స్ట్రోక్, మెదడుకు తక్కువ రక్తప్రసరణపై పరిశోధనలో మిథిలీన్ బ్లూ: మూడు నమూనాలు నిజంగా ఏమి చూపిస్తున్నాయి

మూసుకుపోయిన ధమని, పోషకాలు అందని కణ సంస్కృతి, మెడలోని ధమనులు సన్నబడిన ఎలుక — ఇవి ఒకే ప్రయోగానికి మూడు రూపాల్లా అనిపించవచ్చు. కానీ అలా కాదు. ప్రతిదీ వేర్వేరు ప్రశ్నను అడుగుతుంది; ప్రతిదానిలో మిథిలీన్ బ్లూ వేర్వేరు సమాధానాన్ని ఇస్తుంది. వీటిని కలగలిపితే పరిశోధనా సాహిత్యం పరస్పర విరుద్ధంగా కనిపిస్తుంది. విడివిడిగా చూస్తే స్పష్టమైన నమూనా కనిపిస్తుంది; దాన్ని ప్రధానంగా నిర్ణయించేది ఇచ్చే సమయమే.

ఈ భేదాన్ని స్పష్టం చేయడమే ఈ సమీక్ష ఉద్దేశం. ఆ మూడు నమూనాలు: మెదడులో ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతాన్ని ప్రభావితం చేసే తీవ్రమైన స్ట్రోక్, పెంచిన కణాల్లో ఆక్సిజన్-గ్లూకోజ్ లేమి తర్వాత మళ్లీ ఆక్సిజన్ అందించడం, వారాలపాటు మెదడుకు దీర్ఘకాలికంగా తక్కువ రక్తప్రసరణ. వీటిని కలిపే ప్రతిపాదిత చర్యా విధానం మైటోకాండ్రియాకు సంబంధించినది. కానీ జీవక్రియ పరిస్థితులు మారడం వల్ల ఫలితాలు కూడా మారుతాయి.

మూడు నమూనాలు వేర్వేరు ప్రశ్నలకు సమాధానాలిస్తాయి

ఎలుకల్లో ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతాన్ని ప్రభావితం చేసే తీవ్రమైన స్ట్రోక్‌ను సాధారణంగా మధ్య మస్తిష్క ధమనిని మూసివేయడం ద్వారా కలిగిస్తారు. దీన్ని సంక్షిప్తంగా MCAO అంటారు. రక్తగడ్డను పోలిన ఈ అడ్డంకి ఒక ఇస్కీమిక్ కేంద్రాన్ని సృష్టిస్తుంది. దాని చుట్టూ పెనంబ్రా ఉంటుంది — ప్రమాదంలో ఉన్నప్పటికీ రక్తప్రసరణ తిరిగి వస్తే కాపాడే అవకాశం ఉన్న కణజాలం. ఇక్కడి ప్రశ్న: ఏదైనా జోక్యం ఇన్‌ఫార్క్ట్ పెరుగుదలను నెమ్మదింపజేస్తుందా, లేదా రక్తప్రసరణ పునరుద్ధరణ సమయంలో పనితీరును కాపాడుతుందా?

ఆక్సిజన్-గ్లూకోజ్ లేమి, సంక్షిప్తంగా OGD, దీనికి భిన్నంగా కణస్థాయిలో పనిచేస్తుంది. పెంచిన మెదడు కణాలను గ్లూకోజ్ లేకుండా, దాదాపు శూన్య ఆక్సిజన్ ఉన్న పరిస్థితుల్లో ఉంచి, తర్వాత సాధారణ పెంపక మాధ్యమంలోకి తిరిగి తీసుకువస్తారు. ఇక్కడ రక్తగడ్డ లేదు, ప్రత్యామ్నాయ మార్గాల ద్వారా రక్తప్రసరణ లేదు, రక్తపోటు లేదు, రోగనిరోధక వ్యవస్థ లేదు. ప్రశ్న పూర్తిగా కణాలకు సంబంధించినది: జీవక్రియకు అవసరమైన పదార్థాలు లేకుండా పోయి, తర్వాత తిరిగి అందినప్పుడు కణ శ్వాసక్రియ, ATP, మనుగడకు ఏమవుతుంది?

మెదడుకు దీర్ఘకాలికంగా తక్కువ రక్తప్రసరణ కలిగించే ప్రయోగాల్లో ఎలుకల రెండు కరోటిడ్ ధమనులను శాశ్వతంగా మూసివేస్తారు. దీన్ని 2VO నమూనా అంటారు. ముందుమెదడుకు రక్తప్రసరణ తగ్గి, వారాలపాటు తక్కువగానే ఉంటుంది. ఇందులో అకస్మాత్తుగా ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతంలో ఇన్‌ఫార్క్ట్ ఏర్పడదు; అత్యవసరంగా రక్తప్రసరణను పునరుద్ధరించడమూ ఉండదు. ఇక్కడి ప్రశ్న: దీర్ఘకాలిక తక్కువ రక్తప్రసరణలో వారాలపాటు జీవక్రియకు మద్దతు ఇవ్వడం వల్ల రక్తనాళాలు, మైటోకాండ్రియా, జ్ఞాపకశక్తి కాపాడబడతాయా?

అందువల్ల, 2VO నమూనాలో ఒక నెల చికిత్స తర్వాత జ్ఞాపకశక్తి మెరుగుపడటం, అత్యవసర థ్రాంబెక్టమీ సమయంలో మానవ మెదడును కాపాడటం గురించి నేరుగా ఏమీ చెప్పదు. అత్యంత ఆశావహమైన సారాంశాల్లో చాలావరకు ఈ భేదాన్ని విస్మరిస్తాయి కాబట్టి ఇది ముఖ్యమైనది.

తీవ్రమైన స్ట్రోక్: రక్తప్రసరణ పునరుద్ధరణ సమయంలో రక్షణ, అది లేకుంటే ఆలస్యం మాత్రమే

తీవ్రమైన స్ట్రోక్‌కు సంబంధించిన అత్యంత స్పష్టమైన ఫలితం, తాత్కాలిక MCAO తర్వాత రక్తప్రసరణను పునరుద్ధరించిన ప్రయోగం నుంచి వచ్చింది. ఎలుకల్లో 60 నిమిషాలపాటు ధమనిని మూసివేశారు. తర్వాత రక్తప్రసరణ పునరుద్ధరణ మొదలైనప్పటి నుంచి తక్కువ మోతాదు మిథిలీన్ బ్లూను సిర ద్వారా ఇచ్చారు; 3 గంటలకు, 2వ రోజున అదనపు మోతాదులు ఇచ్చారు. MRIలో 2వ రోజు నాటికి ఔషధం లేని వాహక ద్రావణం మాత్రమే పొందిన గుంపులో దెబ్బతిన్న ప్రాంతం సుమారు 19 శాతం పెరిగింది. చికిత్స పొందిన గుంపులో అది సుమారు 17 శాతం తగ్గింది. తుది ఇన్‌ఫార్క్ట్‌లు సుమారు 30 శాతం చిన్నవిగా ఉండటంతోపాటు, 2వ మరియు 7వ రోజుల్లో నాడీ సంబంధిత స్కోర్లు మెరుగ్గా ఉన్నాయి. చిత్రీకరణలో కేంద్ర భాగం, పెనంబ్రా రెండింటిలోనూ కణజాల మనుగడ మెరుగుపడింది. విస్తృత నాడీరక్షణ పరిశోధనా సాహిత్యం, రక్తప్రసరణ పునరుద్ధరణ సమయానికి అనుగుణంగా కనిపించిన ఈ రక్షణను మెదడంతటా ఇస్కీమియా, గాయాలకు సంబంధించిన ఫలితాలతో కలిపి పరిశీలిస్తుంది.

ధమని మూసుకుపోయే ఉన్నప్పుడు పరిస్థితి మారుతుంది. శాశ్వత MCAO ప్రయోగంలో, ఇస్కీమియా కొనసాగుతున్న సమయంలో ఇచ్చిన మిథిలీన్ బ్లూ డిఫ్యూషన్ చిత్రీకరణలో కనిపించే దెబ్బతిన్న ప్రాంతం విస్తరణను నెమ్మదింపజేసింది. స్థానిక రక్తప్రసరణ కొద్దిగా మెరుగుపడటంతోపాటు, పర్ఫ్యూషన్-డిఫ్యూషన్ అసమతుల్యతను కొంతసేపు పొడిగించింది. అయితే 24 గంటలకు తుది ఇన్‌ఫార్క్ట్ పరిమాణంలో గణనీయమైన తేడా లేదు. ప్రమాదంలో ఉన్న కణజాలం ఇన్‌ఫార్క్ట్‌గా మారడాన్ని అది ఆలస్యం చేసింది; కానీ రక్తనాళాన్ని తిరిగి తెరవడానికి ప్రత్యామ్నాయం కాలేదు.

మూడో తీవ్రమైన స్ట్రోక్ అధ్యయనం చర్యా విధానం, మోతాదుకు సంబంధించిన మరిన్ని వివరాలను అందిస్తుంది. ధమనిని మూసివేసిన వెంటనే పెరిటోనియల్ కుహరంలోకి ఇచ్చిన ఒక్క మోతాదుతో, 1 లేదా 10 mg/kg కంటే మధ్యస్థమైన 5 mg/kg మోతాదు వద్ద ఇన్‌ఫార్క్ట్‌లో అత్యధికంగా, సుమారు 50 శాతం తగ్గుదల కనిపించింది. ఇంద్రియ-చలన పనితీరు స్కోర్లు కూడా మెరుగ్గా ఉన్నాయి. రచయితలు దీనిని మైటోకాండ్రియా నిర్మాణం కాపాడబడటం, దెబ్బతిన్న మైటోకాండ్రియాను ఎంపిక చేసి తొలగించే మైటోఫాజీ పెరగడంతో అనుసంధానించారు. కాబట్టి మోతాదు, ఇచ్చే మార్గం, సమయ పట్టిక ముఖ్యమైనవి; ఎలుకల mg/kg విలువలు మానవ స్ట్రోక్ మోతాదులు కావు.

కణ సంస్కృతి: ఇచ్చే సమయాన్ని బట్టి అదే ఔషధం మేలు లేదా హాని చేస్తుంది

ఆస్ట్రోసైట్ ప్రయోగం అత్యంత అవగాహన కలిగించేది; అలాగే అత్యంత తరచుగా తప్పుగా ఉటంకించబడేది కూడా. ఎలుకల మెదడు కార్టెక్స్ నుంచి నేరుగా సేకరించి పెంచిన ఆస్ట్రోసైట్‌లను, గ్లూకోజ్, పైరువేట్, సీరం లేని మాధ్యమంలో 0.1 శాతం ఆక్సిజన్ వద్ద 6 గంటలపాటు తీవ్రమైన లేమికి గురిచేశారు. తర్వాత జీవక్రియకు అవసరమైన పదార్థాలను తిరిగి అందించి, 24 గంటలపాటు మళ్లీ ఆక్సిజన్ అందించారు. సుమారు సగం కణాలు చనిపోయాయి. అందువల్ల ఈ పరీక్షలో మేలు లేదా హాని — ఏ దిశలో ప్రభావం ఉన్నా — గుర్తించడానికి అవకాశం ఉంది.

లేమి దశలో మిథిలీన్ బ్లూ ఉన్నప్పుడు కణాల మనుగడ మెరుగుపడలేదు; మరింత దిగజారింది. దానికి బదులుగా ఆక్సిజన్‌ను తిరిగి అందించే సమయంలో దాన్ని ప్రవేశపెట్టినప్పుడు, తక్కువ మైక్రోమోలార్ సాంద్రతలు కణాల జీవన సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచి, ఆక్సిజన్ వినియోగం, గ్లూకోజ్ గ్రహణం, ATP ఉత్పత్తిని పెంచాయి. సాధారణ పరిస్థితుల్లో అదే సాంద్రతలు గ్లూకోజ్ గ్రహణాన్ని 0.1 మైక్రోమోలార్ వద్ద సుమారు 89 శాతం, 1 మైక్రోమోలార్ వద్ద సుమారు 200 శాతం పెంచాయి. గాయం తర్వాత గ్లైకోజెన్, హెక్సోకైనేజ్ క్రియాశీలత కాపాడబడ్డాయి; సూపర్‌ఆక్సైడ్ పెరుగుదల కొలతల్లో కనిపించలేదు.

దీని చర్యా విధానాన్ని అర్థం చేసుకోవడానికి ఒక ప్రత్యామ్నాయ విద్యుత్ జనరేటర్‌తో పోల్చవచ్చు. మిథిలీన్ బ్లూ అపచయ సమానకాలను స్వీకరించి, వాటిని సైటోక్రోమ్ c, కాంప్లెక్స్ IV వైపు పంపించే ప్రత్యామ్నాయ ఎలక్ట్రాన్ వాహకంగా పనిచేస్తుంది. ఇది ఎలక్ట్రాన్ ప్రవాహానికి, ATP సంశ్లేషణకు మద్దతు ఇస్తూ, ముందు దశల్లో ఎలక్ట్రాన్ లీకేజీని తగ్గిస్తుంది. తీవ్రమైన లేమి సమయంలో ఈ ప్రేరేపణ ప్రతికూలంగా మారుతుంది. ఎందుకంటే ఆక్సిజన్, గ్లూకోజ్ దాదాపుగా లేనప్పుడు జీవక్రియ అవసరాలను పెంచి, మిగిలిన చివరి నిల్వలను మరింత వేగంగా ఖర్చు చేయించవచ్చు. అవసరమైన పదార్థాలు తిరిగి అందిన తర్వాత ఇదే లక్షణం ప్రయోజనకరంగా మారుతుంది. దెబ్బతిన్న మైటోకాండ్రియా తిరిగి అందిన ఆక్సిజన్, గ్లూకోజ్‌ను సమర్థంగా ఉపయోగించుకోవడానికి ఇది సహాయపడుతుంది. మైటోకాండ్రియాలో ఎలక్ట్రాన్ బదిలీని వివరించే వ్యాసాల్లోని ఫలితాలను కూడా ఈ లేమి పరిస్థితుల సందర్భంతో కలిపి చూడాల్సిన కారణం ఇదే.

ఒక జాగ్రత్త: ఈ సమయ నియమం ఆ ప్రత్యేక ఆస్ట్రోసైట్ ప్రయోగ వ్యవస్థకే వర్తిస్తుంది. వేరే కణ రకం, తక్కువ తీవ్రత గల లేమి, తక్కువ సాంద్రతను ఉపయోగించిన అనుబంధ కణ అధ్యయనంలో, లేమి సమయంలోనే ఔషధం ఇచ్చినా రక్షణ కనిపించింది. కణ రకం, మిగిలి ఉన్న ఆక్సిజన్, సాంద్రత, ప్రయోగ పద్ధతి — ఇవే ప్రభావం మేలు వైపా, హాని వైపా అన్నది నిర్ణయిస్తాయి.

దీర్ఘకాలిక తక్కువ రక్తప్రసరణ: వారాల వ్యవధిలో జ్ఞాపకశక్తి, సైటోక్రోమ్ ఆక్సిడేజ్, రక్తనాళాలు

దీర్ఘకాలిక ప్రయోగాల్లో వారాలపాటు ప్రతిరోజూ తక్కువ మోతాదు చికిత్స ఇచ్చారు; అత్యవసరంగా ఒకేసారి ఇచ్చే ఒక్క మోతాదు కాదు. మొదటి అధ్యయనంలో, కరోటిడ్ ధమనులను శాశ్వతంగా మూసివేసిన ఎలుకలకు ఒక నెలపాటు ప్రతిరోజూ 4 mg/kg ఇచ్చారు. తక్షణ పనితీరును కాకుండా నేర్చుకున్న విషయాలు జ్ఞాపకంలో స్థిరపడటాన్ని లక్ష్యంగా చేసుకుని, ప్రతిరోజూ శిక్షణ ముగిసిన తర్వాత మోతాదు ఇచ్చారు. ధమనులు మూసివేసిన జంతువులు దృశ్య భేదాలను గుర్తించే సమస్యలను మరింత నెమ్మదిగా నేర్చుకున్నాయి; కష్టమైన జ్ఞాపక పరీక్షలో అధ్వాన్నంగా పనిచేశాయి. అయితే ఈత సామర్థ్యం, చలన కార్యకలాపాలు, వాసన గుర్తింపుపై ప్రభావం లేదు. రోజువారీ చికిత్స సాధారణ చలన ప్రవర్తనను మార్చకుండా, నేర్చుకోవడం, జ్ఞాపకశక్తిలోని లోపాలను తగ్గించింది.

అదే ఒక నెల చికిత్స పద్ధతి తర్వాత నిర్వహించిన తదుపరి అధ్యయనం, మైటోకాండ్రియల్ కాంప్లెక్స్ IV అయిన సైటోక్రోమ్ ఆక్సిడేజ్‌ను 44 మెదడు ప్రాంతాల్లో మ్యాప్ చేసింది. ధమనుల మూసివేత దృశ్య, ప్రీఫ్రంటల్, పెరిరైనల్ కార్టెక్స్‌లతోపాటు హిప్పోకాంపస్, అమిగ్డాలాలో ఎంజైమ్ క్రియాశీలతను తగ్గించింది. దృశ్య కార్టెక్స్, హిప్పోకాంపస్ మధ్య సమన్వయ క్రియాశీలతనూ బలహీనపరిచింది. చికిత్స ఆయా ప్రాంతాల్లో ఎంజైమ్ క్రియాశీలతను కాపాడి, ప్రాంతాల మధ్య జీవక్రియ సహసంబంధాలను బలపరిచింది; కాపాడబడిన క్రియాశీలత మెరుగైన పని ప్రదర్శనతో సంబంధం చూపింది. ఈ సహసంబంధాలు జీవక్రియ ఎంజైమ్‌ల సమన్వయ క్రియాశీలతను వివరిస్తాయి; మానవ మెదడులో పనితీరు సంబంధాల ప్రత్యక్ష కొలతలు కావు. ఈ భేదాన్ని స్పష్టంగా ఉంచడానికి మెదడు శక్తి జీవక్రియపై సమీక్షలు సహాయపడతాయి.

వేరొక వారం వ్యవధి అధ్యయనంలో ప్రతిరోజూ 2 mg/kg ఇచ్చి, చర్యా విధానాన్ని పరీక్షించడానికి ఒక సంకేత మార్గ నిరోధకాన్ని జోడించారు. చికిత్సతో మెదడు రక్తప్రసరణ ప్రతి 100 gకు నిమిషానికి సుమారు 60 నుంచి సుమారు 100 mLకు పెరిగింది. హిప్పోకాంపస్‌లో రక్తనాళాల సాంద్రత సుమారు 15.1 నుంచి 23 శాతానికి పెరిగింది. PI3K/Akt మనుగడ సంకేత మార్గాన్ని నిరోధించినప్పుడు ఈ రెండు మెరుగుదలలూ కొంతవరకు వెనక్కి తగ్గాయి; చికిత్సతో ఫాస్ఫోరిలేటెడ్ Akt పెరిగింది. రక్తప్రసరణ, రక్తనాళాల సాంద్రత, అవరోధం, న్యూరాన్‌లకు సంబంధించిన ఫలితాలు కేవలం జీవక్రియ ప్రభావం కంటే, PI3K/Akt సంకేతాలతో అనుసంధానమైన నాడీ-రక్తనాళ రక్షణను సూచిస్తున్నాయి.

ఇవేవీ అత్యవసర స్ట్రోక్ చికిత్సకు ఎందుకు సమానం కావు

ఈ ఫలితాలు నేరుగా క్లినికల్ పరిస్థితులకు వర్తించకపోవడానికి కారణం ప్రయోగశాలలో పరిస్థితులను నియంత్రించగలగడమే. పెంచిన కణాల్లో రక్తగడ్డ ఉండదు; శరీరంలో ఔషధ శోషణ, పంపిణీ, జీవక్రియ, విసర్జన ప్రక్రియలూ ఉండవు. 2VO నమూనా మెదడంతటా దీర్ఘకాలిక తక్కువ రక్తప్రసరణను సూచిస్తుంది. అది కొన్ని నిమిషాల క్రితమే ఏర్పడిన పెనంబ్రాతో, ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతంలో అకస్మాత్తుగా ఏర్పడే ఎంబోలస్ కాదు. ఎలుకల MCAOలో కూడా చిన్న వయస్సు గల ఆరోగ్యవంతమైన జంతువులు, అనస్థీషియా, ఒకే విధమైన ధమని మూసివేతలు, ఖచ్చితంగా నిర్ణయించిన సమయాల్లో మోతాదులు ఉపయోగిస్తారు. వివిధ రకాల రక్తగడ్డలు, అథెరోస్క్లెరోసిస్, అధిక రక్తపోటు, మధుమేహం, తెలియని లక్షణాల ప్రారంభ సమయాలు ఉన్న వృద్ధ రోగుల పరిస్థితి దీనికి భిన్నం.

ప్రచురితమైన ఏ యాదృచ్ఛిక కేటాయింపు మానవ అధ్యయనమూ తీవ్రమైన ఇస్కీమిక్ స్ట్రోక్‌కు అత్యవసర చికిత్సగా మిథిలీన్ బ్లూను స్థాపించలేదు. అప్పుడప్పుడు ఉటంకించే ఒక మానవ చిత్రీకరణ అధ్యయనంలో 26 మంది ఆరోగ్యవంతమైన పెద్దలు పాల్గొన్నారు; స్ట్రోక్ రోగులు కాదు. నోటి ద్వారా ఇచ్చిన ఒక్క మోతాదు, పనికి సంబంధించిన మెదడు సంకేతాలను మార్చి, జ్ఞాపకాలను తిరిగి గుర్తుచేసుకోవడంలో స్వల్ప మెరుగుదలను కలిగించింది. అది కేంద్ర నాడీ వ్యవస్థలో క్రియాశీలతను చూపుతుంది; స్ట్రోక్‌లో చికిత్సా ప్రభావాన్ని కాదు. ప్రస్తుత అత్యవసర మార్గదర్శకాలు అర్హులైన రోగుల్లో సిర ద్వారా థ్రాంబోలైసిస్, తగిన పెద్ద రక్తనాళాల మూసివేతల్లో థ్రాంబెక్టమీతో వేగంగా రక్తప్రసరణను పునరుద్ధరించడంపైనే కేంద్రీకృతమై ఉన్నాయి. ప్రామాణిక అత్యవసర స్ట్రోక్ చికిత్స మార్గాలే నిరూపితమైన ఏకైక మార్గంగా ఉన్నాయి. స్ట్రోక్ అనుమానం ఉన్నప్పుడు మిథిలీన్ బ్లూ ఇవ్వడానికి చికిత్సను ఎప్పుడూ ఆలస్యం చేయకూడదు. ప్రీక్లినికల్ మోతాదులను మనుషులకు అన్వయించడంలో ఉన్న ఆచరణాత్మక పరిమితుల వల్లే ఎలుకల మోతాదు సమయ పట్టికలను క్లినికల్ చికిత్స పద్ధతులుగా భావించలేము.

భద్రతకు సంబంధించిన అంశాలు ఈ హద్దును మరింత స్పష్టం చేస్తాయి. సిర ద్వారా ఇచ్చే మిథిలీన్ బ్లూను SSRIs, SNRIs, MAO నిరోధకాలు సహా సెరోటోనిన్‌పై పనిచేసే ఔషధాలతో కలిపినప్పుడు తీవ్రమైన లేదా ప్రాణాంతక సెరోటోనిన్ సిండ్రోమ్ సంభవించవచ్చని బాక్స్‌డ్ హెచ్చరిక ఉంది. స్ట్రోక్ సాధారణంగా వచ్చే వయస్సులోని అనేక మంది రోగులు ఈ ఔషధాలను తీసుకుంటుంటారు. హీమోలైసిస్ ప్రమాదం కారణంగా G6PD లోపం ఉన్నవారికి ఇది నిషేధితం. ఇది నైట్రిక్ ఆక్సైడ్ సంకేతాలను కూడా నిరోధిస్తుంది. దీనివల్ల కొన్ని పరిస్థితుల్లో రక్తనాళ నిరోధం, రక్తపోటు పెరుగుతాయి. కాబట్టి దీన్ని కేవలం మెదడుకు రక్తప్రసరణ పెంచే ఔషధంగా వర్ణించకూడదు. ఆర్జిత మెథీమోగ్లోబినీమియాకు ఆమోదించిన 1 mg/kg సిర ద్వారా ఇచ్చే చికిత్స పద్ధతి, స్ట్రోక్ చికిత్స పద్ధతి కాదు.

నిజాయితీగల సారాంశం పరిమితమైనదే, కానీ వాస్తవమైనది. తాత్కాలికంగా ఒక నిర్దిష్ట ప్రాంతంలో ఇస్కీమియా ఏర్పడిన ఎలుకల్లో, రక్తప్రసరణ పునరుద్ధరణ సమయానికి ఇచ్చిన తక్కువ మోతాదు మిథిలీన్ బ్లూ దెబ్బతిన్న ప్రాంతం పురోగతిని తగ్గించింది. శాశ్వత ధమని మూసివేతలో అది ఇన్‌ఫార్క్ట్‌ను ఆలస్యం చేసింది, కానీ నివారించలేదు. ఆస్ట్రోసైట్‌లలో తీవ్రమైన లేమి సమయంలో హాని చేసింది; ఆక్సిజన్ తిరిగి అందించే సమయంలో సహాయపడింది. దీర్ఘకాలిక తక్కువ రక్తప్రసరణలో వారాలపాటు సైటోక్రోమ్ ఆక్సిడేజ్, రక్తనాళాలు, జ్ఞాపకశక్తిని కాపాడింది. ఒకే ఎలక్ట్రాన్ వాహకం, మూడు సందర్భాలు, మూడు సమాధానాలు.