ரூமன் திரவத்திற்கான மெத்திலீன் நீல ஒடுக்கச் சோதனை

ஒரு பட்டதாரி, கையில் நீல நிறச் சோதனைக் குழாயுடன் ஒரு பண்ணையிலிருந்து அழைக்கிறார். பத்து நிமிடங்களுக்கு முன்பு ரூமன் திரவத்தில் மெத்திலீன் நீலத்தைச் சேர்த்திருக்கிறார்; நீல நிறம் இன்னும் மறையவில்லை. பசுவுக்கு மேலும் சாயம் கொடுக்க வேண்டுமா என்று கேட்கிறார்.

அந்தக் கேள்வி, சோதனை பற்றிய தவறான புரிதலை வெளிப்படுத்துகிறது. ரூமன் திரவத்திற்கான மெத்திலீன் நீல ஒடுக்கச் சோதனையில், சாயம் சோதனைக் குழாயில்தான் சேர்க்கப்படுகிறது; விலங்கிற்கு ஒருபோதும் கொடுக்கப்படுவதில்லை. முழுச் சோதனையும் அந்தக் குழாயிலேயே நடைபெறுகிறது. நீல நிறம் எவ்வளவு விரைவாக மறைகிறது என்பதை அளவிடுவது, அந்த மாதிரியிலுள்ள நுண்ணுயிர்களைப் பற்றிய தகவலைத் தருகிறது; விலங்கிற்குத் தேவையான சிகிச்சையைப் பற்றிய தகவலை அல்ல.

மெத்திலீன் நீலம் மூன்று வெவ்வேறு கால்நடை மருத்துவச் சூழல்களில் பயன்படுத்தப்படுவதால் இந்தக் குழப்பம் புரிந்துகொள்ளக்கூடியதே. இந்தக் கட்டுரை அவற்றைத் தனித்தனியாக விளக்குகிறது; மேலும் pH, புரோட்டோசோவாக்கள், மாதிரி சேகரிப்புத் தரம், மருத்துவ அறிகுறிகள் ஆகியவற்றுடன் ஒடுக்க நேரத்தை எவ்வாறு புரிந்துகொள்வது என்பதையும் காட்டுகிறது.

சோதனை உண்மையில் எதை அளவிடுகிறது

மெத்திலீன் நீலம் ஆக்சிஜனேற்றம் அடைந்த நிலையில் நீலமாகவும், ஒடுக்கம் அடைந்த நிலையில் கிட்டத்தட்ட நிறமற்றதாகவும் இருக்கும். ஆரோக்கியமான விலங்கிலிருந்து பெறப்படும் புதிய ரூமன் திரவம் வலுவான ஒடுக்கும் திறனைக் கொண்டுள்ளது; ஏனெனில் ஆக்சிஜன் இன்றிச் செயல்படும் பாக்டீரியாக்கள் தீவனத்தைத் தீவிரமாக நொதிக்கச் செய்கின்றன. அத்தகைய திரவத்தில் சிறிதளவு சாயத்தைக் கலக்கும்போது, பாக்டீரியாக்களின் வளர்சிதை மாற்றம் சில நிமிடங்களுக்குள் அதன் நிறத்தை நீக்கிவிடுகிறது.

எனவே செயல்முறையின் அடிப்படை எளிமையானது: செயல்பாட்டிலுள்ள ஆக்சிஜனற்ற நுண்ணுயிர்க் கூட்டம் நீல நிறத்தை விரைவாக நீக்குகிறது; செயல்பாடற்ற அல்லது பாதிக்கப்பட்ட நுண்ணுயிர்க் கூட்டம் அதை மெதுவாக நீக்குகிறது. குறுகிய நேரம், அந்த மாதிரியில் அதிக ஒடுக்கும் திறன் இருப்பதைக் குறிக்கிறது. மாதிரி சரியாகச் சேகரிக்கப்பட்டு கையாளப்பட்டிருந்தால், நீண்ட நேரம் நுண்ணுயிர்ச் செயல்பாடு குறைந்திருப்பதைக் குறிக்கிறது.

இது ரூமனின் ஆக்சிஜனேற்ற-ஒடுக்க மின்னழுத்தத்தை நேரடியாக அளவிடுவதில்லை. ஒடுக்கச் சோதனையை நேரடி மில்லிவோல்ட் அளவீடுகளுடன் ஒப்பிட்ட கால்நடை ஆய்வுமுறை ஆய்வொன்றில், ஒடுக்க நேரத்திற்கும் அளவிடப்பட்ட ஆக்சிஜனேற்ற-ஒடுக்க மின்னழுத்தத்திற்கும் நேரியல் தொடர்பு இல்லை என்பது கண்டறியப்பட்டது. ஒரே மாறியை அளவிடும், ஒன்றுக்கொன்று மாற்றாகப் பயன்படுத்தக்கூடிய அளவீடுகளாக இவை கருதப்படக்கூடாது என்றும் அது முடிவுசெய்தது. முழு ஒப்பீட்டின் சுருக்கம் PubMed-இல் உள்ளது. ஒடுக்கச் சோதனையை நுண்ணுயிர்க் கூட்டத்தின் செயல்பாட்டை மதிப்பிடும் சோதனையாகக் கருதுங்கள்; மலிவான மின்முனையாக அல்ல.

அசைபோடும் விலங்குகளின் எளிய அஜீரணம் குறித்த Merck/MSD விளக்கம், நீண்ட ஒடுக்க நேரத்தை, இயல்பற்ற ரூமன் pH மற்றும் குறைந்த புரோட்டோசோவா எண்ணிக்கை ஆகியவற்றுடன் சேர்ந்த அறிகுறித் தொகுப்பாகக் குறிப்பிடுகிறது. எந்த ஒரு மதிப்பும் தனியாக நோயறிதலைத் தீர்மானிப்பதில்லை. ஒட்டுமொத்த அறிகுறித் தொகுப்பே அதைத் தீர்மானிக்கிறது.

விலங்கின் அருகிலேயே செய்யக்கூடிய ஒரு நிலையான செய்முறை

கல்வி நிறுவனங்களுக்கு இடையே செய்முறைகள் சிறிது மாறுபடுகின்றன. எனவே நீங்கள் பயன்படுத்தும் துல்லியமான அளவுகளையும் வெப்பநிலையையும் பதிவு செய்து, அதே செய்முறையில் பெறப்பட்ட முடிவுகளை மட்டுமே ஒப்பிடுங்கள். பரவலாகக் கற்பிக்கப்படும் ஒரு செய்முறை:

1. உமிழ்நீர் கலப்பு, காற்றுத் தொடர்பு, குளிர்தல் ஆகியவை குறைவாக இருக்குமாறு குறைந்தது 10 முதல் 20 mL புதிய ரூமன் திரவத்தைச் சேகரிக்கவும். உடனடியாகச் சோதிக்கவும்.
2. 0.03 சதவீத மெத்திலீன் நீலத்தைத் தயாரிக்கவும்; இது ஒரு mL-க்கு 0.3 mg ஆகும்.
3. திரவத்தின் அளவில் 5 சதவீதத்திற்குச் சமமான சாயத்தைச் சேர்க்கவும். அதாவது 20 mL திரவத்திற்கு 1.0 mL சாயம், அல்லது 10 mL திரவத்திற்கு 0.5 mL சாயம். இரண்டுமே ஒரே 20 க்கு 1 திரவம்-சாயம் விகிதத்தைத் தருகின்றன.
4. அதே மாதிரியிலிருந்து சாயம் சேர்க்காத திரவத்தை இரண்டாவது குழாயில் வைத்து, நிற ஒப்பீட்டுக் கட்டுப்பாடாகப் பயன்படுத்தவும்.
5. மெதுவாகக் கலந்து, உடனே நேர அளவியைத் தொடங்கவும். உள்ளூர் செய்முறையைப் பொறுத்து, குழாயை உடல் வெப்பநிலைக்கு அருகில், சுமார் 37 முதல் 39 டிகிரி செல்சியஸில் வைத்திருக்கவும்.
6. சோதனைக் குழாயின் நிறம் கட்டுப்பாட்டுக் குழாயுடன் ஒத்துப்போகும் வரை ஆகும் நேரத்தைப் பதிவு செய்யவும். காற்றுடன் தொடர்புள்ள மேற்பரப்பில் மெல்லிய நீல வளையம் நீடிக்கலாம்; ஏனெனில் அங்குள்ள ஆக்சிஜன் சாயத்தை மீண்டும் ஆக்சிஜனேற்றம் அடையச் செய்கிறது. அந்த வளையம் மறையும் வரை காத்திருக்க வேண்டாம்.

மெத்திலீன் நீலத்தின் ஆக்சிஜனேற்ற-ஒடுக்க வேதியியல் இங்கு ஆக்சிஜன் ஏன் முக்கியம் என்பதை விளக்குகிறது. வலுவாகக் குலுக்குதல், அகலமாகத் திறந்திருக்கும் குழாய் அல்லது நீண்ட தாமதம் ஆகியவை ஆக்சிஜனை உள்ளே அனுமதித்து, ரூமனில் இயல்பாக ஏற்படுவதைவிட நீண்ட நேரம் சாயத்தை நீலமாக வைத்திருக்கும். அதே காரணத்திற்காக, கலப்பில்லாத ரூமன் திரவச் சேகரிப்பு முறையின் விவரங்களும் முக்கியமானவை. உமிழ்நீர் மாதிரியை நீர்த்துப்போகச் செய்து pH-ஐ உயர்த்துகிறது. எனவே இரைப்பைக் குழாய் மூலம் சேகரிக்கும்போது, போதுமான திரவம் கிடைத்தால் பல கால்நடை மருத்துவர்கள் முதலில் வரும் பகுதியை அகற்றிவிடுகிறார்கள்.

வெவ்வேறு கவனிப்புகள் எதை அளவிடுகின்றன

ஒடுக்க நேரம் ஒரே ஒரு கேள்விக்கு மட்டுமே பதிலளிக்கிறது. கீழே உள்ள ரூமன் மதிப்பீடு, விலங்கின் அருகில் செய்யப்படும் ஒவ்வொரு கவனிப்பும் என்ன தகவலைத் தருகிறது என்பதைக் காட்டுகிறது. ஒரு கட்டத்தை மட்டும் அல்லாமல், முழு வரியையும் பயன்படுத்துங்கள்.

இந்த அட்டவணையே முக்கியமானது. நீண்ட ஒடுக்க நேரத்துடன் மந்தமான புரோட்டோசோவாக்கள், இயல்பற்ற pH, பலவீனமான சுருக்கங்கள் ஆகியவை சேர்ந்து காணப்பட்டால், அது உண்மையான நுண்ணுயிர்ச் செயல்பாட்டுக் குறைவைக் குறிக்கிறது. சுறுசுறுப்பாக அசைபோடும் விலங்கில், புரோட்டோசோவாக்களும் சுறுசுறுப்பாக இருக்கும்போது, ஒடுக்க நேரம் மட்டும் நீண்டிருந்தால் அது ரூமனைவிட மாதிரியிலுள்ள பிரச்சினையைக் குறிக்கிறது. நடவடிக்கை எடுப்பதற்கு முன்பு மீண்டும் மாதிரி சேகரிக்கவும்.

pH மற்றும் பின்னணித் தகவலுடன் நேரத்தைப் புரிந்துகொள்வது

உணவே அடிப்படை நிலையை நிர்ணயிக்கிறது. அடர்தீவனம் அதிகமுள்ள உணவு விரைவாக நொதித்து, சுமார் ஒரு நிமிடத்தில் சாயத்தின் நிறத்தை நீக்கக்கூடும். வைக்கோல் உணவில், ஆரோக்கியமான விலங்குகளில்கூட பல நிமிடங்கள் ஆகலாம். எனவே குறுகிய நேரம் மட்டுமே சிறந்த ஆரோக்கியத்தை நிரூபிப்பதில்லை. நொதிக்கக்கூடிய மூலப்பொருள் அதிகமாக இருப்பதையும், செயல்பாட்டிலுள்ள நுண்ணுயிர்களுடன் அது தொடர்புகொண்டதையும் அது காட்டுகிறது.

அளவுக்கு அதிகமான தானிய உட்கொள்ளல் கடுமையாக இருக்கும்போது இந்த எளிய போக்கு மாறுகிறது. ஆரம்பத்தில் கார்போஹைட்ரேட் நொதித்தல் தீவிரமாக இருக்கலாம்; பின்னர் அமிலத்தால் ஏற்படும் பாதிப்பு இயல்பான நுண்ணுயிர்க் கூட்டத்தையும் புரோட்டோசோவாக்களையும் ஒடுக்குகிறது, ஒடுக்க நேரமும் நீள்கிறது. அதனால்தான், ரூமன் pH சுமார் 5.5-க்குக் கீழே இருக்கும்போது இந்தச் சோதனை செல்லுபடியாகாது என்று ஒரு கற்பித்தல் விதி கூறுகிறது. அந்த நிலையில், சோதிக்கப்படும் நுண்ணுயிர்க் கூட்டமே மாறிவிட்டிருக்கும்.

நடைமுறைக்கான அறிகுறித் தொகுப்பு வழிகாட்டி:

• இயல்பான pH உடன் சுமார் 6 நிமிடங்களுக்குள் ஒடுக்கம் ஏற்பட்டால், அது செயல்பாட்டிலுள்ள நுண்ணுயிர்க் கூட்டத்தைக் குறிக்கிறது.
• இயல்பான pH உடன் ஒடுக்க நேரம் குறிப்பிடத்தக்க அளவு நீண்டிருந்தால், உணவின்மை, நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பு மருந்தின் விளைவு அல்லது தரம் பாதிக்கப்பட்ட மாதிரி காரணமாகச் செயல்பாடு குறைந்திருக்கலாம்.
• உயர்ந்த pH உடன் நீண்ட ஒடுக்க நேரம், நொதித்தல் மூலப்பொருள் குறைவாக இருக்கும் நீண்டகால உணவின்மைக்குப் பிறகு பெரும்பாலும் காணப்படுகிறது. ஆனால் குழாய் மூலம் சேகரிக்கும்போது ஏற்பட்ட உமிழ்நீர் கலப்பையும் கருத்தில் கொள்ளுங்கள்.
• குறைந்த pH உடன் புரோட்டோசோவா செயல்பாடு குறைந்திருந்தால், கார்போஹைட்ரேட்டுடன் தொடர்புடைய நுண்ணுயிர்ச் சமநிலைக் குலைவு குறித்த கவலை எழுகிறது. ரூமன் pH-ஐப் புரிந்துகொள்வதற்கான வழிகாட்டுதல் இங்கு உதவும். 5.5-க்குக் குறைவான மதிப்புகளுடன் விலங்கின் ஒட்டுமொத்தச் செயல்பாடும் மந்தமாக இருந்தால், அது எளிய அஜீரணத்தைவிட அளவுக்கு அதிகமான தானிய உட்கொள்ளலையும் கடுமையான அமிலத்தன்மை அதிகரிப்பையும் குறிக்கிறது.

அண்மையில் வாய்வழியாக வழங்கப்பட்ட டெட்ராசைக்ளின்கள், தீவனத்தில் சேர்க்கப்பட்ட அயனோஃபோர்கள், நீண்டகாலமாக வழங்கப்பட்ட உடலளாவிய நுண்ணுயிர் எதிர்ப்பு மருந்துகள், திடீர் தீவன மாற்றங்கள், உணவின்மை நீடித்த காலம், நீர் உட்கொள்ளல் ஆகியவற்றை எப்போதும் பதிவு செய்யுங்கள். வாய்வழி டெட்ராசைக்ளின்கள் ரூமன் நுண்ணுயிர்க் கூட்டத்தின் செயல்பாட்டைக் கணிசமாகக் குறைக்கக்கூடும் என்று MSD கையேடு குறிப்பாக எச்சரிக்கிறது. அயனோஃபோர்கள் திட்டமிட்டே பாக்டீரியாக்களின் கூட்டமைப்பை மாற்றுகின்றன. இந்தப் பின்னணித் தகவல் இல்லாமல், நீண்ட நேரத்தைப் பொருள்படுத்த முடியாது.

மாதிரி சேகரிப்புத் தரத்திற்கும் சமமான முக்கியத்துவம் அளிக்க வேண்டும். கட்டுப்படுத்தப்பட்ட ஆய்வில், அதே விலங்குகளிலிருந்து கேனுலா மூலம் பெறப்பட்ட மாதிரிகளுடன் ஒப்பிடும்போது, இரைப்பைக் குழாய் மாதிரிகளில் pH அதிகமாகவும் ஆவியாகக்கூடிய கொழுப்பு அமிலங்கள் குறைவாகவும் இருந்தன; இதற்குப் பெரும்பாலும் உமிழ்நீரே காரணம். சோதிக்கப்பட்ட ஒவ்வொரு மாதிரி அளவிலும், சேகரித்த 60 நிமிடங்களுக்குப் பிறகு ஒடுக்க நேரம் கணிசமாக நீண்டது; சிறிய மாதிரிகள் அதிகம் பாதிக்கப்பட்டன. குறைந்தது 10 mL சேகரிக்கவும், 30 நிமிடங்களுக்குள் சோதிக்கவும், ஒடுக்கச் சோதனையை ஆரம்பத்திலேயே செய்யவும், மாதிரியைச் சூடாக வைத்திருக்கவும், காற்றுத் தொடர்பைக் குறைக்கவும்.

குழப்பிக்கொள்ளக்கூடாத மூன்று பயன்பாடுகள்

ஒரே சாயம், மூன்று வெவ்வேறு அமைப்புகள்.

முதலாவது, இங்கு விளக்கப்பட்ட ரூமன் திரவச் சோதனை. சோதனை மாதிரி என்பது சேகரிக்கப்பட்ட ரூமன் திரவம். உடலுக்கு வெளியே 0.03 சதவீதச் சாயம் சேர்க்கப்படுகிறது. நிறம் மறைவதற்கான நேரமே இறுதிப் புள்ளி. நுண்ணுயிர்களின் ஒடுக்கும் செயல்பாட்டை மதிப்பிடுவதே நோக்கம்.

இரண்டாவது, உயிருள்ள அசைபோடும் விலங்கிற்கு மெத்திலீன் நீலம் வழங்கப்படுவது. மெத்தீமோகுளோபினீமியாவுடன் கூடிய நைட்ரேட் அல்லது நைட்ரைட் நச்சுத்தன்மைக்கு நரம்புவழிச் சிகிச்சை அளிப்பது இதன் நிறுவப்பட்ட எடுத்துக்காட்டாகும்; இதில் மருந்து ஹீமோகுளோபினின் செயல்பாட்டை மீட்டெடுக்கிறது. மருந்தளவு, தயாரிப்பு வடிவம், மருந்து எச்சம், மருந்து வழங்கிய பின் காத்திருக்க வேண்டிய காலம் ஆகியவற்றுக்கான விதிகள் பொருந்தும். அந்த முடிவிற்கும் ஒரு குழாயில் நேரம் அளவிடுவதற்கும் எந்தத் தொடர்பும் இல்லை. குறிப்பிட்ட செய்முறையில் சாயம் உயிருள்ள உடலில் தடமறியும் பொருளாகப் பயன்படுத்தப்பட்டால், சாயம் எங்கு செல்கிறது என்பதே அடிப்படை; ரூமன் நுண்ணுயிர்கள் அதை எவ்வளவு விரைவாக ஒடுக்குகின்றன என்பது அல்ல.

மூன்றாவது, பால் ஒடுக்கச் சோதனை. சோதனை மாதிரி பால். பால் மாதிரியில் சாயம் சேர்க்கப்படுகிறது. நீல நிறம் விரைவாக மறைவது பொதுவாக அதிக நுண்ணுயிர்ச் செயல்பாட்டையும் குறைந்த சேமிப்புத் தரத்தையும் குறிக்கிறது; மெதுவான ஒடுக்கம் சிறந்த தரத்தைக் குறிக்கிறது. இது உணவு நுண்ணுயிரியலுக்கும் பால் தரச் சோதனைக்கும் உரியது; ரூமன் மருத்துவத்திற்கு அல்ல. மேலும் இது பாக்டீரியா எண்ணிக்கைச் சோதனையும் அல்ல.

பெயர்களைத் தெளிவாகக் குறிப்பிடுவது பிழைகளைத் தடுக்கிறது: ரூமன் திரவ ஒடுக்க நேரம், உடலளாவிய மெத்திலீன் நீலச் சிகிச்சை அல்லது தடமறியும் பயன்பாடு, பால் ஒடுக்கச் சோதனை. பாதுகாப்பு விதியை ஒரே வாக்கியத்தில் சொல்லலாம். ரூமன் சோதனைக்கான சாயம் ஆய்வகக் குழாயிலேயே இருக்க வேண்டும்; அந்தக் குழாய் பின்னர் அகற்றப்பட வேண்டும். இந்தச் சோதனையைச் செய்வதற்காக அது விலங்கிற்கு ஒருபோதும் வழங்கப்படுவதில்லை.

பண்ணையிலிருந்து வரும் அழைப்புக்கான சுருக்கமான விதி

சாயச் செறிவை 0.03 சதவீதமாகவும், 20 பங்கு திரவத்திற்கு 1 பங்கு சாயம் என்ற விகிதமாகவும் நிலைப்படுத்துங்கள். புதிய திரவத்தை உடல் வெப்பநிலைக்கு அருகில் வைத்து, சாயம் சேர்க்காத கட்டுப்பாட்டு மாதிரியுடன் ஒப்பிட்டுச் சோதியுங்கள். கிடைத்த நிமிடங்களை pH, புரோட்டோசோவா இயக்கம், சேகரிப்புத் தரம், உணவு, மருந்துகள், சுருக்கங்கள், பசி, மலம், உடலின் நீர்ச்சத்து நிலை ஆகியவற்றுடன் சேர்த்துப் புரிந்துகொள்ளுங்கள். தனித்த ஒரு எண் ஒருபோதும் அஜீரணத்தை உறுதிசெய்வதில்லை. ஒன்றுக்கொன்று ஒத்துப்போகும் அறிகுறித் தொகுப்பே அதை உறுதிசெய்கிறது.