ኣብ EMB ኣጋር ናይ E. coliን ካልኦት ኮሎኒታትን መልክዕ ምንባብ

ሓደ ተማሃራይ ዘይተፈልጠ ናሙና ኣብ ኢዮሲን መቲሊን ብሉ ኣጋር ብመስመራት ይዘርእ፣ ንሓደ ለይቲ ኣብ መዕበዪ የጽንሖ፣ ድሕሪኡ ናብቲ ቀጠልያ ብልጭታ ዘለዎም ጸሊም ኮሎኒታት ዝሓዘ ሳሕኒ ይምለስ። ኣብ ደፍተሩ "E. coli፣ ተረጋጊጹ" ይብል። እዚ ምዝገባ፣ እቲ ሳሕኒ ከረጋግጾ ካብ ዝኽእል ንላዕሊ ይገልጽ። እቲ ሳሕኒ፣ ኣብ ፍሉይ ኩነታት ዝርአ ናይ ዕብየትን ምብኳዕን ፊኖታይፕ የርኢ። መንነት ዓይነት ምርግጋጽ ግን ናይ በይኑ መርትዖ ዘድልዮ ዝተፈልየ መደምደምታ እዩ።

እዚ መምርሒ፣ ውጽኢት EMB ኣጋር ከም ናይ ትርጉም ዕማም ይርእዮ። ነቲ መሰረታዊ ሓሳብ ይገልጽ፣ መቆጻጸሪታት ዝሓዘ ስእላዊ ኣትላስ ሳሕንታት የቕርብ፣ ከምኡውን እቲ ኣብ መጽሓፍ ትምህርቲ ዝቐርብ መልክዕ ከም ዝጋጊ ዝገብር ኩነታት ይጠቅስ።

ኣብ ድሕሪ እቲ ሳሕኒ ዘሎ ሓሳብ

EMB ኣጋር መራጽን መፈላለዪን እዩ። እቶም ኢዮሲን Yን መቲሊን ብሉን ዝበሃሉ መሕበሪታት፣ ንብዙሓት ግራም ኣወንታዊ ህዋሳት ይዓግቱ፤ ስለዚ እቲ መዕበዪ ሚድያ ንዕብየት ግራም ኣሉታዊ ህዋሳት ይምችእ። እዞም መሕበሪታት ከም መርኣዪታት እውን ይሰርሑ፦ ሓደ ህዋስ ነቲ ዘሎ ሽኮር ምስ ዘብኩዕን ኣብ ከባቢኡ እኹል ኣሲድ ምስ ዘፍርን፣ እቲ ኮሎኒ ብዙሕ መሕበሪ ይወስድ፣ ካብ ጸሊም ሓምላይ ናብ ሰማያዊ-ጸሊም ድማ ይቕየር። ብርቱዕ ምፍራይ ኣሲድ እንተሎ፣ ገጽ እቲ ኮሎኒ ብረታዊ ቀጠልያ ብልጭታ ከርኢ ይኽእል። እቲ ናይ ASM ፕሮቶኮል ንሳሕንታት ኢዮሲን መቲሊን ብሉ ኣጋር ነዚ ውህደት ምምራጽን ምፍልላይን ይገልጽ፣ ንትምህርቲ ዝኸውን መወከሲ ስእልታት ድማ ይህብ።

ዝኾነ ውጽኢት ቅድሚ ምንባብካ፣ ሓደ ዝርዝር ኣገዳሲ እዩ፦ ኣየናይ ቅመማ ከም ዝጥቀም ኣረጋግጽ። እቲ ዝኣረገ Holt Harris Teague ቅመማ፣ ላክቶዝን ሱክሮዝን ይሕዝ፤ Levine EMB ግን ላክቶዝ ጥራይ ይሕዝ። ሱክሮዝ ዘብኩዕ ግን ላክቶዝ ዘየብኩዕ ህዋስ፣ ከም ብዙሓት ዝተነጸሉ ናሙናታት Serratia marcescens፣ ኣብቶም ክልተ ዓይነታት ዝተፈላለየ መልክዕ ከርኢ ይኽእል። እቲ ናይ ኣፍራዪ ሰነድ ብዛዕባ EMB ሚድያ ነዚ ፍልልይ ቅመማ ብግልጺ ይገልጾ። ኣብ ደፍተርካ፣ ምስቲ ውጽኢት ስም ኣፍራዪን ቅመማን መዝግብ።

ዝተዳለወ ግን ናሙና ዘይተዘርኣሉ EMB ኣጋር፣ ብሓፈሻ ካብ ቀይሕ-ቡናዊ ናብ ቀይሕ-ሓምላይ ሕብሪ ኣለዎ፤ ኣሳልጦ ቀጠልያ ሕብሪ ወይ ደቂቕ ተረፍ ክህልዎ ይኽእል። እዚ ናይ ድሕረ ባይታ ሕብሪ ዕብየት ኣይኮነን። ነፍሲ ወከፍ ንባብ ምስ ናሙና ዘይተዘርኣሉ ሳሕኒ ወይ ምስቲ ዝተመዝገበ መሰረታዊ መልክዕ ኣነጻጽሮ። እቲ ናይ ትምህርቲ ፕሮቶኮል ካልእ እንተዘይገሊጹ፣ ነቲ ቀዳማይ ሳሕኒ ኣብ 35 ክሳብ 37 C፣ ኦክስጅን ኣብ ዘለዎ ኩነታት ንኣስታት 18 ክሳብ 24 ሰዓታት ድሕሪ ምዕባይ ኣንብቦ። ነዊሕ ግዜ ኣብ መዕበዪ ምጽናሕ መልክዕ ምብኳዕ ክቕይሮ ይኽእል።

ነቲ ሳሕኒ ብኸመይ ከም እትርእዮ

ክልተ ዓይነት ብርሃን ተጠቐም። መጀመርታ ነቲ ሳሕኒ ብዝተንጸባረቐ ወይ ብጎኒ ብዝመጽእ ብርሃን ርኣዮን ኣዛዝዮን፦ እቲ ብረታዊ ብልጭታ ምስ ኩርናዕ ምርኣይ ይቀያየር፣ ክርአ ወይ ክጠፍእ ድማ ይኽእል። ድሕሪኡ፣ ሕብሪ ኮሎኒን ጸሊም ማእከላትን ንምግምጋም፣ ብእኡ ዝሓልፍ ብርሃን ተጠቒምካ ርኣዮ። ካብ ጽቡቕ ዝተፈላለዩ ኮሎኒታት ጀምር፤ ምጽቕቓጥን ጎረባብቲ ኮሎኒታትን ኣብ ከባቢኦም ዝእከብ ኣሲድ ይቕይሩ፣ ሕብሪ ድማ ከዳኽሙ ወይ ከሕይሉ ይኽእሉ። እቲ ናይ ASM እኩብ ስእልታት ነዚ ብቐጥታ የርእዮ፦ E. coli ኣብ ዝተሓዋወሰ ባህሊ፣ እቶም ኣብ ዙርያኡ ዘለዉ ህዋሳት ነቲ ኣሲዳዊ ከባቢ ስለ ዝቕይርዎ፣ እቲ ዝጽበ ብልጭታ ክጎድሎ ይኽእል።

እቲ ልምምድ ኣብ ዘፍቅደሉ ኩሉ ግዜ መቆጻጸሪታት ኣካትት። ኣብ መደበኛ ሰደቓታት ቁጽጽር ጽሬት ንEMB ሚድያ ከም ዝተዘርዘረ፣ ሓደ ልሙድ ናይ ትምህርቲ እኩብ፣ ንሰማያዊ-ጸሊም ሕብርን ብረታዊ ብልጭታን ዘለዎ ፊኖታይፕ E. coli ATCC 25922፣ ሕብሪ ዘይብሉ ፊኖታይፕ ንምርኣይ ከም Salmonella Typhimurium ATCC 14028 ወይ Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 ዝበለ ዘየብኩዕ ህዋስ፣ ከምኡውን ከም መቆጻጸሪ ዕገታ ከም Enterococcus faecalis ወይ Staphylococcus aureus ዝበለ ግራም ኣወንታዊ ህዋስ ይሕዝ። እቲ ኣወንታዊ መቆጻጸሪ ብልጭታ እንተዘይብሉ፣ ነቲ ዘይተፈልጠ ናሙና ቅድሚ ምጥርጣርካ፣ ኩነታት ምዕባይ፣ ምጽቕቓጥ ወይ ቅመማ ተጠራጠር።

ስእላዊ ኣትላስ ሳሕንታት

እቶም ኣብ ታሕቲ ዘለዉ ሳሕንታት ዝተፈጥሩ መግለጺ ስእልታት እዮም፣ ናይ ሓቀኛ ባህልታት ፎቶታት ኣይኮኑን። ነቲ ክትደልዮ ዘለካ ኣቀማምጣ የርእዩ፣ ናይ ዝኾነ ሓደ ዝርያ ትኽክለኛ ጽላሎት ሕብሪ ኣይኮኑን። ምስ ናይ ASM መወከሲ ፎቶታትን ካብ ናይ ትምህርቲ ቤተ ፈተነ ምስ ዝመጹ ሓቀኛ ሳሕንታትን ኣነጻጽሮም።

ሳሕኒ 1፦ Escherichia coli ኣብ EMB ኣጋር፣ ላክቶዝ ብብርቱዕ ዘብኩዕ

E. coli ኣብ EMB ኣጋር፣ ብሓፈሻ ካብ ጸሊም ሓምላይ ናብ ሰማያዊ-ጸሊም ሕብሪ ኣለዎ፤ ብዙሕ ግዜ ድማ ብሰንኪ ብርቱዕ ምፍራይ ኣሲድ፣ ጸሊም ማእከልን ብረታዊ ቀጠልያ ብልጭታን የርኢ። እቲ ብልጭታ፣ ተማሃሮ ዝደልይዎ ፍሉጥ ምልክት እዩ፤ ግን ከም መግለጺ መንነት ዘይኮነስ፣ ከም ደጋፊ መርትዖ ርኣዮ። ብርታዐ ብልጭታ ብዝርያ፣ ብግዜ ምዕባይ፣ ብጽዕቕነት ኮሎኒታትን ብኩርናዕ ምርኣይን ይቀያየር። ብልጭታ ዘይምህላው E. coli ከም ዘየለ ኣየረጋግጽን፤ ብልጭታ ዘይብሉ ጸሊም ኮሎኒ ድማ ንሓያሎ ካልኦት ዘብኩዑ ህዋሳት ከመልክት ይኽእል። ንዝኾነ ቀጻሊ ስራሕ፣ ካብ ዝተጸቕጸቐ ክፋል ኣብ ክንዲ ምንባብ፣ ጽቡቕ ዝተፈለየ ኮሎኒ ምረጽ።

ሳሕኒ 2፦ Klebsiella pneumoniae ኣብ EMB ኣጋር፣ ልፋጣዊ ዘብኩዕ ህዋስ

Klebsiella pneumoniae ኣብ EMB ኣጋር፣ ብሓፈሻ ካብ ሮዛ-ሓምላይ ናብ ቡናዊ-ሓምላይ ሕብሪ ዘለዎም፣ ዓበይቲ፣ ዝብለጭለጩ፣ ልፋጣዊ ኮሎኒታት ይፈጥር። ብዙሕ ግዜ ጸሊም ማእከላት ኣለዎም፣ ግን ብሓፈሻ ሓያል ብረታዊ ብልጭታ የብሎምን። ተመሳሳሊ ቅርጺ ኣብ ከም Enterobacter ዝበሉ ተዛመድቲ ዘብኩዑ ህዋሳት እውን ይርአ። ልፋጣዊ ባህርን ዓቐን ኮሎኒን ክፋል እቲ ንባብ እዮም፦ ንእሽቶን ጸፍላሕን ሮዛ ኮሎኒ፣ ካብ ዓቢ፣ ብጉብታ ዝተላዕለ፣ ልፋጣዊ ኮሎኒ ዝተፈልየ ክብደት መርትዖ ኣለዎ። ከም E. coli፣ እቲ ሳሕኒ ናይ ምብኳዕ ፊኖታይፕ ይእምት፤ ስም ዓይነት ንምውሳን ግን እቲ ኣብ ታሕቲ ዝተገልጸ ባዮኬሚካላዊ ምርግጋጽ የድሊ።

ሳሕኒ 3፦ Salmonella ኣብ EMB ኣጋርን ካልኦት ዘይብኩዑ ህዋሳትን፣ ሕብሪ ዘይብሎም ኮሎኒታት

Salmonella ኣብ EMB ኣጋርን ተዛመድቲ ላክቶዝ ዘየብኩዑ ህዋሳትን፣ Shigellaን ብዙሓት ዝተነጸሉ ናሙናታት Pseudomonasን ሓዊሱ፣ ብሓፈሻ ካብ ሕብሪ ዘይብሎም ናብ ብርሃን ዘሕልፉ ወይ ሃሳስ ዓምበር ሕብሪ ዘለዎም ኮሎኒታት ኮይኖም ይዓብዩ። ገለ ቅመማታትን ኩነታትን ድኹም ሮዛ ጽላሎት ይህቡ፤ ስለዚ ሃሳስ ሮዛ ኮሎኒ፣ ብቐጥታ ዘብኩዕ ህዋስ ማለት ኣይኮነን። EMB ንSalmonella ካብ Shigella ወይ ካብ ካልኦት ዘይብኩዑ ህዋሳት ኣይፈልዮን፤ እዚ ፍልልይ ብድሕሪኡ ብዝግበሩ ፈተናታት ይውሰን። ላክቶዝ ዘብኩዑ፣ ንE. coli ዝመስሉ ብረታዊ ኮሎኒታት ዘለዎም ዝርያታት Salmonella ከም ዝተመዝገቡ እውን ኣስተውዕል፤ እዚ ድማ ሓደ ሳሕኒ ጥራይ ጉዳይ ክዓጹ ዘይክእል ተወሳኺ ምኽንያት እዩ።

ሳሕኒ 4፦ Serratia marcescensን ናይ ቅመማ መጋገዪን

Serratia marcescens ናይ በይኑ ክፋል ይግብኦ፣ ምኽንያቱ ተማሃሮ ብዙሕ ግዜ ቀይሕ ኮሎኒታት ይጽበዩ፣ ድሕሪኡ ድማ ነቲ ሳሕኒ ብጌጋ የንብብዎ። መብዛሕትኦም ካብ ክሊኒካዊ ናሙናታት ዝተነጸሉ ህዋሳት ላክቶዝ ኣየብኩዑን፤ ስለዚ ኣብ Levine EMB ብተለምዶ ሃሳስ ወይ ድኹም ሕብሪ ዘለዎም ኮይኖም ይርአዩ። ብዙሓት ዝተነጸሉ ህዋሳት ሱክሮዝ ስለ ዘብኩዑ፣ ሱክሮዝ ዝሓዘ ቅመማ ዝጸለመ ወይ ምስ ኣሲድ ዝያዳ ዝተኣሳሰረ ምላሽ ክህብ ይኽእል። ኣብ 35 ክሳብ 37 C እቲ ልሙድ ቀይሕ ፕሮዲጂዮሲን ቀለም እውን ኣይትጸበ፤ ኣብ ሙቐት መዕበዪ ምፍራይ እቲ ቀለም እሙን ኣይኮነን። እቲ ፕሮቶኮል Serratia marcescens ኣብ EMB ኣጋር ክጠቅስ ከሎ፣ እቲ መግለጺ ኣየናይ ቅመማ ከም ዝግምት ኣረጋግጽ። ሓደ ግምገማ ሜታቦሊዝም Serratia፣ ኣብ ድሕሪ እዚ መጋገዪ ዘሎ፣ ላክቶዝ ዘየብኩዕን ኣብ ሱክሮዝ ተቐያያሪ ምላሽ ዘለዎን ባህሪ ይጽምቕ።

ሳሕኒ 5፦ መቆጻጸሪታትን ዝተዓገቱ ህዋሳትን

ከም Staphylococcus፣ Enterococcus፣ Streptococcusን Bacillusን ዝበሉ ግራም ኣወንታዊ ህዋሳት፣ ብሓፈሻ ኣብ EMB ኣጋር ይዕገቱ ወይ ዕብየቶም ብእጅጉ ይዳኸም፤ እንተኾነ ዕገታ ንነፍሲ ወከፍ ዝርያ ፍጹም ኣይኮነን። እኩብ መቆጻጸሪታት ነቲ ንባብ እሙን ይገብሮ፦ እቲ ናይ E. coli መቆጻጸሪ ምስ ሰማያዊ-ጸሊም ሕብርን ብልጭታን ጽቡቕ ዕብየት ከርኢ ኣለዎ፣ እቲ ዘየብኩዕ መቆጻጸሪ ሕብሪ ዘይብሉ ዕብየት ከርኢ ኣለዎ፣ እቲ ናይ ዕገታ መቆጻጸሪ ድማ ንእሽቶ ዕብየት ወይ ፈጺሙ ዕብየት ዘይምህላው ከርኢ ኣለዎ። እቲ ናይ ዕገታ መቆጻጸሪ ጽቡቕ እንተዓብዩ፣ እቲ ናይ ምምራጽ ደረጃ ኣይተሳኽዐን፣ ኣብቲ ሓደ ጉጅለ ዝተዳለወ ሚድያ ዝግበር ኩሉ ካልእ ንባብ ድማ ኣጠራጣሪ እዩ። ናይ ምሕባር ሜላታት፣ ካብ መዕበዪ ሚድያ ዝተፈልየ ሕቶ ይምልሱ፤ ብዛዕባ ኣብ ቤተ ፈተነ ናይ ስላይድ ምሕባር ክፋል፣ ነቲ ኣትላስ ምሕባር ብመቲሊን ብሉ ርአ።

ደረት ዘለዎ ምንጽጻር

ነቶም መጋገዪ መልክዓት ሰለስተ ምሉእ ሓሳባት ይጽምቕዎም። ጸሊም ማለት E. coli ማለት ኣይኮነን፣ ምኽንያቱ Klebsiella፣ Enterobacterን ካልኦት ዘብኩዑ ህዋሳትን ብልጭታ ዘይብሎም ጸሊም ማእከላት የማዕብሉ። ሮዛ ማለት Klebsiella ማለት ኣይኮነን፣ ምኽንያቱ ብመጠነኛ ወይ ብዝሑል ፍጥነት ዘብኩዑ ህዋሳትን ገለ ብተለምዶ ዘይብኩዑ ተባሂሎም ዝጽውዑ ህዋሳትን ሮዛ ወይ ፈኲስ ሓምላይ ኮይኖም ይርአዩ። ብልጭታ ማለት ብዘየማትእ E. coli ማለት ኣይኮነን፣ ምኽንያቱ ካልኦት ብብርቱዕ ዘብኩዑ ህዋሳት ከፍርይዎ ይኽእሉ። እቲ ናይ ትምህርቲ ፕሮቶኮልን ናይ ዝተሓዋወሰ ባህሊ ስእልታቱን ነፍሲ ወከፍ ካብዞም ጌጋታት የርእዩ።

ደረት ምርግጋጽ

EMB ኣጋር ፊኖታይፕ እዩ ዝገልጽ፣ ዓይነት ኣይኮነን። ዝተፈላለዩ ህዋሳት ሓደ መልክዕ ኮሎኒ ክካፈሉ ይኽእሉ፤ ሓደ ህዋስ ድማ ብዝርያ፣ ብዕድመ፣ ብምጽቕቓጥ፣ ብቅመማን ብኩነታት ምዕባይን፣ ካብቲ ኣብ መጽሓፍ ትምህርቲ ዘሎ መልክዑ ክፍለ ይኽእል። ስለዚ እዮም ናይ ትምህርትን ክሊኒካዊን ኣሰራርሓታት፣ መልክዕ EMB ከም ግምታዊ ምልክት ዝወስድዎ።

ብመርትዖ ክድገፍ ዝኽእል ናይ ተማሃራይ ኣሰራርሓ እዚ እዩ፦ ነቲ ዝተፈለየ ኮሎኒ ግለጽ፣ ማለት ዓቐኑ፣ ሕብሩ፣ ማእከሉ፣ ብጎኒ ብዝመጽእ ብርሃን ዘለዎ ብልጭታን ልፋጣዊ ባህሩን፤ ቅመማ፣ ግዜን ሙቐትን ምዕባይ፣ ከምኡውን መቆጻጸሪታት መዝግብ። ድሕሪኡ፣ ዝኾነ መረጋገጺ ፈተና ቅድሚ ምግባርካ፣ ጽቡቕ ዝተፈለየ ኮሎኒ ዳግማይ ዘሪእካ ንጹህ ባህሊ ኣዳሉ። ልሙድ ቀጻሊ ፈተና፣ ንግምታዊ መለለዪ E. coliን ኮሊፎርምን፣ ግራም ምሕባር ምስ IMViC ምላሻት የጠቓልል። ንናይ መዓንጣ ህዋሳት፣ TSI ወይ KIAን ንነፍሲ ወከፍ ህዋስ ፍሉይ ዝኾነ እኩብ ባዮኬሚካላዊ ፈተናታትን ይጥቀሙ፤ እቲ ዕማም ኣብ ዝጠልቦ ድማ፣ ሴሮሎጂያዊ መለለዪ፣ MALDI TOF ወይ ካልእ ዝተረጋገጸ መለለዪ ይውሰኽ። EMB ኣብ መንጎ መረጽትን መፈላለይትን ናይ መዓንጣ ሚድያታት ብኸመይ ከም ዝስራዕ ንምፍላጥ፣ መእተዊታት ናይ መዓንጣ መዕበዪ ሚድያን ድሕሪ ግራም ምሕባር ዝግበሩ ቀጻሊ ፈተናታትን ርአ። ብዛዕባ እቲ ተዛማዲ ሕቶ፣ ሰማያዊ ምሕባር ስላይድ እንታይ ከረጋግጽ ከም ዝኽእልን ከም ዘይክእልን፣ እቲ ኣትላስ ምሕባር ብመቲሊን ብሉ ብተመሳሳሊ ኣተሓሳስባ፣ ትዕዝብትን መደምደምታን ፈላልዩ ይሕዞም።

ቅድሚ መደምደምታ፣ ነቲ ዝተራእየ ጽሓፍ። "ኣብ Levine EMB ድሕሪ 24 ሰዓታት፣ ምስ ኩርናዕ ምርኣይ ዝቀያየር ቀጠልያ ብልጭታ ዘለዎም ጸሊም ሰማያዊ-ጸሊም ኮሎኒታት፣ ምስ ብርቱዕ ምብኳዕ ላክቶዝ ዝሰማምዑ" ዝብል መግለጺ ብመርትዖ ክድገፍ ይኽእል። "E. coli፣ ተረጋጊጹ" ንምባል ግን፣ እቲ ሳሕኒ በይኑ ከቕርቦ ዘይክእል ናይ ምርግጋጽ ደረጃ የድሊ።