ዓንቀጽ

መቲሊን ብሉ ኣብ ናይ G6PD ላቦራቶሪ መርመራታት፦ እቲ ሕብሪ ብሓቂ እንታይ ይገብር?

መቲሊን ብሉ ኣብ ናይ G6PD ላቦራቶሪ መርመራታት፦ እቲ ሕብሪ ብሓቂ እንታይ ይገብር?

ሓደ ተማሃራይ፣ ድሕሪ ምቕያጥ፣ ክልተ ቱቦታት ይዕዘብ። ሓደ ናብቲ ዝተጸበዮ ሕብሪ ተቐይሩ ኣሎ። እቲ ካልኣይ ግን ኣይተቐየረን። እቲ ተማሃራይ፣ እቲ ካልኣይ ተሓካሚ ሕጽረት ግሉኮዝ-6-ፎስፌት ዲሃይድሮጀኔዝ ከም ዘለዎ ይድምድም። እዚ መደምደምታ ቅኑዕ ክኸውን ይኽእል እዩ፣ ግን እቲ ኣተሓሳስባ ነቲ መርመራ ከም ዝሰርሕ ዝገብሮ መሰረታዊ ሓሳብ ይሓልፎ። ኣብቲ ቱቦ ነቲ ኤንዛይም ብቐጥታ ዝዕቅን ነገር የለን። እቲ ቱቦ፣ መቲሊን ብሉ ከም መንጎኛ ብምጥቃም፣ ነቲ ኤንዛይም ዘፍርዮ ነገር እዩ ዝዕቅን።

እዚ ብተዘዋዋሪ ዝሰርሕ መስርሕ ምስ ተነጸረ፣ እቲ ኣሰራርሓ፣ ናይ መቆጻጸሪ ናሙናታትን እቲ ነዊሕ ዝርዝር ጌጋ ውጽኢታትን ከም ብዘይ መሰረት ዝተወሰኑ ነገራት ምርኣይ የቋርጹ።

እቲ ሓጺር መልሲ

መቲሊን ብሉ ኣብ መርመራ G6PD ናይ ሪዶክስ መመልከቲ እዩ። እቲ ኤንዛይም G6PD፣ NADPH የፍሪ፤ ኣብ NADPH ዝምርኮሱ ስርዓታት ድማ ነቲ ሰማያዊ መቲሊን ብሉ ብሪዳክሽን ናብ ሕብሪ ዘይብሉ ሉኮ ቅርጹ ይቕይርዎ፣ ወይ ኤሌክትሮናት ንምስግጋር ይጥቀሙሉ። ንቡር ንጥፈት ኤንዛይም ውጽኢታዊ ሪዳክሽን ይፈጥር። ዝጎደለ ንጥፈት ድማ ቀስ ዝብል ወይ ዘይተማልአ ሪዳክሽን ይፈጥር። እቲ ምልክት ብምሉኡ እዚ እዩ።

ክልተ ታሪኻዊ ሜላታት ሓደ ዓይነት ሕብሪ ይጥቀሙ፣ ግን ብመወዳእታ መለክዒኦም ይፈላለዩ። በበይኖም እንተ ርኢኹምዎም፣ መብዛሕትኡ ምድንጋር ይጠፍእ።

ክልተ መርመራታት፣ ሓደ ሕብሪ፣ ዝተፈላለዩ መወዳእታ መለክዒታት

እቲ ቀዳማይ፣ Sassን መሳርሕቱን ዝገለጽዎን ጸኒሑ Gibbs ዝገምገሞን፣ ቀጥታዊ መርመራ ሪዳክሽን መቲሊን ብሉ እዩ። ኣብዚ እቲ መወዳእታ መለክዒ እቲ ሕብሪ ባዕሉ እዩ፦ ኦክሲደሽን ዝተኻየደሉ ሰማያዊ መቲሊን ብሉ፣ ብሪዳክሽን ናብ ሕብሪ ዘይብሉ ሉኮመቲሊን ብሉ ይቕየር፤ ናህሪ እዚ ለውጢ ድማ ናይ NADPH ምፍራይ ዓቕሚ የንጸባርቕ። እቲ መበቆላዊ ጽሑፍ መባእታዊ መርመራ፣ ኣብ PubMed ብስም Sassን መሳርሕቱን (1966) ተመዝጊቡ ኣሎ።

እቲ ካልኣይ፣ ናይ Brewer መርመራ ሪዳክሽን ሜትሄሞግሎቢን እዩ። ሶድየም ናይትራይት መጀመርታ ንሄሞግሎቢን ብኦክሲደሽን ናብ ቡናዊ ሜትሄሞግሎቢን ይቕይሮ። ድሕሪኡ መቲሊን ብሉ ከም መንጎኛ ምትሕልላፍ ኤሌክትሮናት ይሰርሕ፦ ሪዳክሽን ዝተኻየደሉ መቲሊን ብሉ፣ ሪዳክሽን ዘካይዱ ኣሃዱታት ናብ ሜትሄሞግሎቢን የመሓላልፍ፣ እንደገና ድማ ናብ ቀይሕ ሄሞግሎቢን ይቕይሮ። ስለዚ እቲ ብዓይኒ ዝርአ መወዳእታ መለክዒ፣ ቡናዊ ምስ ቀይሕ እዩ፣ ሰማያዊ ምስ ሕብሪ ዘይብሉ ኣይኮነን። እቲ መበቆላዊ ሜላ ኣብ መጽሔት ውድብ ጥዕና ዓለም (Brewerን መሳርሕቱን፣ 1960) ተሓቲሙ።

ንመርመራ Brewer፣ ሕብሪ ናይ ምውጋድ መርመራ ኢልካ ምጽዋዕ ብኬሚካዊ መዳይ ትኽክለኛ ኣይኮነን። እቲ ሕብሪ ኣብ ዑደት ይንቀሳቐስ፤ ሄሞግሎቢን ድማ ሕብሩ ይቕይር። እዚ ኣብ ታሕቲ ዘሎ ስእላዊ መግለጺ ንኽልቲኦም መንገድታት የርኢ።

ስእላዊ መግለጺ መንገዲ መርመራ፦ G6PD፣ NADPH የፍሪ፣ እዚ ድማ ንመቲሊን ብሉ ሪዳክሽን የካይደሉ፤ ኣብ ናይ Brewer ሜላ፣ ሪዳክሽን ዝተኻየደሉ ሕብሪ ንቡናዊ ሜትሄሞግሎቢን ናብ ቀይሕ ሄሞግሎቢን ይቕይሮ

እቲ መሰረታዊ ኬሚካዊ ግብረመልሲ

G6PD ነቲ ቀዳማይ ናይ ኦክሲደሽን ስጉምቲ ኣብ መንገዲ ፔንቶዝ ፎስፌት የቀላጥፎ፦

Glucose-6-phosphate + NADP+ becomes 6-phosphogluconolactone + NADPH + H+

ከምቲ Luzzattoን መሳርሕቱን ኣብ Blood (2020) ዝገለጽዎ፣ ብሱላት ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም፣ NADPH ንምርካብ ብዓቢኡ ኣብዚ መንገዲ ይምርኮሱ። NADPH ንግሉታትዮን ኣብ ሪዳክሽን ዝተኻየደሉ ኩነታት ይዕቅቦ፣ ነቲ ዋህዮ ድማ ካብ ብኦክሲደሽን ዝመጽእ ጉድኣት ይከላኸለሉ። መቲሊን ብሉ ከም ተቐባሊ ኤሌክትሮናት ናብዚ ስርዓት ይኣቱ። እኹል G6PD፣ እኹል NADPH የፍሪ፣ እዚ ድማ ውጽኢታዊ ሪዳክሽን የምጽእ። ትሑት G6PD ነቲ ሰንሰለት ኣብ ቀዳማይ መላግቦኡ ይበትኮ።

ነቲ ሕብሪ ከም መለክዒ መጠን ነዳዲ ሕሰቡዎ፣ ከም ሞተር ኣይኮነን። ብዛዕባ ቀረብ NADPH ሓበሬታ ይህብ። ነዚ ቀረብ ወይ ነቲ ዝንበብ ውጽኢት ዝቕይር ዝኾነ ካልእ ነገር፣ ኣብቲ ጂን ለውጢ ከይተፈጥረ፣ ነቲ መመልከቲ ከንቀሳቕሶ ይኽእል።

ናይ Brewer ዓይነት ኣሰራርሓ ብኸመይ ይካየድ?

ቀመራት ኬሚካዊ ኣጸግበርቲ ኣብ ዝተፈላለዩ ዓሰርተታት ዓመታት ተለዋዊጦም እዮም፣ ስለዚ ንምምሃር ዝቐርብ መግለጺ ከም ክሊኒካዊ ፕሮቶኮል ክውሰድ የብሉን። ነፍሲ ወከፍ ላቦራቶሪ ናቱ ዝተረጋገጸ መደበኛ ኣሰራርሓ ይኽተል። እዚ ጥንቃቐ ኣብ ግምት ብምእታው፣ እቲ ባህላዊ ኣቀራርባ ቱቦታት ከምዚ ይሰርሕ፣ ከምቲ ብሰለስተ ቱቦታትን ናይ 3 ሰዓታት ምቕያጥን ኣብ እዚ ዝተሓትመ ኣተገባብራ ዝተሰነደ፦

  1. ናይ ተሓካሚ ቱቦ፦ ሙሉእ ደም፣ ግሉኮዝ፣ ሶድየም ናይትራይትን መቲሊን ብሉን። ናይትራይት ሜትሄሞግሎቢን ይፈጥር፣ ግሉኮዝ ንሜታቦሊዝም ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም ይምግብ፣ እቲ ሕብሪ ድማ ኣብ NADPH ዝምርኮስ መሰጋገሪ ይኸውን።
  2. ኦክሲደሽን ዝተኻየደሉ መቆጻጸሪ፦ ደም፣ ናይትራይትን ግሉኮዝን፣ ግን መቲሊን ብሉ ዘይብሉ። ነቲ ቡናዊ ናይ ሜትሄሞግሎቢን መወዳእታ መለክዒ፣ ናይ ሕጽረት ንድፊ፣ የርኢ።
  3. ናይ ሄሞግሎቢን መቆጻጸሪ፦ ደምን ማይን። ነቲ ቀይሕ ናይ ሄሞግሎቢን መወዳእታ መለክዒ፣ ንቡር ንድፊ፣ የርኢ።
  4. ኣቕይጡ ንኹሎም ቱቦታት ኣብ ከባቢ 37 C፣ ብተለምዶ ን3 ሰዓታት፣ ቀስ ኢልኩም እናሓዋወስኩም።
  5. ኣቕጥኑ ካብ ነፍሲ ወከፍ ቱቦ ዝተወስደ ንእሽቶ ክፋል ናብ ዝተነጠረ ማይ ብምውሳኽ፣ ነቶም ዋህዮታት ንምፍራስን ንሕብሪ ብቐሊሉ ክነጻጸር ንምግባርን።
  6. ኣነጻጽሩ ናይቲ ተሓካሚ ቱቦ ምስቶም ክልተ መቆጻጸሪታት። ናብ ቀይሕ ምምላስ ኣርካቢ ናይ ሪዳክሽን ዓቕሚ ከም ዘሎ የመልክት። ቡናዊ ኮይኑ ምቕጻል ድማ ጉሉሕ ሕጽረት ከም ዘሎ ይእምት።

ሓደ ታሪኻዊ ቀመር፣ ኣስታት 1 mL ደም ምስ ኣስታት 180 mM ሶድየም ናይትራይት፣ 280 mM ዴክስትሮዝን 0.4 mM መቲሊን ብሉን ዝሓዙ ኣጸግበርቲ ይጥቀም ነይሩ። ነዞም ቁጽርታት ከም ኣብ ሳይንሳዊ ጽሑፋት ዝተጠቕሰ ኣብነት ውሰዱዎም፣ ከም ኣብ ኩሉ ቦታ ዝሰርሕ መለክዒ ኣይኮኑን።

ነቲ ውጽኢት ምንባብ

ንድፊኣብ Brewer ዝርአ መልክዕትርጉም
ንቡርናይቲ ተሓካሚ ቱቦ ናብቲ ቀይሕ ናይ ሄሞግሎቢን መቆጻጸሪ ይቐርብናይ ሪዳክሽን ዓቕሚ ልዕሊ መለክዒ ደረት መባእታዊ መርመራ ኣሎ
ሕጽረት ዘለዎናይቲ ተሓካሚ ቱቦ ቡናዊ ኮይኑ፣ ናብቲ ናይ ሜትሄሞግሎቢን መቆጻጸሪ ቀሪቡ ይተርፍመባእታዊ መርመራ ጉሉሕ ሕጽረት G6PD ከም ዘሎ ይእምት
ማእከላይእቲ ሕብሪ ኣብ መንጎ እቶም መቆጻጸሪታት ይወድቕፊኖታይፕ ኣይውስኑ፤ ነቲ ንጥፈት ብመጠናዊ መርመራ ዕቀኑዎ

ከምቲ ኣብ እዚ ናይ Malaria Journal ግምገማ ክፍተታት ምልላይ G6PD ዝተገልጸ፣ ዓይነታዊ መባእታዊ መርመራ ኣብ ከባቢ 30 ክሳብ 40 ፐርሰንት ናይ ንቡር ንጥፈት እዩ ብዝበለጸ ዝፈላሊ። ስለዚ ንቡር ውጽኢት መባእታዊ መርመራ፣ እቲ መርመራ ከቢድ ሕጽረት ከም ዘይረኸበ ማለት እዩ። ሙሉእ ብሙሉእ ንቡር ንጥፈት ከም ዘሎ ኣየረጋግጽን።

መባእታዊ መርመራ ስለምንታይ የጋጊ?

ድሕሪ ሄሞሊሲስ ዝመጽእ ሬቲኩሎሳይቶሲስ እቲ ልሙድ ምኽንያት ብጌጋ ንቡር ውጽኢት እዩ። መንእሰያት ቀያሕቲ ዋህዮታት ደምን ሬቲኩሎሳይታትን፣ ካብ ኣረጊት ዋህዮታት ዝበዝሕ G6PD ይሕዙ። ኣብ እዋን ሃንደበታዊ ሄሞሊሲስ፣ እቶም ዝኣረጉን ዝበለጸ ሕጽረት ዘለዎምን ዋህዮታት ኣቐዲሞም ጠፊኦም ክኾኑ ይኽእሉ፣ ንጥፈቱ ኣብ መርመራ ንቡር ዝርአ መንእሰይ ጉጅለ ዋህዮታት ጥራይ ድማ ይተርፍ። እዚ ባዮሎጂያዊ ኩነታት፣ ንመጠናዊ መርመራታት እውን የጋጊ እምበር፣ ብሕብሪ ዝግበሩ መባእታዊ መርመራታት ጥራይ ኣይኮኑን።

ኣብ ቀረባ እዋን ዝተገብረ ምውሳድ ደም ንሕጽረት ይሽፍኖ፣ ምኽንያቱ ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም ናይቲ ለጋሲ፣ ናቶም ኤንዛይም ናብቲ ናሙና ይውስኹ። Mayo Clinic Laboratories፣ ምውሳድ ደም ይዝርዝር፣ ምስ ሬቲኩሎሳይቶሲስን ጣልቃ ምእታው ጻዕዳ ዋህዮታት ደምን፣ ከም ሓደ ካብ ምኽንያታት ዘይእመኑ ውጽኢታት ኤንዛይም።

ሄተሮዛይጎት ዝኾና ደቂ ኣንስትዮ እቲ ዝኸበደ ጉዳይ እየን። ብዘይ ዝተወሰነ ንድፊ ዝካየድ ምቦዛን ክሮሞዞም X፣ ድብልቕ ንቡራትን ሕጽረት ዘለዎምን ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም ይፈጥር፣ ሓፈሻዊ ንጥፈት ድማ ካብ ከቢድ ሕጽረት ክሳብ ንቡር ዝመስል ኣብ ዝኾነ ደረጃ ክወድቕ ይኽእል። ዓይነታዊ መባእታዊ መርመራታት ማእከላይ ፊኖታይፕ ብተደጋጋሚ ኣየለልዩን። ሰነዳት WHO ብዛዕባ መርመራ G6PD ነዚ ደረት ብዝርዝር ይገልጽዎ።

ዕድመ ናሙና፣ ሙቐት መኽዘን፣ ኣብ ምግምጋም ናይቲ ብዓይኒ ዝርአ መወዳእታ መለክዒ ዘሎ ግላዊ ፍርዲ፣ ሄማቶክሪትን ጽሬት ኬሚካዊ ኣጸግበርትን፣ ኣብ ልዕሊ እዞም ባዮሎጂያዊ ጽልዋታት ተወሳኺ ናይ ትንተና ምዝባዕ የምጽኡ።

መባእታዊ መርመራ መረጋገጺ ምርመራ ኣይኮነን

ሕጽረት ዘርኢ፣ ማእከላይ ዝኾነ ወይ ምስ ክሊኒካዊ ኩነታት ዘይሰማማዕ ውጽኢት መባእታዊ መርመራ፣ መጠናዊ መርመራ ኤንዛይም G6PD የድልዮ። WHO፣ ሙቐቱ ዝተቆጻጸረ መጠናዊ ስፔክትሮፎቶሜትሪ ከም መወከሲ ሜላ ይቖጽሮ። ኣብዚ መርመራ፣ ናብ ፍራስ ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም ግሉኮዝ-6-ፎስፌትን NADP+ን ይውሰኹ፣ እቲ ዝፍጠር NADPH ድማ ኣብ 340 nm ብዝውስኽ ምምጣጥ ብርሃን ይከታተል። ናህሪ ለውጢ ምስ ንጥፈት ኤንዛይም ብቐጥታ ይመጣጠን፣ ብተለምዶ ድማ ብመሰረት ሄሞግሎቢን ተስተኻኺሉ፣ ኣብ ነፍሲ ወከፍ ግራም ብዘሎ ኣሃዱታት ይግለጽ። ናይ ሕጂ ኣሰራርሓ ክሊኒካዊ ላቦራቶሪ፣ ኣብ ናይ Mayo ካታሎግ መርመራ፣ ናይ ንጥፈት G6PD መግለጺ ተጠቓሊሉ ኣሎ።

ኣተረጓጉማ ነቲ ላቦራቶሪ ዘረጋገጾ መወከሲ ክልል ይጥቀም፣ ብዙሕ ግዜ ድማ ምስ ንቡር ንጥፈት ናይቲ ህዝቢ ብምንጽጻር ይግለጽ። ሕጽረት ብተለምዶ ኣብ ከባቢ 30 ፐርሰንት መለክዒ ደረት ይግለጽ፣ ማእከላይ ንጥፈት ድማ ልዕሊኡ ይኸውን። ናይ WHO ዝተደልዩ ባህርያት ፍርያት መርመራ G6PD (2022) ነዚ ናይ ምርመራ ማዕቀፍ ይዝርዝሩ። ኣብ ቀረባ እዋን ዝተኻየደ ሄሞሊሲስ ወይ ምውሳድ ደም፣ ፊኖታይፕ ምውሳን ዘይእመን እንተ ገይርዎ፣ እቲ ጉጅለ ቀያሕቲ ዋህዮታት ደም እንደገና ሚዛኑ ምስ መለሰ መርመራ ደግሙ። ሞለኪዩላዊ መርመራ ድማ፣ ንመለክዒ ኤንዛይም ከይተክአ፣ ተወሳኺ ሓበሬታ ክህብ ይኽእል።

ክዕቀብ ዝግባእ ዶብ

መቲሊን ብሉ ኣብዞም መርመራታት፣ ካብ ህያው ኣካል ወጻኢ ዝጥቀሙሉ ናይ ላቦራቶሪ ኬሚካዊ ኣጸግባሪ እዩ። እዚ ሓቂ፣ ካብቲ መቲሊን ብሉ ንተሓካሚ ምሃብ ብዛዕባ ዘለዎ ድሕነት ዝገልጽ ዘተ ዝተፈለየ እዩ፣ እቲ ጉዳይ ድማ ኣብ መምርሒ መቲሊን ብሉ ክወሃብ ዘይግባእ ኩነታት ተገሊጹ ኣሎ። እቲ መድሃኒት እውን ኣብ NADPH ዝምርኮስ ሪዳክሽን ስለ ዝድገፍ፣ ባዮኬሚስትሪ ነቶም ክልተ ጉዳያት የተኣሳስሮም። ግን ኣብ ናይ መርመራ ቱቦ ዘሎ ሕብሪ፣ ኣብ ዋሕዚ ደም ዘሎ መጠን መድሃኒት ኣይኮነን። እቲ ሕብሪ ኣብ ካልእ ኩነታት ከም መሕበሪ ብኸመይ ከም ዝሰርሕ ንምርዳእ፣ መትከላት ምሕባር ብመቲሊን ብሉ ርአዩ። ብዛዕባ እቲ ዝምደበሉ ኬሚካዊ ስድራቤት ድማ፣ ናይ ሪዶክስ ሕብርታት ኣብ ላቦራቶሪ ርአዩ።

መባእታዊ መርመራ፣ ናይ ሪዳክሽን ዓቕሚ ሙሉእ ኮይኑ ይርአ ድዩ ኢሉ ይሓትት። መረጋገጺ መርመራ ድማ፣ ብሓቂ ክንደይ ኤንዛይም ኣሎ ኢሉ ይሓትት። እቲ ሕብሪ፣ ነቲ ካልኣይ ሕቶ ክምልስ ክሳብ ዘይተሓተተ፣ ነቲ ቀዳማይ ሕቶ ብጽቡቕ የገልግል።