Kuverenga chitarisiko chemakoloni eE. coli nemamwe paEMB agar

Mudzidzi anoparadzira sampuli yeutachiona husingazivikanwi pamitsetse paeosin methylene blue agar, oiisa kuti ikure usiku hwose, ozodzoka onowana ndiro ine makoloni akasviba anopenya negirini. Zvaanonyora mubhuku zvinoti "E. coli, yasimbiswa." Mashoko iwayo anotaura zvinopfuura zvinogona kutsigirwa nendiro yacho. Ndiro inoratidza hunhu hwekukura nekuvirisa pasi pemamiriro akati. Kuzivikanwa kwemhando yeutachiona inyaya yakasiyana inoda humbowo hwayo.

Gwaro iri rinobata zvinobuda paEMB agar sebasa rekududzira. Rinotsanangura pfungwa iri shure kwayo, rinofamba nemuatlasi yemifananidzo yendiro ine makontrol, uye rinoratidza mamiriro ayo chitarisiko chinodzidziswa mumabhuku chinogona kutsausa.

Pfungwa iri shure kwendiro

EMB agar inosarudza utachiona hunokura uye inosiyanisa hunhu hwahwo. Madhayi eosin Y nemethylene blue anodzvinyirira kukura kweutachiona hwakawanda hweGram positive, saka svikiro iri rinofarira kukura kweGram negative. Madhayi mamwe chete aya anoshanda sezviratidzi: kana utachiona hukavirisa shuga iripo uye hukabudisa asidhi yakakwana panzvimbo yahwo, koloni rinotora dhayi yakawanda rova nepepuru yakasviba kusvika pabhuruu-nhema. Kana kugadzirwa kweasidhi kwakanyanya, pamusoro pekoloni panogona kuratidza kupenya kwegirini kwakaita sesimbi kunochinja zvichienderana nekwauri kutarisa. Maitiro eASM ekushandisa ndiro dzeeosin methylene blue agar anotsanangura kusanganiswa uku kwekusarudza nekusiyanisa uye anopa mifananidzo yekuenzanisa pakudzidzisa.

Pane chinhu chimwe chinokosha usati waverenga chero chinobuda: tarisa musanganiswa uri kushandiswa. Musanganiswa wekare weHolt Harris Teague une lactose pamwe nesucrose, asi Levine EMB ine lactose chete. Utachiona hunovirisa sucrose asi kwete lactose, hwakadai semhando zhinji dzeSerratia marcescens dzakapatsanurwa, hunogona kutaridzika zvakasiyana pamisanganiswa iyi miviri. Magwaro emugadziri emasvikiro eEMB anotaura musiyano uyu zvakajeka. Nyora mugadziri nemusanganiswa mubhuku pamwe nezvakabuda.

EMB agar yakagadzirwa isati yaiswa utachiona inowanzova netsvuku-shava kusvika kupepuru ine kutsvuka, dzimwe nguva iine kagirini kana tunhu tutete twakagadzika. Ruvara urwu rwesvikiro harurevi kukura kweutachiona. Enzanisa zvose zvaunoverenga nendiro isina kuiswa utachiona kana nechitarisiko chekutanga chakanyorwa, uye verenga ndiro yekutanga mushure memaawa angangoita 18 kusvika 24 ekukurisa utachiona paine okisijeni pa35 kusvika 37 C, kunze kwekunge maitiro ekudzidzisa ataura zvimwe. Kurebesa nguva yekukurisa kunogona kuchinja chitarisiko chekuvirisa.

Matarisiro endiro

Shandisa mhando mbiri dzechiedza. Tanga nekuongorora ndiro nechiedza chinoratidzwa kana chinouya nedivi, woirereka: kupenya kwakaita sesimbi kunochinja nekwauri kutarisa uye kunogona kuoneka kana kunyangarika paunochinja kona yekutarisa. Wobva waiongorora nechiedza chinopfuura nemairi kuti uone ruvara rwemakoloni nenzvimbo dzawo dzepakati dzakasviba. Shanda nemakoloni akanyatsopatsanuka, nokuti kuwanda kwakawandisa uye makoloni ari pedyo zvinoshandura kuungana kweasidhi panzvimbo uye zvinogona kuderedza kana kuwedzeredza ruvara. Mifananidzo yeASM inoratidza izvi zvakananga: E. coli yakakuriswa pamwe nehumwe utachiona inogona kusaratidza kupenya kunotarisirwa nokuti utachiona hwakaipoteredza hunochinja mamiriro easidhi.

Sanganisira makontrol pose panobvumirwa nebasa racho. Boka rinowanzoshandiswa pakudzidzisa rinosanganisira E. coli ATCC 25922 kuratidza hunhu hwebhuruu-nhema nekupenya kwakaita sesimbi, utachiona husingavirisi shuga hwakadai seSalmonella Typhimurium ATCC 14028 kana Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 kuratidza hunhu hwekusava neruvara, uye utachiona hweGram positive hwakadai seEnterococcus faecalis kana Staphylococcus aureus sekontrol yekutadziswa kwekukura, sezvakanyorwa mumatafura akajairwa ekuongorora kunaka kwemasvikiro eEMB. Kana kontrol inofanira kuratidza kupenya isingapenyi, tanga wafungira mamiriro ekukurisa, kuwandisa kwemakoloni, kana musanganiswa usati wafungira sampuli isingazivikanwi.

Atlasi yemifananidzo yendiro

Ndiro dziri pasi apa mifananidzo yakagadzirwa, kwete mapikicha etsika dzeutachiona chaidzo. Dzinoratidza patani yekutsvaga, kwete ruvara chairwo rwemhando imwe neimwe. Dzienzanise nemapikicha eASM ekuenzanisa uye nendiro chaidzo dzemurabhoritari yekudzidzisa.

Ndiro 1: Escherichia coli paEMB agar, utachiona hunovirisa lactose zvakanyanya

E. coli paEMB agar inowanzova nepepuru yakasviba kusvika pabhuruu-nhema, kazhinji iine pakati pakasviba nekupenya kwegirini kwakaita sesimbi kunobva pakugadzirwa kwakanyanya kweasidhi. Kupenya uku ndicho chiratidzo chakakurumbira chinotsvakwa nevadzidzi, asi kuchione seumbowo hunotsigira pane kuchiona sechinotsanangura E. coli. Kuwanda kwekupenya kunosiyana nemhando yeutachiona, nguva yekukurisa, kuwanda kwemakoloni, uye kona yekutarisa. Kusavapo kwekupenya hakubvisi mukana weE. coli, uye koloni rakasviba risingapenyi rinogona kuratidza humwe utachiona hwakati wandei hunovirisa. Sarudza koloni rakanyatsopatsanuka pabasa ripi neripi rinotevera pane kuverenga kubva pachikamu chine makoloni akawandisa.

Ndiro 2: Klebsiella pneumoniae paEMB agar, utachiona hunovirisa hune madzihwa

Klebsiella pneumoniae paEMB agar inowanzogadzira makoloni makuru, anopenya nokunyorova, ane madzihwa, ane ruvara rwepingi-pepuru kusvika kushava-pepuru. Anowanzova nepakati pakasviba asi kazhinji haana kupenya kwakasimba kwakaita sesimbi. Chitarisiko chakafanana chinoonekwa kune humwe utachiona hunovirisa hwakabatana nayo, hwakadai seEnterobacter. Hunhu hwemadzihwa nekukura kwekoloni chikamu chekuverenga: koloni repingi diki uye rakati sandara rinopa humbowo hwakasiyana nerakakura, rakakwira sedome uye rine madzihwa. Sezvinoita E. coli, ndiro inongoratidza hunhu hwekuvirisa hunofungidzirwa, uye kudoma rudzi chairwo kunoda kusimbiswa nekuongorora kwemakemikari eutachiona kunotsanangurwa pasi apa.

Ndiro 3: Salmonella paEMB agar nehumwe utachiona husingavirisi shuga, makoloni asina ruvara

Salmonella paEMB agar nehumwe utachiona husingavirisi lactose hwakabatana nayo, kusanganisira Shigella nemhando zhinji dzePseudomonas dzakapatsanurwa, zvinowanzokura semakoloni asina ruvara kusvika kune anopinza chiedza zvishoma kana ane ruvara rweamber rwakachenuruka. Mimwe misanganiswa nemamwe mamiriro zvinopa kapingi, saka koloni repingi yakachenuruka haringonzi rinovirisa pasina humwe humbowo. EMB haisiyanisi Salmonella neShigella kana nehumwe utachiona husingavirisi; kusiyanisa ikoko kunoitwa nekuongorora kunotevera. Zivawo kuti mhando dzeSalmonella dzinovirisa lactose dzine makoloni anopenya sesimbi akafanana neeE. coli dzakambonyorwa, chiri chimwe chikonzero nei ndiro imwe chete isingapedzi nyaya.

Ndiro 4: Serratia marcescens nemuteyo wemusanganiswa

Serratia marcescens inopiwa chikamu chayo nokuti vadzidzi vanowanzotarisira makoloni matsvuku vozotadza kuverenga ndiro. Mhando zhinji dzakapatsanurwa kubva kumasampuli ekiriniki hadzivirisi lactose, saka paLevine EMB dzinowanzova dzakachenuruka kana dzine ruvara rushoma. Nokuti mhando zhinji dzinovirisa sucrose, musanganiswa une sucrose unogona kupa chitarisiko chakasviba kana chiratidzo chakanyanya kubatana neasidhi. Usatarisirawo ruvara rutsvuku rwakakurumbira rweprodigiosin pa35 kusvika 37 C; kugadzirwa kweruvara uku hakuvimbiki patembiricha yemudziyo wekukurisa. Kana maitiro achitaura Serratia marcescens paEMB agar, tarisa kuti mashoko acho ari kureva musanganiswa upi. Ongororo yemaitiro eSerratia ekushandura zvinovaka muviri inopfupisa patani yekusavirisa lactose uye kusiyana pakuvirisa sucrose iri shure kwemuteyo uyu.

Ndiro 5: makontrol neutachiona hunotadziswa kukura

Utachiona hweGram positive hwakadai seStaphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, neBacillus hunowanzotadziswa kana kudzvinyirirwa zvakanyanya pakukura paEMB agar, kunyange zvazvo kutadziswa uku kusiri kwakakwana pamhando dzose. Boka remakontrol rinoita kuti kuverenga kuve kwechokwadi: kontrol yeE. coli inofanira kuratidza kukura kwakanaka ine ruvara rwebhuruu-nhema nekupenya, kontrol yeutachiona husingavirisi inofanira kuratidza kukura kusina ruvara, uye kontrol yekutadziswa kwekukura inofanira kuratidza kukura kushoma kana kusavapo kwekukura. Kana kontrol yekutadziswa kwekukura ikakura zvakanaka, basa rekusarudza utachiona rakundikana uye zvimwe zvose zvinobatwa pandiro dzeboka iroro zvinofanira kubvunzwa. Nzira dzekudhaya dzinopindura mubvunzo wakasiyana newemasvikiro ekukurisa utachiona; panyaya yekudhaya masiraidhi murabhoritari, ona atlasi yekudhaya nemethylene blue.

Kuenzanisa kune miganhu

Mitsara mitatu inopfupisa zvitarisiko zvinotsaudzira. Kusviba hakurevi E. coli, nokuti Klebsiella, Enterobacter, nehumwe utachiona hunovirisa zvinogadzira nzvimbo dzepakati dzakasviba dzisingapenyi. Pingi hairevi Klebsiella, nokuti utachiona hunovirisa zviri pakati kana zvishoma nezvishoma pamwe nehumwe hunowanzonzi hahuv irisi zvinogona kuva nepingi kana pepuru yakachenuruka. Kupenya hakusimbisi E. coli zvachose, nokuti humwe utachiona hunovirisa zvakanyanya hunogona kukugadzira. Maitiro ekudzidzisa nemifananidzo yawo yeutachiona hwakakuriswa pamwe chete zvinoratidza kumwe nokumwe kwekutadza uku.

Miganhu yekusimbisa

EMB agar inoratidza hunhu hunoonekwa, kwete rudzi rweutachiona. Utachiona hwakasiyana hunogona kuva nechitarisiko chimwe chemakoloni, uye utachiona humwe chete hunogona kusiyana nechitarisiko chahwo chemumabhuku zvichienderana nemhando, zera, kuwandisa, musanganiswa, uye mamiriro ekukurisa. Ndokusaka nzira dzebasa dzekudzidzisa nedzekiriniki dzichibata chitarisiko cheEMB sechiratidzo chinofungidzirwa.

Nzira yebasa yemudzidzi inogona kutsigirwa neumbowo ndeiyi: tsanangura koloni rakapatsanuka (kukura, ruvara, pakati paro, kupenya muchiedza chinouya nedivi, hunhu hwemadzihwa), nyora musanganiswa, nguva netembiricha yekukurisa, pamwe nemakontrol; wozokurisa zvakare koloni rakanyatsopatsanuka kuti uwane utachiona hwemhando imwe chete usati waita chero bvunzo yekusimbisa. Zvinowanzoitwa pakutevera zvinosanganisira kudhaya kweGram pamwe nemaitikiro eIMViC pakufungidzira kuzivikanwa kweE. coli nemacoliform, TSI kana KIA nemapoka ebvunzo dzemakemikari eutachiona dzakanangana neutachiona hwemudumbu, pamwe nekuongorora kunoshandisa maantibodies, MALDI TOF, kana dzimwe nzira dzakasimbiswa dzekuziva utachiona kana basa richida kudaro. Kuti unzwisise nzvimbo yeEMB pakati pemasvikiro anosarudza nekusiyanisa utachiona hwemudumbu, ona sumo dzemasvikiro ekukurisa utachiona hwemudumbu nekuongorora kunotevera kudhaya kweGram. Pamubvunzo wakabatana wekuti dhayi yebhuruu pasiraidhi inogona uye isingagoni kusimbisa chii, atlasi yekudhaya nemethylene blue inochengeta zvakaonekwa nemhedziso zvakaparadzana nenzira imwe cheteyo.

Nyora zvaunoona usati wanyora mhedziso. "Makoloni ebhuruu-nhema yakasviba ane kupenya kwegirini kunoenderana nekona yekutarisa paLevine EMB pamaawa 24, zvinoenderana nekuviriswa kwakanyanya kwelactose" mashoko anogona kutsigirwa neumbowo. "E. coli, yasimbiswa" zvinoda danho rekusimbisa risingagoni kupiwa nendiro yoga.