ኩነታት ንሓደ ሕብሪ ብሓባር ሓቂ ክኾኑ ይኽእሉ። ናይ DCF ውጽኢት በይኑ ድማ፣ ነቲ ምልክት ኣየናይ ኦክሲዳንት ከም ዘስዓቦ ክገልጽ ኣይክእልን። እቲ ቀደም ዝበለ ናይ ሓንጎል ማይቶኮንድርያ ምርምር ኣገዳሲ ዝኸውን፣ ነዚ መጻረዪ መርመራ ብካሊብሬሽን ዝተገብረሉ መለክዒ ፐሮክሳይድ ተኪኡ፣ ነቲ ጽዕነት ብቐጥታ ስለ ዝረኸቦ እዩ፦ ሚእቲ ናኖሞላር ሕብሪ ጥራይ እውን፣ ኣብ ኩሎም ዝተፈተኑ ሰብስትሬታትን ናይ ምትንፋስ ኩነታትን፣ ምፍናው ፐሮክሳይድ ብሓያሎ ዕጽፊ ኣወሲኹ።

DCFDA ምስ ሜቲሊን ብሉ ዝተኣሳሰር ሓደ ተወሳኺ መጻወድያ ኣለዎ። እቲ ሕብሪ ኣዝዩ ሕብራዊን ብሬዶክስ ንጡፍን ስለ ዝኾነ፣ ፍሎረሰንስ ከሃስስ፣ ምውጻእ ብርሃን ክገትእ፣ ወይ ካብ ናይ ዋህዮ ROS ብነጻ ነቲ መርመሪ ንጥረ ነገር ኦክሲደሽን ከግብሮ ይኽእል። ሕብርን መርመሪ ንጥረ ነገርን ዘለዎ፣ ዋህዮታት ግን ዘይብሉ ቁጽጽር ፈተነ፣ ከም ኣማራጺ ጥራይ ዝግበር ማስተኻኸሊ ኣይኮነን። እቲ ሕብሪ ምስቲ መርመሪ ንጥረ ነገር ግብረመልሲ ይገብር እንተሎ ዝነግረካ ፈተነ እዩ።

ስፒን ምጽማድን ምውሳድ ኦክስጅንን፦ መንነትን ዋሕዚን

እቶም ፍሎረሰንስ ዘውጽኡ መርመሪ ንጥረ ነገራት፣ ኦክሲደሽን ክገብር ዝኽእል ነገር ከም ዝተፈጥረ ኣብ ዝገልጹሉ፣ ብመጻወድያታት ስፒን ዝግበር ናይ ኤሌክትሮን ስፒን ሬዞናንስ፣ እቲ ነገር እንታይ ምዃኑ ንምፍላጥ ዝቐረበ ሓበሬታ ይህብ። እቲ ዝፍለጥ ናይ ሜቲሊን ብሉ ፎቶኬሚስትሪ መጽናዕቲ፣ ካብ ሕብሪ፣ ኣስኮርቤትን ብርሃንን ዝፍጠር ኣስኮርቤት ራዲካል ንምርካብ ESR ተጠቒሙ። ድሕሪኡ ኣብ ናይ ምውሳድ ኦክስጅን ፈተነታት ምፍጣር ፐሮክሳይድ፣ ኣብ ናይ ስፒን ምጽማድ ፈተነታት ድማ ብሓጺን ዝተኻተለዘ ምፍጣር ሃይድሮክሲል ራዲካል ኣርእዩ። ነፍሲ ወከፍ ቴክኒክ፣ እቶም ካልኦት ክምልሱዎ ዘይክእሉ ሕቶ መሊሱ፦ ESR መንነት ራዲካል ሂቡ፣ ምውሳድ ኦክስጅን ካብ ዝኾነ ፍሎረሰንስ ዘውጽእ መርመሪ ንጥረ ነገር ነጻ ዝኾነ ዋሕዚ ግብረመልሲ ሂቡ፣ እቲ ጥምረት ድማ ኣብ ተመሳሳሊ ብብርሃን ዝተቓልዐ ስርዓት፣ ናይ ሲንግሌት ኦክስጅንን ራዲካላትን መስመራት ብሓባር ከም ዝሰርሑ ኣርእዩ።

እቲ ናይ 1984 ውጽኢት ገና ከም መጠንቀቕታ ይንበብ። ብርሃንን ሪዳክሽን ዘካይድ ንጥረ ነገርን ኣብ ዘለዉሉ፣ እቲ ሕብሪ ፐሮክሳይድ ኣፍርዩ። ሓጺን ኣብ ዘለዎ ኩነታት ድማ፣ እቲ ስርዓት ሃይድሮክሲል ራዲካል፣ ካብቶም ዝተመርመሩ ዓይነታት እቲ ዝበለጸ ግብረ-ንጡፍ፣ ኣፍርዩ። እቶም ደረስቲ ነዚ ምስ ኣብ ዓይኒ ዘሎ ኣስኮርቤት ኣተኣሳሲሮም፣ ብዘይ እኹል ጥንቃቐ ኣብ ዓይኒ ንዝግበር ኣጠቓቕማ ኣብ ሕቶ ኣእትዮምዎ። ዘመናዊ ኣንበብቲ ነቶም ኩነታት ከስተውዕሉሎም ይግባእ፦ ብርሃን ምስ ሪዳክሽን ዘካይድ ንጥረ ነገር ምስ ሓጺን። ካብዚኦም ዝኾነ ሓደ ምስ ዝውገድ፣ እቲ መስመር ግብረመልሲ ይደክም ወይ ይጠፍእ።

ናይ ኦክስጅን ኤሌክትሮዳት ብኻልእ መንገዲ ኣገዳስነቶም የረጋግጹ። ናይ ክላርክ ዓይነት ኤሌክትሮድ፣ ንጹህ ሃልኪ ኦክስጅን ይዕቅን። እዚ ድማ ብሕብሪ ዝድረኽ ሬዶክስ ኬሚካዊ መስርሕ፣ ሞለኪዩላዊ ኦክስጅን ይሃልኽ ከም ዘሎ የረጋግጽ፣ ዝኾነ ናይ ፍሎረሰንስ ኣርቲፋክት ክፈጥሮ ዘይክእል ናይ ፍጥነት ግብረመልሲ ሓበሬታ ድማ ይህብ። ነቲ ውጽኢት ግን ኣይለልዮን። ምፍጣር ፐሮክሳይድ፣ ሱፐርኦክሳይድን ማይን፣ ከምኡውን ምርጋፍ ሲንግሌት ኦክስጅን፣ ኩሎም ኦክስጅን ይሃልኹ። መንነት ዘይብሉ ዋሕዚ፣ ልክዕ ከም ዋሕዚ ዘይብሉ መንነት፣ ዘይተማልአ እዩ። ስለዚ ድማ ድልዱላት ምርምራዊ ጽሑፋት፣ ነቲ ኤሌክትሮድ ምስ ካሊብሬሽን ዝተገብረሉ መርመራ ፐሮክሳይድ ወይ መጻወድያ የጣምሩዎ።

ውጽኢታት ጸረ-ኦክሲደሽን ስለምንታይ ይጋጨዉ

ነቶም ሰለስተ ንባባት ጎኒ ጎኒ ምስ እተነጻጽሮም፣ ኣብ ስነ-ጽሑፍ ሜቲሊን ብሉ ዝርኣዩ ግጭታት፣ ብፍልልያት ኣገባብን ብሰለስተ ባዮሎጂያዊ ሓቅታትን ይግለጹ።

ቀዳማይ፣ እቲ ሕብሪ ክልቲኡ፣ ኤሌክትሮናት ዘመላልስን ምንጪ ፐሮክሳይድን እዩ። ኤሌክትሮናት፣ ኦክስጅን እንተዘይተኣልየ ናብ ሱፐርኦክሳይድ ኣብ ዝቕየረሎም ናይ ምትንፋስ ቦታታት ከይበጽሑ ብምእላይ፣ ሓደ ROS ክንኪ ይኽእል። እቲ ሪዳክሽን ዝገበረ መልክዑ ግን፣ ኦክስጅን ብቐጥታ ናብ ፐሮክሳይድ ብምቕያር ካልእ ROS የወስኽ። ስለዚ፣ ናይ ማይቶኮንድርያ ሬዶክስ ኬሚካዊ መስርሕን ብኣማራጺ መስመር ናይ ምሕላፍ ተራኡን ዝምርምር ቤተ-ምርምር፣ ኣብ ዓይነት መርመሪ ንጥረ ነገር ዝምርኮሱ መልስታት ክጽበ ይግባእ፦ ኣብ ተመሳሳሊ ኩቬት፣ ንሱፐርኦክሳይድ ተኣፋፊ ዝኾነ ንባብ ይወርድ፣ ናይ ፐሮክሳይድ ንባብ ግን ይድይብ።

ካልኣይ፣ ኣብ ትሑት መጠን ዘሎ ፐሮክሳይድ፣ ምልክት እዩ፣ ጉድኣት ጥራይ ኣይኮነን። ነቲ ቀደም ዝበለ ምርምር ዝሰዓበ፣ ኣብ ናይ ኣናጹ ሓንጎል ማይቶኮንድርያታት ዝተኻየደ መጽናዕቲ፣ ካብ ሓምሳ ናኖሞላር ጥራይ ዝኾነ መጠን ሕብሪ ፐሮክሳይድ ከም ዝፍጠር፣ ኣብ ሕክምናዊ ደረጃታት ግን ኣብ DNA ማይቶኮንድርያ ጉድኣት ከም ዘይነበረ ረኺቡ። ኣቐዲምካ ምስ ተጠቐምካሉ ድማ፣ ሮቴኖን ካብ ዘስዕቦ ጉድኣት ሓለዋ ተራእዩ። ካብ ሕክምናዊ ክልል ኣዝዩ ንላዕሊ ኣብ ዝኾነ ሚእቲ ማይክሮሞላር ጥራይ፣ እቲ ሕብሪ ንዝተወሰኑ ቁርጽራጻት DNA ጎዲኡ። ቀይሕ ብርሃን ምስ ዕስራ ማይክሮሞላር ሕብሪ ድማ፣ ንኹሎም ዝተፈተኑ ቁርጽራጻት ዝጎድእ ሲንግሌት ኦክስጅን ኣፍርዩ። እቲ ዝተጠቖመ መካኒዝም ሆርሜሲስ እዩ፦ ፈኲስ ምፍራይ ፐሮክሳይድ፣ ምስ Nrf2 ዝተኣሳሰሩ ጸረ-ኦክሲደሽን መከላኸሊታትን ምፍጣር ማይቶኮንድርያታትን የበግስ። ስለዚ ኦክሲደሽን ምትብባዕ ዘርኢ ሓጺር እዋን ንባብ፣ ቅድሚ ናይ ነዊሕ እዋን ጸረ-ኦክሲደሽን ውጽኢት ይመጽእ። ኣብ ሓደ ሰዓት ዝተነበበ መርመራን ኣብ ሓደ መዓልቲ ዝተነበበ መርመራን፣ ኣብ መንጎኦም ባዮሎጂ ስለ ዝተቐየረ፣ ክጋጨዉ ይኽእሉ።

ሳልሳይ፣ ብርሃን ኣየናይ ሞለኪዩል ከም ዘሎ እውን ይውስን። ንብርሃን ምቅላዕ፣ ካብቲ ሕብሪ ናይ ሜቲል ጉጅለታት ብምእላይ፣ ናብ Azure Bን ተዛመድቲ ውጽኢታትን ይቕይሮ። ኣብ ልዕሊ ሳሕኒ ዘሎ መብራህቲ ማይክሮስኮፕ ድማ፣ ብብርሃን ከነጥፎ እኹል እዩ። ኣብ ጸልማትን ኣብ ብርሃንን ዝካየዱ ፈተነታት፣ ዝተፈላለዩ ፈተነታት እዮም። ኣብ ዝኾነ ፕሮቶኮል ዘሎ ናይ ብርሃንን ኣተሓሕዛ ሕብርን ቁጽጽር ፈተነታት ክፍሊ ድማ፣ ከምኡ ገይሩ ክሕዞም ይግባእ።

ዝነኣሰ ዘድሊ ስብስብ ቁጽጽር ፈተነታትን ዝኾነ መግለጺ ከመይ ከም እትግምግሞን

እዚ ኣብ ታሕቲ ዘሎ ምንጽጻር፣ ነዚ ዓንቀጽ ዝተዳለወ መበቆላዊ መወከሲ እዩ። ዝኾነ ናይ ሜቲሊን ብሉ ROS ውጽኢት ቅድሚ ምቕባልካ፣ እቶም ደረስቲ ኣየናይ መስርዕ ከም ዝመልኡን ኣየናይ ከም ዝሰገሩን መርምር።

ቁጽጽር ፈተነእንታይ ይነጽግከመይ ከም ዝካየድ
ጸልማት ምስ ዝተወሰነ ብርሃን ምንጽጻርናይ መሰረታዊ ኩነታት ሬዶክስ ጽልዋታት ምስ ፎቶኬሚስትሪ ምሕዋስተመሳሳሊ ሕብሪ፣ ተመሳሳሊ ናሙናዊ ማትሪክስ፤ ሓደ ክፋል ኣብ ጸልማት፣ ካልእ ኣብ ትሕቲ ዝተዓቀነ መጠን ብርሃን
መርመሪ ንጥረ ነገር ምስ ብርሃን፣ ብዘይ ሕብሪናይ መርመሪ ንጥረ ነገር ፎቶኬሚስትሪነቲ መርመሪ ንጥረ ነገር በይኑ ንብርሃን ኣቃልዖ፤ ዝኾነ ምልክት መሰረታዊ ደረጃ ኣርቲፋክት እዩ
ሕብሪ ምስ ብርሃን፣ ብዘይ ዋህዮታት ወይ ሰብስትሬትናይ ዋህዮ ROS ምስ ናይቲ ሕብሪ ባዕሉ ROS ምሕዋስዋህዮታት ዘይብሉ ማትሪክስ፤ እቲ ሕብሪ ባዕሉ እንታይ ከም ዘፍሪ የረጋግጽ
ካታላዝኣብ ናይ Amplex መርመራ ካብ ፐሮክሳይድ ዘይመጽእ ምልክትእቲ ምልክት ክወርድ ይግባእ፤ ንብርሃን ዝተቓልዐ ሕብሪ ነቲ ካታላዝ ባዕሉ ክጎድኦ ከም ዝኽእል ኣስተውዕል
SODተሳትፎ ሱፐርኦክሳይድናይ Amplex ምልክት ምውሳኽ፣ ሱፐርኦክሳይድ ኣብ ቀደም ዝበለ ደረጃ መስርሕ ከም ዝሳተፍ የመልክት፣ ምፍሻል መርመራ ኣይኮነን
ከም ዴፈሮክሳሚን ዝበለ ሓጺን ዝኣስር ንጥረ ነገርናይ ፌንተን ዓይነት ሃይድሮክሲል ኬሚካዊ ግብረመልሲብሬዶክስ ንጡፍ ዝኾነ ሓጺን፣ ነቲ ናይ DCFH ወይ መጻወድያ ምልክት የስዕቦ እንተሎ ይፍትን
ኣብ ምሉእ ማትሪክስ ዝተዳለዉ መወከሲ ፐሮክሳይዳትካሊብሬሽን ዘይተገብረሉ ፍሎረሰንስብተመሳሳሊ ክምችት ሕብርን ኦፕቲካዊ ኩነታትን፣ ዝፍለጥ መጠን ፐሮክሳይድ ምውሳኽ

ካብዚ ተግባራዊ ሕጊ ንባብ ይወጽእ። Amplex ምስ ፐሮክሲዳዝ፣ ካሊብሬሽን ተገይሩሉን ብካታላዝ ተረጋጊጹን እንተኾይኑ፣ ብዛዕባ ፐሮክሳይድ መርትዖ እዩ። DCFDA ብዛዕባ ፍሉይነት ዘይብሉ ኦክሲደሽን መርመሪ ንጥረ ነገር መርትዖ እዩ፣ ካብኡ ንላዕሊ ድማ ኣይኮነን። ራዲካላት ብዝውግዱ ንጥረ ነገራት ምስ ዝግበሩ ቁጽጽር ፈተነታት ዝተደገፈ ስፒን ምጽማድ፣ ብዛዕባ መንነት ራዲካል መርትዖ እዩ። ምውሳድ ኦክስጅን፣ ብዛዕባ ዋሕዚ መርትዖ እዩ። ካብቲ መርመራኡ ክድግፎ ዝኽእል ንላዕሊ ዝገልጽ ሓረግ፣ ብዝኾነ ደረጃ እምነት ተጻሒፉ ይኹን፣ ብዛዕባ እቲ መርመሪ ንጥረ ነገር እምበር ብዛዕባ እቲ ሕብሪ ዝገልጽ ሓረግ ኣይኮነን። ብዛዕባ ኣብ መጠን ምምርኳስን ናይ ሆርሜሲስ ክልልን፣ ኣብ ማይቶኮንድርያ ዋሕዚ ኤሌክትሮናት፣ ኣብ ብሕብሪ ዝተቐለሙ ናሙናታት ዘጋጥም ምትእትታው መርመራ፣ ከምኡውን ኣብ ማይክሮስኮፒ ብብርሃን ዝፍጠሩ ኣርቲፋክታት ዝግበሩ ተዛመድቲ ምይይጣት፣ ንነፍሲ ወከፍ ካብዞም ነጥብታት የስፍሑዎ። ግዝያዊ መወከሲኡ ምስ ተተክአ እውን፣ ነፍሲ ወከፍ ነጥቢ ቅቡልነቱ ይዕቅብ።