ميٿيلين بلو اَنايروبڪ ۽ آڪسيجن اشاري طور: رنگ جي تبديلي ڇا ثابت ڪري ٿي

هڪ ٽيڪنيشن اَنايروبڪ جار کي سيل ڪري ٿي، ڍڪ مان ميٿيلين بلو اشاري واري پٽي ڏسي ٿي، ۽ اهو ئي ڏسي ٿي جيڪو ڏسڻ چاهي ٿي. پٽي نيري مان اڇي ٿي وئي آهي. هوءَ ان عمل کي اَنايروبڪ طور درج ڪري اڳتي وڌي ٿي. ٻن ڏينهن کان پوءِ هڪ پليٽ تي ڪا واڌ نٿي ٿئي، جڏهن ته ساڳئي جار اندر سيل ٿيل بروٿ ٽيوب ۾ آڪسيجن سان رابطي جا نشان نظر اچن ٿا. پٽي سچ ٻڌائي رهي هئي. هن ان کان غلط سوال پڇيو هو.

هي مونجهارو بنيادي تصور بابت آهي. ميٿيلين بلو اَنايروبڪ اشارو ريڊوڪس جو تصور آهي، نه جراثيم کان پاڪ هجڻ جو ۽ نه ئي سڄي نظام جي تصديق جو. جڏهن اهو فرق واضح ٿي وڃي ٿو، ته پٽي هڪ محدود ڪم لاءِ صحيح ۽ سچو اوزار بڻجي وڃي ٿي.

تصور: هڪ موٽڻ جوڳو ريڊوڪس جوڙو

حل ٿيل ميٿيلين بلو ٻن حالتن ۾ موجود هوندو آهي. آڪسيڊيشن ٿيل صورت اهو واقف نيرو ڪيٽائن آهي. ريڊڪشن ٿيل صورت، جنهن کي ليوڪوميٿيلين بلو چئبو آهي، بي رنگ هوندي آهي. غيرجانبدار pH جي ويجهو، سادي ڪيل اڌ ردعمل ۾ هڪ نيرو ڪيٽائن، هڪ پروٽان ۽ ٻه اليڪٽران ملي هڪ بي رنگ ليوڪو ماليڪيول ٺاهين ٿا. pH 7 تي معياري هائيڊروجن اليڪٽروڊ جي ڀيٽ ۾ ان جو فارمل پوٽينشل لڳ ڀڳ پلس 11 ملي وولٽ آهي. اهو ان کي اهڙي حد ۾ رکي ٿو جنهن تائين ڪيترائي ريڊڪشن ڪندڙ نظام پهچي سگهن ٿا ۽ جنهن کي آڪسيجن واپس موٽائي سگهي ٿي.

ريڊڪشن لاءِ مقامي ريڊوڪس پوٽينشل گهٽ هجڻ ضروري آهي. رڳو آڪسيجن هٽائڻ سان هميشه ائين نٿو ٿئي. آڪسيجن کان سواءِ حالتن بابت شروعاتي تحقيق ۾ ڏٺو ويو ته سادي آڪسيجن کان پاڪ پاڻيءَ ۾ ميٿيلين بلو پنهنجو رنگ برقرار رکيو، جيستائين ڪو ريڊڪشن ڪندڙ مادو موجود نه هو. اهو به ڏٺو ويو ته ڊيڪسٽروز بروٿ ۾ لڳ ڀڳ 0.01 سيڪڙو رنگ جا ملاوٽ 37 C تي آسانيءَ سان بي رنگ ٿي ويا، جڏهن ته ساڳيو ملاوٽ 4 C تي رکڻ سان هڪ ڏينهن تائين نيرو رهيو، جيئن تازي ٽشو ۽ اَنايروبڪ ڪلچر جي حالتن بابت تجربن ۾ ٻڌايو ويو آهي. گرمي پد، pH، گلوڪوز، اسڪاربيٽ، ٿائيوگليڪوليٽ ۽ خردجاندارن جي ريڊڪشن ڪندڙ سرگرمي سڀ طئي ڪن ٿا ته اليڪٽران دستياب آهن يا نه.

ٻيهر آڪسيڊيشن لاءِ رڳو آڪسيجن گهرجي. جڏهن هوا ليوڪو صورت تائين پهچي ٿي، ته اها وري نيري ٿي وڃي ٿي. جديد تيار ڪيل اشارا بلڪل انهيءَ چڪر کي استعمال ڪن ٿا: رنگ، ريڊڪشن ڪندڙ مادو ۽ هڪ استحڪام ڏيندڙ ميٽرڪس؛ گهٽ آڪسيجن تي بي رنگ ۽ هوا سان رابطي تي وري نيرو، جيئن رنگ، ريڊڪشن ڪندڙ مادي، سرفيڪٽنٽ ۽ مٽيءَ تي ٻڌل هڪ هائبرڊ ميٿيلين بلو آڪسيجن اشاري ۾ ڏيکاريو ويو آهي. ان پروٽوٽائپ ۾ pH 11 تي 0.01 ملي مولر رنگ سان 2.0 ملي مولر اسڪاربيٽ يا گلوڪوز استعمال ڪيو ويو. اهو آڪسيجن جي حجمي مقدار لڳ ڀڳ 0.5 سيڪڙو ٿيڻ تي بي رنگ ٿيو، ۽ پنهنجي آزمائشي چيمبر ۾ 0.1 سيڪڙو کان گهٽ ۽ 0.5 سيڪڙو کان وڌيڪ آڪسيجن ۾ فرق ڏيکاري سگهيو.

تنهنڪري عملي اصول سادو آهي. نيري رنگ جو مطلب آهي ته اشاري وارو علائقو آڪسيڊيشن ٿيل آهي. بي رنگ هجڻ جو مطلب آهي ته اشاري وارو علائقو ريڊڪشن ڪندڙ، گهٽ آڪسيجن وارين حالتن تائين پهچي ويو آهي. هي تبديلي موٽڻ جوڳي، مقامي ۽ ڪيميائي آهي. اها پاڻمرادو خردجاندارن بابت ڪجهه به نٿي ٻڌائي.

اَنايروبڪ جار ۾ ميٿيلين بلو اشاري واري پٽي ڪيئن ڪم ڪري ٿي

اَنايروبڪ جار لاءِ ميٿيلين بلو اشاري واري پٽي هڪ ننڍڙو ردعمل وارو علائقو آهي، جيڪو جار جي اندروني گئسي ماحول ۾ اهڙي هنڌ رکبو آهي جتان برتن کولڻ کان سواءِ ان کي ڏسي سگهجي. واپاري صورتون مختلف آهن: ڪاغذي پٽيون، سيٽ اپ وقت حل ڪيل يا آليون ڪيل ٽڪيون، ۽ نوان هائبرڊ ڪاغذ. ڪجهه صورتن ۾ ردعمل واري علائقي کي چالو ڪرڻ لاءِ ڊسٽل ٿيل پاڻيءَ جو هڪ ڦڙو گهربل هوندو آهي. ٻيون سڪي صورت وارا اوزار آهن، جن کي سڪو ئي رکڻو پوندو آهي. مخصوص پراڊڪٽ جي هدايتن واري شيٽ تي عمل ڪرڻ ضروري آهي، ڇاڪاڻ ته پاڻي ڏيڻ، رکڻ جي جاءِ ۽ پڙهڻ جو وقت ڪيميائي عمل جو حصو آهن.

عملي طور گهربل پڙهڻي ٻن حالتن واري هوندي آهي. نيري رنگ جو مطلب آهي ته پٽي وٽ آڪسيجن يا اڻپوريون ريڊڪشن ڪندڙ حالتون اڃا موجود آهن. اڇي يا بي رنگ هجڻ جو مطلب آهي ته پٽي وٽ اَنايروبڪ ريڊوڪس حالتون قائم ٿي ويون آهن. ڪجهه واپاري ڪاغذن ۾ پسمنظر لاءِ ڳاڙهو رنگ شامل هوندو آهي، تنهنڪري انهن جي ريڊڪشن ٿيل آخري حالت اڇي بدران گلابي نظر اچي ٿي. فيصلو ڪرڻ کان اڳ ڄاڻو ته توهان جي پراڊڪٽ ڪهڙي آخري رنگ جو واعدو ڪري ٿي.

وقت نظام موجب بدلجي ٿو. هڪ GasPak طرز جي سيٽ اپ ۾ رنگ لڳ ڀڳ هڪ ڪلاڪ اندر ڦڪو ٿيڻ شروع ٿيو ۽ ڪجهه ڪلاڪن اندر مڪمل بي رنگ ٿي ويو، جڏهن ته ڪمري جي گرمي پد تي هڪ ڪنٽرول ڪيل ڀيٽ ۾ ميٿيلين بلو کي ڇهن ڪلاڪن کان وڌيڪ وقت لڳو. ان تحقيق ۾ ميڊيا جو ريڊوڪس پوٽينشل 60 کان 100 منٽن اندر لڳ ڀڳ مائنس 100 ملي وولٽ تائين پهتو، رنگ جي تبديلي مڪمل ٿيڻ کان گهڻو اڳ؛ ۽ جڏهن پٽي مڪمل بي رنگ ٿي، تڏهن اهو مائنس 200 ملي وولٽ کان به گهڻو هيٺ هو. اشارو گئسي ماحول کان دير سان جواب ڏئي ٿو. پهرين ڪلاڪ ۾ نيري پٽي ناڪامي ثابت نٿي ڪري، ۽ ڇهين ڪلاڪ ۾ اڇي پٽي، ڇهين ڪلاڪ واري پٽيءَ جي حالت بيان ڪري ٿي.

ساڳئي سبب ڪري رکڻ جي جاءِ به اهم آهي. پٽي کي مٿئين خالي گئسي حصي ۾، ڍڪ مان نظر اچڻ واري هنڌ، آگر جي سطحن ۽ ڪلچر ميڊيا کان پري رکو. اها پنهنجي بلڪل ويجهي ماحول جي حالت ٻڌائي ٿي. ان کي ٿڌي ڀت سان سنئون لڳايو، پليٽن هيٺ لڪايو يا ٻاڦ مان ٺهيل پاڻيءَ سان ڀڄڻ ڏيو، ته پوءِ اها جار بدران انهيءَ ننڍڙي مقامي ماحول جي حالت ٻڌائيندي.

پٽي ڇا ظاهر ڪري ٿي ۽ ڇا نٿي ڪري

اَنايروبڪ جار جي ميٿيلين بلو اشاري کي هڪ هنڌ تي موجود هڪ سينسر سمجهو. اهو پنهنجي ردعمل واري علائقي ۾ مقامي ريڊوڪس ۽ آڪسيجن جون حالتون ثابت ڪري ٿو. جيڪڏهن گئسون چڱيءَ طرح ملن ۽ توازن قائم ٿيڻ لاءِ مناسب وقت ملي، ته اهي حالتون عام طور مٿئين گئسي حصي جون نمائندگي ڪن ٿيون. ان کان اڳتي هر ڳالهه اندازي تي ٻڌل نتيجو آهي، ۽ اهڙي نتيجي لاءِ الڳ ثبوت گهرجي.

بي رنگ پٽي جراثيم کان پاڪ هجڻ ثابت نٿي ڪري. جراثيم کان پاڪ هجڻ جو مطلب زنده رهڻ لائق جاندارن جي غيرموجودگي آهي، جنهن کي تصديق ٿيل جراثيم کان پاڪ ڪرڻ واري عمل ۽ ڪلچر جي تصديقي ڪنٽرولن سان ثابت ڪيو ويندو آهي. جار مڪمل اَنايروبڪ هوندي به آلودہ ٿي سگهي ٿو، يا مڪمل جراثيم کان پاڪ هوندي به ان ۾ آڪسيجن موجود ٿي سگهي ٿي.

اها ڪلچر نظام جي هر حصي جي تصديق نٿي ڪري. سيل ٿيل ٽيوب اندر حل ٿيل آڪسيجن، گهري آگر ۾ ڦاٿل آڪسيجن، ڀريل جار ۾ حالتن جا تدريجي فرق، ۽ پڙهڻي کان پوءِ پيدا ٿيندڙ ليڪ، سڀ هڪ پٽي جي نظر کان ٻاهر آهن. هنڌن موجب ڪيل تجربن ۾ ساڳئي برتن اندر گڏوگڏ نيرا ۽ بي رنگ علائقا ڏٺا ويا، جتي آڪسيجن جي رسائي ۽ ريڊڪشن ڪندڙ سرگرميءَ جو توازن مختلف هو. هڪ نقطو پوري حجم جي تصديق نٿو ڪري سگهي.

اها بنا وقفي اَنايروبڪ حالتون برقرار رهڻ ثابت نٿي ڪري. سيٽ اپ وقت هڪ ڀيرو پڙهيل پٽي ويهين ڪلاڪ بابت ڪجهه به نٿي ٻڌائي. اَنايروبڪ معيار بابت تازي تحقيق خبردار ڪري ٿي ته ڪيميائي اشارا پڙهڻ واري لمحي جي گئسي ماحول کي بيان ڪن ٿا ۽ ٿوري بچيل آڪسيجن جي باوجود اطمينان بخش نظر اچي سگهن ٿا. مسلسل يا مقرر جاچ وقتن تي ڪيل دستاويزي رڪارڊ، نه هڪ ڀيرو آخري حالت تي نظر وجهڻ، پٽيءَ کي انڪيوبيشن سان ڳنڍي ٿو.

رنگ جي تبديليءَ پٺيان لاڳاپيل ڪيميا لاءِ، ڏسو ميٿيلين بلو آڪسيڊيشن ٿيل ۽ ريڊڪشن ٿيل حالتن جي وچ ۾ ڪيئن ڦري ٿو. آڪسيجن نمونن جي سنڀال تي وڌيڪ وسيع انداز ۾ ڪيئن اثر انداز ٿئي ٿي، ان لاءِ خوردبيني مشاهدي ۽ ڪلچر جي ڪم ۾ آڪسيجن جي ڪنٽرول بابت ڏسو.

جار جي ڀرسان رکڻ لاءِ هڪ خاڪو

هيٺ ڏنل شڪل مضمون کي ليبارٽري بينچ تي استعمال لاءِ هڪ مختصر حوالي ۾ سموئي ٿي. ساڳئي پٽيءَ جون ٽي حالتون، ردعمل جون ٻئي هدايتون، ۽ اشاري جي ثبوت ۽ نظام جي تصديق جي وچ واري حد.

ناڪاميءَ جون صورتون جيڪي پٽي نيري رکن ٿيون يا ڪوڙو اطمينان ڏين ٿيون

گهڻيون ناڪاميون پنجن گروپن ۾ اچن ٿيون. هر هڪ جي الڳ سڃاڻپ آهي.

ليڪ ڪندڙ جار يا پائوچ ردعمل واري علائقي تائين آڪسيجن پهچائيندو رهي ٿو. پٽي نيري رهي ٿي يا ڦڪي ٿيڻ کان پوءِ وري نيري ٿي وڃي ٿي. ڪيميائي عمل کي الزام ڏيڻ کان اڳ ڍڪ، گيسڪٽ، ڪليمپ ۽ سيل ٿيڻ واريون سطحون چيڪ ڪريو.

ختم ٿيل يا غلط نموني چالو ڪيل گئس پيدا ڪندڙ اوزار آڪسيجن هٽائي ئي نٿو. پراڻن پاڻيءَ سان چالو ٿيندڙ نظامن ۾، لڳ ڀڳ 10 کان 15 منٽن تي ٻاڦ مان پاڻي نه ٺهڻ ۽ لڳ ڀڳ 20 کان 40 منٽن تي ڍڪ گرم نه ٿيڻ، ان نظام لاءِ شروعاتي خبرداريون هيون. ضرورت کان وڌيڪ ڀريل جار ۾ ننڍي گنجائش وارو ساشي به ساڳيءَ طرح ناڪام ٿئي ٿو.

غيرفعال ٿيل ڪيٽالسٽ وارو مسئلو رڳو پراڻن هائيڊروجن ۽ پيليڊيم وارن نظامن تي لاڳو ٿئي ٿو، جتي پيليڊيم هائيڊروجن ۽ آڪسيجن کي ملائي پاڻي ٺاهيندو آهي. نمي ۽ هائيڊروجن سلفائيڊ ان کي خراب ڪن ٿا. ڪيترن موجوده ساشين ۾ پيليڊيم بلڪل استعمال نٿو ٿئي، تنهنڪري جتي هي حل لاڳو نه هجي، اتي ان کي استعمال نه ڪريو.

خراب ٿيل يا غلط سنڀاليل پٽي خاموشيءَ سان ناڪام ٿئي ٿي. ذخيرو ڪرڻ دوران رنگ ۽ ريڊڪشن ڪندڙ مادو پنهنجي موٽڻ جوڳي خاصيت وڃائي ڇڏين ٿا. اهو هڪ سبب آهي جو روشنيءَ سان رنگ ڦڪو ٿيڻ ۽ ذخيري دوران خاصيتن جي نقصان کي روڪڻ لاءِ هائبرڊ فارموليشن تيار ڪيون ويون. مدي کان ٻاهر اسٽاڪ، غيرمعمولي شروعاتي رنگ وارو اسٽاڪ، ۽ اهي پٽيون رد ڪريو جيڪي سڪيون هجڻ گهرجن پر آليون ڪيون ويون هجن، يا جن کي آلو ڪرڻ ضروري هجي پر سڪيون ڇڏيون ويون هجن.

حالتن جو تدريجي فرق يا جواب ۾ دير، ڪيميائي عمل بدران پڙهندڙ کي گمراهه ڪري ٿي. چڱيءَ طرح نه مليل مٿيون گئسي حصو، حل ٿيل آڪسيجن واريون سيل ٿيل ٽيوبون ۽ نيم سخت ميڊيا، هر هڪ پنهنجون حالتون پٽيءَ جي اشاري کان وڌيڪ وقت تائين برقرار رکن ٿا. ريسازورِن جون پٽيون گلابي حالت مان گذري بي رنگ ٿين ٿيون ۽ اڪثر تيز ڪم ڪندڙ طور وڪرو ڪيون وڃن ٿيون، پر انهن جون حدون انهن جي پنهنجي فارموليشن سان لاڳاپيل آهن ۽ ميٿيلين بلو تي لاڳو نٿيون ٿين.

ڪنٽرول ۽ پڙهڻيءَ جو هڪ پيروي ڪرڻ جوڳو طريقو

ٻه گهٽ خرچ وارا ڪنٽرول اڪثر غلط پڙهڻيون پڪڙي وٺن ٿا. آزمائش سان گڏ هڪ نئين هوا واري ڪنٽرول پٽي ڪمري جي هوا ۾ رکو. صحيح ڪم ڪندڙ ميٿيلين بلو پٽي اتي نيري رهي ٿي. ڪجهه پيڪ ٿيل اشارا شروع ۾ ڦڪا هوندا آهن ۽ کولڻ تي نيرا ٿيندا آهن، جيڪو پاڻ به ڪم ڪرڻ جي جاچ آهي. ان کان علاوه وقت بوقت هڪ نئين پٽي اڳ ۾ تصديق ٿيل اَنايروبڪ سيٽ اپ ۾ رکو. ان کي پراڊڪٽ جي مقرر وقت اندر تصديق ٿيل ريڊڪشن واري آخري حالت تائين پهچڻ گهرجي. جيڪڏهن ڪنهن به ڪنٽرول جو رويو درست نه هجي، ته جار جي پڙهڻين تي ڀروسو ڪرڻ کان اڳ اهو بيچ مٽايو.

پڙهڻيءَ جو طريقو عمل جي ميڪانيزم مان نڪري ٿو. پٽي کي مٿئين گئسي حصي ۾ اهڙي هنڌ رکو جتان جار کولڻ کان سواءِ ان کي ڏسي سگهجي، ۽ ڀت سان رابطي ۽ آلو ڪرڻ بابت پراڊڪٽ جي شيٽ تي عمل ڪريو. شروعاتي رنگ، جار سيل ڪرڻ جو وقت ۽ پراڊڪٽ جي مقرر جاچ وقت تي رنگ درج ڪريو. جتي برتن اجازت ڏئي، اتي انڪيوبيشن دوران مقرر جاچ وقتن تي درج ڪريو ته اشارو ريڊڪشن ٿيل حالت ۾ رهيو. کولڻ کان بلڪل اڳ آخري رنگ درج ڪريو. کولڻ کان اڳ وارو اهو رنگ ان عمل جو آخري نتيجو آهي. کولڻ کان پوءِ وري نيرو ٿيڻ جي اميد رکو ۽ ان کي اڳوڻو رڪارڊ بدلائڻ نه ڏيو.

جيڪڏهن پٽي پنهنجي مقرر وقت کان پوءِ به نيري رهي، ته اَنايروبڪ حالتن کي غيرتصديق ٿيل سمجهو. ترتيب سان هي سلسلو چيڪ ڪريو: سيل، ساشي، ڪيٽالسٽ جيڪڏهن موجود هجي، اشاري کي پاڻي ڏيڻ ۽ ان جي مدي جي پڄاڻي، پوءِ هوا واري ڪنٽرول جي ڀيٽ ۾ اشاري جو ڪم ڪرڻ. گئسي ماحول جي تصديق ٿيڻ کان پوءِ ئي واڌ يا واڌ نه ٿيڻ جي تشريح ڪريو، ۽ ان لاءِ استعمال جي مقصد سان ٺهڪندڙ اَنايروبڪ ڪلچر سيٽ اپ ۽ جاندارن جا ڪنٽرول استعمال ڪريو.

پٽي پنهنجي دائري ۾ آخري ڳالهه چوڻ جي حقدار آهي. نيري هجي يا بي رنگ، اها هڪ وقت تي هڪ هنڌ بابت هڪ سوال جو جواب ڏئي ٿي. مقرر وقت تي، ڀرسان ڪنٽرول رکندي، ان کان اهو سوال پڇو ته اها ڀروسي جوڳو جواب ڏئي ٿي. ان کان جراثيم کان پاڪ هجڻ، هر ٽيوب، يا هڪ ئي نظر سان سڄي انڪيوبيشن بابت پڇو، ته اشاري جي ڪا به ڪيميا ان پڙهڻيءَ کي صحيح نٿي بڻائي سگهي.