Methylene blue ee cilmi-baarista zebrafish: walax lagu daro daryeelka iyo qodob qalloociya tijaabada

Biyaha ukunta zebrafish badanaa waxay leeyihiin midab buluug khafiif ah, waxaana dhif ah in qof qoro sababta. Midabeeyuhu waa methylene blue, oo lagu daro si looga hortago fangaska, habraacyada badankooduna waxay u arkaan wax ka mid ah xaaladda guud ee tijaabada. Taasi halkan ma aha fikradda saxda ah. Waxaa ka habboon in loo arko qodob tijaabo oo aan la diiwaangelin: walax ku jirta weelasha la daaweeyay balse ka maqan kuwa xakamaynta, firfircoon marka laga eego farmakoolojiga heerarka uruurinta la adeegsado, awoodna u leh inay beddesho isla cabbirrada natiijada ee tijaabadu cabbirayso.

Kala soociddaasi waxay saldhig u tahay wax kasta oo hoos ku qoran. Daryeelka joogtada ah ee ka hortagga fangasku waa hal arrin. In walaxda lagu daray aysan saamayn ku lahayn baaritaankaaga waa arrin kale. Qoraallada cilmiyeed ee dhowaan laga sameeyay zebrafish waxay tan koowaad uga jawaabaan si dejinaysa walaaca, tan labaadna si walaac dhalinaysa.

Waxa tilmaamuhu dhab ahaan farayaan

Ma jiro hal halbeeg oo la wada raaco, taasina waa qayb ka mid ah dhibaatada. Tilmaamaha Canadian Council on Animal Care waxay oggol yihiin 0.5 mg/L, ama 0.00005%, in lagu daro dareeraha lagu qaado ukunta iyo dirxiyada si loo yareeyo koritaanka fangaska. Tilmaamaha Yurub ee xayawaanka shaybaarku waxay sharxaan uurjiifyo lagu hayo dareere inta badan ka kooban isla 0.00005%. Qaacidada Cold Spring Harbor E3 waxay qayb ka mid ah isku-darka u qeexdaa laba jibbaar taas, 1 mg/L ama 0.0001%. Dhanka kale, waxaa jira ka-tegis muuqata: tilmaamaha OECD ee tijaabada sunta ee uurjiifka kalluunka waxay qeexaan biyo qasid oo dib loo diyaariyay iyo kiimikada la tijaabinayo, iyaga oo aan methylene blue ku talinayn noocii 2013 ama dib-u-eegistii dambe midna. Sidaas darteed, hal shaybaar ayaa uurjiifyada zebrafish ku koriya biyo buluug ah oo leh methylene blue laga bilaabo saacadaha ugu horreeya ee nolosha, mid kalena wuxuu baaritaanka uurjiifka ee sharciyeynta ku sameeyaa biyo aan midab lahayn, labaduna dareerahooda waxay ugu yeeraan mid caadi ah. Qof kasta oo isbarbardhigaya natiijooyinka shaybaarrada ama isku geeya xogta kooxaha xakamaynta ee hore wuxuu la kulmayaa iswaafaqla'aantaas.

Si loo fahmo heerarka uruurinta, 0.00005% waxay u dhigantaa qiyaastii 1.56 micromolar, 0.0001%-na qiyaastii 3.13 micromolar. Kuwani waa tirooyin hoose, waana sahlan tahay in loo fahmo inay aad u hooseeyaan oo aanay saamayn yeelan karin. Daraasadaha hoose waxay tijaabiyaan isla mala-awaalkaas, iyaga oo adeegsanaya isla heerarkaas uruurinta.

Akhristayaasha ka yimaada dhinaca daryeelka kalluunka halkii ay ka ahaan lahaayeen shaybaarka waxay isla molikuyuulkan kula kulmaan xaalad kale, oo lagu faahfaahiyay hagaha methylene blue ee quraaradda kalluunka. Kiimikadu waa isku mid; sharaxaadda sida midabeeyuhu elektaroonnada ugu kala gudbiyo unugyada waxay caddaynaysaa sababta walax firfircoon oo redox ahi ugu soo noqnoqoto qoraallada dheef-shiidka. Waxa soo socda waxay gaar u yihiin biyaha ukunta zebrafish ee leh methylene blue.

Dheef-shiidka: jihada saamayntu waxay ku beddelantaa marxaladda

Daraasadda ugu xogta badan waxay zebrafish si caadi ah u koraya u soo bandhigtay walaxda laga bilaabo maalinta koowaad ee nolosha ilaa 5 maalmood ka dib bacriminta, waxayna marxalad kasta cabbirtay dheef-shiidka oksaydhaynta, sida uu sharxayo warbixinta la daabacay ee tijaabooyinka dheef-shiidka uurjiifka. Qaabka natiijooyinka waa in si taxaddar leh loo sheegaa, sababtoo ah jihadiisu way is rogtaa.

1 maalin ka dib bacriminta, isticmaalka aasaasiga ah ee ogsijiintu wuxuu ku kordhay uurjiifyadii loo soo bandhigay walaxda labada heer uruurin ee daryeelka. 2 maalmood, farqiga danabka xuubka mitokondriyada ee lakabka dusha dirxiyada ayaa sare u kacay markii loo soo bandhigay 0.00005%, 0.0001%, iyo 0.0003%. Marka la gaaray 4 ilaa 5 maalmood, ka dib dillaacidda ukunta, jihadii isbeddelku way rogmantay: isticmaalka tamarta ee oksaydhayntu wuu yaraaday, hadday soo-gaadhistu joogto ahayd tan iyo bacriminta ama ay ahayd mid muddo gaaban ku koobnayd maalinta 3 ilaa maalinta 4 oo keliya. Isla waqtigaas, nuqullada RNA ee qaybaha isku-dhisyada neefsashada mitokondriyada ayaa yaraaday labadaba maalmaha 1 iyo 4, sidoo kalena nuqullada RNA ee la xiriira samayska steroid-ka iyo samayska gulukooska cusub.

Laba indho-indhayn oo kale ayaa sawirka sii caddaynaya. Dillaacidda ukuntu wax yar ayay soo hormartay heerka uruurinta daryeelka ee sare, iyada oo uurjiifyadii loo soo bandhigay walaxdu ka horreeyeen kuwa xakamaynta marka la gaaray 2 maalmood, kuwa xakamayntuna ay la simmeen maalinta 3. Nidaamka jawaabta walbahaarkuna wuxuu u muuqday mid aan waxba gaarin: markii dirxiyada 5-maalmood jirka ah la mariyay kicin walbahaar oo wareejin ah, cortisol-ka jirka oo dhan si caadi ah ayuu ugu kordhay labada kooxood. Sidaas darteed, midabeeyuhu ma aha sun guud oo waxyeellaysa koritaanka heerarkan la adeegsaday, mana wiiqo jawaab kasta oo jir ahaaneed. Wuxuu dheef-shiidka tamarta u beddelaa si ku xiran marxaladda, isaga oo kordhiya ka hor dillaacidda ukunta, hoosna u dhiga ka dib.

Habdhaqanka: sababta laba daraasadood u kala duwan yihiin, iyo sababta ay labaduba sax u noqon karaan

Qoraallada cilmiyeed ee habdhaqanku waxay u muuqdaan kuwo is khilaafsan ilaa naqshadaha soo-gaadhista la is barbar dhigo. Hal daraasad badbaadada koritaanka iyo habdhaqanka ah ayaa uurjiifyada, laga bilaabo qiyaastii 6 saacadood ka dib bacriminta, u soo bandhigtay heerar uruurin oo gaadhaya 10 micromolar, maalin kastana cusboonaysiisay dareerayaasha ilaa maalinta 4. Dabadeed dirxiyada ayay u wareejisay dareere aan midabeeye lahayn maalmaha 5 iyo 6, waxayna maalinta 6 dhaqdhaqaaqa ku tijaabisay baaritaan iftiin-mugdi ah. Natiijadu waxay ahayd: ma jirin saamayn muhiim ah oo ku saabsan dhimashada, dillaacidda ukunta, ama qaab-dhismeedka jirka, mana jirin saamayn daawayntu ku yeelatay dhaqdhaqaaqa. Qorayaashu si macquul ah ayay 10 micromolar ugu taliyeen xadka sare ee xaaladihii ay adeegsadeen.

Koox labaad, oo qaar ka mid ah qorayaasheedu sidoo kale qayb ka ahaayeen daraasadda dheef-shiidka, ayaa soo-gaadhista u samaysay sida daryeelku dhab ahaan u shaqeeyo: midabeeyuhu wuxuu jiray laga bilaabo 2 ilaa 3 saacadood ka dib bacriminta, iyadoo maalin kasta qayb ka mid ah dareeraha la cusboonaysiinayay, habdhaqankana la cabbiray iyadoo soo-gaadhistu socotay ama dhowaan dhacday. Isla heerarka uruurinta ee joogtada loo adeegsado, dirxiyadu waxay muujiyeen dhaqdhaqaaq yaraaday baaritaan 24-saacadood ah, taas oo dib loogu xaqiijiyay noocyo hidde-sideedyo iyo shaybaarro kala duwan. Daraasadda qalloocinta habdhaqanka waxay saamaynta ku xiriirisay heerka firfircoonida nidaamka serotonin-ka, taas oo waafaqsan xannibaadda monoamine oxidase ee midabeeyaha lagu yaqaan. Waxa ugu caddeynta badnaa waxay ahayd in dareeraha uurjiifka ee leh methylene blue uu qariyay jawaabtii dhaqdhaqaaqa ee laga filayay fluoxetine, oo ah SSRI. Sidaas darteed, baaritaan shaandhayn ah oo lagu sameeyo biyo buluug ah wuxuu seegi karaa saamayn daawo oo biyaha aan midabka lahayn ay muujin lahaayeen.

Ma jiro khilaaf dhab ah. Walax ayaa hal baaritaan ka tagi karta saamayn aan la ogaan karin laba maalmood ka dib marka laga dhaqo, iyadoo haddana firfircoon inta ay ku jirto baaritaan kale. Fasiraadda wax ku oolka ahi waa in natiijada aan saamaynta muujin ay taageerayso xad sare oo uruurin ah, balse aanay taageerayn sheegasho ah in walaxdu saamayn la'aan tahay. Natiijada saamaynta muujinaysana waxay qeexaysaa khatarta muhiimka ah: soo-gaadhis firfircoon inta cabbirku socdo, iyadoo la adeegsanayo isla habka shaybaarrada badankoodu isticmaalaan.

Midabeeye redox ah oo ku dhex jira baaritaan redox ah

Dabin kale ayaa mudan cutub u gaar ah, sababtoo ah wuxuu khaldaa aaladda cabbirka halkii uu ka saamayn lahaa xayawaanka. Baaritaanka isticmaalka tamarta ee Alamar Blue laftiisu waa kiimiko redox ah: resazurin ayaa la yareeyaa oo isu beddela resorufin iftiin-bixiye ah. Methylene blue-na sidoo kale waa kiimiko redox ah. Kooxaha xakamaynta ee aan unugyada lahayn, labada heer uruurin ee daryeelku waxay wax yar, balse si tirakoob ahaan muhiim ah, u dhimeen iftiin-bixinta Alamar Blue ka dib 24 saacadood. Tijaabooyinka xayawaanka, uurjiifyadii loo soo bandhigay walaxda waxaa ugu yaraan saddex jeer lagu dhaqay dareere aan midabeeye lahayn ka hor baaritaanka, saamaynta bayoolojiyeed ee dirxiyada dillaacayna way ka weynayd faragelinta lagu arkay tijaabada aan unugyada lahayn. Sidaas darteed, labaduba waa run: xayawaanka la dhaqay waxay wataan saamayn dheef-shiid oo dhab ah, midabeeyaha aan laga dhaqinna wuxuu dusha kaga daraa khalad cabbir oo kiimiko ah oo toos ah. Kooxaha xakamayntu waa inay labadan kala saaraan, haddii kale labada tiro midna macne ma leh. Tilmaamaha guud ee ku saabsan akhrinta natiijooyinka baaritaannada ku salaysan midabeeyaha waxay halkan si gaar ah muhiim ugu yihiin.

Jadwalka marxaladaha koritaanka

Qaybta xogeed ee asalka ah ee maqaalkan. Heerarka uruurintu waa labada qiime ee caadiga ah ee daryeelka, 0.00005% iyo 0.0001%, haddii aan si kale loo sheegin.

Qaabka ay tahay in la xasuusto waa koror hore iyo hoos-u-dhac dambe oo ku yimaadda cabbirrada dheef-shiidka, iyadoo saamaynta habdhaqanku jirto inta soo-gaadhistu socoto, balse aan la ogaan karin ka dib marka walaxda laga saaro jirka, hal baaritaan oo arrintaas tijaabiyay.

Liiska hubinta naqshadaynta kooxaha xakamaynta

Qaybta labaad ee asalka ah. Adeegso marka habraacyada zebrafish ee methylene blue ay ku lug yeeshaan tijaabo.

1. Midabeeyaha u diiwaangeli walax tijaabo, ee ha u diiwaangelin biyo. Sheeg heerka uruurinta labadaba boqolkiiba iyo micromolar, bilowga iyo dhammaadka saacado ama maalmo ka dib bacriminta, jadwalka cusboonaysiinta, iyo muddada walaxda laga saaro ka hor cabbir kasta.
2. Kooxaha xakamaynta ku waafaji su'aasha. Daraasad kiimikada la tijaabinayo ku saabsan waxay u baahan tahay kooxo xakamayn oo aan midabeeye lahayn; daraasad daryeelka ku saabsanna waxay u baahan tahay kooxo aan midabeeye lahayn iyo kuwo leh, iyadoo la diiwaangelinayo natiijada ka hortagga fangaska, maadaama labada daraasadood ee la soo xigtay midna aanu cabbirin waxtarka ka hortagga fangaska.
3. Dhaq ka hor baaritaannada redox, dabadeedna xaqiiji. Ugu yaraan saddex jeer ku raaci dareere aan midabeeye lahayn, isla markaana ku dar tijaabo xakamayn oo aan unugyo lahayn oo ka kooban midabeeyaha iyo walaxda baaritaanka, sababtoo ah midabeeyuhu si toos ah ayuu u dhimaa calaamadda Alamar Blue.
4. Cabbirrada habdhaqanka iyo monoamine-ka u arag kuwo khatar sare leh. Daraasadaha dhaqdhaqaaqa, falcelinta naxdinta kediska ah, habdhaqanka u eg walaaca, dawooyinka lidka niyad-jabka, iyo xannibayaasha MAO waa inay ka fogaadaan midabeeyaha inta cabbirku socdo ama muujiyaan inuusan saamayn ku lahayn cabbirka gaarka ah; muddada hal ilaa laba maalmood ah ee walaxda laga saaray waxay baabi'isay hal saamayn dhaqdhaqaaq, balse taas looma xaqiijin hababka tijaabo ee kale.
5. Cabbirrada dheef-shiidka iyo mitokondriyada u arag kuwo khatar sare leh marxalad kasta. Isticmaalka ogsijiinta, isticmaalka tamarta, farqiga danabka xuubka, iyo nuqullada RNA ee silsiladda neefsashadu way is beddelaan marka la adeegsado heerarka uruurinta ee daryeelka, iyaga oo jihooyin iska soo horjeeda u socda ka hor iyo ka dib dillaacidda ukunta.
6. Ha u gudbin saamayn-la'aanta naqshad tijaabo mid kale. Natiijo aan saamayn muujin ka dib marka walaxda laga saaro ma khusayso soo-gaadhis weli socota; natiijo aan isbeddel qaab-dhismeed muujin ma khusayso dheef-shiidka ama isdhexgalka daawooyinka; natiijo laga helay hal nooc hidde-sideed, heerkul, ama muddo baaritaan ma khusayso kuwa kale.
7. Sheeg tilmaamaha aad raacday iyo kuwa beddelka u ah. Si cad u sheeg heerarka uruurinta CCAC, Yurub, ama Cold Spring Harbor, oo xus in tijaabada uurjiifka ee OECD aysan ku darin midabeeyaha, si akhristuhu u fahmo xaaladaha xayawaankaaga lagu hayay.

Waxyaalahan midkoodna ma diidayo in midabeeyaha loo adeegsado ilaalinta nolosha ukunta. Waxay ka digayaan in doorashada daryeelku, iyada oo aan la baarin, saamayn ku yeelato xogta. Buluugga weelka ku jira waa molikuyuul leh sifooyin farmakoolojiyeed, tijaabooyinka ay u badan tahay inuu qalloociyana waa isla baaritaannada shaandhaynta dheef-shiidka iyo habdhaqanka neerfaha ee tiro badan hal mar lagu sameeyo, kuwaas oo zebrafish da' yar hadda loo doorbido. Diiwaangeli, xakamee, ka dhaq ka hor intaadan cabbirin, oo hubi baaritaanka uu si aan muuqan uga qayb qaadan karo.