Bluu ya methilini na ini lenye mafuta: tafiti za majaribio zilibaini nini

Ini lenye mafuta ni jina moja linalotumika kwa matatizo kadhaa tofauti. Kwa mtu mmoja, kichocheo ni matumizi makubwa ya pombe kwa muda mrefu. Kwa mwingine, ni ugavi wa virutubishi kupita kiasi pamoja na ukinzani wa insulini na kupelekwa kwa mafuta ya ziada kwenye ini. Hadubini inaweza kuonyesha uhifadhi wa mafuta pekee katika hali zote mbili, lakini visababishi vya awali hutofautiana. Tofauti hiyo huamua kile ambacho jaribio lolote linaweza kuthibitisha.

Maandiko ya utafiti kuhusu bluu ya methilini na ini lenye mafuta ni machache, na yote kuhusu suala hili ni ya kabla ya hatua ya kliniki. Tafiti tatu za panya wakubwa na panya wadogo ndizo zinazorejelewa mara nyingi zaidi, na hazielekei zote upande mmoja. Utafiti mmoja wa ulishaji wa ethanoli ulirekebisha mabadiliko ya redoksi lakini mafuta kwenye ini yakabaki bila kubadilika. Utafiti mmoja wa lishe yenye mafuta mengi ulipunguza mafuta kwenye ini pamoja na mabadiliko ya upitishaji wa ishara. Utafiti mmoja wa wanyama wenye afya ulipata matokeo yanayokinzana ya peroksidishaji wa lipidi kwenye ini na figo. Zikisomwa pamoja, zinaonyesha kwa nini vipimo vitatu vya matokeo lazima vibaki tofauti: mabadiliko ya redoksi, uanzishaji wa upitishaji wa ishara, na mrundikano wa mafuta kwenye tishu.

Vipimo vitatu vya matokeo ambavyo ni rahisi kuvichanganya

Kipimo cha redoksi hueleza namna elektroni zinavyoshughulikiwa. Uwiano wa NAD+ kwa NADH kwenye ini huonyesha kama mazingira ya seli yameoksidishwa au yamereduksiwa kwa kulinganisha. Uoksidishaji wa ethanoli hubadilisha NAD+ kuwa NADH, hivyo unywaji wa pombe kwa muda mrefu hushusha uwiano huo. Rangi inayopokea elektroni inaweza kuupandisha tena. Huo ni mchakato wa kikemia, si uthibitisho wa kupungua kwa mafuta yaliyohifadhiwa.

Kipimo cha upitishaji wa ishara hueleza udhibiti. SIRT1 ni kimeng'enya cha udhibiti kinachotegemea NAD+ na kinachobadilisha protini zinazohusika katika utendaji wa mitokondria na ushughulikiaji wa lipidi. AMPK hufanya kazi kama kihisi cha kiwango kidogo cha nishati ambacho, kinapoanzishwa, huchochea uoksidishaji wa vyanzo vya nishati na kuzuia usanisi wa lipidi. Makala inaporipoti uanzishaji wa SIRT1 kwenye ini kwa bluu ya methilini, inaripoti mabadiliko ya udhibiti. Bado haijaripoti matokeo kwa mgonjwa.

Kipimo cha kihistolojia au kibiokemia hueleza hali ya ini lenyewe. Mifano ya kawaida ni kiasi cha trigliseridi kwa kila gramu ya tishu, utiaji rangi wa mafuta yasiyo na chaji kwa Oil Red O, tathmini ya kuvimba kwa seli na uharibifu kwa hematoksilini na eosini, na shughuli ya ALT kwenye plazma. Ni aina hii ya tatu pekee inayojibu kama mrundikano wa mafuta kwenye ini ulipungua kwa bluu ya methilini katika jaribio hilo.

Kutenganisha aina hizi huzuia tafsiri potofu inayotokea mara nyingi zaidi: matokeo mazuri ya redoksi au upitishaji wa ishara hayamaanishi kupungua kwa mafuta kwenye ini.

Mfano wa ethanoli: redoksi ilirekebishwa, mafuta hayakubadilika

Matokeo hasi yaliyo wazi zaidi yanatoka katika utafiti wa ulishaji wa ethanoli kwa muda mrefu kwa panya wakubwa wa kiume wa Wistar. Wanyama walipewa ethanoli kama sehemu ya lishe ya kimiminika, ikiongezwa hadi asilimia 36 ya nishati yote, huku wanyama wa udhibiti waliopewa kiasi sawia cha chakula wakipokea glukosi badala ya nishati ya ethanoli. Kundi moja la ethanoli na kundi moja la udhibiti pia yalipewa bluu ya methilini kwa kiwango cha 130 mg kwa lita ya lishe, takriban 42 mg kwa kg kwa siku, kuanzia siku ya 5 hadi siku ya 30.

Hali ya redoksi ilikadiriwa kwa kutumia jozi za kawaida za metaboliti: laktati kwa piruvati kwa sitosoli na 3-hydroxybutyrate kwa acetoacetate kwa mitokondria. Mapema katika ulishaji wa ethanoli wa kiwango kikubwa, makundi ya ethanoli yalionyesha mabadiliko makubwa, huku uwiano wa NAD+ kwa NADH wa sitosoli ukishuka kwa takriban asilimia 62 na ule wa mitokondria kwa takriban asilimia 71, pamoja na ongezeko la gliseroli 3-fosfati. Bluu ya methilini ilirejesha kwa kiasi kikubwa mabadiliko hayo na kurudisha gliseroli 3-fosfati karibu na viwango vya makundi ya udhibiti, bila kubadilisha kiasi cha ethanoli kilichotumiwa, ongezeko la uzito wa mwili, au ethanoli kwenye seramu.

Mafuta kwenye ini yalionyesha hali tofauti. Katika siku ya 12, kabla ya mrundikano mkubwa wa mafuta, trigliseridi haikutofautiana kati ya makundi. Katika siku ya 27, makundi ya ethanoli yalikuwa na ongezeko kubwa la trigliseridi bila kujali matumizi ya bluu ya methilini. Katika siku ya 30, jumla ya lipidi iliongezeka kwa takriban asilimia 89 na trigliseridi kwa takriban asilimia 196 kwa wanyama waliolishwa ethanoli, na tena rangi hiyo haikuathiri ongezeko hilo. Mrundikano wa mafuta karibu na sehemu za kati za lobuli ulionekana sawa, iwe matibabu yalitumika au la. Waandishi walihitimisha kwamba mabadiliko ya redoksi yaliyosababishwa na ethanoli si kisababishi kikuu cha ini lenye mafuta baada ya ulishaji wa muda mrefu katika mfano huu. Kujifunza kutofautisha jinsi matokeo ya wanyama na seli yanavyohusiana na hatari kwa binadamu kunasaidia hapa: utaratibu wa kibaolojia unaweza kuwa halisi lakini bado usidhibiti matokeo.

Huu ndio utafiti wa kunukuu mtu anapodai kwamba kila urekebishaji wa redoksi lazima uondoe mafuta kwenye ini. Katika mpangilio huu wa jaribio, hilo halikutokea.

Mfano wa kimetaboliki: upitishaji wa ishara pamoja na mafuta machache, kwa panya wadogo

Taswira tofauti inatokana na utafiti wa seli za ini na panya wadogo waliopewa lishe yenye mafuta mengi uliojikita katika SIRT1 na AMPK. Katika seli za HepG2, seli za AML-12, na seli za ini zilizotengwa moja kwa moja kutoka kwa panya wakubwa, bluu ya methilini ilipandisha uwiano wa NAD+ kwa NADH, kuongeza protini ya SIRT1, kupunguza asetilesheni ya kidhibiti PGC-1alpha, kuongeza kiasi cha DNA ya mitokondria na matumizi ya oksijeni, na kuanzisha AMPK pamoja na ongezeko la CPT-1 na PPARalpha katika hatua zinazofuata. Uzalishaji wa SIRT1 ulipopunguzwa, uanzishaji wa AMPK ulipotea, jambo linalohusisha mnyororo huo na SIRT1 katika mfumo huo wa seli. Rangi hiyo pia ilipinga ishara za uundaji wa lipidi zilizotokana na kianzishaji cha LXR, T0901317, na kuathiriwa na palmitati, zikiwemo kuchochewa kwa SREBP-1c, FAS, na ACC.

Sehemu ya wanyama ilitumia panya wadogo wa kiume wa C57BL/6 waliolishwa lishe yenye mafuta ya asilimia 60 kwa wiki 8, huku bluu ya methilini ikitolewa kwa mdomo mara nne kwa wiki katika wiki 4 za mwisho kwa kiwango cha 3 au 10 mg kwa kg kwa siku. Panya waliotibiwa walionyesha utiaji rangi mdogo wa Oil Red O, trigliseridi kidogo kwenye ini, kuvimba kwa seli na kuzorota kwa tishu kutokana na mafuta kwa kiwango kidogo kwenye histolojia, na ALT kidogo kwenye plazma kuliko panya waliopewa lishe yenye mafuta mengi bila kutibiwa. Uchunguzi wa farmakokinetiki katika makala hiyo hiyo ulibaini upatikanaji wa kibiolojia baada ya kutolewa kwa mdomo wa takriban asilimia 31 hadi 35, pamoja na ufyonzwaji karibu kamili kwenye utumbo lakini umetaboli mkubwa, na uwiano wa juu zaidi wa kiasi kwenye tishu kwa kiasi kwenye plazma ukiwa kwenye ini. Kwa kuzingatia usambazaji huo, athari kwenye ini angalau inawezekana.

Hiyo ni ishara halisi ya kupungua kwa mrundikano wa mafuta, lakini mipaka yake ni finyu. Ni jaribio fupi la panya wadogo lenye wanyama 9 hadi 10 kwa kila kundi, lishe moja, viwango viwili vya dozi, na matibabu ya wiki nne. Linachunguza mrundikano wa mafuta unaohusiana na umetaboli na sifa za uvimbe wa ini unaoambatana na mafuta, si ugonjwa unaohusiana na pombe, na halichunguzi sirhosisi, kurejesha hali ya awali baada ya fibrosisi, au matokeo yoyote kwa binadamu. Jukumu la vipimo vya mitokondria na redoksi katika kutafsiri matokeo hayo ni kuviona kama vinavyounga mkono dhana ya utafiti, si kama dozi au utaratibu wa matibabu.

Taswira ya tishu zenye afya: dozi ileile, matokeo yanayokinzana kati ya viungo

Utafiti wa tatu mara nyingi huingizwa katika madai kuhusu ini ambapo haufai kuhusishwa. Katika jaribio la siku 30 kwa panya wakubwa wa kike wa Wistar wenye afya, wanyama watano walipewa bluu ya methilini ya 1 mM kwenye maji ya kunywa na watano walitumika kama kundi la udhibiti. Dismutasi ya superoksidi, katalasi, na glutathioni katika hali iliyoreduksiwa havikubadilika kwenye ini wala figo. Peroksidishaji wa lipidi uliongezeka kidogo kwenye ini na kupungua kwenye figo. ALT ya seramu na kreatinini zilipungua, bila mabadiliko katika nitrojeni ya urea kwenye damu.

Tafsiri ya uaminifu ni kwamba athari hutegemea tishu katika wanyama wenye afya, si kwamba ugonjwa ulitibiwa. Kiwango kilekile cha kuathiriwa kilionekana kuchochea uoksidishaji kwa kiasi kidogo kwa kiashiria kimoja kwenye ini na kuwa na athari ndogo ya kinga kwa kiashiria hicho hicho kwenye figo, huku mifumo ya kawaida ya kujikinga dhidi ya uoksidishaji ikibaki bila kubadilika. Kwa kuwa kulikuwa na wanyama watano kwa kila kundi na hakuna mfano wa ugonjwa, makala hii inaonya dhidi ya kuiita bluu ya methilini kinzaoksidishaji cha jumla cha ini. Pia inaonyesha kwa nini mabadiliko ya vimeng'enya vya ini yanahitaji muktadha wa ugonjwa uliofafanuliwa kabla hayajamaanisha kuboreka.

Ulinganisho wa majaribio matatu ya ini

Jedwali linaweka wazi hoja kuu. Rangi ya buluu inayofanana, biolojia tofauti. Utafiti wa ethanoli unatenganisha mafanikio ya redoksi na kutopungua kwa mafuta. Utafiti wa lishe unaunganisha upitishaji wa ishara na kupungua kwa mafuta katika mfano mmoja. Utafiti wa wanyama wenye afya unaonyesha kwamba viashiria vya redoksi vinaweza kuelekea pande zinazokinzana kutegemea kiungo.

Kwa nini haya hayatoi msingi wa dai la matibabu

Hakuna utafiti kati ya hii uliowahusisha watu wenye ini lenye mafuta. Dozi, njia za kutoa, na muda hutofautiana kati ya makala, na haviwezi kubadilishwa kuwa mpango wa matumizi kwa binadamu kwa kurekebisha kiwango tu. Ukubwa mdogo wa makundi, hasa wanyama watatu kwa kila wakati wa kipimo cha redoksi katika utafiti wa ethanoli na watano kwa kila kundi katika utafiti wa wanyama wenye afya, unaacha kutokuwa na uhakika kwa kiasi kikubwa. Jinsia, nasaba, muundo wa lishe, na muda wa kuanza matibabu ukilinganishwa na kutokea kwa uharibifu vyote hutofautiana. Na mifano hiyo miwili ya ugonjwa inawakilisha visababishi tofauti vya awali, hivyo matokeo mazuri ya lishe hayawezi kufuta matokeo hasi ya ethanoli, wala kinyume chake.

Kwa yeyote aliyegunduliwa kuwa na ugonjwa wa ini, jambo la muhimu zaidi katika kusoma tafiti hizi ni tahadhari badala ya matibabu. Muhtasari wa tahadhari za figo na ini kuhusu bluu ya methilini unaeleza kwa nini kuharibika kwa utendaji wa kiungo hubadilisha maswali ya usalama hata wakati makala ya wanyama inaonekana kuonyesha matokeo mazuri. Mpelekee mtaalamu wa afya taarifa ya utambuzi wa ugonjwa, vipimo vya hivi karibuni vya maabara, bidhaa halisi na njia ya kuitumia, na orodha kamili ya dawa, kisha uulize ni ushahidi gani unaounga mkono bidhaa hiyo kwa kusudi hilo kwa mtu mwenye kiwango hicho cha kuharibika kwa utendaji wa kiungo.

Kwa ufupi: bluu ya methilini ilibadilisha hali ya redoksi ya ini katika mfano mmoja wa ethanoli bila kupunguza mafuta yaliyohifadhiwa, ilianzisha SIRT1 na AMPK huku ikipunguza mafuta katika mfano mmoja wa kimetaboliki wa panya wadogo, na ilionyesha athari za redoksi zilizotofautiana kwa kila kiungo kwa panya wakubwa wenye afya. Huo ni mkusanyiko wa mielekeo ya kufuatilia katika utafiti, si tiba iliyothibitishwa ya ini lenye mafuta.