ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ରଞ୍ଜନ: ଏକ ଅଲଗା ରଞ୍ଜକ ଓ ଜୀବନ୍ତ କୋଷ ପଦ୍ଧତି

ଜଣେ ଶିକ୍ଷାର୍ଥୀ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଗଣନା ପାଇଁ ପ୍ରସ୍ତୁତି କରନ୍ତି, ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମଗାନ୍ତି, ତାହାକୁ ରକ୍ତ ସହିତ ମିଶାନ୍ତି ଏବଂ ପ୍ରାୟ କିଛି ଦେଖିପାରନ୍ତି ନାହିଁ। ଜଣେ ସହପାଠୀ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଲେଖାଥିବା ବୋତଲ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତି ଏବଂ କିଛି ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା ଭିତରେ ସ୍ପଷ୍ଟ ନୀଳ ତନ୍ତୁ ଦେଖନ୍ତି। ପ୍ରଥମ ଶିକ୍ଷାର୍ଥୀ ଭାବନ୍ତି ଯେ ଦ୍ୱିତୀୟ ବୋତଲର ରଞ୍ଜକ ଅଧିକ ସଦ୍ୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ କିମ୍ବା ଅଧିକ ସାନ୍ଦ୍ର। ଏହା ଦୁଇଟି ମଧ୍ୟରୁ କୌଣସିଟି ନୁହେଁ। ଏଥିରେ ଏକ ଭିନ୍ନ ଅଣୁ ରହିଛି।

ଏହି ବିଷୟରେ ଅଧିକାଂଶ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ପଛରେ ଏହି ଧାରଣାଗତ ଭୁଲ ରହିଛି। ନାମରୁ ଲାଗେ ଯେ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ହେଉଛି ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ଏକ ଉନ୍ନତ ବ୍ୟାଚ୍। କିନ୍ତୁ ରସାୟନ ତାହା କୁହେ ନାହିଁ। ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ N ଏକ ପୃଥକ ଫେନୋଥିଆଜିନ୍ ରଞ୍ଜକ, ଯାହାର ନିଜସ୍ୱ କଲର୍ ଇଣ୍ଡେକ୍ସ ସଂଖ୍ୟା, ନିଜସ୍ୱ ପ୍ରତିସ୍ଥାପନ ବିନ୍ୟାସ ଏବଂ ରକ୍ତବିଜ୍ଞାନରେ ନିଜସ୍ୱ ମାନକୀକୃତ ଭୂମିକା ଅଛି। ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟ ସ୍ପଷ୍ଟ ହୋଇଗଲେ ପଦ୍ଧତିର ଅବଶିଷ୍ଟ ଅଂଶ—ରଞ୍ଜନ ସମୟରେ କୋଷଗୁଡ଼ିକ କାହିଁକି ଜୀବନ୍ତ ରହିବା ଆବଶ୍ୟକ, କେଉଁ କୋଷକୁ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଭାବେ ଗଣନା କରାଯାଏ, ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡିର ସ୍ଥାନ କେଉଁଠି ଏବଂ ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁ କେବେ ପ୍ରସଙ୍ଗକୁ ଆସେ—ବୁଝିବା ସହଜ ହୁଏ।

ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଉତ୍ତର

ରକ୍ତବିଜ୍ଞାନରେ ବ୍ୟବହୃତ ଅଭିକର୍ମକ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ Nକୁ ସାଧାରଣତଃ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର PubChem ବିବରଣୀରେ ବେସିକ୍ ବ୍ଲୁ 24, C.I. 52030, CAS 1934-16-3, ସୂତ୍ର C18H22ClN3S ଭାବେ ଚିହ୍ନଟ କରାଯାଏ। ସାଧାରଣ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ହେଉଛି ଏହାର PubChem ବିବରଣୀରେ ଥିବା ମିଥିଲଥିଓନିନିୟମ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍, ବେସିକ୍ ବ୍ଲୁ 9, C.I. 52015, CAS 61-73-4, ସୂତ୍ର C16H18ClN3S। ଗଠନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ, ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ବଳୟ ସହିତ ଯୁକ୍ତ ଦୁଇଟି ମିଥାଇଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଏବଂ ଇଥାଇଲ୍‌ଆମିନୋ ପାର୍ଶ୍ୱଶୃଙ୍ଖଳ ଥାଏ; ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ଏହା ବଦଳରେ ଡାଇମିଥାଇଲ୍‌ଆମିନୋ ଗୋଷ୍ଠୀ ଥାଏ। ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟ ରଞ୍ଜନର ଆଚରଣ ବଦଳାଇଦିଏ। ରକ୍ତବିଜ୍ଞାନ ପାଠ୍ୟପୁସ୍ତକରେ ସାଧାରଣ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ତୁଳନାତ୍ମକ ଭାବେ ଦୁର୍ବଳ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ରଞ୍ଜକ ଏବଂ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ଅଧିକ ଗାଢ଼ ଓ ସମାନ ରଞ୍ଜନ ଦେଉଥିବା ରଞ୍ଜକ ଭାବେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଛି। ଏହି ତୁଳନା ScienceDirectର ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବିଷୟକ ପୃଷ୍ଠାରେ ସଂକ୍ଷେପରେ ଦିଆଯାଇଛି।

ହଁ, ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜକ। ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜନର ନୀତି ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ NCBI ସମୀକ୍ଷାରେ ଦିଆଯାଇଥିବା ସଂଜ୍ଞା ଅନୁସାରେ, ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜନର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ଶରୀରରୁ ବାହାର କରିବା ପରେ ଏବଂ ସ୍ଥିରୀକରଣ ପୂର୍ବରୁ ଜୀବନ୍ତ କୋଷକୁ ରଞ୍ଜିତ କରିବା। ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁ ଉଭୟ ଏହି ଶ୍ରେଣୀରେ ପଡ଼ନ୍ତି, ଏବଂ CLSI ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ମାନକରେ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବେ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜକ ଭାବେ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଛି। ଶିକ୍ଷାର୍ଥୀମାନେ ବେଳେବେଳେ ଏହାକୁ ସ୍ଥିରୀକୃତ ରକ୍ତପ୍ରଲେପର ରୋମାନୋଭ୍‌ସ୍କି ରଞ୍ଜନ ସହିତ ଏକାଠି ଭାବନ୍ତି। ସେହି ଧାରଣା ଏଠାରେ କାମ କରେ ନାହିଁ। ପ୍ରଥମେ ସ୍ଥିରୀକରଣ କଲେ ଏହି ପଦ୍ଧତି କାମ କରିବା ବନ୍ଦ କରିଦିଏ।

ସମାନ ନାମ ଥିବା ରଞ୍ଜକଗୁଡ଼ିକ ବିଷୟରେ ଜାଣୁଥିବା ପାଠକଙ୍କ ପାଇଁ, ମିଥାଇଲ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ତୁଳନା ଏକ ଋଣାୟନିକ ଟ୍ରାଇଆରିଲ୍‌ମିଥେନ୍ ରଞ୍ଜକ ଓ ଧନାୟନିକ ଫେନୋଥିଆଜିନ୍ ପରିବାର ମଧ୍ୟରେ ଥିବା ଭିନ୍ନ ଓ ବ୍ୟାପକ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ବିଷୟରେ ଆଲୋଚନା କରେ। ପରୀକ୍ଷାଗାର ରଞ୍ଜନର ସାରାଂଶ ସ୍ଥିରୀକୃତ ପ୍ରଲେପ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ କାର୍ଯ୍ୟର ସ୍ଥାନ ଦର୍ଶାଏ, ଏବଂ ରକ୍ତକଣିକାର ଆକୃତିବିଜ୍ଞାନ ମାର୍ଗଦର୍ଶିକା ବ୍ୟାପକ ପୃଥକୀକରଣମୂଳକ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନରେ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଆକଳନ କେଉଁଠି ରହେ ତାହା ଦର୍ଶାଏ।

କ୍ୟାଟାଲଗ୍ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଏକ ସତର୍କତା: CAS 6586-05-6 ଅଧୀନରେ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ଏକ ପୃଥକ ଜିଙ୍କ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ଦ୍ୱୈତ-ଲବଣ ରୂପ ରହିଛି। ତେଣୁ ପଦ୍ଧତି ବିଭାଗରେ କେବଳ ସାଧାରଣ ନାମ ନୁହେଁ, ଲବଣର ରୂପ ଓ ଯୋଗାଣକାରୀଙ୍କ ନାମ ମଧ୍ୟ ଉଲ୍ଲେଖ କରିବା ଉଚିତ।

ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜନ ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ କରେ

ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ହେଉଛି ଏକ ଅପରିପକ୍ୱ ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା, ଯାହାର କେନ୍ଦ୍ରକ ନାହିଁ କିନ୍ତୁ ଅବଶିଷ୍ଟ ରାଇବୋସୋମାଲ୍ RNA ରହିଛି। ରଞ୍ଜନ କରାଯାଇନଥିବା ଆର୍ଦ୍ର ପ୍ରସ୍ତୁତିରେ ସେହି RNA ଦୃଶ୍ୟମାନ ହୁଏ ନାହିଁ। ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜକ ଜୀବନ୍ତ କୋଷରେ ପ୍ରବେଶ କରେ ଏବଂ ସେହି RNAକୁ ଅବକ୍ଷେପିତ କିମ୍ବା ପୁଞ୍ଜୀଭୂତ କରି ନୀଳ କଣିକା ଓ ତନ୍ତୁରେ ପରିଣତ କରେ। ତୈଳ ନିମଜ୍ଜନରେ ଦେଖାଯାଉଥିବା ଜାଲିକା-ତନ୍ତୁମୟ ପଦାର୍ଥ ଏହା ହିଁ। ତେଣୁ ଏହି ଜାଲିକା ରଞ୍ଜନର ଏକ ଉତ୍ପାଦ, ରଙ୍ଗ ଅପେକ୍ଷାରେ ଥିବା ପୂର୍ବଗଠିତ ଢାଞ୍ଚା ନୁହେଁ। ଏହି କାରଣରୁ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍‌ର ଚଳକଗୁଡ଼ିକ—ରଞ୍ଜକର ସାନ୍ଦ୍ରତା, ବଫର୍, ରକ୍ତ ଓ ରଞ୍ଜକର ଅନୁପାତ, ତାପମାତ୍ରା, ସମୟ—ରଞ୍ଜକର ନାମ ପରି ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ।

ବ୍ୟବହାରିକ ଭାବେ ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି କାର୍ଯ୍ୟର କ୍ରମ କଡ଼ାକଡ଼ି ଭାବେ ପାଳନ କରିବା: ପ୍ରଥମେ ଜମାଟ ହେବାରୁ ରୋକାଯାଇଥିବା ରକ୍ତକୁ ରଞ୍ଜକ ସହିତ ମିଶାନ୍ତୁ, ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେଟ୍ କରନ୍ତୁ, ତା’ପରେ ପ୍ରଲେପ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରି ସ୍ଥିରୀକରଣ ଓ ପ୍ରତିରଞ୍ଜନ ବିନା ପରୀକ୍ଷା କରନ୍ତୁ। ରଞ୍ଜନ ପୂର୍ବରୁ ସ୍ଥିରୀକରଣ କଲେ, କିମ୍ବା ହାଲୁକା ତନ୍ତୁଗୁଡ଼ିକୁ ଢାଙ୍କିଦେଉଥିବା ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କଲେ, ଗଣନା ନିର୍ଭର କରୁଥିବା ସୂଚନା ନଷ୍ଟ ହୋଇଯାଏ।

ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସହିତ ଏକ ବ୍ୟବହାରଯୋଗ୍ୟ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍

କୌଣସି ଏକକ ସାର୍ବଜନୀନ ସୂତ୍ରୀକରଣ ନାହିଁ, ତେଣୁ ବ୍ୟବହୃତ ସୂତ୍ରୀକରଣକୁ ଉଲ୍ଲେଖ କରନ୍ତୁ। ତିନୋଟି ଲିପିବଦ୍ଧ ପ୍ରକାର ଏହାର ବିବିଧତା ଦର୍ଶାଏ।

ପାରମ୍ପରିକ ବ୍ରେକର୍ ପ୍ରକାରର ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ପୋଟାସିୟମ୍ ଅକ୍ସାଲେଟ୍ ସହିତ ପ୍ରାୟ 0.5 percent ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ। ଏହାକୁ ଭଲ ଭାବେ ମିଶାଯାଇଥିବା EDTA ରକ୍ତ ସହିତ ସମାନ ଆୟତନରେ ମିଶାଇ କକ୍ଷ ତାପମାତ୍ରାରେ ପ୍ରାୟ 10 ରୁ 15 minutes ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେଟ୍ କରାଯାଏ। ହାଲୁକା ଭାବେ ପୁନଃ ମିଶାଇବା ପରେ ପତଳା କୀଳାକାର ପ୍ରଲେପ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଏ, ପବନରେ ଶୁଖାଯାଏ ଏବଂ ସ୍ଥିରୀକରଣ ବିନା 100x ତୈଳ-ନିମଜ୍ଜନ ଅବ୍‌ଜେକ୍ଟିଭ୍ ଲେନ୍ସରେ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଏ। ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଗଣନା ପାଇଁ NCBI ପ୍ରକ୍ରିୟା ଏହି କାର୍ଯ୍ୟକ୍ରମ ଏବଂ ଏହା ସହିତ ବ୍ୟବହୃତ ଗଣନା ଫ୍ରେମ୍‌ର ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ।

ଡେସି ଓ ଲୁଇସ୍ ପ୍ରକାରରେ ସିଟ୍ରେଟ୍ ସାଲାଇନ୍‌ରେ 1.0 percent ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଏ। ଏହାକୁ 2 ରୁ 4 volumes ରକ୍ତ ସହିତ ମିଶାଇ ପ୍ରଲେପ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପୂର୍ବରୁ 37 Cରେ 15 ରୁ 20 minutes ରଖାଯାଏ। CLSI H44 ପ୍ରକ୍ରିୟାର ଏକ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ସମନ୍ୱୟ ପ୍ରୟୋଗରେ pH 7.4ର ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ବଫର୍‌ଯୁକ୍ତ ସାଲାଇନ୍‌ରେ ଅଧିକ ପତଳା 0.1 percent ଦ୍ରବଣ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହାକୁ 20 Cରେ 10 minutes ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେଟ୍ କରାଯାଇଥିଲା ଏବଂ ସ୍ଥିରୀକରଣ କରାଯାଇନଥିଲା। ଏହା 2026ର NMB ସମନ୍ୱୟ ଅଧ୍ୟୟନରେ ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି।

ସମସ୍ତ ପ୍ରକାରରେ ଗଣନା ନିୟମ ସମାନ। ଏକ କୋଷରେ ଅତିକମରେ ଦୁଇଟି ପୃଥକ ନୀଳ ରଞ୍ଜିତ କଣିକା କିମ୍ବା ତନ୍ତୁ ଖଣ୍ଡ ଥିଲେ ତାହାକୁ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଭାବେ ଗଣନା କରନ୍ତୁ; ଏହା ଏକକ ରଞ୍ଜକ ଜମାକୁ ବାଦ୍ ଦିଏ। ନିୟମିତ କାର୍ଯ୍ୟରେ ଅତିକମରେ 1,000 ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା ଗଣନା କରନ୍ତୁ ଏବଂ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍‌କୁ ଶତକଡ଼ା ଭାବେ ରିପୋର୍ଟ କରନ୍ତୁ। ଶତକଡ଼ା କମ୍ ଥିଲେ ପରିସଂଖ୍ୟାନ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଅଧିକ କୋଷ ଆବଶ୍ୟକ ହୁଏ। CLSI H44 ପଦ୍ଧତିର ଏକ ସମୀକ୍ଷା ଅନୁସାରେ, ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ପ୍ରାୟ 1 percent ଥିବାବେଳେ ଗଣନାର ଭିନ୍ନତାକୁ 5 percentକୁ ଆଣିବା ପାଇଁ ପ୍ରାୟ 4,400 କୋଷ ଆବଶ୍ୟକ। ଏହା De Gruyterରେ ଥିବା CLSI H44 ସମୀକ୍ଷାରେ ଉଲ୍ଲେଖ ଅଛି। ମିଲର୍ ଅକ୍ୟୁଲାର୍ ଡିସ୍କ ବଡ଼ ସଂଖ୍ୟାର ଗଣନାକୁ ବ୍ୟବହାରଯୋଗ୍ୟ କରେ। ରଞ୍ଜକକୁ ଛାଣନ୍ତୁ କିମ୍ବା ସଦ୍ୟ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତୁ, କାରଣ ଅବକ୍ଷେପ କଣିକାମୟ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତି ପରି ଦେଖାଯାଏ।

ସେହି ପ୍ରସ୍ତୁତିରେ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି

ସେହି ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ପ୍ରଲେପରେ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି ମଧ୍ୟ ଦେଖାଯାଇପାରେ। ଏଗୁଡ଼ିକ ଅବଶିଷ୍ଟ RNA ନୁହେଁ, ବରଂ ଜାରିତ ଓ ବିକୃତ ହିମୋଗ୍ଲୋବିନ୍‌ର ପୁଞ୍ଜ। ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପ୍ରସ୍ତୁତିରେ ଏଗୁଡ଼ିକ ଗୋଲାକାର ପିଣ୍ଡ ଭାବେ ଦେଖାଯାନ୍ତି, ପ୍ରାୟତଃ ଗୋଟିଏ ମାତ୍ର ଏବଂ କୋଷଝିଲ୍ଲୀ ନିକଟରେ ଥାନ୍ତି। ଜାଲିକା-ତନ୍ତୁମୟ ପଦାର୍ଥ ତୁଳନାରେ ଏଗୁଡ଼ିକ ହାଲୁକା ନୀଳ ରଙ୍ଗରେ ରଞ୍ଜିତ ହୁଅନ୍ତି। ସ୍ଥିରୀକରଣ ଓ ପ୍ରତିରଞ୍ଜନ ପରେ ଏଗୁଡ଼ିକ ଭଲ ଭାବେ ରହେ ନାହିଁ, ତେଣୁ ସ୍ଥିରୀକରଣ ହୋଇନଥିବା ପ୍ରଲେପ ପରୀକ୍ଷା କରନ୍ତୁ। ଏକ ସାମ୍ପ୍ରତିକ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍‌ରେ 20 microliters EDTA ରକ୍ତ ସହିତ 20 microliters 1 percent ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏବଂ 15 minutes ଇନ୍‌କ୍ୟୁବେସନ୍ ବ୍ୟବହାର କରି 250 ଲୋହିତ ରକ୍ତକଣିକା ମଧ୍ୟରେ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି ଥିବା କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ ଗଣନା କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ପ୍ରକ୍ରିୟା ତାହା ରିପୋର୍ଟ କରିଥିବା PMC ଅଧ୍ୟୟନରେ ଦିଆଯାଇଛି।

ଦୁଇଟି ପାର୍ଥକ୍ୟ ଭୁଲ ଚିହ୍ନଟକୁ ରୋକେ। ପ୍ରଥମତଃ, ScienceDirectର ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି ବିଷୟକ ପୃଷ୍ଠାରେ ଉଲ୍ଲେଖ ଥିବା ପରି, ମିଥାଇଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ଓ କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ତୁଳନାରେ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡିକୁ ଅଧିକ ଗାଢ଼ ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ କରନ୍ତି। ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ଓ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡିକୁ ଏକାଠି ଆକଳନ କଲେ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ସୁବିଧାଜନକ ପସନ୍ଦ, କିନ୍ତୁ କେବଳ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି ପାଇଁ ଏହା ସବୁଠାରୁ ତୀବ୍ର ରଞ୍ଜକ ନୁହେଁ। ଦ୍ୱିତୀୟତଃ, ଆଲ୍‌ଫା ଥାଲାସେମିଆ ଟ୍ରେଟ୍‌ରେ HbH ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତିଗୁଡ଼ିକ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜନ ପରେ କୋଷ ସାରା ଅନେକ ସୂକ୍ଷ୍ମ ବିନ୍ଦୁ ସୃଷ୍ଟି କରନ୍ତି, ଯେତେବେଳେ ପାରମ୍ପରିକ ହାଇନ୍ଜ୍ ବଡି ସଂଖ୍ୟାରେ କମ୍, ଆକାରରେ ବଡ଼ ଏବଂ ପ୍ରାୟତଃ କୋଷଝିଲ୍ଲୀ ସହିତ ସମ୍ବନ୍ଧିତ ଥାନ୍ତି। ରଞ୍ଜକ ଜମା ତୃତୀୟ ସଦୃଶ ଦୃଶ୍ୟ: ଏହା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ଫୋକାଲ୍ ତଳ ବାହାରେ ଥାଏ ଏବଂ ଦୃଶ୍ୟକ୍ଷେତ୍ର ଅନୁସାରେ ବଦଳେ।

ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ତୁଳନା

ଉଭୟ ରଞ୍ଜକ ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ପାଇଁ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ରଞ୍ଜକ, କିନ୍ତୁ ମାନକୀକରଣରେ ସେଥିରୁ ଗୋଟିଏକୁ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ଦିଆଯାଏ। ରକ୍ତବିଜ୍ଞାନର ମାନକୀକରଣ ପାଇଁ ଆନ୍ତର୍ଜାତୀୟ ପରିଷଦ ସହିତ ମିଳିତ ଭାବେ ବିକଶିତ ଏବଂ CLSI H44 ମାନକ ପୃଷ୍ଠାରେ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ CLSI H44-A2 ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍ ପଦ୍ଧତି, EDTA ରକ୍ତର ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରଞ୍ଜନକୁ ହସ୍ତଚାଳିତ ତୁଳନାତ୍ମକ ପଦ୍ଧତି ଭାବେ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରେ। ଦୃଶ୍ୟରୂପ ବିଷୟରେ ପାରମ୍ପରିକ ରକ୍ତବିଜ୍ଞାନ ଶିକ୍ଷା ମଧ୍ୟ ସହମତ: ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ତନ୍ତୁଗୁଡ଼ିକୁ ଅଧିକ ଗାଢ଼ ଓ ସମାନ ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ କରେ, ଯେତେବେଳେ ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁରେ ବ୍ୟାଚ୍ ଓ ନମୁନା ମଧ୍ୟରେ ଅଧିକ ଭିନ୍ନତା ଦେଖାଯାଏ।

ସେହି ମାନ୍ୟତା ସହିତ ଏକ ସୀମାବଦ୍ଧତା ମଧ୍ୟ ଉଲ୍ଲେଖ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ। ICSH ବିଶ୍ଳେଷକ ମୂଲ୍ୟାଙ୍କନ ନିର୍ଦ୍ଦେଶିକା ହସ୍ତଚାଳିତ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣକୁ ଏକ ସନ୍ଦର୍ଭ ତୁଳନା ପଦ୍ଧତି ଭାବେ ଗ୍ରହଣ କରେ, କିନ୍ତୁ ଏହାକୁ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷକଙ୍କ ବିଚାର ଉପରେ ନିର୍ଭରଶୀଳ ଏବଂ ତୁଳନାତ୍ମକ ଭାବେ କମ୍ ପରିଶୁଦ୍ଧ ବୋଲି କୁହେ। ଯେଉଁଠି ଉପଲବ୍ଧ, ସେଠି ଫ୍ଲୋ ସାଇଟୋମେଟ୍ରିକ୍ ସନ୍ଦର୍ଭ ପ୍ରକ୍ରିୟାକୁ ପ୍ରାଧାନ୍ୟ ଦିଆଯାଏ। 2022ରେ 100 ନମୁନାର ଏକ ତୁଳନାରେ ଅଧ୍ୟୟନର ବିଶ୍ଳେଷକ ସହିତ ତୁଳନା କଲେ ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଅପେକ୍ଷା ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁରେ କମ୍ ବ୍ୟବସ୍ଥିତ ବିଚ୍ୟୁତି ମିଳିଥିଲା। ଏହା ରଞ୍ଜନ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକର PMC ତୁଳନାରେ ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଇଛି। ଶିକ୍ଷାର୍ଥୀଙ୍କ ପାଇଁ ଯୁକ୍ତିସଙ୍ଗତ ସାରାଂଶ ହେଉଛି: ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ମାନକୀକୃତ ହସ୍ତଚାଳିତ ତୁଳନା ମାନଦଣ୍ଡ ଭାବେ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ସ୍ଥାନୀୟ ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ କ୍ରେସିଲ୍ ବ୍ଲୁ ପଦ୍ଧତିକୁ ଏହା କିମ୍ବା ସ୍ୱୟଂଚାଳିତ ପଦ୍ଧତି ସହିତ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ, ଏବଂ ଯେକୌଣସି ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କଲେ ମଧ୍ୟ ହସ୍ତଚାଳିତ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣରେ ଫଳାଫଳର ଅଧିକ ବିକିରଣ ଆଶା କରନ୍ତୁ। ପୁରୁଣା ମାନକୀକରଣ ସାହିତ୍ୟରେ ମଧ୍ୟ ବାଣିଜ୍ୟିକ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟାଚ୍‌ଗୁଡ଼ିକରେ ଭିନ୍ନତା ଥିବାରୁ ଶୁଦ୍ଧିକୃତ Azure Bକୁ ରାସାୟନିକ ଭାବେ ଅଧିକ ଶୁଦ୍ଧ ବିକଳ୍ପ ଭାବେ ସମର୍ଥନ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହା Azure B ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ମାର୍ଶାଲ୍ ଅଧ୍ୟୟନରେ ଦିଆଯାଇଛି, ଯାହା ପଦ୍ଧତି ଆଲୋଚନାରେ ଅଭିକର୍ମକର ଗ୍ରେଡ୍ କାହିଁକି ଏବେ ମଧ୍ୟ ଉଲ୍ଲେଖ ହୁଏ ତାହା ବୁଝାଏ।

ସାଧାରଣ ଭୁଲଗୁଡ଼ିକୁ ଏଡ଼ାଇବା

ଅଧିକାଂଶ ବିଫଳ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପାଇଁ ଚାରୋଟି ଭୁଲ ଦାୟୀ। ନ୍ୟୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ N ବଦଳରେ ସାଧାରଣ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମଗାଇଲେ ରାସାୟନିକ କାରଣରୁ ଦୁର୍ବଳ ରଞ୍ଜନ ହୁଏ, ପ୍ରୟୋଗ କୌଶଳ କାରଣରୁ ନୁହେଁ। ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ପୂର୍ବରୁ ସ୍ଥିରୀକରଣ କିମ୍ବା ପ୍ରତିରଞ୍ଜନ କଲେ ସୁପ୍ରାଭାଇଟାଲ୍ ସଙ୍କେତ ହଟିଯାଏ। ରଞ୍ଜକ ଅବକ୍ଷେପକୁ କଣିକା ଭାବେ ଗଣନା କଲେ ଫଳାଫଳ ଅଧିକ ହୋଇଯାଏ; ଦୁଇ-କଣିକା ନିୟମ ଓ ଛଣାଯାଇଥିବା ରଞ୍ଜକ ଏହାକୁ ରୋକନ୍ତି। ରେଟିକୁଲୋସାଇଟ୍‌ର ଶତକଡ଼ା କମ୍ ଥିବାବେଳେ ଅତ୍ୟଳ୍ପ କୋଷ ଗଣନା କଲେ ଏକ ସଂଖ୍ୟା ମିଳେ ଯାହା ପରିଶୁଦ୍ଧ ଦେଖାଯାଏ, କିନ୍ତୁ ତାହାର ବିଶ୍ୱାସ ସୀମା ବ୍ୟାପକ ଥାଏ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଭୁଲର ଲକ୍ଷଣ ସମାନ: ଅଭିକର୍ମକ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ ନିର୍ଣ୍ଣୟ ହୋଇଯାଇଥିବା ଫଳାଫଳ ପାଇଁ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣକାରୀ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ଯନ୍ତ୍ରକୁ ଦୋଷ ଦିଅନ୍ତି।