මෙතිලීන් නිල් මඟින් කම්මුලේ සෛල වර්ණ ගැන්වීම: නිරීක්ෂණය කළ යුතු දේ

ශිෂ්‍යාවක් කම්මුලේ සෛල අඩංගු අවලම්බනයකින් බිංදුවක් වීදුරු කදාවක් මත තබා අන්වීක්ෂයෙන් බලයි. ඇයට කිසිවක් පාහේ නොපෙනේ. දීප්තිමත් දෘශ්‍ය ක්ෂේත්‍රය හරහා අවතාර වැනි සුදුමැලි හැඩ කිහිපයක් පාවී යයි. ඇය නාභිගත කිරීම සකස් කරයි, ඉන්පසු ආලෝකය වැඩි කරයි, අවසානයේ කදාව හිස් බව නිගමනය කරයි. කදාව හිස් නැත. සෛල එහි තිබේ. ඒවා බොහෝ දුරට විනිවිද පෙනෙන අතර, මෙම වර්ණකය භාවිත කරන්නේ විසඳීමට ඇති එම ගැටලුව නිසාමය.

ක්‍රියාපටිපාටිය ආරම්භ කිරීමට පෙර, අපේක්ෂාව සහ රූපය අතර ඇති එම නොගැළපීම පැහැදිලි කිරීම වටී. කැමරාවක විශාලනය මඟින් දුරින් ඇති පුවරුවක විස්තර පෙන්වන ආකාරයට අන්වීක්ෂයක් ද විස්තර හෙළි කරනු ඇතැයි ආධුනිකයෝ අපේක්ෂා කරති. දීප්ත ක්ෂේත්‍ර අන්වීක්ෂයක කාර්යය ඊට වඩා සීමිතය: එය ආලෝක අවශෝෂණයේ වෙනස්කම් පෙන්වයි. වර්ණ නොගැන්වූ කම්මුල් සෛලයක් ආලෝකය අවශෝෂණය කරන්නේ ඉතා සුළු වශයෙන් බැවින්, එය දෘශ්‍ය වෙනසක් ඇති කරන්නේ ද ඉතා සුළු වශයෙනි. මෙතිලීන් නිල් එම වෙනස එක් කරයි. එය සෛලය තුළ අසමාන ලෙස බැඳී, ව්‍යුහය දෘශ්‍ය ප්‍රතිවිරුද්ධතාවක් බවට පත් කරයි. සිසුන් එම සංකල්පය තේරුම් ගත් පසු, ඉන්පසු එන සෑම පියවරක්ම හුදෙක් අනුගමනය කළ යුතු උපදෙසක් නොව එම සංකල්පයෙන් පැන නඟින දෙයක් ලෙස පෙනේ.

පාසල් විද්‍යාගාරයේ සරල වර්ණක මඟින් දෘශ්‍ය ප්‍රතිවිරුද්ධතාව එක් කරන ආකාරය පිළිබඳ පසුබිම් දැනුම මෙහිදී උපකාරී වන අතර, වර්ණ ගැන්වීමට පෙර දීප්ත ක්ෂේත්‍ර අන්වීක්ෂයක් සකස් කිරීම පිළිබඳ දැනුම නැවත මතක් කර ගැනීමෙන් අසාර්ථක කදා අඩක් පමණ වළක්වා ගත හැකිය. වර්ණය පිටුපස ඇති රසායන විද්‍යාව අන්වීක්ෂ භාවිතයේදී මෙතිලීන් නිල් පිළිබඳ හැඳින්වීමක විස්තර කෙරේ. මෙම විශේෂිත වර්ණකය විද්‍යාගාර මේසය මත නිතර දක්නට ලැබෙන්නේ ඇයි යන්න එහි පැහැදිලි කරයි.

පන්තිකාමර ක්‍රියාපටිපාටිය

පහත දැක්වෙන තෙත් සැකසුම් ක්‍රමය සාමාන්‍ය පන්ති සඳහා වඩා සරල මූලික තේරීමයි. එයට දැල්ලක් හෝ ස්ථායීකරණ පියවරක් අවශ්‍ය නොවේ. සමහර උසස් අධ්‍යාපන අත්පොත්වල භාවිත වන ස්ථායීකරණය කළ ආලේප ක්‍රමයට වාතයේ වියළීම සහ කෙටි තාප ස්ථායීකරණයක් එක් කෙරේ. Biology LibreTexts හරහා ප්‍රකාශිත North Central Texas College හි කම්මුල් ආලේප ක්‍රියාකාරකම එයට උදාහරණයකි. එහෙත් තාප ස්ථායීකරණය යනු ක්ෂුද්‍රජීව විද්‍යාවේ භාවිතයක් මිස අපිච්ඡද සෛල දැකීමට අවශ්‍ය කොන්දේසියක් නොවේ.

අවශ්‍ය දේ: පිරිසිදු වීදුරු කදා සහ ආවරණ වීදුරු, එක් වරක් පමණක් භාවිත කරන වඳ කපු කූරු (වඩාත් සුදුසුය) හෝ අලුත් පැතලි දත් කූරු, සියයට 0.5 සිට 1 දක්වා මෙතිලීන් නිල් ජලීය ද්‍රාවණයක් අඩංගු බිංදු බෝතලයක්, ආසවනය කළ හෝ අයන ඉවත් කළ ජලය, අවශෝෂක කඩදාසි, අත්වැසුම් සහ 100x හා 400x සමස්ත විශාලනය සහිත සංයුක්ත අන්වීක්ෂයක්.

1. සාමාන්‍ය ජලයෙන් මුඛය සෝදන්න. පසුව තදින් වර්ණ ගැන්වී සෛලවලින් අවධානය වෙනතකට යොමු කරන ආහාර අංශු මෙයින් ඉවත් වේ.
2. සෑම සිසුවකුම තමන්ගේම කම්මුලෙන් පමණක් නියැදිය ලබා ගත යුතුය. අලුත් වඳ කපු කූරකින් කම්මුලේ ඇතුළත මෘදු ලෙස අතුල්ලන්න. තද කරන්න, සූරන්න එපා. කිසිදු අපහසුතාවක් හෝ ලේ ගැලීමක් ඇති වීමට බොහෝ කලින් නවත්වන්න.
3. පිරිසිදු කදාවක මැද හරහා කපු කූර පෙරළමින් තුනී ආලේපයක් යොදන්න. හොඳින් නිරීක්ෂණය කළ හැකි කදාවක් ලැබීමට වඩාත්ම බලපාන්නේ තුනී පටලයකි. ඝන සුදු තැන්පතුවක් වර්ණ ගැන්වූ විට, පැහැදිලිව නිරීක්ෂණය කළ නොහැකි නිල් ස්කන්ධයක් බවට පත්වේ.
4. ආලේපය මත මෙතිලීන් නිල් බිංදුවක් එක් කරන්න. එය මිනිත්තු 1 සිට 3 දක්වා තබන්න. බොහෝ උසස් අධ්‍යාපන ක්‍රියාපටිපාටිවල මිනිත්තුවක් ප්‍රමාණවත්ය; NCERT IX ශ්‍රේණියේ විද්‍යාගාර අත්පොත තාවකාලික සැකසුමක් සඳහා මිනිත්තු 3 පමණ භාවිත කරයි. වැඩි වේලාවක් තැබීමෙන් වඩා හොඳ ප්‍රතිඵලයක් ලැබෙන්නේ නැති අතර, අධික ලෙස වර්ණ ගැන්වීම කාලය සම්බන්ධයෙන් සිදු වන වඩාත් සුලභ දෝෂයයි.
5. දේශීය ක්‍රියාපටිපාටිය අනුව, ආසවනය කළ ජලයෙන් මෘදු ලෙස සෝදන්න හෝ අවශෝෂක කඩදාසියකින් අතිරික්ත වර්ණකය උරා ගන්න. පසුබිම ළා නිල් විය යුතුය; තද නාවික නිල් නොවිය යුතුය.
6. ආවරණ වීදුරුවේ එක් දාරයක් මුලින් ස්පර්ශ වන පරිදි එය ඇල කර පහත් කරන්න, ඉන්පසු සෙමින් පහළට වැටෙන්නට ඉඩ දෙන්න. මෙයින් වායු බුබුළු ඇතුළත් වීම වළක්වයි.
7. සෛල සොයා ගැනීමට අඩු විශාලනයෙන් ආරම්භ කරන්න. නාභිගත වීම සහ මධ්‍යගත වීම තහවුරු කර, ඉන්පසු 100x වෙතත් අවසානයේ 400x වෙතත් යන්න. 400x දී සියුම් නාභිගත කිරීම පමණක් භාවිත කරන්න.

වර්ණක සාන්ද්‍රණය ගැන නිශ්චිතව සඳහන් කිරීම වටී. පාසල් ක්‍රියාපටිපාටි බොහොමයක් භාවිත කරන්නේ සියයට 1 පමණ මෙතිලීන් නිල් ජලීය ද්‍රාවණයකි. වඩා සාන්ද්‍ර මූලික ද්‍රාවණයක් හෝ දිගු නිරාවරණයක් න්‍යෂ්ටියේ වර්ණය තද කරනවාට වඩා ඉක්මනින් පසුබිම තද කරයි. එවිට මෙම ක්‍රියාකාරකම රඳා පවතින දෘශ්‍ය ප්‍රතිවිරුද්ධතාව පෙරළෙයි.

කම්මුල් නියැදි ආරක්ෂිතව හැසිරවීම

කම්මුල් නියැදි සමඟ කෙළ සහ මුඛයේ සාමාන්‍යයෙන් සිටින ක්ෂුද්‍රජීවීන් ද පැමිණේ. එබැවින් නියැදි දෙන අය නිරෝගී පන්තියේ මිතුරන් වුවත්, සෑම නැවුම් ආලේපයක්ම ආසාදන ඇති කළ හැකි ද්‍රව්‍යයක් ලෙස සලකන්න. ඉගැන්වීම් විද්‍යාගාර සඳහා American Society for Microbiology ජෛව ආරක්ෂක මාර්ගෝපදේශ පොදු මූලධර්ම දක්වයි: සැසියට පෙර අවදානම තක්සේරු කරන්න, අත්වැසුම් පළඳින්න, දියර ඉසීමේ හැකියාව ඇති විට ඇස් ආරක්ෂා කරන්න, පසුව අත් සෝදන්න, විද්‍යාගාර මේස විෂබීජහරණය කරන්න, දූෂිත එක් වරක් භාවිත කරන ද්‍රව්‍ය අනුමත ජෛව අපද්‍රව්‍ය බැහැර කිරීමේ ක්‍රමය හරහා ඉවත් කරන්න.

පන්තිකාමර නීති හතරකින් අවදානමෙන් වැඩි කොටසක් පාලනය කළ හැකිය. එක් කපු කූරකටත් එක් කදාවකටත් එක් නියැදි දායකයකු පමණි; කිසිවිටෙක බෙදා නොගන්න. තමන්ගෙන් පමණක් නියැදි ගන්න; අසල සිටින අයකුගෙන් කිසිවිටෙක නියැදි නොගන්න. එක් වරක් භාවිත කරන කපු කූරු සහ දත් කූරු නියමිත අපද්‍රව්‍ය බඳුනට සෘජුවම දමන්න; නැවත මේසය මත නොතබන්න. මෙතිලීන් නිල් සම සහ ඇඳුම්වල පැල්ලම් ඇති කරන අතර ඇස්වලට කෝපයක් ඇති කරයි. එබැවින් අත්වැසුම් සහ වර්ණක හැසිරවීමේ සාමාන්‍ය සනීපාරක්ෂක ක්‍රම අදාළ වේ. ආලේපයේ ඇති කිසිවක් වගා කිරීම දක්වා මෙම ක්‍රියාකාරකම ව්‍යාප්ත නොකරන්න. පාසලේ ආරක්ෂක ක්‍රියාපටිපාටියෙන් බැහැරව නැවුම් මානව නියැදි සඳහා තාප ස්ථායීකරණය ඔබම අත්හදා නොබලන්න.

නිරීක්ෂණය කළ යුතු දේ සහ එසේ පෙනීමට හේතුව

100x දී, අක්‍රමවත් ඕවලාකාර හෝ බහුඅස්‍රාකාර සීමා සහිත ළා නිල් පැහැති පුළුල්, පැතලි සෛල සොයන්න. ඒවා තනි තනිව හෝ ලිහිල්ව එකිනෙක මත පිහිටි පටල ලෙස තිබේ. සෑම සෛලයකම සාමාන්‍යයෙන් එක් තද නිල් ලපයක් ඇත. එම ලපය න්‍යෂ්ටියයි. ඒවා පිහිටා ඇති ආකාරයත් සටහන් කරන්න: ශල්කමය අපිච්ඡද සෛල යනු තුනී උළු කැට වැනි දේ මිස ගෝල නොවේ. ඒවායේ දාර වටකුරු බැලුන්වලට වඩා ඉරිතැළුණු ඔප දැමූ මතුපිටක් මෙන් පෙනෙන්නේ ඒ නිසාය.

400x දී ලක්ෂණ තුනක් පැහැදිලිව වෙන් කර දැකිය හැකිය. සෛල සීමාව සෛලය වට කර ඇති තුනී, වඩා තද රේඛාවක් ලෙස පෙනේ. සෛල ප්ලාස්මය ඇතුළත ළා, ඒකාකාර නිල් පැහැයකින් පුරවයි. න්‍යෂ්ටිය වඩා තද පැහැයෙන් සහ වඩා සංයුක්තව පෙනෙන අතර, බොහෝ විට ඕවලාකාරය. සාමාන්‍යයෙන් එය මධ්‍යයට ආසන්නව තිබුණත් සැමවිටම එසේ නොවේ. වැඩපත්‍රිකාවෙන් ඉල්ලන්නේ මේ දේවල්ම බැවින්, එම ලක්ෂණ තුන සමඟ හැඩය සහ විශාලනය ද සටහන් කරන ලෙස සිසුන්ට කියන්න.

මෙහිදී නිවැරදිභාවය පිළිබඳ එක් කරුණක් වැදගත් වන අතර බොහෝ වැඩපත්‍රිකාවල එය වැරදි ලෙස දක්වා ඇත. පෙනෙන සීමාව ප්ලාස්ම පටලය ඇති ප්‍රදේශයට අනුරූප වේ. එහෙත් නැනෝමීටර 7 සිට 10 පමණ ඝනකමක් ඇති ලිපිඩ ද්විස්තරයක් වන පටලයම පාසල් අන්වීක්ෂයකින් වෙන් කර දැකිය හැකි සීමාවට බොහෝ පහළින් පවතී. සිසුන් දකින්නේ සෛලයේ ප්‍රකාශීය දාරය සහ එහි රැස් වූ වර්ණකයයි. ඉන්ද්‍රයිකා සම්බන්ධයෙන් ද එම සැලකිල්ලම අදාළ වේ. මයිටොකොන්ඩ්‍රියා, අන්තඃප්ලාස්මීය ජාලිකාව, ගොල්ගි දේහ සහ රයිබොසෝම මෙම සැකසුමේ නොපෙනේ. අන්වීක්ෂ මෙවලම් පිළිබඳ NCBI සෛල ජීව විද්‍යා පසුබිම් විස්තරය පැහැදිලි කරන පරිදි, හොඳ තත්ත්ව යටතේ සාම්ප්‍රදායික ආලෝක අන්වීක්ෂයකින් මයික්‍රෝමීටර 0.2 පමණ දක්වා වූ විස්තර වෙන් කර දැකිය හැකිය. බොහෝ අතිසූක්ෂ්ම ව්‍යුහ එම සීමාවට පහළින් හෝ ඒ ආසන්නයේ පවතී. තවත් විස්තර නොලැබෙන ඉහළ විශාලනයකින් රූපය විශාල වනවා පමණි.

න්‍යෂ්ටිය වඩාත් තදින් වර්ණ ගැන්වෙන්නේ ඇයි? මෙතිලීන් නිල් යනු ද්‍රාවණයේදී ධන ආරෝපිත වන කැටායනික වර්ණකයකි. එය සෛලයේ ඍණ ආරෝපිත ද්‍රව්‍ය සමඟ, විශේෂයෙන්ම න්‍යෂ්ටික අම්ල සමඟ, සම්බන්ධ වේ. ක්‍රොමැටින් න්‍යෂ්ටිය තුළ DNA සංකේන්ද්‍රණය කරන නිසා න්‍යෂ්ටිය වැඩිම වර්ණක ප්‍රමාණයක් රැස් කර ගනී. සෛල ප්ලාස්මයේ RNA සහ වෙනත් ආරෝපිත අණු අඩංගු බැවින් එය ද වර්ණ ගැන්වේ, නමුත් වඩා විසිරුණු සහ ළා ආකාරයකිනි. මෙහි වැදගත් සීමාව වන්නේ මෙතිලීන් නිල් DNA සඳහා විශේෂිත වර්ණකයක් නොවන බවයි. න්‍යෂ්ටි රූපගත කිරීමේදී මෙතිලීන් නිල් ව්‍යාප්තිය පිළිබඳ අධ්‍යයනය කැටායනය න්‍යෂ්ටික අම්ල බහුල ප්‍රදේශ සමඟ සම්බන්ධ වන ආකාරය විස්තර කරයි. සෛල සැකසුම්වල මෙතිලීන් නිල් බැඳීම පිළිබඳ පැරණි ප්‍රමාණාත්මක අධ්‍යයනයකින් බැඳී ඇති වර්ණකයෙන් වැඩි කොටසක් න්‍යෂ්ටික අම්ල සමඟ සම්බන්ධ බව සොයාගෙන ඇත. එබැවින් තද න්‍යෂ්ටියක් සහ ළා සෛල ප්ලාස්මයක් යනු දෘශ්‍ය ප්‍රතිවිරුද්ධතා රටාවක් මිස අණුක පරීක්ෂණයක් නොවේ.

සිසුන් අතින් සිදු වන වැරදි සහ ඒවා හඳුනාගන්නා ආකාරය

අසාර්ථක කදා සියල්ලම පාහේ රටා පහෙන් එකකට අයත් වේ. නොසිතා නැවත නැවත සකස් කරනවා වෙනුවට කදාවේ ගැටලුව හඳුනාගැනීමට සිසුන්ට උගන්වන්න.

අධික ලෙස වර්ණ ගැන්වීමෙන් සෛල සහ පසුබිම ඒකාකාරව තද පැහැයක් ගන්නා නිසා න්‍යෂ්ටිය දෘශ්‍ය ක්ෂේත්‍රය තුළ වෙන් කර හඳුනාගත නොහැකි වේ. වර්ණ ගැන්වීමේ කාලය කෙටි කිරීමෙන් හෝ වඩා හොඳින් සේදීමෙන් එය නිවැරදි කරන්න. ප්‍රමාණවත් ලෙස වර්ණ නොගැන්වීමෙන් ආලෝකය වැඩි කළ විට නොපෙනී යන අවතාර වැනි හැඩ පමණක් ඉතිරි වේ; තත්පර තිහ බැගින් කාලය වැඩි කරන්න. ඝන ආලේපවලින් කිසිදු සීමාවක් ලුහුබැඳිය නොහැකි ඝන, එකිනෙක මත පිහිටි ස්කන්ධ ඇති වේ. එහි නිවැරදි කිරීම භෞතික එකකි: ඊළඟ වතාවේ වඩා තුනීව පතුරුවන්න, මන්ද සෛල ගොඩක් සේදීමෙන් සකස් කරගත නොහැකි බැවිනි. වායු බුබුළු තියුණු තද දාර සහිත පරිපූර්ණ වෘත්ත ලෙස පෙනෙන අතර, ඒවා ව්‍යුහ ලෙස වරදවා හඳුනාගන්නා ආධුනිකයන්ගේ අවධානය වෙනතකට යොමු කරයි; ආවරණ වීදුරුව ඇල කර සෙමින් නැවත තබන්න. Ingrid Science කම්මුල් සෛල ක්‍රියාපටිපාටිය වැනි පාසල් ක්‍රියාපටිපාටි සඳහන් කරන පරිදි, සෛල මත හෝ ඒවා වටා විසිරී ඇති කුඩා තද තිත් සාමාන්‍යයෙන් මුඛයේ සාමාන්‍ය බැක්ටීරියා වේ. මුඛයේ ජීවීන් සිටින බව ඒවා තහවුරු කරන අතර, එය සිසුන්ට මතකයේ රැඳෙන කරුණක් විය හැකිය. එහෙත් මෙම ක්‍රියාකාරකමේදී ඒවා විශේෂ මට්ටමින් හඳුනාගත නොහැකි අතර සෛල කොටස් ලෙස ඇඳිය නොයුතුය. ආහාර අවශේෂ සහ ශ්ලේෂ්මල නූල් අක්‍රමවත් ලෙසත් තදින්ත් වර්ණ ගැන්වේ; කලින් මුඛය සේදීමේ අරමුණ ඒවා අඩු කිරීමයි.

මෙම ක්‍රියාකාරකමෙන් කළ නොහැකි දේ

මෙය අධ්‍යාපනික නිරීක්ෂණයක් මිස රෝග විනිශ්චය පරීක්ෂණයක් නොවේ. පන්තිකාමර වර්ණ ගැන්වීමකදී සෛලවල පෙනුමෙන් ආසාදනයක්, පිළිකාවක් හෝ වෙනත් කිසිදු රෝගයක් විනිශ්චය කළ නොහැකි අතර, මෙම ලිපිය එසේ කළ හැකි බව හඟවන ලෙස නොකියවිය යුතුය. මෙම සැකසුම විශාලන දෙකකදී හැඩය, සීමාව, සෛල ප්ලාස්මය සහ න්‍යෂ්ටිය පෙන්වයි. එය පටලයේ අතිසූක්ෂ්ම ව්‍යුහය, ඉන්ද්‍රයිකා විස්තර හෝ අණුක අනන්‍යතාව පෙන්වන්නේ නැත. එම සීමාව පැහැදිලිව සඳහන් කිරීම විද්‍යාවත් සිසුනුත් ආරක්ෂා කරයි: හොඳ ප්‍රතිඵලයක් යනු විශාලනය සහ වර්ණකය සටහන් කර ඇති, නිවැරදිව නම් කළ චිත්‍රයක් මිස සෞඛ්‍යය පිළිබඳ නිගමනයක් නොවේ.

ශිෂ්‍ය වැඩපත්‍රිකාව සහ නම් කළ අන්වීක්ෂ ඡායාරූප

මෙම පිටුව සඳහා ව්‍යාපෘති සම්පත් දෙක වන්නේ ඉහත නම් කළ අන්වීක්ෂ ඡායාරූපය සහ පහත වැඩපත්‍රිකාවයි. එක් සිසුවකුට එක බැගින් වැඩපත්‍රිකාව මුද්‍රණය කරන්න, නැතහොත් එය තිරයකට ප්‍රක්ෂේපණය කර එහි කොටු තම සටහන් පොත්වල පිටපත් කිරීමට සිසුන්ට කියන්න.

මිනිත්තු 45 සැසියකදී එය භාවිත කරන ආකාරය: ආරක්ෂාව පිළිබඳ දැනුවත් කිරීම සහ නියැදි ලබා ගැනීම සඳහා මිනිත්තු දහයක්, වර්ණ ගැන්වීම සහ කදාව සකස් කිරීම සඳහා මිනිත්තු දහයක්, විශාලන දෙකේදීම නිරීක්ෂණය සහ සටහන් චිත්‍ර ඇඳීම සඳහා මිනිත්තු පහළොවක්, පිරික්සුම් ලැයිස්තුව සහ නම් කළ අන්වීක්ෂ ඡායාරූපය සමඟ සැසඳීම සඳහා මිනිත්තු දහයක්. පිරික්සුම් ලැයිස්තුවේ අයිතම හිතාමතාම ක්‍රියාපටිපාටියට අදාළ සරල කරුණු ලෙස තබා ඇත. තුනී ආලේපයක්, නිවැරදි වර්ණ ගැන්වීමේ කාලයක්, සෛල ප්ලාස්මයට වඩා තද පැහැති න්‍යෂ්ටියක්, සටහන් කළ විශාලනයක්. මේ හතරම සලකුණු කළ හැකි සිසුවකු මෙම පාඩමෙන් ඉගැන්වීමට අදහස් කරන සංකල්පය තේරුම් ගෙන ඇත: අන්වීක්ෂ වෙනස්කම් පෙන්වන අතර, වර්ණක පෙන්වීමට වටින වෙනස්කම් ඇති කරයි.