கட்டுரை
மெதிலீன் ப்ளூ புற்றுநோயை ஏற்படுத்துமா? நச்சியியல் ஆய்வுகள் காட்டுவது என்ன
நீண்டகால விலங்கு பரிசோதனைகளில் மெதிலீன் ப்ளூ கட்டி உருவாக்கத்தைக் குறிக்கும் அறிகுறிகளையும், மரபணுப் பொருளுக்கு சேதம் ஏற்படுவதை மதிப்பிடும் பல ஆய்வகச் சோதனைகளில் நேர்மறை முடிவுகளையும் உருவாக்கியுள்ளது. இந்தக் கண்டுபிடிப்புகள் கவனிக்கப்பட வேண்டியவை. ஆனால் ஒரு குறிப்பிட்ட வெளிப்பாட்டுக்குப் பிறகு ஒருவருக்கு புற்றுநோய் உருவாகும் நிகழ்தகவை அவை நிரூபிப்பதில்லை.
2016-ல் வெளியிடப்பட்ட IARC மதிப்பீடு மெதிலீன் ப்ளூவை Group 3-ல் வகைப்படுத்தியது; அதாவது மனிதர்களில் அதன் புற்றுநோய் உண்டாக்கும் திறனை வகைப்படுத்த முடியவில்லை. பணிக்குழுவிடம் மனிதப் புற்றுநோய் தரவுகள் எதுவும் இல்லை; விலங்கு ஆதாரங்கள் வரம்புடையவை என அது மதிப்பிட்டது. Group 3 என்பது பாதிப்பற்றது என்று நிரூபிக்கப்பட்டது என்று பொருளல்ல. அதேபோல், விலங்குகளில் கிடைத்த ஒரு முடிவு ஒவ்வொரு மனித வெளிப்பாடும் புற்றுநோய்க்கான நிரூபிக்கப்பட்ட காரணம் என்று பொருளல்ல.
தனித்தனியாக பதிலளிக்க வேண்டிய மூன்று கேள்விகள்
புற்றுநோய் உண்டாக்கும் திறன் என்பது கட்டிகள் உருவாகுவதைக் குறிக்கிறது. வரையறுக்கப்பட்ட ஒரு வெளிப்பாட்டுக்குப் பிறகு ஏற்படும் கட்டி வடிவங்களை நீண்டகால விலங்கு ஆய்வு கண்டறிய முடியும். மரபணு நச்சுத்தன்மை என்பது மரபணுப் பொருளுக்கு ஏற்படும் சேதம் அல்லது அதனுடன் தொடர்புடைய செல்சார் நிகழ்வுகளைக் குறிக்கிறது. நேர்மறையான mutation assay ஒரு எச்சரிக்கை அறிகுறியை வழங்குகிறது; ஆனால் அது மனிதர்களில் ஏற்படும் புற்றுநோய்களின் எண்ணிக்கையை நேரடியாக அளப்பதில்லை. மனித ஆபத்து என்பது உண்மையான வெளிப்பாட்டு நிலைகளில் தீங்கு ஏற்படும் சாத்தியத்தைப் பற்றியது.
இந்தக் கேள்விகளுக்கு வெவ்வேறு அளவீடுகள் தேவை. பாக்டீரியா mutants-ஐ எண்ணுதல், எலியின் இரத்த அணுக்களை ஆய்வு செய்தல், necropsy-யில் கட்டிகளை கண்டறிதல் ஆகியவை ஒன்றுக்கொன்று மாற்றாகப் பயன்படுத்தக்கூடிய endpoints அல்ல. அதேபோல், ஒரு பொருள் புற்றுநோய் செல்களை சேதப்படுத்துகிறது என்று காட்டும் சிகிச்சை பரிசோதனை, அதற்கு மீண்டும் மீண்டும் வெளிப்படுவது ஆரோக்கியமான திசுக்களில் கட்டிகளைத் தொடங்குமா என்பதை நிரூபிப்பதில்லை. புற்றுநோய் ஆராய்ச்சியில் மெதிலீன் ப்ளூ குறித்த தனிப்பட்ட விவாதம் சிகிச்சை தொடர்பான கூற்றுகளை எடுத்துரைக்கிறது.
ஆய்வு ஒப்பீடு: உண்மையான நீண்டகால வெளிப்பாடுகள்
முக்கிய பரிசோதனையில் மெதிலீன் ப்ளூ trihydrate பயன்படுத்தப்பட்டது. இது 0.5% aqueous methylcellulose-இல் oral gavage முறையில் வழங்கப்பட்டது; அதாவது ஒரு குழாய் வழியாக வயிற்றுக்குள் அளவிடப்பட்ட அளவு செலுத்தப்பட்டது. Auerbach மற்றும் சக ஆய்வாளர்களின் ஆய்வு அறிக்கையின் படி, ஒவ்வொரு நீண்டகால ஆய்வு dose group-லும் ஒவ்வொரு இனத்திலும் 50 ஆண்களும் 50 பெண்களும் இருந்தனர். இரண்டு ஆண்டுகளுக்கு வாரத்தில் ஐந்து நாட்கள் பொருள் வழங்கப்பட்டது.
அட்டவணை NTP-யின் இனத்திற்கேற்ப வழங்கப்பட்ட முடிவுகளை அப்படியே பிரதிபலிக்கிறது. அளவுகள், dose வழங்கப்பட்ட நாட்களில் விலங்கின் ஒவ்வொரு kilogram உடல் எடைக்கும் வழங்கப்பட்ட பரிசோதனைப் பொருளின் milligrams ஆகும்; அவை மனிதர்களுக்கான பரிந்துரைகள் அல்ல. Zero-dose விலங்குகளுக்கு vehicle மட்டும் வழங்கப்பட்டது.
| மாதிரி | Dose groups, mg/kg | வழங்கும் வழி மற்றும் கால அளவு | NTP முடிவு மற்றும் தொடர்புடைய கண்டுபிடிப்பு |
|---|---|---|---|
| ஆண் F344/N எலிகள் | 0, 5, 25, 50 | Oral gavage; வாரத்தில் ஐந்து நாட்கள்; இரண்டு ஆண்டுகள் | சில ஆதாரங்கள்: pancreatic islet-cell adenomas மற்றும் adenoma/carcinoma இணைந்த அளவு அதிகரித்தது. |
| பெண் F344/N எலிகள் | 0, 5, 25, 50 | அதே அட்டவணை | இந்த நிலைகளில் புற்றுநோய் உண்டாக்கும் செயல்பாட்டுக்கான ஆதாரம் இல்லை. |
| ஆண் B6C3F1 சுண்டெலிகள் | 0, 2.5, 12.5, 25 | Oral gavage; வாரத்தில் ஐந்து நாட்கள்; இரண்டு ஆண்டுகள் | சில ஆதாரங்கள்: சிறுகுடல் carcinoma மற்றும் adenoma/carcinoma இணைந்த அளவு அதிகரித்தது. Malignant lymphoma-வும் தொடர்புடையதாக இருந்திருக்கலாம். |
| பெண் B6C3F1 சுண்டெலிகள் | 0, 2.5, 12.5, 25 | அதே அட்டவணை | தெளிவற்ற ஆதாரம்: malignant lymphoma-வில் ஓரளவு அதிகரிப்பு. |
“சில ஆதாரங்கள்” என்பது நேர்மறையான பரிசோதனை முடிவைக் குறிக்கும் NTP வகை; ஆனால் அது “தெளிவான ஆதாரம்” என்பதைக் காட்டிலும் குறைந்த வலிமையுடையது. “தெளிவற்ற” என்பது உறுதியற்ற கண்டுபிடிப்பைக் குறிக்கிறது. இந்த வகைகள் ஆதாரத்தின் வலிமையையே வெளிப்படுத்துகின்றன; சதவீத ஆபத்தையோ ஒரு carcinogen எவ்வளவு சக்திவாய்ந்தது என்பதற்கான தரவரிசையையோ அல்ல.
ஆண் எலிகளில் கிடைத்த முடிவு dose அதிகரிக்கும்போது தொடர்ந்து உயர்ந்த ஒரு படிக்கட்டு போன்றதாக இருக்கவில்லை. Pancreatic islet adenoma அல்லது carcinoma, 4/50 control விலங்குகளிலும், dose அதிகரிக்கும் வரிசையில் 9/50, 14/50 மற்றும் 8/50 விலங்குகளிலும் ஏற்பட்டது. வெளியிடப்பட்ட ஆய்வுக் கட்டுரை நடுத்தர dose-க்கு மட்டுமே statistical significance இருப்பதாகக் குறிப்பிடுகிறது. எனவே இதை எளிய நேர்கோட்டுத் தொடர்பாக விளக்குவது துல்லியமல்ல; அதே நேரத்தில் அதிகபட்ச dose பாதுகாப்பானது என்பதையும் இது நிரூபிப்பதில்லை. Adenoma என்பது benign tumour; carcinoma என்பது malignant. இணைந்த endpoint-ஐ, எண்ணப்பட்ட ஒவ்வொரு கட்டியும் புற்றுநோயே என்பது போல விவரிக்கக் கூடாது.
வெவ்வேறு சுருக்கங்கள் ஏன் முரண்படுவது போலத் தோன்றுகின்றன
தற்போதைய PROVAYBLUE prescribing information ஆண் எலிகளில் காணப்பட்ட pancreatic கண்டுபிடிப்புகளைப் பதிவு செய்கிறது; ஆனால் சுண்டெலிகளில் மருந்துடன் தொடர்புடைய neoplastic கண்டுபிடிப்புகள் இல்லை என்று விவரிக்கிறது. ஆய்வுக் கட்டுரை, சுண்டெலிகளில் neoplastic அதிகரிப்புகள் statistically significant அல்ல என்று கூறுகிறது; அதே நேரத்தில் நேர்மறையான trends இருந்ததையும் குறிப்பிடுகிறது. இருந்தாலும் NTP மேலே காட்டப்பட்டுள்ள mouse வகைப்பாடுகளை வழங்கியது.
IARC-ன் விலங்கு ஆய்வு பகுப்பாய்வு ஒரு முக்கியமான புள்ளியியல் வேறுபாட்டை விளக்குகிறது: ஆண் சுண்டெலிகளில் குடல் தொடர்பான கண்டுபிடிப்புகளில் குறிப்பிடத்தக்க dose trends இருந்தன; ஆனால் தனித்தனியான dosed groups-ஐ controls உடன் pairwise comparisons செய்தபோது அவை significant ஆக இல்லை. Dose-களின் முழு வரிசையிலும் ஒரு pattern-ஐ சோதிப்பது, ஒவ்வொரு group-ஐ தனித்தனியாகச் சோதிப்பதிலிருந்து வேறுபட்டது. வாசகர்கள் ஆதாரத்தையும் அதன் சொற்களையும் தக்கவைத்துக்கொள்ள வேண்டும்; இந்த அனைத்து முடிவுகளையும் “சுண்டெலிகளுக்கு புற்றுநோய் ஏற்பட்டது” அல்லது “mouse study negative” என்ற இரு எளிய கூற்றுகளில் ஒன்றாகச் சுருக்கக் கூடாது. இவற்றில் எதுவும் மனிதர்களுக்கான அளவிடப்பட்ட புற்றுநோய் விகிதத்தை வழங்கவில்லை.
ஆய்வு ஒப்பீடு: மரபணு சேத endpoints
NTP Technical Report 540-ன் genetic toxicology பகுதி வேறு வகையான பரிசோதனைகளை விவரிக்கிறது. S9 என்பது metabolic activation-ஐ மாதிரியாக்கப் பயன்படுத்தப்படும் liver enzymes கொண்ட ஆய்வகக் கலவை. அது இருப்பதால் ஒரு cell assay முழு உடல் exposure study ஆக மாறாது.
| சோதனை முறை | உண்மையான வெளிப்பாட்டு நிலைகள் | அளவிடப்பட்ட endpoint மற்றும் முடிவு |
|---|---|---|
| Bacterial mutation assays, இரண்டாவது பரிசோதிக்கப்பட்ட lot | Salmonella: 0.25–150 µg/plate; E. coli: 0.25–1,500 µg/plate; rat-liver S9 உடனும் இல்லாமலும் | பரிசோதிக்கப்பட்ட strains-ல் mutations அதிகரித்தன. |
| வளர்க்கப்பட்ட Chinese hamster ovary cells | Sister-chromatid exchange testing-ல் S9 இல்லாமல் 0.17–2.5 µg/mL, S9 உடன் 5 µg/mL வரை; chromosome-aberration testing-ல் 4.7–22 µg/mL பயன்படுத்தப்பட்டது | Exchange மற்றும் chromosome-aberration முடிவுகள் நேர்மறையாக இருந்தன. |
| ஆண் சுண்டெலிகள், acute experiment | Single intraperitoneal injection: 25, 50 or 150 mg/kg; samples at 48 hours | Marrow அல்லது blood-ல் micronucleated erythrocytes அதிகரிக்கவில்லை. |
| ஆண் மற்றும் பெண் சுண்டெலிகள், repeated experiment | Oral gavage: 25, 50, 100 or 200 mg/kg; வாரத்தில் ஐந்து நாட்கள், மூன்று மாதங்களுக்கு | Peripheral-blood micronucleated erythrocytes அதிகரிக்கவில்லை. |
Micronucleus என்பது cell division நடைபெறும் போது chromosome breakage அல்லது chromosome loss ஏற்பட்டதை பிரதிபலிக்கக்கூடிய சிறிய கூடுதல் nuclear body ஆகும். Negative blood-cell assay, sample எடுக்கப்பட்ட அந்த cells-ல் அந்த குறிப்பிட்ட கேள்விக்குப் பதிலளிக்கிறது. ஒவ்வொரு உறுப்பிலும் ஏற்படக்கூடிய அனைத்து வகையான DNA damage-ஐயும் அது விலக்க முடியாது. அதேபோல், positive cultured-cell assay ஒருவரின் tissues எந்த concentration-ஐ அடைந்தன என்பதைச் சொல்லாது.
Prescribing information-லும் இதே மொத்த pattern பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளது: positive bacterial மற்றும் cultured-cell tests, negative mouse micronucleus tests. மெதிலீன் ப்ளூவை வெறுமனே “genotoxic” அல்லது “non-genotoxic” என்று அழைப்பது, விளக்கத்திற்கு முக்கியமான தகவல்களை நீக்கிவிடுகிறது.
மனித வெளிப்பாட்டிற்கு இதன் பொருள் என்ன
இந்த ஆய்வுகள் மனிதர்களுக்கான சரிபார்க்கப்பட்ட cancer-safe daily threshold ஒன்றை வழங்கவில்லை. Rat dose-ஐ body-weight factor-ஆல் வகுத்தாலும் absorption, metabolism, route, exposure frequency அல்லது lifetime duration ஆகியவற்றின் வேறுபாடுகள் தீர்க்கப்படமாட்டாது. அதனால் கிடைப்பது மாற்றிக் கணக்கிடப்பட்ட ஒரு அளவு மட்டுமே; பாதுகாப்புக்கான ஆதாரம் அல்ல.
இரண்டு ஆண்டு gavage experiment-மும், குறுகிய கால மருத்துவ மேற்பார்வையுடனான intravenous treatment-மும் வெவ்வேறு கேள்விகளைக் கேட்கின்றன. அந்த வேறுபாடு நேரடி numerical extrapolation-ஐத் தடுக்கிறது; ஆனால் விலங்கு ஆய்வு கண்டுபிடிப்புகளை நீக்கிவிடுவதில்லை. பயனுள்ள மதிப்பீடு, பயன்படுத்தப்பட்ட சரியான compound மற்றும் formulation, அளவு, route, frequency, duration மற்றும் பயன்படுத்திய காரணம் ஆகியவற்றிலிருந்து தொடங்குகிறது. “சில துளிகள்” என்று மட்டும் கூறுவது concentration மற்றும் அளவிடப்பட்ட volume இரண்டையும் விடுத்துவிடுகிறது.
மருத்துவக் காரணத்திற்காக மெதிலீன் ப்ளூ வழங்கப்பட்டிருந்தால், கட்டி தொடர்பான கண்டுபிடிப்புகள் மட்டும் அந்தச் சிகிச்சையின் நன்மைகள் அதன் ஆபத்துகளைவிட அதிகமா என்பதைத் தீர்மானிக்க முடியாது. தொடர்ந்து விருப்பத்திற்காகப் பயன்படுத்துவது பரிசீலிக்கப்படுகிறதெனில், அளவிடப்படாத நீண்டகால புற்றுநோய் ஆபத்தை zero என்று விவரிக்கக் கூடாது. Drug interactions மற்றும் haemolysis-க்கு உள்ள susceptibility உள்ளிட்ட உடனடி முக்கியத்துவம் வாய்ந்த விஷயங்கள் பக்கவிளைவுகள் மற்றும் contraindications பகுதியில் விவரிக்கப்பட்டுள்ளன.
மேலும் படிக்க, மனித ஆய்வுகளை விலங்கு மற்றும் cell experiments-லிருந்து வேறுபடுத்த ஆராய்ச்சி நூலகத்தை பயன்படுத்துங்கள். ஒவ்வொரு ஆய்வுக் கட்டுரையிலும் கேட்க வேண்டிய அடிப்படை கேள்வி: அது எந்த exposure-ஐ சோதித்தது, உண்மையில் எந்த outcome-ஐ அளந்தது என்பதே.