د وینې ارغواني رنګوونکی چا جوړ کړ؟ مېتیلین بلو، مالاخوفسکي، رومانوفسکي او ګیمسا

ایوسین سور دی. مېتیلین بلو آبي دی. دواړه سره ګډ کړئ، ګډ محلول د وینې پر وچ شوي نري پوړ واچوئ، او د پوړ ځینې برخې ارغواني کېږي.

ټولې برخې نه. په ښه چمتو شوې نمونه کې د وینې د سپینو حجرو هستې سور ـ ارغواني رنګ اخلي، او د ملاریا د پرازیت دننه کروماتین هم همدا رنګ اخلي، خو شاوخوا سرې حجرې ګلابي او سایتوپلازم خړ ـ آبي پاتې کېږي. همدا ارغواني رنګ د حجرو ډولونه له یو بل څخه بېلوي.

په هېڅ یوه بوتل کې ارغواني رنګ نشته. دا رنګ یوازې هغه وخت څرګندېږي چې د مېتیلین بلو د تجزیې یو ځانګړی محصول پر سلایډ له ایوسین سره یوځای شي. په 1880مه او 1890مه لسیزه کې هېڅوک نه پوهېدل چې دا محصول شته، لا دا خو پرېږدئ چې څه شی دی. هغه کسان چې د دې رنګ په لټه کې وو، له ناخالصو رنګوونکو سره، یوازې، او له کومې باوري لارې پرته کار کاوه چې معلومه کړي په هغه بوتل کې څه دي چې دوه میاشتې پر المارۍ پاتې شوی وي.

له همدې امله د سرلیک پوښتنه له یوه څخه زیات د دفاع وړ ځوابونه لري، او له همدې امله یې ځواب په 2011 کې بدل شو.

هغه پایله چې له ګډ محلول سره بدلېده

دا رنګوونکی په یوه ځل اختراع نه شو. په تدریج جوړ شو. په ګډ محلول کې هر بدلون د لیدو وړ معلوماتو یوه نوې برخه ورزیاتوله، او د دغو برخو ترتیب د دې تاریخ د لوستلو تر ټولو روښانه لاره ده.

په وروستي ستون کې بڼه مهمه ده. هر پرمختګ د رنګونو لړۍ پراخوله، او هر پراخوالي یو بل جوړښت د لیدو وړ کاوه. ارغواني رنګ د دې طریقې سینګار نه دی؛ دا د دې ترمنځ توپیر دی چې یوازې د پرازیت شتون ووینئ او که ووینئ چې له څه جوړ دی. دا چې پخپله رنګوونکی څنګه د BASF له رنګ جوړوونکې فابریکې څخه طب ته ورسېد، یو اوږد تاریخ دی چې خپل اسناد لري. پورته بشپړ ترتیب، د هرې برخې له سرچینې سره، د ونډه‌لرونکو د وخت‌کرښې په توګه له سرچینو سره تړلی ساتل شوی دی.

انځور: هماغه شپږ ګډ محلولونه، داسې انځور شوي چې په لوښي کې څه وو او څه ترې راووتل. دایرې رنګوونکي ښيي؛ لاندې مستطیلونه هغه رنګونه ښيي چې دغو رنګوونکو د وینې په نري پوړ کې تولیدولای شول. له 1890 مخکې هېڅ یو سور ـ ارغواني مستطیل نه لري، او له هغه وروسته هېڅ یو ترې بې‌برخې نه دی.

هغه سړی چې بوراکس یې په قصدي ډول وکاراوه

اېرنست مالاخوفسکي په بریسلاو، اوسني وروتسواف، کې ډاکټر و. هغه خپل مسلکي ژوند په شخصي طبابت او په یوه کوچني کلینیک کې تېر کړ چې له یوه همکار سره یې چلاوه، او لابراتواري کار یې په خپل شخصي وخت کې کاوه. هغه د 1857 د مارچ پر 12 په شتژېلنو کې زېږېدلی و، د بریسلاو په پوهنتون کې یې طب لوستی و، او له 1882 تر 1887 پورې یې د ټولو مقدسانو په روغتون کې، چې هغه وخت د جرمني دویم لوی روغتون و، د داخله طب د مرستیال په توګه کار کړی و.

هغه په 1888 کې د خېنچینسکي او پلېن له دوه‌ګوني رنګوونکي سره پیل وکړ. په یوه نمونه کې چې په 1889 کې چمتو شوې وه، هغه ولیدل چې د پلازمودیوم د هستې کروماتین له سایتوپلازم څخه په بېل رنګ رنګېږي، خو بیا یې دا پایله تکرار نه شوه کړای. هغه هڅه وکړه چې مېتیلین بلو تیزابي کړي، خو دې کار پایله نوره هم خرابه کړه. بیا یې هڅه وکړه چې په بوراکس یې قلوي کړي، او دا هر ځل بریالی و. هغه د 1890 د جون پر 15 دا طریقه په عامه توګه وښوده او د 1891 په اګست کې یې د بوراکس د کارولو د لارښوونې په ګډون، لا بشپړ تشریح خپره کړه. هغه یادونه وکړه چې رنګول څلورویشت ساعته وخت نیسي او پایلې یې په اسانۍ تکرارېدای شي.

په تشخیصي لابراتوار کې څلورویشت ساعته اوږد وخت دی، او د هغه مقالې د پرازیت د هستې پر ارغواني ـ سور رنګ ډېر تمرکز نه کاوه. علت چې هر څه و، هېچا د مېتیلین بلو قصدي قلوي کول بیا ونه کارول، تر هغه چې نوخت په 1898 کې دا کار بیا وکړ. مالاخوفسکي بیا هېڅکله د وینې د رنګولو په اړه ونه لیکل.

تر وروستیو وختونو پورې د هغه په اړه د لږو معلوماتو لامل اسرار نه، بلکې د آرشیفي اسنادو وضعیت و. په طبي لیکنو کې د هغه د ژوند نږدې هېڅ نښه پاتې نه وه، او څه چې پاتې وو، یوازې د یوې لارې له مخې راورسېدل. د هغه لور ماري په 1939 کې له جرمني څخه لندن ته ولاړه، د بریتانیا په پوځ کې یې خدمت وکړ او په کاناډا کې مېشته شوه. د هغې د کورنیو اسنادو ټولګه په پای کې په نیویارک کې د لیو بېک انسټیټیوټ ته ورسېده. د هغې ورور لیو په لومړۍ نړیواله جګړه کې ووژل شو. خور یې اېوا د 1942 په اپرېل کې له بریسلاو څخه د ایزبیتسا ترانزیټي کمپ ته وشړل شوه او هېڅکله بېرته راستنه نه شوه. مور یې هېډویګ د 1942 د اپرېل پر 22، د دې پر ځای چې د همداسې شړلو انتظار وکړي، خپل ژوند پای ته ورساوه. مالاخوفسکي په 1934 کې، له دې ټولو پېښو مخکې، مړ شوی و.

هغه کورنی تاریخ چې په دې ډول پای ته رسېږي، داسې تاریخ دی چې بیا یې یادونه نه کېږي. هغه دوه مقالې چې مالاخوفسکي یې د دې رنګوونکي د جوړېدو تاریخ ته بېرته راوست، دواړه په 2011 کې خپرې شوې وې او په پوزنان او وروتسواف کې له آرشیفي اسنادو او په نیویارک کې د ماري له اسنادو څخه برابرې شوې وې.

یو پوپنک وهلی بوتل او یو بختور روسی

دیمیتري رومانوفسکي په سنټ پیټرزبورګ کې د پوځي طب په اکاډمۍ کې طب ولوست او د خپل مسلکي ژوند ډېره برخه یې د ملاریا په اړه کار وکړ. په 1890 کې یې یوه طریقه خپره کړه چې پر کاغذ د خېنچینسکي له طریقې سره نږدې یو شان وه: نه بدل شوی مېتیلین بلو او ایوسین، خو لږ زیات ایوسین.

د 1891 په سپټمبر کې یې هغه طریقه خپره کړه چې نوم یې پرې مشهور شو، او مهم جزئیات د لارښوونو په منځ کې پټ وو. د هغه تر ټولو ښې پایلې له موجود زیرمه شوي مېتیلین محلول څخه ترلاسه کېدې؛ د مېتیلین بلو داسې زیرمه شوی محلول چې له دوو میاشتو زیات ولاړ پاتې و او پوپنک پرې راټوکېدلی و. پوپنک او د ولاړ پاتې کېدو وخت د رنګوونکي ځینې مېتیل ګروپونه لرې کړي وو. رومانوفسکي په دې نه پوهېده او نه یې کنټرولولای شو، او نورو کارکوونکو چې د هغه طریقه یې وازمویله، ارغواني رنګ ترلاسه نه کړ. د هغه رساله د 1891 په جون کې په سنټ پیټرزبورګ کې سپارل شوې وه، له همدې امله عام روایت 1891 د کشف کال ګڼي.

د مالاخوفسکي عملي ننداره د 1890 په جون کې، له یوه کال څخه زیات مخکې، ترسره شوې وه، او طریقې یې په قصدي ډول کار ورکاوه.

ولې نوم د ناسم کس په نوم شو

د مالاخوفسکي د لومړیتوب دلایل کریستین کرافټس، اېرنست هېمپېلمان او باربرا اولېکسین راټول کړل، او دا پر څلورو شیانو ولاړ دي. د عامه عملي نندارې نېټه: د 1890 جون، د 1891 د سپټمبر په مقابل کې. د قصدي کلمه، د په ناڅاپي بخت موندل شوي په مقابل کې. دا حقیقت چې مالاخوفسکي خپله طریقه، د بوراکس په ګډون، خپره کړې وه، خو د رومانوفسکي طریقه پر یوه نه کنټرولېدونکي متغیر متکي وه. او دا مشاهده چې د پلازمودیوم د هستې تشریح، له هغه ارغواني رنګ سره چې هسته یې ښکاره کوله، عملاً د اوو کلونو لپاره له علمي لیکنو ورکه شوه، ځکه هېچا تصادفي بڼه نه شوه تکرارولای.

دوی د خپلې پایلې په بیان کې ډېر صریح دي. په ژوندلیکي مقاله کې دا نسبت ورکول «یوه مسخره تحریف» بولي، او د رالف لیلي خبره رااخلي چې په 1978 کې یې لیکلي وو: «ښایي د رنګوونکو دې کورنۍ ته د مالاخوفسکي رنګوونکي ووایو».

دا ادعا د بحث وړ ده، لکه د لومړیتوب ادعاوې چې عموماً وي، او د دې بحث بڼه د حل کولو پر ځای د تشریح کولو ارزښت لري. د لومړیتوب بحث باید روښانه کړي چې کشف څه و. که کشف ارغواني رنګ وي، مالاخوفسکي تر ټولو پخوانۍ مستنده عملي ننداره لري. که کشف خپره شوې طریقه وي، دواړو په 1891 کې خپرونې کړې، او نوم د رومانوفسکي په نوم شو. که کشف تشریح وي، هېڅ یو یې ادعا نه شي کولای، ځکه هېڅ یو نه پوهېده چې پخېدل د مېتیل ګروپونو لرې کېدل دي، او هېڅ یو نه شو ویلای چې دا رنګ اصلاً ولې څرګندېږي. همدا وروستی ټکی دی چې عام روایتونه یې له پامه غورځوي. فعاله ماده داسې ناخالصي وه چې هېچا نه وه پېژندلې، او لومړي کس چې رنګ یې په قصدي ډول تولید کړ، دا کار یې د یوې تکرارېدونکې تجربوي نسخې له مخې وکړ، نه د دې پوهې پر بنسټ چې نسخه څه کوي.

د 2011 دا دوه مقالې د مالاخوفسکي د لومړیتوب د دلایلو تر ټولو بشپړ خپور شوی بیان دی، او دواړه په PubMed کې په وړیا ډول لوستل کېدای شي: اوږده بیاکتنه په PMID 21235291 او ژوندلیکي مقاله په PMID 21660627. د بیاکتنې د PubMed ثبت د هغې په اړه یوه تبصره هم ښيي، چې د هماغه کال په وروستیو کې په هماغه ژورنال کې په 86(5):366 کې خپره شوې وه. دا پر ځای یادونه ده چې له خپرېدو سره سم یې دلایل په چاپي بڼه هم تر بحث لاندې راغلل.

دا اختلاف د کیمیا په اړه اختلاف نه دی. ټول اړوند کسان پر دې موافق دي چې ارغواني رنګ څه دی او کومې برخې یې تولیدوي. اختلاف پر دې دی چې لومړی څوک دې پایلې ته ورسېد، او دا چې ایا داسې تصادف چې هېچا نه شو تکرارولای، دې پایلې ته رسېدل ګڼل کېږي که نه.

وروستیو نومونو څه ورزیات کړل

که مالاخوفسکي لومړی ارغواني رنګ تولید کړ، نو ولې دا رنګوونکی د رومانوفسکي، رایټ او ګیمسا نومونه لري؟

ځکه هغه رنګوونکی چې د خپل جوړوونکي په لاس کې یو ځل کار وکړي، لا یو باوري ریجنټ نه دی. وروستي کارونه یو نازک او بې‌ثباته ګډ محلول په داسې څه بدل کړ چې په بل هېواد کې یو تخنیکر یې د سه‌شنبې په ورځ کارولای شو.

نوخت د استدلال له لارې دې پایلې ته ورسېد. کله چې یې له یوه ساده خنثی رنګوونکي څخه باوري پایله ترلاسه نه کړه، دې پایلې ته ورسېد چې ارغواني رنګ باید په مېتیلین بلو کې له داسې څه څخه راځي چې پخپله مېتیلین بلو نه دی، او د هغه په لټه کې شو. اونا لا مخکې لیدلي وو چې د مېتیلین بلو زاړه محلولونه د ماسټ حجرو دانه‌ګۍ سرې رنګوي، او وړاندیز یې کړی و چې د رنګوونکي د پخېدو پر مهال نوې ماده جوړېږي. برنتسن په 1885 کې ښودلې وه چې قلوي شرایط له مېتیلین بلو څخه مېتیل ګروپونه لرې کوي، او دا محصولات هغه څه دي چې اوس یې ازورونه بولو. نوخت فعاله برخه په کلوروفورم استخراج کړه او یوازې یې له مېتیلین بلو څخه سور رنګ بللای شوه؛ میخایلیس په 1901 کې ورته د ازور I نوم ورکړ. جېنر د چمتو کولو او کارولو ستونزه حل کړه. په مطلق مېتانول کې د مېتیلین بلو او ایوسین د رسوب بیا حل کولو یو واحد ثابت محلول ورکړ چې د رنګولو پر مهال یې د وینې نری پوړ هم تثبیتاوه، او په تودوخه د تثبیت اړتیا یې ختمه کړه. لیشمن او رویټر څو‌رنګیز شوی رنګوونکی له الکولي محلل سره ګډ کړ او هم ثبات او هم ارغواني رنګ یې ترلاسه کړ. رایټ په 65 °C کې د دولس ساعته انکیوبېشن او د لسو ورځو ولاړ پاتې کېدو پر ځای، په روان بخار کې یو ساعت وکاراوه. ګیمسا په بشپړه توګه پر تصادفي ډول پاخه شوي محلول له تکیې لاس واخیست، او په مېتانول کې یې له ګلیسرول سره د پېژندل شویو رنګوونکو اندازه شوي مقدارونه وکارول، څو محصول د استوايي سیمو تودوخه وزغمي. هغه هېڅکله دا خپاره نه کړل چې خالص مېتیلین ازور یې څنګه جوړاوه. هغه دا په لایپڅیګ کې د ډاکټر ګرېبلر پر لابراتوار وپلوره، چې هغه یې د ازور I په نوم بازار ته وړاندې کړ او ادعا یې کوله چې یوازې د دوی بڼه اصلي ګیمسا رنګوونکی دی.

د دې ازور د هویت په اړه لا هم بحث کېږي. ځینې باور لري چې دا یوازې څو‌رنګیز شوی مېتیلین بلو و، نور بیا وايي چې Azure B پکې ډېر و. ځواب له یوې جګړې څخه راووت. کله چې جرمني رنګوونکي نور نه ترلاسه کېدل، د متحده ایالاتو د عامې روغتیا د خدمت یوې ډلې، رالف لیلي له موریس رو او اېمي ویلکاکس سره، وموندله چې تر ټولو ښه رنګول له دریو بېلو شوو برخو څخه ترلاسه کېږي: نه بدل شوی مېتیلین بلو، د مېتیل ګروپونو تر لرې کېدو وروسته د هغه د تجزیې محصول Azure B، او ایوسین. Azure B د نه موندل کېدونکي ازور I ځای ونیو، او همدا درې برخې لا هم د هغه رنګوونکي بنسټ دي چې نن د ملاریا د تشخیص لپاره کارېږي.

دا چې دغه درې برخې پر سلایډ څنګه یو له بل سره تعامل کوي، یوه جلا کیمیاوي پوښتنه او د بلې پاڼې موضوع ده. د رومانوفسکي ډوله رنګوونکو د رنګوونکو نقشونه او کیمیا تشریح کوي چې Azure B او ایوسین هر یو څه کوي او ولې دواړه یوځای داسې رنګ تولیدوي چې هېڅ یو یې یوازې نه تولیدوي. د مایکروسکوپي او لابراتواري کارونو پاڼه عملي اړخ څېړي: یوه ځانګړې چمتو شوې نمونه څه ښيي، او څنګه وارزوئ چې یو ځانګړی محصول د هغې طریقې لپاره مناسب دی که نه چې تاسو یې کارول غواړئ.

د تاریخ هغه برخه چې لا هم اوسنی اهمیت لري

په دې کیسه کې یو جزئیات په 1902 کې هم پر خپل حقیقت پاتې و. شاوخوا پنځوس کاله، په نړۍ کې د ملاریا د معیاري رنګوونکي تر ټولو مهمه برخه یوه بې‌نومه ناخالصي وه. دا په تصادفي ډول موجوده وه، مقدار یې له یوه بوتل څخه بل ته توپیر درلود، د دې مودې په یوه برخه کې یې هویت سوداګریز راز و، او تر 1940مې لسیزې پورې یې د تناسب په اړه بحث کېده. هغه کسان چې دا رنګوونکی یې کاراوه، بې‌احتیاطه نه وو. دوی هېڅ لاره نه لرله چې پوه شي په بوتل کې څه دي.

د همدې ستونزې اوسنۍ بڼه داسې مشخصات دي چې د موادو یوازې یوه برخه بیانوي. له USP سره مطابقت هغه تر ټولو لوړې خالصتیا ته د رسېدو لاره ده چې بازار یې وړاندې کوي، ځکه دا د یوې واحدې اندازه‌ګیرۍ پر ځای یو بشپړ خپور شوی معیار دی: هویت، خالصتیا، د ازور رنګوونکو په ګډون عضوي ناخالصۍ، پاتې محللونه، عنصري ناخالصۍ، له سوځولو وروسته پاتې شوني، میکروبي حدونه او باکتریايي اندوټوکسینونه. Blupreme خپل مېتیلین بلو له یوه درمل جوړوونکي څخه ترلاسه کوي او د تحلیل بشپړ سند خپروي، څو د دې لړلیک هره برخه یوازې ادعا نه، بلکې وکتل شي. هغه سند چې د درنو فلزاتو پایله راپوروي او ورته له USP سره مطابقت وايي، د هغه بوتل نننی معادل دی چې پرې «پوخ شوی مېتیلین بلو» لیکل شوي وي: کېدای شي ښه ریجنټ وي، خو لیبل نه درته وايي چې دننه یې څه دي.