மெத்திலீன் நீலமும் ALS-உம்: பரிசோதனை மாதிரிகளுக்கிடையே முடிவுகள் ஏன் வேறுபடுகின்றன

மெத்திலீன் நீலம் மற்றும் ALS பற்றித் தேடினால், ஒன்றுக்கொன்று முரண்படுவதுபோல் தோன்றும் இரண்டு கூற்றுகளைக் காணலாம். இந்த நீலச் சாயம் ALS மாதிரிகளில் நரம்பணுக்களைப் பாதுகாத்தது என ஒன்று கூறுகிறது. ALS எலி மாதிரியில் அது எந்தப் பலனையும் அளிக்கவில்லை என மற்றொன்று கூறுகிறது. இரண்டுமே உண்மையான ஆய்வுக் கட்டுரைகளை மேற்கோள் காட்டுகின்றன; இரு கட்டுரைகளையும் கவனமாக எடுத்துக்கொள்ள வேண்டும். ஒவ்வொரு பரிசோதனைக்கும் பின்னுள்ள அடிப்படைக் கருத்தைத் தெளிவுபடுத்தினால் இந்த முரண்பாடு மறைந்துவிடும்: பயன்படுத்தப்பட்ட மாதிரியே அந்தக் கூற்றின் வரம்பை நிர்ணயிக்கிறது.

ஒரு புழுவில் கிடைத்த முடிவு, அந்தப் புழுவைப் பற்றிய கூற்றாகும். ஒரு மீன் இளம்பருவ உயிரியில் கிடைத்த முடிவு, அந்த மீன் இளம்பருவ உயிரியைப் பற்றிய கூற்றாகும். பாலூட்டியில் நோயின் முழுப் போக்கும் அதனை உறுதிப்படுத்தும் வரை, இவற்றில் எதுவும் ஒரு நோயாளியைப் பற்றிய கூற்றாகாது. அவற்றின் பதில்கள் ஏன் வேறுபடுகின்றன என்பதை நீங்கள் புரிந்துகொள்ள, அதிகம் மேற்கோள் காட்டப்படும் இந்த இரண்டு ஆய்வுக் கட்டுரைகளையும் இக்கட்டுரை அருகருகே ஒப்பிடுகிறது.

இரண்டு பரிசோதனைகளும் ஒரே அட்டவணையில்

படிக்கும்போது இந்த அட்டவணையைப் பார்வையில் வைத்திருங்கள். ஆய்வுகளுக்கிடையிலான முக்கியமான வேறுபாடுகள் அனைத்தும் இதில் அடங்கியுள்ளன.

மரபியல் வேறுபடுகிறது, உயிரினங்கள் வேறுபடுகின்றன, மருந்து அளிக்கும் வழி வேறுபடுகிறது, காலத்தேர்வு வேறுபடுகிறது, முடிவளவுகளும் வேறுபடுகின்றன. மரபணு வகை இந்த ஐந்து வேறுபாடுகளில் ஒன்றே. எனவே, மெத்திலீன் நீலம் ஒரு குறிப்பிட்ட ALS உயிரியல் வழிமுறையில் மட்டும் தேர்ந்தெடுத்துச் செயல்படுகிறது என்பதை இந்த இரு ஆய்வுகளும் நிரூபிக்க முடியாது. அவை நிரூபிப்பது இன்னும் குறுகிய, அதே நேரத்தில் பயனுள்ள ஒரு விஷயத்தைத்தான்: எளிய மாதிரிகளில் ஆரம்பகால நேரடி மருந்து வெளிப்பாட்டின்போது கிடைத்த வலுவான மீட்பு, நீண்டகால வாய்வழி மருந்தளிப்புடன் கூடிய பாலூட்டியின் நோய்ப் போக்கில் கிடைக்கவில்லை.

சாதகமான முடிவு: புழு மற்றும் மீன் ஆய்வு காட்டியது என்ன

2012 புழு மற்றும் மீன் ஆய்வில், புழுக்களின் இயக்க நரம்பணுக்களில் மரபணு மாற்றமுற்ற மனித TDP-43 அல்லது FUS வெளிப்படுத்தப்பட்டது; மீன் கருக்களில் மரபணு மாற்றமுற்ற மனித mRNA செலுத்தப்பட்டது. இவை புரத நச்சுத்தன்மை மாதிரிகள். மரபணு மாற்றமுற்ற புரதம் இயக்கத்திலும் நரம்பணு வடிவத்திலும் ஏற்படுத்தும் நச்சு விளைவுகளை இவை சில நாட்களில் மீண்டும் உருவாக்குகின்றன; வயதுவந்த மனிதர்களில் பல ஆண்டுகளாக நடைபெறும் ALS-இன் முழுப் போக்கை அல்ல.

சிகிச்சை மிக ஆரம்பத்திலேயே தொடங்கியது. குஞ்சு பொரித்ததிலிருந்து புழுக்கள் மெத்திலீன் நீலம் கொண்ட அகார் ஊடகத்தில் வளர்ந்தன. கருவுறுதலுக்குப் பிறகு 24 மணிநேரத்தில் தொடங்கி, மீன் கருக்கள் இரவு முழுவதும் மருந்துக் கரைசலில் வைக்கப்பட்டன; சுமார் இரண்டு நாட்களுக்குப் பிறகு அவற்றின் நடத்தை சோதிக்கப்பட்டது. பாலூட்டியில் இருப்பதைப்போன்ற இரத்த–மூளைத் தடை மருந்துக்கும் நரம்பணுவுக்கும் இடையே இருக்கவில்லை; இரத்தப் பிளாஸ்மாவிலோ மூளையிலோ மருந்தின் அளவு அளவிடப்படவும் இல்லை.

இந்தச் சூழ்நிலைகளில் விளைவுகள் பெரியதாகவும் சீராகவும் இருந்தன. 6 மற்றும் 60 μM ஆகிய இரு செறிவுகளும் TDP-43 மற்றும் FUS புழுக்களில் வயது சார்ந்த செயலிழப்பைக் குறைத்தன. முதிர்ந்த நிலையின் 12-ஆம் நாளில், சிகிச்சையளிக்கப்படாத TDP-43 புழுக்களில் சுமார் 80 சதவீதம் செயலிழந்திருந்தன; குஞ்சு பொரித்ததிலிருந்து சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட புழுக்களில் அது சுமார் 10 சதவீதமாக இருந்தது. நரம்பிணைப்புப் பரிசோதனையும் இதே திசையைச் சுட்டியது: நரம்பு–தசைச் செய்திப் பரிமாற்றத்தை ஆராயப் பயன்படும் ஆல்டிகார்ப் என்ற மருந்துக்கு TDP-43 புழுக்கள் மிகை உணர்திறனைக் காட்டின; மெத்திலீன் நீலம் அந்தப் பதிலை இயல்புநிலையை நோக்கி மாற்றியது. சிதைவடைந்த இயக்க நரம்பணு நீட்சிகளின் எண்ணிக்கை குறைந்தது; மிகத் தெளிவான விளைவு 60 μM-இல் காணப்பட்டது. மீன்களில், தொடுதலால் தூண்டப்படும் நீச்சல் கணிசமாக மேம்பட்டது; குறுகியிருந்த இயக்க ஆக்சான்கள் 30 அல்லது 60 μM-இல் இயல்பான நீளத்தை நோக்கி மீண்டும் வளர்ந்தன. எனினும், மீட்பு முழுமையாக இல்லாமல் பகுதியளவிலேயே இருந்தது.

ஆக்சிகரண அழுத்தத் தரவுகள், ஆக்சிகரண எதிர்ப்புச் செயல்பாடு என்ற விளக்கத்துடன் பொருந்தின. மரபணு மாற்றமுற்ற புழுக்கள் மற்றும் மீன்களில் வினைத்திறன் கொண்ட ஆக்சிஜன் அளவீடுகள் உயர்ந்திருந்தன; சிகிச்சையுடன் அவை குறைந்தன. மெத்திலீன் நீலம் அளிக்கப்பட்ட இயல்பான புழுக்கள், ஆக்சிகரணத்தைத் தூண்டும் ஒரு சோதனைச் சூழலில் சிகிச்சையளிக்கப்படாத புழுக்களைவிட மிக நீண்ட நேரம் உயிர்வாழ்ந்தன. ஆனால் இரண்டு வரம்புகள் முக்கியமானவை. மரபணு மாற்றமுற்ற TDP-43 மற்றும் FUS புரதங்களின் மொத்த அளவுகள் குறையவில்லை; புரதத் திரள்களையும் ஆய்வு நேரடியாக அளவிடவில்லை. எனவே, புரதத் திரள்கள் அகற்றப்பட்டன என்பதை நிரூபிக்காமல், செயல்பாட்டு மீட்பை இது காட்டுகிறது. ஆக்சிகரண–ஒடுக்க மற்றும் மைட்டோகாண்ட்ரியா சார்ந்த கருதுகோள்கள் பொதுவாக எவ்வாறு முன்வைக்கப்படுகின்றன என்பதைப் பின்தொடர்பவர்கள், இந்தச் செயல்முறைக்கு ஆதரவு உள்ளது என்றாலும் அது உறுதியாகத் தீர்மானிக்கப்படவில்லை என்றே கருத வேண்டும்.

காலத்தேர்வே மிக முக்கியமான புரிதலை அளித்த விவரமாக இருந்தது. சிகிச்சையைத் தொடங்க ஆய்வாளர்கள் முதிர்ந்த நிலையின் 5-ஆம் நாள் வரை காத்திருந்தபோது, 12-ஆம் நாளின் செயலிழப்பு விகிதம் சுமார் 55 சதவீதமாக இருந்தது; குஞ்சு பொரித்ததிலிருந்து சிகிச்சை அளித்தபோது அது சுமார் 10 சதவீதமாக இருந்தது. அதே மருந்து, அதே புழு, அதே மரபணு மாற்றம்; ஆனால் விளைவு மிகவும் குறைவு. காணப்பட்ட பலனின் பெரும்பகுதி ஆரம்பகால முன்னெச்சரிக்கை மருந்து வெளிப்பாட்டைச் சார்ந்திருந்தது.

பலனில்லாத முடிவு: SOD1 எலி ஆய்வு காட்டியது என்ன

2011 எலி ஆய்வு, அதிகக் கட்டுப்பாடுள்ள ஒரு அமைப்பில் இன்னும் கடினமான கேள்வியை ஆராய்ந்தது. ஒத்த மரபணுப் பின்னணி கொண்ட SOD1 G93A எலிகளில், பின்னங்கால் நடுக்கத்திலிருந்து நடை பாதிப்பு, உடலை இயல்பு நிலைக்குத் திருப்பும் அனிச்சை இழப்பு ஆகியவை வழியாக, முன்கூட்டியே வரையறுக்கப்பட்ட இறுதி முடிவளவு வரை நோய் முன்னேறுகிறது. அறிகுறிகளுக்கு முன்பே 45-ஆம் நாளில் சிகிச்சை தொடங்கி தினமும் தொடர்ந்தது; பார்வையாளர்கள் நரம்பியல் நிலையை 0 முதல் 6 வரையிலான அளவுகோலில் மதிப்பிட்டனர். இது நோயின் முழுப் போக்கையும் ஆராயும் பரிசோதனை. அதனால், புழுவில் காணப்படும் எந்தச் செயலிழப்பு வளைவையும்விட, ஒரு நோயாளி முக்கியமாகக் கருதும் விளைவுகளுக்கு இது நெருக்கமானது.

முக்கிய முடிவுகள் பலனைக் காட்டவில்லை. ஒட்டுமொத்த அறிகுறித் தொடக்கம் கட்டுப்பாட்டுக் குழுவில் 121 நாட்களிலும், மெத்திலீன் நீலக் குழுவில் 124 நாட்களிலும் ஏற்பட்டது; இந்த வேறுபாடு புள்ளியியல் ரீதியாகக் குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லை. இறுதிநிலை வரையிலான உயிர்வாழ்வு முறையே 167 நாட்கள் மற்றும் 170 நாட்களாக இருந்தது; இதுவும் குறிப்பிடத்தக்கதாக இல்லை. சில துணைப் பகுப்பாய்வுகள் சிகிச்சைக்குச் சாதகமாக இருந்தன: பெண் எலிகளில் அறிகுறித் தொடக்கம் சுமார் 7 நாட்கள் தாமதமானது; சிகிச்சையளிக்கப்பட்ட விலங்குகள் லேசான நிலைகளில் சற்றே அதிக நேரமும், தீவிர நிலைகளில் குறைந்த நேரமும் இருந்தன. பாலின அடிப்படையிலான துணைக்குழுக்கள் சிறியதாகவும், நோய் நிலைகளுக்கிடையிலான ஒப்பீடுகள் பலவாகவும் இருந்ததால், இவற்றை நிரூபணமாக அல்லாமல் புதிய கருதுகோள்களை உருவாக்கும் முடிவுகளாகவே பார்க்க வேண்டும். நரம்பணு எண்ணிக்கைகளோ, SOD1 திரளாக்கப் பரிசோதனையோ, ஆக்சிகரண அல்லது அழற்சிக் குறியீடுகளோ அளவிடப்படவில்லை. எனவே, மருந்து அதன் இலக்குகளை அடைந்தும் செயல்படத் தவறியதா, அல்லது இந்த மருந்தளவில் அந்த இலக்குகளில் செயல்படவே இல்லையா என்பதையும் ஆய்வால் கூற முடியாது. ஒரே ஒரு மருந்தளவு மட்டுமே சோதிக்கப்பட்டது.

இரு திசைகளிலும் பொருந்தும் மிக அடிப்படையான வரம்பை ஆய்வாளர்களே சுட்டிக்காட்டினர். அதிக நகல்களைக் கொண்ட SOD1 G93A மாதிரி, நச்சுத்தன்மை கொண்ட SOD1 நோயை நன்றாக மாதிரியாக்குகிறது. ஆனால் SOD1 நோய் என்பது குடும்ப வழி ALS-இன் ஒரு சிறிய பகுதி மட்டுமே; பெரும்பாலான ஆங்காங்கே ஏற்படும் ALS நோய்களிலிருந்து அதன் உயிரியல் வேறுபடுகிறது. ஆய்வுக்குரிய மருந்துகளை TDP-43 அடிப்படையிலான பாலூட்டி மாதிரிகளில் மீண்டும் சோதிக்க அவர்கள் பரிந்துரைத்தனர். அந்தப் பரிந்துரை பின்னர் இன்னும் சிக்கலானதாகியுள்ளது. ஏனெனில், மெத்திலீன் நீலம் குறித்த ஒரு தனி TDP-43 எலி ஆய்வும் இயக்க முடிவளவுகளை மேம்படுத்தத் தவறியதாக புழு மற்றும் மீன் ஆய்வாளர்கள் குறிப்பிடுகின்றனர். எனவே, ஒரு சேர்மம் ஒரு TDP-43 அமைப்பில் வலுவான விளைவைக் காட்டியும், மற்றொரு TDP-43 அமைப்பில் எந்த விளைவையும் காட்டாமலும் இருக்கலாம். மரபணுவைப் போலவே பரிசோதனை அமைப்பும் முக்கியமானது.

புழு அல்லது மீனில் ஏற்படும் முன்னேற்றம் நோயாளிகளுக்கான பலனை ஏன் உறுதிப்படுத்த முடியாது

ஒவ்வொரு மாதிரியும் வெவ்வேறு கேள்விக்குப் பதிலளிப்பதாகக் கருதுங்கள்.

முதலாவதாக, உயிரியல் வேறுபடுகிறது. TDP-43 மற்றும் FUS ஆகியவை நியூக்ளிக் அமிலங்களுடன் பிணையும் புரதங்கள்; இந்த எளிய அமைப்புகளில் அவை பொதுவான மரபியல் இடைவினைகளைக் கொண்டுள்ளன. ஆனால் SOD1 நச்சுத்தன்மை, ஓரளவு வேறுபட்ட நேரடி செயல்முறைகள் வழியாக ஏற்படுகிறது. ஒரு வகையான புரத நச்சுத்தன்மை அழுத்தத்தைத் தணிக்கும் மருந்து, மற்றொன்றையும் தணிக்க வேண்டியதில்லை. கருநிலையில் நிகழும் அதிகப்படியான வெளிப்பாட்டுக்கு எதிரான வெற்றி, அழற்சி, கிளையல் செல்களின் பங்கேற்பு மற்றும் உடல் முழுவதுமான சரிவு ஆகியவற்றுடன் வயதுவந்த நிலையில் மெதுவாக நடைபெறும் நரம்புச் சிதைவுக்கு எதிரான வெற்றியை முன்னறிவிக்க வேண்டியதில்லை.

இரண்டாவதாக, மருந்து வெளிப்பாடு வேறுபடுகிறது. மைக்ரோமோலார் செறிவுகளில் தொடர்ந்து மருந்துக் கரைசலில் வைப்பது, வாய்வழி மருந்தளிப்புக்கு நிகரானது அல்ல. விழுங்கப்பட்ட மருந்தளவுக்கும் முதுகுத்தண்டின் இயக்க நரம்பணுவுக்கும் இடையே குடல் உறிஞ்சுதல், முதல் கடத்தல் வளர்சிதை மாற்றம், இரத்தப் பிளாஸ்மா புரதங்களுடன் பிணைதல், மூளைக்குள் ஊடுருவுதல், உடலிலிருந்து நீக்கப்படுதல் ஆகிய அனைத்தும் உள்ளன. எந்த ஆய்வும் நரம்பு மண்டலத்தில் மருந்தின் அளவுகளை அளவிடவில்லை. எனவே, ஒரு ஆய்வின் செறிவை மற்றொன்றுடன் இணைத்துப் பார்க்க முடியாது.

மூன்றாவதாக, காலத்தேர்வு வேறுபடுகிறது. புழு மற்றும் மீன்களில் கிடைத்த பலன்கள், நோயியல் மாற்றங்கள் திரள்வதற்கு முன்பே சிகிச்சை அளிப்பதைப் பெரிதும் சார்ந்திருந்தன. எலிகளின் சிகிச்சையும் அறிகுறிகள் தோன்றுவதற்கு முன்பே தொடங்கியது; இது அந்த ஆய்வின் ஒரு பலம். ஆனால் மனிதர்களில் சிகிச்சை பெரும்பாலும் அறிகுறிகள் தொடங்கிய பிறகே ஆரம்பிக்கும்; அது இன்னும் தாமதமான நேரமாகும். இரண்டு நாள் கருப் பரிசோதனையில் கிடைக்கும் முன்னெச்சரிக்கைச் சிகிச்சைக்கான சாதக அறிகுறி, ஆராய்ச்சிக்கான தொடக்கப் புள்ளியே தவிர மருத்துவப் பயன்பாட்டின் மாதிரி அல்ல.

நான்காவதாக, முடிவளவுகள் வேறுபடுகின்றன. 12 நாட்களில் ஏற்படும் செயலிழப்பு, ஆல்டிகார்ப் உணர்திறன், மைக்ரோமீட்டர்களில் அளவிடப்படும் ஆக்சான் நீளம், நீந்திய தூரம் ஆகியவை நேரடியான பண்புக்கூறு முடிவளவுகள். ஒரு பாலூட்டியில் நோய்த் தொடக்கமும் உயிர்வாழ்வும், உடலில் நிகழும் ஒவ்வொரு ஈடுசெய்யும் மற்றும் சிக்கலாக்கும் செயல்முறையையும் ஒருங்கிணைத்துப் பிரதிபலிக்கின்றன. மருந்துகள் உயிர்வாழ்வை மாற்றாமல் இத்தகைய நேரடி அளவீடுகளை மாற்றுவது வழக்கமானது. அதனால்தான் பாலூட்டிகளில் ஒரு நிகழ்வு ஏற்படும் வரையிலான காலத்தை அளவிடும் முடிவளவுகள் பயன்படுத்தப்படுகின்றன.

அடுத்த தலைப்புச் செய்தியை மதிப்பிட ஒரு சரிபார்ப்புப் பட்டியல் வேண்டுமென்றால், முன்மருத்துவ ஆய்வுகளை எவ்வாறு வாசிப்பது என்பதிலிருந்து ஒன்றைப் பயன்படுத்தலாம்: உயிரினம் எது, செலுத்தப்பட்ட வெளிமரபணு எது, மருந்தளவும் அளிக்கும் வழியும் என்ன, மருந்தின் அளவுகள் அளவிடப்பட்டனவா, நோயியல் மாற்றங்களுடன் ஒப்பிடும்போது சிகிச்சை எப்போது தொடங்கியது, முடிவளவு குறுகியகாலப் பண்புக்கூறா அல்லது நோயின் முழுப் போக்கா, இரண்டாவது ஆய்வகத்திலும் அதே விளைவு கிடைத்ததா என்று கேளுங்கள். இந்த ஆரம்பகால சாதக அறிகுறிகளில் ஏதேனும் மருத்துவத் தரவுகளாக வளர்ந்துள்ளனவா என்பதை அறிய, மெத்திலீன் நீலம் குறித்த மனித ஆய்வுகளின் விரிவான ஆதாரத் தொகுப்பையே பார்க்க வேண்டும்.

நோயாளிகளுக்கும் குடும்பங்களுக்கும் இதன் பொருள் என்ன

ALS-க்கான உறுதிப்படுத்தப்பட்ட மெத்திலீன் நீலச் சிகிச்சை நடைமுறை எதையும் இந்தக் கட்டுரைகளிலிருந்து பெற முடியாது. சாதகமான ஆய்வு, TDP-43 மற்றும் FUS உயிரியல் சார்ந்த ஆக்சிகரண மற்றும் நரம்பிணைப்புச் செயல்முறைகள் குறித்து மேலும் ஆராய்வதை ஆதரிக்கிறது. பலனில்லாத ஆய்வு, இந்த மருந்து வெளிப்பாட்டில் நீண்டகால வாய்வழி மருந்தளிப்பால் SOD1 வகை நோயின் போக்கு மாறும் என்ற எதிர்பார்ப்புக்கு எதிரான ஆதாரமாக உள்ளது. இரண்டும் சேர்ந்து மாதிரிகளுக்கிடையிலான முடிவு முரண்பாட்டை விவரிக்கின்றன; சிகிச்சையைப் பரிந்துரைக்கவில்லை.

செயல்திறனைப் போலவே பாதுகாப்பையும் நிதானமாக அணுக வேண்டும். எலிகளில் நடத்தப்பட்ட ALS ஆய்வுகள், மனிதர்களுக்கான பாதுகாப்பான மருந்தளவைப் பற்றி எதையும் கூறுவதில்லை. G6PD குறைபாட்டில் இரத்தச் சிவப்பணுச் சிதைவு ஏற்படுவதன் மூலமும், செரோட்டோனின் செயல்பாட்டைப் பாதிக்கும் மருந்துகளுடன் சேர்க்கும்போது செரோட்டோனின் நச்சுத்தன்மை ஏற்படுவதன் மூலமும் மெத்திலீன் நீலம் உண்மையான அபாயங்களைக் கொண்டுள்ளது. G6PD குறைபாடு இருக்கலாம் என்ற சந்தேகம், தற்போது மனச்சோர்வு எதிர்ப்பு மருந்துகள் பயன்படுத்துவது, மருந்துகளில் திட்டமிடப்படும் எந்த மாற்றமும் மருத்துவருடன் கலந்துரையாடப்பட வேண்டும். ஆய்வக முடிவுகள் குறித்த தலைப்புச் செய்திகளின் அடிப்படையில் யாரும் செயல்படுவதற்கு முன், மெத்திலீன் நீலத்தின் பொதுவான பாதுகாப்புத் தரவுகளையும் மருத்துவருடன் மதிப்பாய்வு செய்ய வேண்டும்.

முக்கிய முடிவை ஒரே வாக்கியத்தில் கூறலாம். ஆரம்பகால மருந்து வெளிப்பாட்டில், TDP-43 மற்றும் FUS புழு மற்றும் மீன் இளம்பருவ உயிரிகளின் பண்புக்கூறுகளில் மெத்திலீன் நீலம் வலுவான மீட்பை ஏற்படுத்தியது; ஆனால் நீண்டகால வாய்வழி மருந்தளிப்புடன் நடத்தப்பட்ட SOD1 எலி ஆய்வில் நோய்த் தொடக்கத்திலோ உயிர்வாழ்விலோ நடைமுறையில் பலன் ஏதும் அளிக்கவில்லை. எனவே, இது மாதிரியைச் சார்ந்த ஆதாரம்; நோயாளிகளில் பயன்படுத்துவதை ஆதரிக்காது என்பதே நேர்மையான விளக்கம்.