ପ୍ରବନ୍ଧ
ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସରଳ ରଞ୍ଜନ ବନାମ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ: ପ୍ରତ୍ୟେକ ପଦ୍ଧତି କ’ଣ ପ୍ରମାଣ କରିପାରେ

ଜଣେ ଛାତ୍ର E. coli ଲେବଲ୍ ଥିବା ଏକ କଲ୍ଚର୍ରୁ ସ୍ମିୟର୍ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରେ, ତାହାକୁ ଏକ ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ପୂରା ଢାଙ୍କେ, ଧୋଇଦିଏ ଏବଂ ତେଲ-ନିମଜ୍ଜନ ଲେନ୍ସ ଦେଇ ଦେଖେ। ଦୃଶ୍ୟକ୍ଷେତ୍ରରେ ନୀଳ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ଭରି ରହିଛି। ପରୀକ୍ଷାଗାର ରିପୋର୍ଟରେ ଲେଖାଯାଏ: "ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷଗୁଡ଼ିକୁ E. coli ଭାବେ ଚିହ୍ନଟ କରାଗଲା।" ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣଟି ଠିକ୍। କିନ୍ତୁ ସେହି ସ୍ଲାଇଡ୍ ଏହି ନିଷ୍କର୍ଷ ପାଇଁ ପ୍ରମାଣ ଦିଏ ନାହିଁ।
ଭୁଲଟି ଧାରଣାଗତ, ପ୍ରାୟୋଗିକ ନୁହେଁ। ଛାତ୍ରଜଣକ ସରଳ ରଞ୍ଜନକୁ ଏକ ବିଭେଦକ ପରୀକ୍ଷା ଭାବେ ଧରିନେଲେ। ସରଳ ରଞ୍ଜନ ଓ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ଭିନ୍ନ ପ୍ରଶ୍ନର ଉତ୍ତର ଦିଅନ୍ତି, କାରଣ ସେଗୁଡ଼ିକ ଭିନ୍ନ ରଞ୍ଜନ ଧାରଣା ଉପରେ ଆଧାରିତ। ଗୋଟିଏ ପଚାରେ: କେଉଁ ଆକୃତି ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି। ଅନ୍ୟଟି ପଚାରେ: ପରୀକ୍ଷାମୂଳକ ପ୍ରକ୍ରିୟାର ସମ୍ମୁଖୀନ ହେଲେ କୋଷଭିତ୍ତି କିପରି ଆଚରଣ କରେ। ଏହି ଦୁଇଟିକୁ ଗୋଳାଇଦେଲେ, ଠିକ୍ ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ ସ୍ଲାଇଡ୍ରୁ ମଧ୍ୟ ଏକ ଅସମର୍ଥିତ ରିପୋର୍ଟ ତିଆରି ହୁଏ।
ଏହି ତୁଳନା ଦୁଇ ପଦ୍ଧତିକୁ ପୃଥକ ରଖେ, ପ୍ରତ୍ୟେକ ଫଳାଫଳ ଆଧାରରେ ଆପଣ କ’ଣ ଦାବି କରିପାରିବେ ତାହା ଦେଖାଏ, ଏବଂ ଛାତ୍ରମାନେ ସବୁଠାରୁ ବେଶି ପଚାରୁଥିବା ଦୁଇଟି ପ୍ରଶ୍ନର ଉତ୍ତର ଦିଏ: ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ କି, ଏବଂ E. coli ର ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରଞ୍ଜନ ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ ଦେଖାଏ।

ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଉତ୍ତର
ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସରଳ ରଞ୍ଜନରେ ରଞ୍ଜିତ ହୋଇପାରୁଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ କୋଷ ସମାନ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ନିଏ। ତେଣୁ ଏହା ଆକୃତି (ଦଣ୍ଡାକାର, ଗୋଲାକାର, ସର୍ପିଳ) ଓ ବିନ୍ୟାସ (ଏକକ, ଯୋଡ଼ି, ଶୃଙ୍ଖଳ) ଦେଖାଏ, କିନ୍ତୁ ଗ୍ରାମ୍ ବର୍ଗ ବିଷୟରେ କିଛି ଦେଖାଏ ନାହିଁ। ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନରେ ଆୟୋଡିନ୍, ଏକ ବିବର୍ଣ୍ଣୀକରଣ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଓ ଏକ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ଯୋଡ଼ାଯାଏ। ତେଣୁ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆର କୋଷ ଆବରଣ ରଞ୍ଜକକୁ କିପରି ଧରିରଖେ, ତାହା ଆଧାରରେ ସେଗୁଡ଼ିକୁ ଗ୍ରାମ୍-ଧନାତ୍ମକ (ବାଇଗଣୀ) ଓ ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ (ଗୋଲାପୀ କିମ୍ବା ଲାଲ୍) ଭାବେ ପୃଥକ କରେ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପରେ ନୀଳ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷର ଅର୍ଥ ହେଉଛି "ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି।" ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ କ୍ରମ ପରେ ଗୋଲାପୀ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷର ଅର୍ଥ ହେଉଛି "ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ଉପସ୍ଥିତ ଅଛି।" ଦ୍ୱିତୀୟ ବକ୍ତବ୍ୟଟି ଅଧିକ ପ୍ରମାଣସମର୍ଥିତ, କାରଣ ସେହି ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ଏକ ଅତିରିକ୍ତ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇଛି।
ଏହି ଲେଖା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ ହୋଇଥିବା ଏକକ-ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ପଦ୍ଧତିଗୁଡ଼ିକର ବିସ୍ତୃତ ସମୂହ ବିଷୟରେ ଜାଣିବା ପାଇଁ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ରଞ୍ଜନ ଆଟଲାସ୍ ଦେଖନ୍ତୁ।
ସରଳ ରଞ୍ଜନ: ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ, ଗୋଟିଏ ପ୍ରଶ୍ନ
ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ କ୍ଷାରୀୟ (ଧନାୟନିକ) ରଞ୍ଜକ। ଏହାର ରଙ୍ଗିନ ଆୟନରେ ଧନାତ୍ମକ ଆବେଶ ଥାଏ ଏବଂ ଏହା କୋଷର ଋଣାତ୍ମକ ଆବେଶଯୁକ୍ତ ସଂରଚନା ସହ ବାନ୍ଧି ହୁଏ। ଏଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଆମ୍ଳ ଓ ପୃଷ୍ଠରେ ଥିବା ଅମ୍ଳୀୟ ଗୋଷ୍ଠୀ ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ। ତେଣୁ ଫିକା ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ନୀଳ ଦେଖାଯାଏ। OpenStax ଏହାର ରଞ୍ଜନ ଅଧ୍ୟାୟରେ ଏହି ଧନାତ୍ମକ ରଞ୍ଜନ ନୀତି ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ। ରଞ୍ଜକ ଧନାୟନଟି ନିଜେ ହେଉଛି ଏକ ଛୋଟ, ସମତଳ ଫେନୋଥିଆଜିନ୍ ଆୟନ, ଯାହାର ବିବରଣୀ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରସାୟନ ସନ୍ଦର୍ଭରେ ଦିଆଯାଇଛି; କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ପ୍ରତିଆୟନ ରଙ୍ଗ ଦିଏ ନାହିଁ।
ଏକ ମାନକ ଶିକ୍ଷଣ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଜାଣିଶୁଣି ସରଳ ରଖାଯାଇଛି: ଏକ ପତଳା ସ୍ମିୟର୍ ତିଆରି କରନ୍ତୁ, ବାୟୁରେ ଶୁଖାନ୍ତୁ, ତାପ ଦେଇ ସ୍ଥିର କରନ୍ତୁ, ପ୍ରାୟ ଏକ ମିନିଟ୍ ପାଇଁ ପ୍ରାୟ 1% ଜଳୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ପୂରା ଢାଙ୍କନ୍ତୁ, ପାଣିରେ ଧୀରେ ଧୋଇଦିଅନ୍ତୁ, ଶୋଷକ କାଗଜରେ ହାଲୁକା ଚାପ ଦେଇ ଶୁଖାନ୍ତୁ ଏବଂ ତେଲ-ନିମଜ୍ଜନ ପଦ୍ଧତିରେ ପରୀକ୍ଷା କରନ୍ତୁ। LibreTexts ର ଏକ ଶିକ୍ଷଣ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଠିକ୍ ଏହି 1%, ଏକ-ମିନିଟ୍ ପଦ୍ଧତି ଦିଏ, ଏବଂ କେତେକ ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ସମୟ ବଢ଼ାଯାଏ ବୋଲି ମଧ୍ୟ ଉଲ୍ଲେଖ କରେ। କୌଣସି ରଙ୍ଗବନ୍ଧକ ନାହିଁ, ବିବର୍ଣ୍ଣକ ନାହିଁ, ଦ୍ୱିତୀୟ ରଞ୍ଜକ ନାହିଁ। ଏହି ଅନୁପସ୍ଥିତି ହିଁ ମୂଳ କଥା। କେବଳ ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ ଥିବା ଏବଂ ଚୟନାତ୍ମକ ଭାବେ ରଞ୍ଜକ ହଟାଯାଉନଥିବାରୁ, ରଞ୍ଜକକୁ ବାନ୍ଧି ରଖୁଥିବା ପ୍ରତ୍ୟେକ କୋଷ ଶେଷରେ ସମାନ ରଙ୍ଗ ନିଏ।
E. coli କ୍ଷେତ୍ରରେ ଆଶା କରାଯାଉଥିବା ଦୃଶ୍ୟ ହେଉଛି ନୀଳ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ (ବାସିଲାଇ), ଯାହା ଏକକ ଭାବେ, ଯୋଡ଼ିରେ କିମ୍ବା ଛୋଟ ଗୋଷ୍ଠୀରେ ଥାଏ। ନୀଳ ରଙ୍ଗ ରଞ୍ଜକରୁ ଆସେ। ଦଣ୍ଡାକାର ଆକୃତି ଜୀବର ନିଜସ୍ୱ ଗୁଣ। କିନ୍ତୁ ଏହି ଦୁଇଟିର ମିଳିତ ଉପସ୍ଥିତି ଜୀବକୁ ଚିହ୍ନଟ କରେ ନାହିଁ, କାରଣ ଅନେକ ପ୍ରଜାତି ଦଣ୍ଡାକାର ଏବଂ ସରଳ ରଞ୍ଜନରେ ଅନେକ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ନିଅନ୍ତି। ATCC ଏହାର ଅଣୁଜୀବବିଜ୍ଞାନ କଲ୍ଚର୍ ମାର୍ଗଦର୍ଶିକାରେ କେବଳ ଆକୃତି ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ ସୀମିତ ଏହି ନିଷ୍କର୍ଷକୁ ସ୍ପଷ୍ଟ କରେ। ଠିକ୍ ରିପୋର୍ଟ ହେଉଛି: "ନୀଳ ବାସିଲାଇ ଦେଖାଗଲା।" ଆକୃତି ଓ ବିନ୍ୟାସଠାରୁ ଆଗକୁ କିଛି କହିବା ପାଇଁ ଅଧିକ ପ୍ରମାଣ ଦରକାର।
ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ: ଚାରୋଟି ଅଭିକାରକ, ଗୋଟିଏ ଆଚରଣ ପରୀକ୍ଷା
ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ଏକ ବିଭେଦକ ରଞ୍ଜନ। ଏଥିରେ ସମସ୍ତ କୋଷକୁ ଏକେ କ୍ରମର ପ୍ରକ୍ରିୟା ମଧ୍ୟ ଦେଇ ନିଆଯାଏ ଏବଂ କେଉଁ କୋଷ ପ୍ରଥମ ରଞ୍ଜକକୁ ଧରିରଖେ ଓ କେଉଁ କୋଷ ତାହା ହରାଏ, ଦେଖାଯାଏ। American Society for Microbiology ର ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ଗୁଡ଼ିକ ମାନକ ଚାରି-ପର୍ଯ୍ୟାୟ କ୍ରମ ନିର୍ଦ୍ଧାରଣ କରେ: କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ (ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକ), ଗ୍ରାମ୍ ଆୟୋଡିନ୍ (ରଙ୍ଗବନ୍ଧକ), ଆଲକୋହଲ୍ କିମ୍ବା ଏସିଟୋନ୍-ଆଲକୋହଲ୍ (ବିବର୍ଣ୍ଣକ), ତା’ପରେ ସାଫ୍ରାନିନ୍ (ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ)।
| ପର୍ଯ୍ୟାୟ | ଅଭିକାରକ | କାର୍ଯ୍ୟ | ଗ୍ରାମ୍-ଧନାତ୍ମକ ଫଳାଫଳ | ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ ଫଳାଫଳ |
|---|---|---|---|---|
| 1 | କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ | ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକ, ସମସ୍ତ କୋଷକୁ ବାଇଗଣୀ କରେ | ବାଇଗଣୀ | ବାଇଗଣୀ |
| 2 | ଗ୍ରାମ୍ ଆୟୋଡିନ୍ | ରଙ୍ଗବନ୍ଧକ, କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ସହ ଏକ ଜଟିଳ ଯୌଗିକ ତିଆରି କରେ | ବାଇଗଣୀ | ବାଇଗଣୀ |
| 3 | ବିବର୍ଣ୍ଣକ | ଜଟିଳ ଯୌଗିକକୁ ଚୟନାତ୍ମକ ଭାବେ ହଟାଏ | ବାଇଗଣୀ ରହେ | ରଙ୍ଗହୀନ ହୁଏ |
| 4 | ସାଫ୍ରାନିନ୍ | ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ, ବିବର୍ଣ୍ଣୀକୃତ କୋଷକୁ ରଙ୍ଗ ଦିଏ | ବାଇଗଣୀ ରହେ | ଗୋଲାପୀ କିମ୍ବା ଲାଲ୍ |
ମାନକ ଶିକ୍ଷଣ ମଡେଲ୍ ଏହି ପୃଥକୀକରଣକୁ କୋଷ ଆବରଣର ଗଠନ ଆଧାରରେ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ। ଗ୍ରାମ୍-ଧନାତ୍ମକ କୋଷରେ ଏକ ମୋଟା ପେପ୍ଟିଡୋଗ୍ଲାଇକାନ୍ ଭିତ୍ତି ଥାଏ, ଯାହା ଆଲକୋହଲ୍ରେ ଧୋଇବା ସମୟରେ ଜଳ ହରାଏ ଏବଂ କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍-ଆୟୋଡିନ୍ ଜଟିଳ ଯୌଗିକକୁ ଧରିରଖେ। ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ କୋଷରେ ଏକ ପତଳା ପେପ୍ଟିଡୋଗ୍ଲାଇକାନ୍ ସ୍ତର ସହ ଏକ ଲିପିଡ୍-ସମୃଦ୍ଧ ବାହ୍ୟ ଝିଲ୍ଲୀ ଥାଏ, ଯାହାକୁ ବିବର୍ଣ୍ଣକ ଭାଙ୍ଗିଦିଏ। ତେଣୁ ଜଟିଳ ଯୌଗିକ ଧୋଇ ହୋଇ ବାହାରିଯାଏ ଏବଂ ତା’ପରେ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ସାଫ୍ରାନିନ୍ ଗ୍ରହଣ କରନ୍ତି। NCBI Bookshelf ର ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ସମୀକ୍ଷା ଏହି କୋଷଭିତ୍ତିଭିତ୍ତିକ ବ୍ୟାଖ୍ୟା ଦିଏ। ବିଶେଷଜ୍ଞମାନେ ଯୋଗ କରନ୍ତି ଯେ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭୌତ-ରାସାୟନିକ ପ୍ରକ୍ରିୟା କେବଳ ଭିତ୍ତିର ମୋଟାପଣଠାରୁ ଅଧିକ ଜଟିଳ। ତଥାପି, ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ଫଳାଫଳ ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରିବା ପାଇଁ ଆଚରଣଭିତ୍ତିକ ନିୟମଟି ଲାଗୁ ହୁଏ: ବାଇଗଣୀର ଅର୍ଥ ପ୍ରଥମ ରଞ୍ଜକ ରହିଛି, ଗୋଲାପୀର ଅର୍ଥ ତାହା ହଟିଛି ଏବଂ ପରେ ପ୍ରତିରଞ୍ଜନ ହୋଇଛି।

ଚିତ୍ରାତ୍ମକ ପ୍ୟାନେଲ୍। ପଦ୍ଧତି ତୁଳନା ପାଇଁ ଶୈଳୀକୃତ ଅଙ୍କନ, କ୍ୟାମେରାରେ ନିଆଯାଇଥିବା ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ଫଟୋ ନୁହେଁ। ନୀତିଟି ବୁଝାଇବା ପାଇଁ ରଙ୍ଗଗୁଡ଼ିକୁ ସରଳ କରାଯାଇଛି: ସରଳ ରଞ୍ଜନରେ ଗୋଟିଏ ରଙ୍ଗ, ଗ୍ରାମ୍ ବିବର୍ଣ୍ଣୀକରଣ ପରେ ଦୁଇଟି ରଙ୍ଗ।
ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ କି
ଏହି ପ୍ରଶ୍ନର ଦୁଇଟି ଅର୍ଥ ହୋଇପାରେ, ଏବଂ ସେଗୁଡ଼ିକ ପାଇଁ ଭିନ୍ନ ଉତ୍ତର ଦରକାର।
ପ୍ରଥମ ଅର୍ଥ: କେବଳ ଥରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ଢାଙ୍କିଦେବା ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ କ୍ରମର ବିକଳ୍ପ ହୋଇପାରିବ କି। ନା। ଆୟୋଡିନ୍, ବିବର୍ଣ୍ଣକ ଓ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ବିନା କୌଣସି ବିଭେଦକ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ନାହିଁ, ତେଣୁ କୌଣସି ଗ୍ରାମ୍ ବର୍ଗ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଏ ନାହିଁ। କେବଳ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପରେ ମିଳୁଥିବା ନୀଳ ଦୃଶ୍ୟକ୍ଷେତ୍ର ଏକ ସରଳ ରଞ୍ଜନ ଫଳାଫଳ, ବୋତଲଟି ଗ୍ରାମ୍ ଅଭିକାରକ ପାଖରେ ରଖାଯାଇଥିଲେ ମଧ୍ୟ। ଏହାକୁ ଗ୍ରାମ୍ ଫଳାଫଳ ଭାବେ ଲିପିବଦ୍ଧ କରନ୍ତୁ ନାହିଁ।
ଦ୍ୱିତୀୟ ଅର୍ଥ: ପର୍ଯ୍ୟାୟ 4 ରେ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ଭାବେ ସାଫ୍ରାନିନ୍ ବଦଳରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇପାରିବ କି। କାର୍ଯ୍ୟଗତ ଭାବେ ଏହା ବିବର୍ଣ୍ଣୀକୃତ କୋଷକୁ ରଙ୍ଗ ଦେଇପାରେ, ଏବଂ ପାଠ୍ୟପୁସ୍ତକର ଏକ ଅଭ୍ୟାସ ଅନୁସାରେ ଏପରି ବଦଳ ପରେ ଗ୍ରାମ୍-ଧନାତ୍ମକ କୋଷ ବାଇଗଣୀ ଓ ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ କୋଷ ନୀଳ ହେବା ଆଶା କରାଯାଏ। ଏହି ଯୁକ୍ତି ଠିକ୍, କାରଣ ସଠିକ୍ ଭାବେ ବିବର୍ଣ୍ଣୀକୃତ ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ କୋଷ ପ୍ରାୟ ରଙ୍ଗହୀନ ଥାଏ ଏବଂ ଅନ୍ୟ ଏକ ଧନାୟନିକ ରଞ୍ଜକ ଗ୍ରହଣ କରିବ। କିନ୍ତୁ ଏହା ମାନକ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ନୁହେଁ। ASM ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ଗୁଡ଼ିକ ସାଫ୍ରାନିନ୍ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରନ୍ତି, ଏବଂ କେତେକ ରୂପାନ୍ତରରେ କ୍ଷାରୀୟ ଫୁକ୍ସିନ୍ ପରି ସ୍ୱୀକୃତ ବିକଳ୍ପ ଥାଏ, ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ନୁହେଁ। ଏହାର ଏକ ବ୍ୟବହାରିକ ଅସୁବିଧା ମଧ୍ୟ ଅଛି: ବାଇଗଣୀ ସହ ନୀଳକୁ ପୃଥକ କରିବା, ବାଇଗଣୀ ସହ ଗୋଲାପୀକୁ ପୃଥକ କରିବାଠାରୁ କଠିନ। ବିଶେଷକରି ନୂଆ ଶିକ୍ଷାର୍ଥୀଙ୍କ ପାଇଁ ଏବଂ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ଯନ୍ତ୍ରର ଦୁର୍ବଳ ଆଲୋକରେ ଏହା ଅଧିକ କଠିନ ହୁଏ। ପାଠ୍ୟକ୍ରମର କାମ ଏବଂ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଯେକୌଣସି ଫଳାଫଳ ପାଇଁ, ଆପଣଙ୍କ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ରେ ନାମିତ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ, ସାଧାରଣତଃ ସାଫ୍ରାନିନ୍। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପ୍ରତିରଞ୍ଜନକୁ ସମତୁଲ୍ୟ ମାନକ ଭାବେ ନୁହେଁ, ବରଂ ପ୍ରଦର୍ଶନ ପାଇଁ ଏକ ରୂପାନ୍ତର ଭାବେ ଧରନ୍ତୁ।
ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଅନ୍ୟ ଏକକ-ରଞ୍ଜକ ବିକଳ୍ପଗୁଡ଼ିକ ସହ କିପରି ତୁଳନୀୟ, ସେହି ସମ୍ପର୍କିତ ପ୍ରଶ୍ନ ସରଳ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ରଞ୍ଜନଗୁଡ଼ିକର ଏକ ତୁଳନାରେ ଆଲୋଚନା କରାଯାଇଛି।
E. coli ର ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରଞ୍ଜନ କ’ଣ ପ୍ରମାଣ କରେ ଏବଂ କ’ଣ କରେ ନାହିଁ
E. coli ଏକ ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ ଦଣ୍ଡାକାର ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ। କିନ୍ତୁ ଏହି ବାକ୍ୟରେ ଅନେକ ପଦ୍ଧତିରୁ ମିଳିଥିବା ତଥ୍ୟ ଏକାଠି ରହିଛି: ଅଣୁବୀକ୍ଷଣରୁ ଆକୃତି, ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନରୁ ଗ୍ରାମ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା, ଏବଂ କଲ୍ଚର୍ ସହ ଜୈବରାସାୟନିକ କିମ୍ବା ଆଣବିକ ପରୀକ୍ଷାରୁ ପରିଚୟ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସ୍ମିୟର୍ କେବଳ ପ୍ରଥମ ଅଂଶଟି ଦିଏ। ଏହା ରଞ୍ଜିତ ନମୁନାରେ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ଅଛି ବୋଲି ଏବଂ ସେଗୁଡ଼ିକ କିପରି ବିନ୍ୟାସିତ ହୋଇଛି ବୋଲି ସ୍ଥାପିତ କରେ। ଏହା ଗ୍ରାମ୍ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସ୍ଥାପିତ କରେ ନାହିଁ, କାରଣ କୌଣସି ବିବର୍ଣ୍ଣୀକରଣ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇନାହିଁ। ଏହା ପ୍ରଜାତି ଚିହ୍ନଟ କରେ ନାହିଁ, କାରଣ ଏହି ବିଭେଦନ କ୍ଷମତାରେ ଅନେକ ପ୍ରଜାତିର ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ସମାନ ଦେଖାଯାନ୍ତି।
ଏଠାରେ ରିପୋର୍ଟଗୁଡ଼ିକ ଏକ ପୂର୍ବାନୁମାନଯୋଗ୍ୟ ଢଙ୍ଗରେ ଭୁଲ୍ ହୁଏ। ଲେଖକ ପୂର୍ବରୁ ଜଣାଥିବା ତଥ୍ୟକୁ ("ଏହି କଲ୍ଚର୍ E. coli ହେବା କଥା, ଏବଂ E. coli ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ") ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ଧାଡ଼ିରେ ମିଶାଇଦିଅନ୍ତି। ତେଣୁ ଯାହା ପ୍ରକୃତରେ ଧରିନିଆଯାଇଥିଲା, ସ୍ଲାଇଡ୍ ତାହାକୁ ନିଶ୍ଚିତ କରୁଥିବା ପରି ଦେଖାଯାଏ। ଅଧିକ ସ୍ପଷ୍ଟ ରିପୋର୍ଟ ଏହି ସ୍ତରଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ କରେ: "ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସରଳ ରଞ୍ଜନ: ନୀଳ ବାସିଲାଇ ଦେଖାଗଲା; କେବଳ ଆକୃତି, କୌଣସି ଗ୍ରାମ୍ ବର୍ଗ ପରୀକ୍ଷା କରାଯାଇନାହିଁ।" ତା’ପରେ, ଯଦି ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା ସହ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ଠିକ୍ ଭାବେ କରାଯାଇଥାଏ: "ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ: ଗୋଲାପୀ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ, ଗ୍ରାମ୍-ଋଣାତ୍ମକ ସହ ସଙ୍ଗତିପୂର୍ଣ୍ଣ।" ପ୍ରଜାତିର ପରିଚୟ ପରେ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରକ୍ରିୟାରୁ ମିଳେ, କେବଳ ରଙ୍ଗରୁ ନୁହେଁ।
ଫଳାଫଳ ବ୍ୟାଖ୍ୟା ପାଇଁ ଏକ ବ୍ୟବହାରିକ ମାର୍ଗଦର୍ଶିକା
ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ଏହି ନିଷ୍ପତ୍ତି ନିୟମ ବ୍ୟବହାର କରନ୍ତୁ। ଯଦି ସମସ୍ତ କୋଷ ଗୋଟିଏ ରଙ୍ଗର ଏବଂ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ରେ ବିବର୍ଣ୍ଣକ ବିନା ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର ହୋଇଛି, ତେବେ ଆପଣ ସରଳ ରଞ୍ଜନ କରିଛନ୍ତି। ଆକୃତି, ଆକାରର ଆନୁମାନିକ ମାପ ଓ ବିନ୍ୟାସ ରିପୋର୍ଟ କରନ୍ତୁ। ସେତିକିରେ ରୁହନ୍ତୁ। ଯଦି ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ରେ ଜଣାଶୁଣା ଧନାତ୍ମକ ଓ ଋଣାତ୍ମକ ନିୟନ୍ତ୍ରଣ ନମୁନା ସହ କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍, ଆୟୋଡିନ୍, ବିବର୍ଣ୍ଣକ ଓ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର ହୋଇଛି, ତେବେ ଆପଣ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ କରିଛନ୍ତି। ରଙ୍ଗ ସହ ଆକୃତି ରିପୋର୍ଟ କରନ୍ତୁ: ଶୃଙ୍ଖଳରେ ବାଇଗଣୀ ଗୋଲାକାର କୋଷ, ଗୋଲାପୀ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷ ଇତ୍ୟାଦି।
ଅଧିକାଂଶ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱର ମୂଳରେ ତିନୋଟି ଭୁଲ୍ ଥାଏ। ପ୍ରଥମଟି ହେଉଛି ନୀଳ ଦଣ୍ଡାକାର କୋଷକୁ ଅତିରିକ୍ତ ଅର୍ଥ ଦେଇ E. coli ର ନିଶ୍ଚିତ ପ୍ରମାଣ ଭାବେ ଧରିନେବା। ଦ୍ୱିତୀୟଟି ହେଉଛି ନୋଟବୁକ୍ରେ "ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ" ଶୀର୍ଷକ ତଳେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସ୍ଲାଇଡ୍ର ତଥ୍ୟ ଲେଖିବା, ଯାହାକୁ ପରବର୍ତ୍ତୀ ପାଠକମାନେ ଭୁଲ୍ ଭାବେ ବୁଝିବେ। ତୃତୀୟଟି ହେଉଛି ଅନାୟାସରେ ପ୍ରତିରଞ୍ଜକ ବଦଳାଇବା ଏବଂ ତା’ପରେ ବିଭିନ୍ନ ପରୀକ୍ଷାଗାରର ରଙ୍ଗକୁ ଏପରି ତୁଳନା କରିବା, ଯେପରି ସମସ୍ତେ ସମାନ ରଙ୍ଗସମୂହ ବ୍ୟବହାର କରିଥିଲେ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଭୁଲର ସମାଧାନ ଏକେ: ପ୍ରକୃତରେ କରାଯାଇଥିବା ପଦ୍ଧତିର ନାମ ଦିଅନ୍ତୁ ଏବଂ ସେହି ପଦ୍ଧତି ଯାହା ପରୀକ୍ଷା କରେ, କେବଳ ସେତିକି ଦାବି କରନ୍ତୁ।
ସରଳ ରଞ୍ଜନର ମୂଲ୍ୟ ଠିକ୍ ଏହି କାରଣରୁ ଅଛି ଯେ ଏହାର ଦାବି ସୀମିତ। ଏହା ଦ୍ରୁତ, ସାମାନ୍ୟ ପ୍ରକ୍ରିୟାଗତ ତ୍ରୁଟିକୁ ସହନ କରେ, ଏବଂ ପ୍ରଶ୍ନଟି ଆକୃତି ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ହେଲେ ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ: କିଛି ଅଛି କି, ଏବଂ ତାହାର ଆକୃତି କ’ଣ। ପ୍ରଶ୍ନଟି ବର୍ଗୀକରଣ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ହେଲେ ବିଭେଦକ ପରୀକ୍ଷା କରନ୍ତୁ। ନୀଳ ସ୍ଲାଇଡ୍ କୋଷଗୁଡ଼ିକ କିପରି ଦେଖାଯାନ୍ତି ତାହା କହେ। ବାଇଗଣୀ କିମ୍ବା ଗୋଲାପୀ ସ୍ଲାଇଡ୍ ସେଗୁଡ଼ିକର ଭିତ୍ତି କିପରି ଆଚରଣ କରେ ତାହା କହେ। କୌଣସି ସ୍ଲାଇଡ୍ ଏକାକୀ ପ୍ରଜାତିର ପରିଚୟ ଦିଏ ନାହିଁ।