ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ଅଟୋଫାଜି: AMPK, mTOR ଏବଂ ସ୍ନାୟୁକୋଷୀୟ ପରୀକ୍ଷଣ

କଳ୍ପନା କରନ୍ତୁ, ଆପଣ ଏକ କୋଷୀୟ ପରୀକ୍ଷଣ କରୁଛନ୍ତି, ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଯୋଗ କରୁଛନ୍ତି ଏବଂ ଆପଣଙ୍କ ବ୍ଲଟ୍‌ରେ LC3-II ନାମକ ଏକ ପ୍ରୋଟିନ୍ ବ୍ୟାଣ୍ଡ ଅଧିକ ଗାଢ଼ ହେଉଥିବା ଦେଖୁଛନ୍ତି। ଯୌଗିକଟି “ଅଟୋଫାଜି ବଢ଼ାଏ” ବୋଲି ଘୋଷଣା କରି ଆଗକୁ ବଢ଼ିଯିବାର ପ୍ରଲୋଭନ ହୋଇପାରେ। କିନ୍ତୁ ଏପରି ବ୍ୟାଖ୍ୟା ଅପରିପକ୍ୱ। ଅଧିକ ଗାଢ଼ LC3-II ବ୍ୟାଣ୍ଡର ଅର୍ଥ ହୋଇପାରେ ଯେ କୋଷ ଅଧିକ ସଫେଇକାରୀ ପୁଟିକା ତିଆରି କରୁଛି, କିମ୍ବା ନିଷ୍କାସନ ପର୍ଯ୍ୟାୟ ଅଟକିଯାଇଥିବାରୁ ପୁଟିକାଗୁଡ଼ିକ ଜମା ହେଉଛି। ଏହି ଦୁଇଟି ବ୍ୟାଖ୍ୟା ବିପରୀତ ଦିଗକୁ ସୂଚାଏ, ଏବଂ ସ୍ନାୟୁକୋଷରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଗବେଷଣା ସାହିତ୍ୟରେ ଉଭୟ ପ୍ରକାର ପ୍ରମାଣର ଉଦାହରଣ ରହିଛି। ଏହି ଲେଖାରେ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷା ଅନୁଯାୟୀ ପ୍ରକୃତରେ କ’ଣ ମାପାଯାଇଥିଲା, ତାହା ଆଲୋଚନା କରାଯାଇଛି।

ଏଠାରେ ଅଧ୍ୟୟନ କରାଯାଇଥିବା ରୂପ, ମାକ୍ରୋଅଟୋଫାଜି, ହେଉଛି କୋଷର ବହୁ ପରିମାଣର ସାମଗ୍ରୀ ପୁନଃଚକ୍ରଣ ପ୍ରକ୍ରିୟା। ଫାଗୋଫୋର୍ ନାମକ ଏକ ଝିଲ୍ଲୀଯୁକ୍ତ ଥଳି ଜୀର୍ଣ୍ଣ ପ୍ରୋଟିନ୍ ଓ କୋଷାଙ୍ଗଗୁଡ଼ିକୁ ଘେରି ବଢ଼େ, ବନ୍ଦ ହୋଇ ଏକ ଅଟୋଫାଗୋସୋମ୍ ଗଠନ କରେ, ଏକ ଲାଇସୋସୋମ୍ ସହ ମିଶେ, ଏବଂ ଏଥିରେ ଥିବା ସାମଗ୍ରୀ ଭାଙ୍ଗିଯାଇ ପୁନଃବ୍ୟବହାର ପାଇଁ ମୁକ୍ତ ହୁଏ। ସ୍ନାୟୁକୋଷଗୁଡ଼ିକ ଏହି ନିୟମିତ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରନ୍ତି, କାରଣ ସେମାନେ ବିଭାଜିତ ହୁଅନ୍ତି ନାହିଁ ଏବଂ ବିଭାଜନ ମାଧ୍ୟମରେ କ୍ଷତିଗ୍ରସ୍ତ ଅଂଶର ଘନତା କମାଇପାରନ୍ତି ନାହିଁ। ପୁନଃଚକ୍ରଣ ଅଟକିଗଲେ ବର୍ଜ୍ୟ ଜମା ହୁଏ। ଏହା ଚାଲୁଥିଲେ, ଚାପଗ୍ରସ୍ତ ଅବସ୍ଥାରେ କୋଷ ନିର୍ମାଣ ପାଇଁ ଆବଶ୍ୟକ ଉପାଦାନ ପୁନରୁଦ୍ଧାର କରେ।

ଏକ ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପାଲ୍ ପରୀକ୍ଷଣ କ’ଣ ଦେଖାଇଲା

ପ୍ରବର୍ତ୍ତନ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ମୁଖ୍ୟ ଅଧ୍ୟୟନରେ HT22 ମୂଷା ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପାଲ୍ କୋଷ ବ୍ୟବହାର କରାଯାଇଥିଲା, ଯାହାକୁ 24 ଘଣ୍ଟା ସିରମ୍‌ରୁ ବଞ୍ଚିତ ରଖି ଚାପଗ୍ରସ୍ତ କରାଯାଇଥିଲା। ଏହି ଅବସ୍ଥାରେ ବୃଦ୍ଧି କାରକ ଓ ପୋଷଣ-ସହାୟକ ସଙ୍କେତ ହଟିଯାଏ ଏବଂ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍ ଓ ଅଟୋଫାଜି ଉଭୟ ଆରମ୍ଭ ହୁଏ। ଗବେଷକମାନେ ଜଣାଇଥିଲେ ଯେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମାତ୍ରା-ନିର୍ଭର ଭାବରେ କୋଷ ମୃତ୍ୟୁ କମାଇଥିଲା ଏବଂ ଏହି ସୁରକ୍ଷା ସହିତ ମାକ୍ରୋଅଟୋଫାଜିର ଲକ୍ଷଣ ମଧ୍ୟ ଦେଖାଯାଇଥିଲା।

ସୂଚକଗୁଡ଼ିକର ଧାରା ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଥିଲା। ପ୍ରାୟ 20 nM ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରୁ ଆରମ୍ଭ କରି, ବିକ୍ଷିପ୍ତ LC3B ରଞ୍ଜନ ନ୍ୟୁକ୍ଲିୟସ୍‌ର ଚାରିପାଖରେ ବିନ୍ଦୁସଦୃଶ ଗୁଚ୍ଛରେ ପୁନର୍ବିତରିତ ହୋଇଥିଲା; ପ୍ରାୟ 1 μM ନିକଟରେ LC3-I ଓ LC3-IIର ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ସବୁଠାରୁ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ଥିଲା। LC3B-I ଓ LC3B-II ଉଭୟ ମାତ୍ରା ଓ ସମୟ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରି ବଢ଼ିଥିଲା। ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ ଭାବରେ, ଦଳଟି ସ୍ଥିର LC3 ବ୍ଲଟ୍‌ରୁ ଆଉ ଗୋଟିଏ ପଦକ୍ଷେପ ଆଗକୁ ଯାଇଥିଲା। ସେମାନେ ଲାଇସୋସୋମ୍ ଦ୍ୱାରା ସାମଗ୍ରୀ ହଟାଇବାକୁ ଅବରୋଧ କରୁଥିବା 10 μM କ୍ଲୋରୋକ୍ୱିନ୍ ଯୋଗ କରିଥିଲେ ଏବଂ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଇଥିବା କୋଷରେ ଅଧିକ LC3-II ସହିତ ସ୍ଥିରୀକୃତ p62 ପାଇଥିଲେ। ଏହି ଧାରା କେବଳ ଜମା ହେବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ଲାଇସୋସୋମ୍-ନିର୍ଭର ଭଙ୍ଗନ ଓ ପୁନଃଚକ୍ରଣକୁ ସମର୍ଥନ କରେ। ସେମାନେ ଏହା ମଧ୍ୟ ଦେଖାଇଥିଲେ ଯେ କ୍ଲୋରୋକ୍ୱିନ୍ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍-ବିରୋଧୀ ପ୍ରଭାବକୁ ଆଂଶିକ ଭାବରେ ଓଲଟାଇଥିଲା, ଯାହା ଏହି ମଡେଲ୍‌ରେ ସୁରକ୍ଷାକୁ ଅଟୋଫାଜି ଓ ଲାଇସୋସୋମ୍ ପଥ ସହିତ ଯୋଡ଼େ।

ସଙ୍କେତ ପ୍ରକ୍ରିୟା ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଫଳାଫଳଟି ହିଁ ସବୁଠାରୁ ଅଧିକ ଭୁଲ୍ ଭାବରେ ଉଦ୍ଧୃତ ହୁଏ। ଫସ୍ଫୋରିଲେଟେଡ୍ AMPK ଏବଂ ଏହାର ପରବର୍ତ୍ତୀ ଲକ୍ଷ୍ୟ ଫସ୍ଫୋରିଲେଟେଡ୍ ACC ଦ୍ୱାରା ମାପାଯାଇଥିବା AMPK ସଙ୍କେତ ପ୍ରକ୍ରିୟା 12 ଓ 24 ଘଣ୍ଟାରେ ମାତ୍ରା-ନିର୍ଭର ଭାବରେ ବଢ଼ିଥିଲା। ଶେଷ 4 ଘଣ୍ଟାରେ 20 μM ମାତ୍ରାରେ ପ୍ରୟୋଗ କରାଯାଇଥିବା AMPK ନିରୋଧକ Compound C, ACC ଫସ୍ଫୋରିଲେସନ୍ ଓ LC3 ସକ୍ରିୟଣ ଉଭୟକୁ କମାଇଥିଲା। ଏହାର ବିପରୀତରେ, ଫସ୍ଫୋରିଲେଟେଡ୍ mTORରେ ଚିହ୍ନଟଯୋଗ୍ୟ ଦମନ ଦେଖାଯାଇନଥିଲା। ତେଣୁ ଚାପଗ୍ରସ୍ତ ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପାଲ୍ କୋଷରେ ଫଳାଫଳ ଥିଲା ଏକ ଦୃଶ୍ୟତଃ mTOR-ସ୍ୱାଧୀନ ପଥ ମାଧ୍ୟମରେ AMPK-ସମ୍ବନ୍ଧିତ ପ୍ରବର୍ତ୍ତନ। ଜୀବିତ ମୂଷାମାନଙ୍କରେ ମଧ୍ୟ ସମାନ ଧାରା ଦେଖାଯାଇଥିଲା, ଯେଉଁଠାରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପ୍ରୟୋଗ କର୍ଟେକ୍ସ ଓ ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପସ୍‌ରେ ମାକ୍ରୋଅଟୋଫାଜି ସୂଚକଗୁଡ଼ିକୁ ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ କରିଥିଲା।

ପ୍ରବର୍ତ୍ତନ ମାନେ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଫ୍ଲକ୍ସ ନୁହେଁ

ଏଠାରେ ଧାରଣାଗତ ପାର୍ଥକ୍ୟ ସବୁଠାରୁ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ। ପ୍ରବର୍ତ୍ତନର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ପ୍ରକ୍ରିୟାର ଉପରିସ୍ତରୀୟ ବ୍ୟବସ୍ଥା ଅଧିକ ଅଟୋଫାଗୋସୋମ୍ ତିଆରି କରେ। ଫ୍ଲକ୍ସର ଅର୍ଥ ହେଉଛି ସାମଗ୍ରୀ ସମଗ୍ର ପଥ ଦେଇ ଗତି କରେ: ଆବଦ୍ଧୀକରଣ, ପରିପକ୍ୱତା, ଲାଇସୋସୋମ୍ ସହ ମିଶ୍ରଣ, ଭଙ୍ଗନ ଓ ପୁନଃଚକ୍ରଣ। ଯାତ୍ରାର ଅବଶିଷ୍ଟ ଅଂଶକୁ ଏକ ଫ୍ଲକ୍ସ ପରୀକ୍ଷା ନିଶ୍ଚିତ କରିବା ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ, ପ୍ରତ୍ୟେକ LC3-II ବୃଦ୍ଧି କେବଳ ପ୍ରବର୍ତ୍ତନର ଦାବି।

ମାନକ ଫ୍ଲକ୍ସ ପରୀକ୍ଷାରେ ବାଫିଲୋମାଇସିନ୍ A1 କିମ୍ବା କ୍ଲୋରୋକ୍ୱିନ୍ ପରି ସ୍ୱଳ୍ପକାଳୀନ ଲାଇସୋସୋମ୍ ଅବରୋଧ ସହିତ ଓ ବିନା ଅବରୋଧରେ LC3-II ମାପାଯାଏ। ଯଦି ପ୍ରୟୋଗ ପ୍ରକୃତରେ ଉତ୍ପାଦନକୁ ତ୍ୱରାନ୍ୱିତ କରେ, ତେବେ ବିନାଶକୁ ଅବରୋଧ କଲେ LC3-II ଆହୁରି ବଢ଼ିବା ଉଚିତ। ଏକ ଟ୍ୟାଣ୍ଡେମ୍ mCherry-GFP-LC3 ରିପୋର୍ଟର୍ ଦ୍ୱିତୀୟ ଦୃଷ୍ଟିକୋଣ ଯୋଗ କରେ: ଲାଇସୋସୋମ୍ ସହ ମିଶିବା ପୂର୍ବରୁ ସଂରଚନାଗୁଡ଼ିକ ହଳଦିଆ ଆଲୋକ ଦିଅନ୍ତି ଏବଂ ଅମ୍ଳ GFP ସଙ୍କେତକୁ ନିର୍ବାପିତ କରିବା ପରେ କେବଳ ଲାଲ୍ ଆଲୋକ ଦିଅନ୍ତି। ତେଣୁ କେବଳ ଲାଲ୍ ଦେଖାଯାଉଥିବା ଅଧିକ ବିନ୍ଦୁସଦୃଶ ଗୁଚ୍ଛ ଅମ୍ଳୀୟ ଅଟୋଲାଇସୋସୋମ୍‌କୁ ଅଗ୍ରଗତି ହେବାକୁ ସମର୍ଥନ କରେ। p62 ପ୍ରୋଟିନ୍ କମିବା ସାମଗ୍ରୀର ଭଙ୍ଗନ ଓ ପୁନଃଚକ୍ରଣକୁ ସମର୍ଥନ କରିପାରେ; ତେବେ ମନେ ରଖିବା ଦରକାର ଯେ p62 ଟ୍ରାନ୍ସକ୍ରିପ୍ସନ୍ ନିଜେ ମଧ୍ୟ ଚାପକୁ ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଦିଏ ଏବଂ ଏହାକୁ mRNA ସ୍ତରରେ ଯାଞ୍ଚ କରାଯିବା ଉଚିତ।

ନିମ୍ନର ଯାଞ୍ଚତାଲିକା ଏହି ଗବେଷଣା ସାହିତ୍ୟରେ ବ୍ୟବହୃତ ପ୍ରତ୍ୟେକ ପରୀକ୍ଷା କ’ଣ ମାପେ ଏବଂ ଏକାକୀ କ’ଣ ପ୍ରମାଣ କରିପାରେ ନାହିଁ, ତାହା ଦର୍ଶାଏ। ଏହି ସୂଚକଗୁଡ଼ିକୁ ଆଧାର କରୁଥିବା ଉପବାସ ଓ ଦୀର୍ଘାୟୁ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଯୁକ୍ତି ସମେତ ଭବିଷ୍ୟତର ଯେକୌଣସି ମାକ୍ରୋଅଟୋଫାଜି ଦାବି ପାଇଁ ପାଠକମାନେ ଏହାକୁ ପୁନଃବ୍ୟବହାର କରିପାରିବେ।

ସାରଣୀଟି ଯେଉଁ ଶବ୍ଦଚୟନର ଫାନ୍ଦରୁ ସୁରକ୍ଷା ଦିଏ, ତାହା ଲକ୍ଷ୍ୟ କରନ୍ତୁ। ଫସ୍ଫୋରିଲେଟେଡ୍ ACC ହେଉଛି ଏନ୍‌ଜାଇମ୍ କାର୍ଯ୍ୟକଳାପ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ନିରୋଧିତ ରୂପ। ଏହାର ବୃଦ୍ଧି AMPKର ପରବର୍ତ୍ତୀ ପ୍ରତିକ୍ରିୟାକୁ ଦର୍ଶାଏ, ACC ସକ୍ରିୟଣକୁ ନୁହେଁ।

“ମାକ୍ରୋଅଟୋଫାଜି ନିରୋଧ ସ୍ନାୟୁସୁରକ୍ଷାକୁ ସମାପ୍ତ କରିଦେଲା” ବାକ୍ୟାଂଶ ପାଇଁ ମଧ୍ୟ ସମାନ ସଠିକତା ଆବଶ୍ୟକ। HT22 ମଡେଲ୍‌ରେ ଏହାର ଅର୍ଥ ହେଉଛି, ଅଟୋଫାଜି ଓ ଲାଇସୋସୋମ୍ ପଥରେ ବାଧା ଦେବା ଦ୍ୱାରା ସିରମ୍‌ରୁ ବଞ୍ଚିତ ଅବସ୍ଥାରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଦେଇଥିବା କୋଷ ବଞ୍ଚିରହିବାର ସୁବିଧା ହଟିଯାଇଥିଲା। ସେହି ପରୀକ୍ଷା ପାତ୍ରରେ ଅଟୋଫାଜି ଆବଶ୍ୟକ କିମ୍ବା ସହାୟକ ଥିଲା ବୋଲି ଏହା ସମର୍ଥନ କରେ। ଏହା ଅଟୋଫାଜିକୁ ଯୌଗିକଟିର ଏକମାତ୍ର ସୁରକ୍ଷାକାରୀ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ଭାବେ ସ୍ଥାପିତ କରେ ନାହିଁ, କ୍ଲୋରୋକ୍ୱିନ୍ କେବଳ ଅଟୋଫାଜି ମାଧ୍ୟମରେ କାମ କରେ ବୋଲି ପ୍ରମାଣ କରେ ନାହିଁ, ଏବଂ କାରଣାତ୍ମକ ଦାବିକୁ ଅଧିକ ଦୃଢ଼ କରିବା ପାଇଁ ATG5, ATG7 କିମ୍ବା ULK1ରେ ଜିନଗତ ହସ୍ତକ୍ଷେପ ଆବଶ୍ୟକ ହେବ।

ସମାନ ବ୍ୟବସ୍ଥାକୁ ଯିବାର ଦୁଇଟି ପଥ

ଏକ ସରଳୀକୃତ ମାନଚିତ୍ର ସହାୟକ ହୁଏ। ଶକ୍ତି-ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଚାପ AMPKକୁ ବଢ଼ାଏ, AMPK ULK1 କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସକୁ ସକ୍ରିୟ କରେ ଏବଂ ଅଟୋଫାଜି ଆରମ୍ଭ ହୁଏ। ବୃଦ୍ଧି କାରକ ଓ ପୋଷକ ତତ୍ତ୍ୱ mTORC1କୁ ବଢ଼ାନ୍ତି, mTORC1 ULK1କୁ ନିରୋଧ କରେ ଏବଂ ଅଟୋଫାଜି ବନ୍ଦ ରହେ। ULK1ର ପରବର୍ତ୍ତୀ ପର୍ଯ୍ୟାୟରେ, Beclin-1 ଓ VPS34 କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଫାଗୋଫୋର୍ ଗଠନର ସୂଚନା କରେ, LC3-Iର ଲିପିଡେସନ୍ ହୋଇ LC3-II ଗଠିତ ହୁଏ, ଅଟୋଫାଗୋସୋମ୍ ବନ୍ଦ ହୁଏ, ଲାଇସୋସୋମ୍ ସହ ମିଶେ ଏବଂ p62ର ଭଙ୍ଗନ ଓ ପୁନଃଚକ୍ରଣ ସହିତ ସାମଗ୍ରୀ ଭାଙ୍ଗିଯାଏ।

ଚିତ୍ରଟି ଏହି ମାନଚିତ୍ରରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପ୍ରତ୍ୟେକ ଫଳାଫଳକୁ ରଖିଛି: ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପାଲ୍ ଫଳାଫଳକୁ AMPK ଶାଖା ପାଖରେ ଏବଂ ପୂର୍ବଜ କୋଷର ଫଳାଫଳକୁ mTOR ଶାଖା ପାଖରେ।

ଏହି ଦୃଷ୍ଟିକୋଣ ଦ୍ୱିତୀୟ Xie ଅଧ୍ୟୟନ ସହିତ ଦେଖାଯାଉଥିବା ଅସଙ୍ଗତିକୁ ସମାଧାନ କରେ। ବିଭାଜନ ମାଧ୍ୟମରେ ସଂଖ୍ୟା ବଢ଼ୁଥିବା ରାଟ୍‌ର ସ୍ନାୟୁ ପୂର୍ବଜ କୋଷରେ, ଏକ ପୃଥକ ପରୀକ୍ଷଣ ଦେଖାଇଥିଲା ଯେ 5 μM ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ କୋଷ ସଂଖ୍ୟା ବୃଦ୍ଧିକୁ ନିରୋଧ କରିଥିଲା ଏବଂ ବିଶ୍ରାମାବସ୍ଥାକୁ ପ୍ରୋତ୍ସାହିତ କରିଥିଲା। 1 ଓ 3 ଦିନରେ Ki67 ପଜିଟିଭ୍ କୋଷ କମିଥିଲେ ମଧ୍ୟ, ସ୍ନାୟୁକୋଷ ହେବାକୁ ପ୍ରତିବଦ୍ଧ କୋଷର ବିଭେଦନ ଅକ୍ଷୁଣ୍ଣ ରହିଥିଲା। ସେଠାରେ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ mTOR ସଙ୍କେତ ପ୍ରକ୍ରିୟାର ଦମନ ମାଧ୍ୟମରେ ଚାଲିଥିଲା: ମୋଟ mTOR ଓ ଫସ୍ଫୋରିଲେଟେଡ୍ mTOR କମିବା ସହିତ p70S6K ଓ 4EBP1ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି କମିଥିଲା, ଏବଂ ସାଇକ୍ଲିନ୍ E1, B1, D1 ଓ D2ର ଅଭିବ୍ୟକ୍ତି ମଧ୍ୟ ହ୍ରାସ ପାଇଥିଲା। ପ୍ରମୁଖ ପ୍ରକାଶିତ ବୈଶିଷ୍ଟ୍ୟ ଥିଲା ପୂର୍ବଜ କୋଷର ବିଶ୍ରାମାବସ୍ଥା, ଯାହାକୁ ଲେଖକମାନେ କୋଷୀୟ ବାର୍ଦ୍ଧକ୍ୟ ବିଳମ୍ବିତ ହେବା ସହ ଯୋଡ଼ିଥିଲେ, ଚାପଗ୍ରସ୍ତ ହିପୋକ୍ୟାମ୍ପାଲ୍ କୋଷକୁ ରକ୍ଷା କରିବା ସହ ନୁହେଁ।

ଦୁଇଟି ଗବେଷଣା ପତ୍ର ମଧ୍ୟରେ କୌଣସି ବିରୋଧାଭାସ ନାହିଁ। AMPK ଓ mTOR ହେଉଛନ୍ତି ପରିପ୍ରେକ୍ଷ୍ୟ-ସମ୍ବେଦନଶୀଳ ସଙ୍କେତ ସମନ୍ୱୟକାରୀ, ସ୍ଥିର ସ୍ୱିଚ୍ ନୁହେଁ। ଏକ ଚାପଗ୍ରସ୍ତ, ସ୍ନାୟୁକୋଷ-ସଦୃଶ କୋଷ ମାପଯୋଗ୍ୟ mTOR ନିରୋଧ ବିନା AMPKକୁ ସକ୍ରିୟ କରିପାରେ, ଯେତେବେଳେ ମାଇଟୋଜେନ୍ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରେରିତ ଏକ ପୂର୍ବଜ କୋଷ ସମାନ ଯୌଗିକ ପ୍ରତି mTOR-ନିର୍ଭର ବୃଦ୍ଧି ବ୍ୟବସ୍ଥାକୁ ମନ୍ଥର କରି ପ୍ରତିକ୍ରିୟା ଦେଇପାରେ। କୋଷର ପ୍ରକାର, ଚାପର ପରିପ୍ରେକ୍ଷ୍ୟ, ସାନ୍ଦ୍ରତା ଓ ମାପ ନିଆଯାଉଥିବା ସମୟବିନ୍ଦୁ କେଉଁ ଶାଖା ପ୍ରମୁଖ ହେବ, ତାହା ନିର୍ଣ୍ଣୟ କରେ। ଏହି କାରଣରୁ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ମାଇଟୋକଣ୍ଡ୍ରିଆଲ୍ ଶକ୍ତି ଓ ରେଡକ୍ସ ପ୍ରଭାବ ମଧ୍ୟ ସମାନ ଚିତ୍ରର ଅଂଶ: ସ୍ନାୟୁସୁରକ୍ଷାର କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଏକ ସମୀକ୍ଷା ବର୍ଣ୍ଣନା କରିଥିବା ପରି, ଯୌଗିକଟି ଏକ ବିକଳ୍ପ ଇଲେକ୍ଟ୍ରନ୍ ବାହକ ଭାବେ କାମ କରେ, ଆଣ୍ଟିଅକ୍ସିଡାଣ୍ଟ ଓ ଆପୋପ୍ଟୋସିସ୍-ବିରୋଧୀ ସଙ୍କେତ ପ୍ରକ୍ରିୟାରେ ସଂପୃକ୍ତ ହୁଏ, MAO ଓ NOSକୁ ନିରୋଧ କରେ ଏବଂ ଜୈବଜନନ ଓ ଅଟୋଫାଜି ମାଧ୍ୟମରେ ମାଇଟୋକଣ୍ଡ୍ରିଆର ନବୀକରଣ ସହ ଯୋଡ଼ିହୁଏ। ଅଟୋଫାଜି ବହୁମୁଖୀ ପ୍ରଭାବର ଏକ ଶାଖା, ସମଗ୍ର ବିବରଣୀ ନୁହେଁ।

ପରୀକ୍ଷଣଗୁଡ଼ିକ କ’ଣ ଦେଖାଉନାହାନ୍ତି

ସିରମ୍‌ରୁ ବଞ୍ଚିତ ରଖିବା ଏକ ପରୀକ୍ଷା ପାତ୍ରରେ ପୋଷଣ-ସହାୟକ ଓ ବିପାକୀୟ ଚାପର ମଡେଲ୍ ସୃଷ୍ଟି କରେ। ଏହା ସମଗ୍ର ଜୀବର ଉପବାସର ମଡେଲ୍ ନୁହେଁ: ମୂଳ କଲ୍ଚର୍ ମାଧ୍ୟମରେ ଗ୍ଲୁକୋଜ୍, ଆମିନୋ ଆସିଡ୍ ଓ ଲବଣ ରହିଥାଏ, ଏବଂ ସେଠାରେ କୌଣସି ଖାଦ୍ୟ ଗ୍ରହଣ ଆଚରଣ ନାହିଁ। 20 nMରୁ 5 μM ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ କଲ୍ଚର୍ ସାନ୍ଦ୍ରତାକୁ ଗାଣିତିକ ହିସାବରେ ମାନବ ପ୍ରୟୋଗ ମାତ୍ରାରେ ରୂପାନ୍ତର କରାଯାଇପାରିବ ନାହିଁ, କାରଣ ଅବଶୋଷଣ, ପ୍ରୋଟିନ୍ ସହ ବନ୍ଧନ, ରେଡକ୍ସ ଅବସ୍ଥା, ବିପାକ, ତନ୍ତୁରେ ସଞ୍ଚୟ ଓ ପ୍ରୟୋଗର ଅବଧି ସବୁ ଭିନ୍ନ।

ରୋଗୀମାନଙ୍କରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଦ୍ୱାରା ପ୍ରବର୍ତ୍ତିତ ଅଟୋଫାଜିକ୍ ଫ୍ଲକ୍ସ ଦେଖାଇବା ପାଇଁ କୌଣସି ମାନବ ପରୀକ୍ଷଣର ପରିକଳ୍ପନା କରାଯାଇନାହିଁ। କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପ୍ରମାଣ ଏବେ ମଧ୍ୟ କୋଷୀୟ, ଶରୀରରୁ ବାହାର କରାଯାଇଥିବା ତନ୍ତୁରେ କରାଯାଇଥିବା ଏବଂ ପ୍ରାଣୀ ଉପରେ କରାଯାଇଥିବା ଅଧ୍ୟୟନରେ ସୀମିତ; ସମୀକ୍ଷାଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟ ମାନବ ପ୍ରୟୋଗକୁ ରୂପାନ୍ତର ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ପ୍ରମାଣକୁ ଏବେ ମଧ୍ୟ ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ବୋଲି ବର୍ଣ୍ଣନା କରନ୍ତି। ତେଣୁ ଏହି ଅଧ୍ୟୟନଗୁଡ଼ିକ ଦେଖାଉନାହାନ୍ତି ଯେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଉପବାସର ପ୍ରଭାବ ପୁନଃସୃଷ୍ଟି କରେ, ଅଟୋଫାଜି ମାଧ୍ୟମରେ ମାନବ ଆୟୁ ବଢ଼ାଏ କିମ୍ବା ମାନବ ମସ୍ତିଷ୍କରେ ଅଟୋଫାଜିକ୍ ଫ୍ଲକ୍ସ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ କରେ। ଉପବାସ-ଅନୁକରଣକାରୀ ଓ ଦୀର୍ଘାୟୁ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଦାବି ପାଇଁ ନିଜସ୍ୱ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ପ୍ରମାଣ ଆବଶ୍ୟକ, ଏବଂ ଅନ୍ୟ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟରେ କରାଯାଇଥିବା ମାନବ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପରୀକ୍ଷଣ କେବଳ ସମ୍ପର୍କ ଥିବାରୁ ଅଟୋଫାଜି ପରୀକ୍ଷଣ ହୋଇଯାଏ ନାହିଁ। ପୋଷକ-ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଚାପ ଓ ଦୀର୍ଘାୟୁ ମଡେଲ୍ ଉପରେ ଗବେଷଣା ପଢ଼ିବାବେଳେ ଏହି ସୀମାକୁ ମନେ ରଖିବା ଉଚିତ।

ଆପଣ ପଢ଼ିବାକୁ ଯାଉଥିବା ପରବର୍ତ୍ତୀ ଗବେଷଣା ପତ୍ର ପାଇଁ ଯାଞ୍ଚତାଲିକାକୁ କ୍ରମାନୁସାରେ ପ୍ରୟୋଗ କରନ୍ତୁ। ପ୍ରଥମେ ପଚାରନ୍ତୁ କେଉଁ ଶାଖାରେ ପରିବର୍ତ୍ତନ ହେଲା: AMPK, mTOR କିମ୍ବା କୌଣସିଟିରେ ନୁହେଁ। ତା’ପରେ ପଚାରନ୍ତୁ LC3 ଫଳାଫଳ ସହିତ ଏକ ଫ୍ଲକ୍ସ ପରୀକ୍ଷା ଥିଲା କି, ନା ଏହା ଏକାକୀ ଥିଲା। ତା’ପରେ ଯାଞ୍ଚ କରନ୍ତୁ, ପଥକୁ ଅବରୋଧ କଲେ ଲାଭ ହଟିଯାଇଥିଲା କି ନାହିଁ ଏବଂ କେଉଁ ପଦ୍ଧତିରେ। ଯେଉଁ ଅଧ୍ୟୟନ ଏହି ତିନୋଟିର ଉତ୍ତର ଦିଏ, ସେହି ଅଧ୍ୟୟନ ଏକ ଦୃଢ଼ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀଗତ ଦାବିର ଯୋଗ୍ୟତା ଅର୍ଜନ କରିଛି। ଯେଉଁଟି କେବଳ ପ୍ରଥମଟିର ଉତ୍ତର ଦିଏ, ସେହିଟି ଏକ ଅନୁମତି ସଙ୍କେତ ଦେଖାଇଛି, ଏବଂ ଯାତ୍ରାର ଅବଶିଷ୍ଟ ଅଂଶ ଏବେ ମଧ୍ୟ ଅନିରୂପିତ ରହିଛି।