ପ୍ରବନ୍ଧ
ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ଭାବେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ କାହିଁକି ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ
ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ରଞ୍ଜନ କ୍ରମ ପରେ ଜଣେ ଟେକ୍ନିସିଆନ୍ କଫର ଏକ ସ୍ମିୟର୍ ପରୀକ୍ଷା କରନ୍ତି। ନୀଳ କ୍ଷେତ୍ରରେ ଲାଲ୍ ଦଣ୍ଡାକାର ଜୀବାଣୁ ସ୍ପଷ୍ଟ ଦିଶନ୍ତି, ଏବଂ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ବାସିଲାଇ ଦେଖାଗଲା ବୋଲି ରିପୋର୍ଟ ଦିଆଯାଏ। ପରଦିନ ଅନ୍ୟ ଏକ ସ୍ଲାଇଡ୍ରେ କୌଣସି ଲାଲ୍ ଦଣ୍ଡାକାର ଜୀବାଣୁ ବିନା ଏକ ସମାନ ନୀଳ କ୍ଷେତ୍ର ଦେଖାଯାଏ, ଏବଂ ତାହାକୁ ଯକ୍ଷ୍ମା ପାଇଁ ନେଗେଟିଭ୍ ବୋଲି ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଏ। ଏହି ରିପୋର୍ଟଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରୁ ଗୋଟିଏ ସ୍ଲାଇଡ୍ରୁ ମିଳୁଥିବା ପ୍ରମାଣଠାରୁ ଅଧିକ ଦାବି କରେ, ଏବଂ ତାହା ପ୍ରଥମଟି ନୁହେଁ।
ଏହି ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ଧାରଣାଗତ। ଟେକ୍ନିସିଆନ୍ ନୀଳ ରଞ୍ଜକକୁ ଚିହ୍ନଟ ପ୍ରକ୍ରିୟାର ରସାୟନର ଏକ ଅଂଶ ଭାବେ ଧରିନେଲେ, ଯେପରି ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆକୁ ଖୋଜିବାରେ ସାହାଯ୍ୟ କରୁଥିଲା। ଏହା ସେପରି କରିନଥିଲା। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସ୍ଲାଇଡ୍କୁ ଛୁଇଁବା ବେଳକୁ ପରୀକ୍ଷା ଆଗରୁ ସରିଯାଇଥାଏ। ଫଳାଫଳ ପଢ଼ିହେବା ପାଇଁ ରଞ୍ଜକ କେବଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମିକୁ ରଙ୍ଗାଏ। ଏହି ଲେଖା ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ, ଅନ୍ୟ କୌଣସି ରଙ୍ଗ ପରିବର୍ତ୍ତେ ଏହା ନୀଳ କାହିଁକି, ଏବଂ ନୀଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ ଲାଲ୍ ଦେଖି ଆପଣ କେଉଁ ନିଷ୍କର୍ଷ ନେଇପାରିବେ, ତାହା ବ୍ୟାଖ୍ୟା କରେ।
ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଉତ୍ତର
ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନ ହେଉଛି ତିନୋଟି ଧାରଣା ଉପରେ ଆଧାରିତ ଏକ ବିଭେଦକ ପରୀକ୍ଷା। ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକ କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍କୁ ମହମସଦୃଶ ଆବରଣ ଥିବା ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ସମେତ ପ୍ରତ୍ୟେକ କୋଷ ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରାଯାଏ। ବର୍ଣ୍ଣହରକ ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ ସାଧାରଣ କୋଷରୁ ଲାଲ୍ ରଞ୍ଜକକୁ ହଟାଏ, କିନ୍ତୁ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ କୋଷରୁ ତାହାକୁ ବାହାର କରିପାରେ ନାହିଁ। ତା’ପରେ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, ବର୍ଣ୍ଣହରକ ଯେଉଁସବୁରୁ ରଞ୍ଜକ ହଟାଇଛି ସେଗୁଡ଼ିକୁ ରଙ୍ଗାଏ। ତେଣୁ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ନଥିବା କୋଷ, ପୋଷକ ଜୀବର କୋଷ ଏବଂ ଅବଶେଷ ନୀଳ ଦିଶନ୍ତି, ଯେତେବେଳେ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ବାସିଲାଇ ଲାଲ୍ ରହନ୍ତି। କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ରଙ୍ଗଭେଦ ସୃଷ୍ଟି କରେ। କୌଣସି କୋଷକୁ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ କରୁଥିବା ରସାୟନରେ ଏହାର କୌଣସି ଭୂମିକା ନାହିଁ।
ପ୍ରତ୍ୟେକ ପଦକ୍ଷେପ କ’ଣ କରେ
ନିମ୍ନର ଚିତ୍ର ଏହି କାର୍ଯ୍ୟ ବିଭାଜନକୁ ଦର୍ଶାଏ। ଏହାକୁ ଏକ ପ୍ରକ୍ରିୟା ଭାବେ ବାମରୁ ଡାହାଣକୁ ପଢ଼ନ୍ତୁ, ଏବଂ ତଳ ଭାଗର ପଟିକୁ ପ୍ରତ୍ୟେକ ରଞ୍ଜନ ଶ୍ରେଣୀ ଏକ ଭିନ୍ନ ପ୍ରଶ୍ନର ଉତ୍ତର ଖୋଜେ ବୋଲି ମନେ ପକାଇବା ପାଇଁ ପଢ଼ନ୍ତୁ।
ପ୍ରଥମେ ରଞ୍ଜକର ପ୍ରବେଶ ହୁଏ। ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ ରଞ୍ଜକକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରନ୍ତି, କାରଣ ସେମାନଙ୍କ ଆବରଣ ଅସାଧାରଣ ଭାବେ ଜଳବିମୁଖ। ତେଣୁ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ରଞ୍ଜକକୁ ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରାଏ। ଜିଲ୍-ନିଲସେନ୍ ପଦ୍ଧତିରେ ବାଷ୍ପ ସୃଷ୍ଟି କରୁଥିବା ଉତ୍ତାପ ଫିନଲ୍ଯୁକ୍ତ କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍କୁ ମହମସଦୃଶ କୋଷପ୍ରାଚୀର ଦେଇ ଭିତରକୁ ନିଏ। କିନ୍ୟୁନ୍ ଶୀତଳ ପଦ୍ଧତିରେ ଉତ୍ତାପ ପରିବର୍ତ୍ତେ ବହୁତ ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକ ମିଶ୍ରଣ ବ୍ୟବହାର ହୁଏ, ଏବଂ କେତେକ ସଂଶୋଧିତ ଉତ୍ତାପବିହୀନ ପଦ୍ଧତିରେ ପୃଷ୍ଠସକ୍ରିୟ ପଦାର୍ଥ ଯୋଗ କରାଯାଏ। ଆମେରିକାନ୍ ସୋସାଇଟି ଫର୍ ମାଇକ୍ରୋବାୟୋଲୋଜିର ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ଗୁଡ଼ିକ ଉଭୟ ମିଶ୍ରଣକୁ ପାଖାପାଖି ଦର୍ଶାଇଛି, ଏବଂ ସାନ୍ଦ୍ରତାର ତଫାତ ଉଲ୍ଲେଖନୀୟ: ଉତ୍ତାପଯୁକ୍ତ ପଦ୍ଧତି ପାଇଁ ପ୍ରତି 100 mL ରେ ପ୍ରାୟ 0.3 g ବେସିକ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍, ଯେତେବେଳେ ଶୀତଳ ପଦ୍ଧତି ପାଇଁ ପ୍ରାୟ 4 g।
ଦ୍ୱିତୀୟରେ ବିଭେଦନ ହୁଏ। ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍, ଯାହା ସାଧାରଣତଃ 95 ଶତକଡ଼ା ଇଥାନଲ୍ର 97 mL ରେ 3 mL ସାନ୍ଦ୍ର ହାଇଡ୍ରୋକ୍ଲୋରିକ୍ ଆସିଡ୍ ମିଶାଇ ତିଆରି ହୁଏ, ବିଶେଷ ପ୍ରତିରୋଧ ଦେଉନଥିବା ପ୍ରାଚୀର ବିଶିଷ୍ଟ ପ୍ରତ୍ୟେକ କୋଷରୁ ଲାଲ୍ ରଞ୍ଜକକୁ ଧୋଇ ହଟାଏ। ଅକ୍ଷତ ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆଲ୍ ଲିପିଡ୍ ଆବରଣ ଥିବା କୋଷଗୁଡ଼ିକ ରଞ୍ଜକକୁ ଧରି ରଖନ୍ତି। ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ପଦ୍ଧତି ଏହି ପଦକ୍ଷେପ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ, ଏବଂ ନିମ୍ନରେ ଆଲୋଚନା କରାଯାଇଥିବା ପରି, କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀର ତ୍ରୁଟି ଦ୍ୱାରା ଏହି ପଦକ୍ଷେପ ସବୁଠାରୁ ଅଧିକ ପ୍ରଭାବିତ ହୁଏ।
ଶେଷରେ ରଙ୍ଗଭେଦ ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ। ଏବେ ସ୍ଲାଇଡ୍ରେ ରଞ୍ଜକ ହଟିଯାଇଥିବା କୋଷଗୁଡ଼ିକର ପ୍ରାୟ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ ଲାଲ୍ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ କୋଷ ରହିଥାନ୍ତି। 0.3 ଶତକଡ଼ା w/v ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, ଲାଲ୍ଠାରୁ ସର୍ବାଧିକ ଭିନ୍ନ ରଙ୍ଗ ଦେଇ ସେହି ପୃଷ୍ଠଭୂମିକୁ ପୁଣି ଦୃଶ୍ୟମାନ କରେ। କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନିଂ ଅଳ୍ପ ସମୟ ପାଇଁ କରାଯାଏ, ସାଧାରଣତଃ ଉତ୍ତାପଯୁକ୍ତ ପଦ୍ଧତିରେ 20 ରୁ 30 ସେକେଣ୍ଡ ଏବଂ କେତେକ ଶୀତଳ ପଦ୍ଧତିର ଭିନ୍ନ ରୂପରେ କିଛି ମିନିଟ୍ ପର୍ଯ୍ୟନ୍ତ। ଏହି ସମୟ ରଞ୍ଜକର ନିଜସ୍ୱ ଗୁଣ ନୁହେଁ, ବରଂ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ।
ଏହି ରଞ୍ଜକ କାହିଁକି, ଏବଂ ନୀଳ କାହିଁକି
ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଏକ ଧନାୟନିକ ବେସିକ୍ ରଞ୍ଜକ। ଅର୍ଥାତ୍, ଏହାର ରଙ୍ଗୀନ ଆୟନ ଧନାତ୍ମକ ଆବେଶ ବହନ କରେ ଏବଂ ବର୍ଣ୍ଣହୀନ କରାଯାଇଥିବା ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ, ପୋଷକ ଜୀବର କୋଷ ଏବଂ ଅବଶେଷର ଋଣାତ୍ମକ ଆବେଶଯୁକ୍ତ ପୃଷ୍ଠ ସହ ବନ୍ଧିତ ହୁଏ। ଓପେନ୍ଷ୍ଟାକ୍ସ ମାଇକ୍ରୋବାୟୋଲୋଜି ଏହି ଆବେଶଭିତ୍ତିକ ଯୁକ୍ତିକୁ ବେସିକ୍ ରଞ୍ଜକଗୁଡ଼ିକର ସାଧାରଣ ନୀତି ଭାବେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ। କିନ୍ତୁ ଏଠାରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରାସାୟନିକ ଦୃଷ୍ଟିରୁ ଅନନ୍ୟ ନୁହେଁ। କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ଏବଂ ସାଫ୍ରାନିନ୍ ମଧ୍ୟ ବେସିକ୍ ରଞ୍ଜକ। ଏହି ଚୟନ ଦୃଶ୍ୟଗତ, ରାସାୟନିକ ନୁହେଁ।
ଲାଲ୍ ଦଣ୍ଡାକାର ଜୀବାଣୁ ପାଇଁ ଏକ ବିପରୀତ ରଙ୍ଗର ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଦରକାର, ଏବଂ ଉଜ୍ଜ୍ୱଳ-କ୍ଷେତ୍ର ଅଣୁବୀକ୍ଷଣରେ ନୀଳ ରଙ୍ଗ ଲାଲ୍ର ବିପରୀତ ଭାବେ ସବୁଠାରୁ ଉପଯୋଗୀ ହୁଏ। ସାଫ୍ରାନିନ୍ ଏକ ଅନୁପଯୁକ୍ତ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ହେବ, କାରଣ ଏହାର ଶେଷ ଗୋଲାପୀ-ଲାଲ୍ ରଙ୍ଗ ଧରି ରହିଥିବା କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍ର ରଙ୍ଗ ସହ ଅତ୍ୟନ୍ତ ନିକଟ, ଯାହା ପ୍ରକ୍ରିୟା ସୃଷ୍ଟି କରିଥିବା ପାର୍ଥକ୍ୟକୁ ନଷ୍ଟ କରିଦିଏ। କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ଏକ ଗାଢ଼ ବାଇଗଣୀ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଦେବ, ଯାହା ଦୃଷ୍ଟି ଆକର୍ଷଣ ପାଇଁ ପତଳା ଲାଲ୍ ବାସିଲାଇ ସହ ପ୍ରତିଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱିତା କରିବ। ଏହାର କାମ ରସାୟନ ନୁହେଁ, ବରଂ ରଙ୍ଗଭେଦ ସୃଷ୍ଟି କରିବା ବୋଲି ସବୁଠାରୁ ଦୃଢ଼ ପ୍ରମାଣ ହେଉଛି ଏହାର ବିକଳ୍ପ ବ୍ୟବହାର: କେତେକ ପଶୁଚିକିତ୍ସା ଏବଂ ସଂଶୋଧିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ରେ ମାଲାକାଇଟ୍ ଗ୍ରୀନ୍ ଓ ବ୍ରିଲିଆଣ୍ଟ୍ ଗ୍ରୀନ୍ ପରି ସବୁଜ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ, ତଥାପି ପରୀକ୍ଷା କାମ କରେ, କାରଣ ଯେକୌଣସି ସ୍ପଷ୍ଟ ଭିନ୍ନ ରଙ୍ଗ ସେହି ଏକା କାମ କରେ।
ଏଥିରୁ ଦୁଇଟି ବ୍ୟବହାରିକ ନିଷ୍କର୍ଷ ମିଳେ। ପ୍ରଥମେ, ମାନକ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପଦ୍ଧତିରେ କୌଣସି pH ସମନ୍ୱୟ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ନାହିଁ; ଏହି ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ 0.3 ଶତକଡ଼ା ଦ୍ରବଣକୁ ଲୋଫ୍ଲର୍ଙ୍କ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ପରି କ୍ଷାରୀୟ ମିଶ୍ରଣ ସହ ଗୋଳାନ୍ତୁ ନାହିଁ, କାରଣ ସେଗୁଡ଼ିକ ଏକ ଭିନ୍ନ ରଞ୍ଜନ ଧାରଣାର ଅଂଶ। ଦ୍ୱିତୀୟରେ, ଅତ୍ୟଧିକ ରଞ୍ଜନ କ୍ଷତିକାରକ। ତନ୍ତୁବିଜ୍ଞାନ ସାହିତ୍ୟ ବିଶେଷ ଭାବେ ସତର୍କ କରାଏ ଯେ ଅତ୍ୟଧିକ ଗାଢ଼ ନୀଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ଅଳ୍ପ ସଂଖ୍ୟକ ବାସିଲାଇକୁ ଲୁଚାଇପାରେ। ତେଣୁ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ରେ ଅନୁମତି ଦିଆଯାଇଥିବା ସମୟଠାରୁ ଅଧିକ ସମୟ ସ୍ଲାଇଡ୍କୁ ରଞ୍ଜକରେ ଢାକି ରଖିବା, କୌଣସି ଲାଭ ବିନା ପଠନୀୟତାକୁ କମାଏ।
ପରୀକ୍ଷାକୁ ସମ୍ଭବ କରୁଥିବା କୋଷପ୍ରାଚୀରର ରସାୟନ
ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ କାହିଁକି ଭେଦ କରିପାରେ, ତାହାର କାରଣ ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆର ଆବରଣରେ ରହିଛି। ଏହାର ଗଠନାତ୍ମକ ମୂଳ ହେଉଛି ମାଇକୋଲିଲ୍-ଆରାବିନୋଗାଲାକ୍ଟାନ୍-ପେପ୍ଟିଡୋଗ୍ଲାଇକାନ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ: ଆରାବିନୋଗାଲାକ୍ଟାନ୍ ସହ ସଂଯୁକ୍ତ ପେପ୍ଟିଡୋଗ୍ଲାଇକାନ୍, ଏବଂ ସେହି ଆରାବିନୋଗାଲାକ୍ଟାନ୍ର ବାହ୍ୟ ପ୍ରାନ୍ତରେ ଅତି ଦୀର୍ଘ ଶୃଙ୍ଖଳାବିଶିଷ୍ଟ ମାଇକୋଲିକ୍ ଆସିଡ୍ ରହିଥାଏ। ଏହା ଅସାଧାରଣ ଭାବେ କମ୍ ପାରଗମ୍ୟତା ଥିବା ଏକ ଲିପିଡ୍-ସମୃଦ୍ଧ ବାହ୍ୟ ମାଇକୋମେମ୍ବ୍ରେନ୍ ଗଠନ କରେ। ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆର ବାହ୍ୟ ଝିଲ୍ଲୀ ବିଷୟକ ସମୀକ୍ଷା ଏହି ଗଠନକୁ ବିସ୍ତୃତ ଭାବେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରେ। ଏହି ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଉଭୟ ଦିଗରେ କାମ କରେ। ଏହା ରଞ୍ଜକର ପ୍ରବେଶକୁ ପ୍ରତିରୋଧ କରେ, ଯେଉଁଥିପାଇଁ ପ୍ରବେଶ ନିମନ୍ତେ ଉତ୍ତାପ କିମ୍ବା ଅଧିକ ଶକ୍ତିଶାଳୀ ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକ ଦରକାର। ଏହା ରଞ୍ଜକ ବାହାର କରିବାକୁ ମଧ୍ୟ ପ୍ରତିରୋଧ କରେ, ଯେଉଁଥିପାଇଁ କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍ ଥରେ ଭିତରକୁ ଯିବା ପରେ ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ ତାହାକୁ ହଟାଇପାରେ ନାହିଁ। ସାଧାରଣ ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆରେ ଏହି ଆବରଣ ନଥାଏ ଏବଂ ସେମାନେ ରଞ୍ଜକ ହରାନ୍ତି। ତେଣୁ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ଗୁଣକୁ ଫୁକ୍ସିନ୍ ମାଇକୋଲିକ୍ ଆସିଡ୍ ସହ ରାସାୟନିକ ଭାବେ ବନ୍ଧିତ ହେବା ଭାବେ ନୁହେଁ, ବରଂ ଲିପିଡ୍ ପ୍ରତିବନ୍ଧକ ଯୋଗୁଁ ଘଟୁଥିବା ଏକ ଘଟଣା ଭାବେ ବୁଝିବା ସବୁଠାରୁ ଉଚିତ।
ଏହି ରସାୟନ ଏକ ସାଧାରଣ ପ୍ରହେଳିକାକୁ ମଧ୍ୟ ବୁଝାଏ: ଗ୍ରାମ୍ ପଦ୍ଧତିରେ ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ଦୁର୍ବଳ ଏବଂ ଅନିଶ୍ଚିତ ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ ହୁଅନ୍ତି, ବେଳେବେଳେ ହାଲୁକା ମଣିମାଳାସଦୃଶ ରୂପରେ କିମ୍ବା ରଞ୍ଜନହୀନ ଛାୟାସଦୃଶ ଆକୃତିରେ ଦିଶନ୍ତି। ସେମାନଙ୍କର ଜଳବିମୁଖ ପ୍ରାଚୀର କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ର ପ୍ରବେଶକୁ ସୀମିତ କରେ। ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନ ଏକ ସଂଶୋଧିତ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ନୁହେଁ। ଏହା ପ୍ରାଚୀରର ଏକ ଭିନ୍ନ ଗୁଣ ଉପରେ ଆଧାରିତ ଭିନ୍ନ ବିଭେଦକ ନୀତି, ଯେପରି ଅନ୍ୟ ଦୁଇଟି ପଦ୍ଧତି ପାଇଁ ସରଳ ରଞ୍ଜନ ବନାମ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନର ତୁଳନା ଦର୍ଶାଏ।
ତିନୋଟି ପଦ୍ଧତି, ତିନୋଟି ପ୍ରଶ୍ନ
| ପଦ୍ଧତି | କରାଯାଉଥିବା ପରୀକ୍ଷା | ପଜିଟିଭ୍ ଫଳର ଶେଷ ରୂପ | ଫଳାଫଳ କ’ଣ ପ୍ରମାଣ କରେ |
|---|---|---|---|
| ସରଳ ରଞ୍ଜନ (ଯଥା, କେବଳ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ) | କିଛି ନୁହେଁ; ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ ସବୁ କୋଷକୁ ରଙ୍ଗାଏ | ଏକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ଆକୃତିର ନୀଳ କୋଷ | କେବଳ ରୂପବିଜ୍ଞାନ: ଆକୃତି ଏବଂ ବିନ୍ୟାସ, କୌଣସି ବର୍ଗୀକରଣ ନୁହେଁ |
| ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ | କ୍ରିଷ୍ଟାଲ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ଆୟୋଡିନ୍ କମ୍ପ୍ଲେକ୍ସ ଉପରେ ଆଲକୋହଲ୍ କିମ୍ବା ଆସିଟୋନ୍ର ପ୍ରଭାବ ପରୀକ୍ଷା | ବାଇଗଣୀ (ପଜିଟିଭ୍) ବନାମ ଗୋଲାପୀ (ନେଗେଟିଭ୍) | ଦ୍ରାବକ ଦ୍ୱାରା ରଞ୍ଜକ ନିଷ୍କାସନ ସମୟରେ ଆବରଣର ଆଚରଣ; ଦୁଇ ପ୍ରକାର ପ୍ରାଚୀରରେ ବର୍ଗୀକରଣ |
| ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନ | ମହମସଦୃଶ ପ୍ରାଚୀର ଭିତରକୁ ପ୍ରବେଶ କରାଯାଇଥିବା କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍ ଉପରେ ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ର ପ୍ରଭାବ ପରୀକ୍ଷା | ଲାଲ୍ (ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ) ବନାମ ନୀଳ (ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ନୁହେଁ) | ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ ସତ୍ତ୍ୱେ ରଞ୍ଜକ ଧରି ରଖିବା; ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ଗୁଣ, ଯାହା ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ସହ ସଙ୍ଗତିପୂର୍ଣ୍ଣ, କିନ୍ତୁ ପ୍ରଜାତି ଚିହ୍ନଟ ନୁହେଁ |
ଗୋଟିଏ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କରୁଥିବା ବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ରଞ୍ଜନ ପଦ୍ଧତିର ବ୍ୟାପକ ଶ୍ରେଣୀ ପାଇଁ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ରଞ୍ଜନ ଆଟଲାସ୍ ଦେଖନ୍ତୁ।
ନୀଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ ଲାଲ୍ କ’ଣ ପ୍ରମାଣ କରିପାରେ ନାହିଁ
ଲାଲ୍ ଦଣ୍ଡାକାର ଜୀବାଣୁର ଅର୍ଥ ହେଉଛି, ସେହି ଜୀବଗୁଡ଼ିକ ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ ପ୍ରୟୋଗ ପରେ ମଧ୍ୟ କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍ ଧରି ରଖିଛନ୍ତି। ଏହି ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ Mycobacterium tuberculosis ସହ ସଙ୍ଗତିପୂର୍ଣ୍ଣ, କିନ୍ତୁ CDCର ଯକ୍ଷ୍ମା ରୋଗନିର୍ଣ୍ଣୟ ମାର୍ଗଦର୍ଶିକା ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବେ ଉଲ୍ଲେଖ କରେ ଯେ ଅନ୍ୟ ମାଇକୋବ୍ୟାକ୍ଟେରିଆ ମଧ୍ୟ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ। ତେଣୁ ପ୍ରଜାତି ଚିହ୍ନଟ ପାଇଁ ରଙ୍ଗ ନୁହେଁ, କଲ୍ଚର୍ ଏବଂ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଆସିଡ୍ ପରୀକ୍ଷା ଆବଶ୍ୟକ।
କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀର ତ୍ରୁଟି ମୁଖ୍ୟତଃ ଦୁଇଟି ଧୋଇବା ପଦକ୍ଷେପରେ ହୁଏ। ଅପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ବର୍ଣ୍ଣହରଣ ପୃଷ୍ଠଭୂମିର ପଦାର୍ଥକୁ ଲାଲ୍ ରଖିଦିଏ ଏବଂ ଭୁଲ୍ ପଜିଟିଭ୍ ଫଳ ପଢ଼ିବାର ସମ୍ଭାବନା ସୃଷ୍ଟି କରେ। ଅତ୍ୟଧିକ ବର୍ଣ୍ଣହରଣ ଦୁର୍ବଳ ଭାବେ ଧରି ରହିଥିବା ପ୍ରାଥମିକ ରଞ୍ଜକକୁ ହଟାଏ ଏବଂ ଭୁଲ୍ ନେଗେଟିଭ୍ ଫଳରେ ଅବଦାନ ଦିଏ। ଅତ୍ୟଧିକ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ପ୍ରୟୋଗ ଅଳ୍ପ ସଂଖ୍ୟକ ବାସିଲାଇକୁ ନୀଳ ରଙ୍ଗରେ ଲୁଚାଇଦିଏ। ମୋଟା ସ୍ମିୟର୍, ଅବକ୍ଷେପିତ ପ୍ରତିକାରକ ଏବଂ ଦୂଷିତ ଧୋଇବା ପାଣି ମଧ୍ୟ ନିଜ ନିଜ ଭ୍ରମଜନକ ଆକୃତି ସୃଷ୍ଟି କରନ୍ତି।
କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ଯେତେ ତ୍ରୁଟିହୀନ ହେଉନା କାହିଁକି, ସଂବେଦନଶୀଳତା ଜୀବାଣୁର ପରିମାଣ ଦ୍ୱାରା ସୀମିତ ହୁଏ। ପାରମ୍ପରିକ ସ୍ମିୟର୍ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ପ୍ରତି ମିଲିଲିଟର କଫରେ ପ୍ରାୟ 5,000 ରୁ 10,000 ବାସିଲାଇ ଆବଶ୍ୟକ। CDCର ପୁରୁଣା ପ୍ରମାଣ ସମୀକ୍ଷାଗୁଡ଼ିକରେ କଲ୍ଚର୍ ଦ୍ୱାରା ନିଶ୍ଚିତ ଫୁସ୍ଫୁସୀୟ ମାମଲାଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟରେ ସ୍ମିୟର୍ର ସଂବେଦନଶୀଳତା ପ୍ରାୟ 45 ରୁ 80 ଶତକଡ଼ା ଥିଲା। ତେଣୁ ଏକ ନେଗେଟିଭ୍ ସ୍ମିୟର୍ କେବେ ମଧ୍ୟ ଯକ୍ଷ୍ମାକୁ ବାଦ୍ ଦିଏ ନାହିଁ। ବର୍ତ୍ତମାନର CDC ମାର୍ଗଦର୍ଶିକା ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ମିୟର୍ ସହ କଲ୍ଚର୍ କରିବାକୁ ରଖିଛି। ଫୁସ୍ଫୁସୀୟ ଯକ୍ଷ୍ମାର ସମ୍ଭାବନା ବିଚାର କରାଯାଉଥିଲେ ଏବଂ ଫଳାଫଳ ରୋଗୀଙ୍କ ଚିକିତ୍ସା ପରିଚାଳନାକୁ ବଦଳାଇବାର ସମ୍ଭାବନା ଥିଲେ, ଅନ୍ତତଃ ଗୋଟିଏ ଶ୍ୱାସତନ୍ତ୍ରୀୟ ନମୁନାରେ ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଆସିଡ୍ ଆମ୍ପ୍ଲିଫିକେସନ୍ ପରୀକ୍ଷା କରିବାକୁ ଏହା ସୁପାରିଶ କରେ।
ବ୍ୟବହାରିକ କାମ ଅନୁମୋଦିତ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍ ଅନୁସାରେ ହେବା ଉଚିତ
ଏହି ଲେଖା ସମେତ ଶିକ୍ଷାମୂଳକ ବର୍ଣ୍ଣନାଗୁଡ଼ିକ କ୍ଲିନିକାଲ୍ କାମ ପାଇଁ ଅନୁମତି ଦିଅନ୍ତି ନାହିଁ। ପରୀକ୍ଷାଗାରରେ ବ୍ୟବହାରିକ କାମ ପାଇଁ ବର୍ତ୍ତମାନର CDC, APHL କିମ୍ବା CLSI ଦଲିଲ ସହ ସମନ୍ୱିତ ପରୀକ୍ଷାଗାରର ବୈଧତା-ଯାଞ୍ଚିତ ମାନକ କାର୍ଯ୍ୟପ୍ରଣାଳୀ ଅନୁସରଣ କରନ୍ତୁ; CDCର Stacks ଅଭିଲେଖାଗାରରେ ରହିଥିବା ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ରଞ୍ଜନ ସନ୍ଦର୍ଭ ଏପରି ପ୍ରକ୍ରିୟାଗୁଡ଼ିକ କିପରି ପ୍ରତିକାରକ ଏବଂ ଫଳାଫଳ ପଢ଼ିବା ପଦ୍ଧତି ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରନ୍ତି, ତାହା ଦର୍ଶାଏ। ଯକ୍ଷ୍ମା ନମୁନା ସହ କାମ କରିବା ପାଇଁ ଜୈବସୁରକ୍ଷା ଆବଦ୍ଧତା ଆବଶ୍ୟକ: ସ୍ମିୟର୍ ଏକ ଜୈବିକ ସୁରକ୍ଷା କ୍ୟାବିନେଟ୍ରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରାଯାଏ, କାରଣ ପ୍ରସ୍ତୁତି ସମୟରେ ବାୟୁରେ ଭାସୁଥିବା ସୂକ୍ଷ୍ମ କଣିକା ଏବଂ ଛିଟା ସୃଷ୍ଟି ହୁଏ। CDCର ପରୀକ୍ଷାଗାର ସୁରକ୍ଷା ମାର୍ଗଦର୍ଶିକା କହେ ଯେ ଉତ୍ତାପ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିରୀକୃତ ସ୍ମିୟର୍ରେ ମଧ୍ୟ ଜୀବନକ୍ଷମ ଯକ୍ଷ୍ମା ବାସିଲାଇ ରହିପାରନ୍ତି ଏବଂ ସେଗୁଡ଼ିକୁ ତଥାପି ଦୂଷିତ ଭାବେ ଧରି ବ୍ୟବହାର କରିବା ଆବଶ୍ୟକ। M. leprae ପାଇଁ ପରୀକ୍ଷିତ କାର୍ବୋଲ୍-ଫୁକ୍ସିନ୍ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସ୍ମିୟର୍ ବିଷୟରେ CDC ସାର୍ବଜନୀନ ସ୍ୱାସ୍ଥ୍ୟ ଚିତ୍ର ଗ୍ରନ୍ଥାଗାରର ଏଣ୍ଟ୍ରି ଯକ୍ଷ୍ମା ବ୍ୟତୀତ ଏହି ପଦ୍ଧତିର ବ୍ୟବହାର କ୍ଷେତ୍ରକୁ ମନେ ପକାଇଦିଏ: ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ଜୀବ ଖୋଜାଯାଉଥିବା ସବୁ ସ୍ଥାନରେ ସେହି ନୀଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ ଲାଲ୍ ରଙ୍ଗଭେଦ କାମ କରେ, ଏବଂ ସାବଧାନତାର ସହ ପଢ଼ାଯାଇଥିବା ନେଗେଟିଭ୍ ଫଳ ମଧ୍ୟ ଲିପିବଦ୍ଧ କରିବା ଯୋଗ୍ୟ ଏକ ଫଳାଫଳ।
ପ୍ରସ୍ତୁତ ସ୍ଲାଇଡ୍ର ଫଳାଫଳ ପଢ଼ିବା
ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଯାଞ୍ଚ ସମୟରେ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ର ଉପଯୋଗିତା ସ୍ପଷ୍ଟ ହୁଏ। କମ୍ ବିବର୍ଦ୍ଧନରେ ସ୍କାନ୍ କରୁଥିବା ଜଣେ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ବିଶେଷଜ୍ଞ ପ୍ରଥମେ ନୀଳ ପୃଷ୍ଠଭୂମି ବ୍ୟବହାର କରି ସ୍ମିୟର୍ର ଗୁଣବତ୍ତା ବିଚାର କରନ୍ତି: କୋଷଗୁଡ଼ିକର ସମାନ ବିତରଣ, ଫୋକସ୍ ପାଇଁ ପୋଷକ ଜୀବର ଅକ୍ଷତ କୋଷ ଏବଂ ଅଧିକ ଅବକ୍ଷେପର ଅନୁପସ୍ଥିତି। ତା’ପରେ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଲାଲ୍ ଜୀବାଣୁ ଦୃଷ୍ଟି ଆକର୍ଷଣ କରନ୍ତି, ଠିକ୍ ଏହି କାରଣରୁ ଯେ ସ୍ଲାଇଡ୍ରେ ଅନ୍ୟ କିଛି ଲାଲ୍ ନଥାଏ। ତୈଳ ନିମଜ୍ଜନରେ ନିଶ୍ଚିତ କରାଯାଏ, ଯେଉଁଠାରେ ପ୍ରକୃତ ବାସିଲାଇ ସମାନ ରଞ୍ଜକ ଅବଶେଷ ପରି ନୁହେଁ, ବରଂ ପ୍ରତ୍ୟାଶିତ ପତଳା, ବେଳେବେଳେ ସାମାନ୍ୟ ବଙ୍କା କିମ୍ବା ମଣିମାଳାସଦୃଶ ଦଣ୍ଡ ଭାବେ ଦିଶନ୍ତି।
ପୃଷ୍ଠଭୂମିର ରଞ୍ଜନ ରିପୋର୍ଟର ଶବ୍ଦାବଳୀକୁ ମଧ୍ୟ ନିର୍ଦ୍ଧାରଣ କରେ। ଲାଲ୍ ବାସିଲାଇ ଥିବା ସ୍ଲାଇଡ୍କୁ ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ବାସିଲାଇ ଦେଖାଗଲା ବୋଲି ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଏ, ପ୍ରାୟତଃ ପରୀକ୍ଷାଗାରର ମାପକ୍ରମ ଅନୁସାରେ ଏକ ଅର୍ଦ୍ଧ-ପରିମାଣାତ୍ମକ ଗ୍ରେଡ୍ ସହିତ। କୌଣସି ଲାଲ୍ ଜୀବ ନଥିବା ସ୍ଲାଇଡ୍କୁ କୌଣସି ଆସିଡ୍-ଫାଷ୍ଟ ବାସିଲାଇ ଦେଖାଗଲା ନାହିଁ ବୋଲି ରିପୋର୍ଟ କରାଯାଏ, ଯକ୍ଷ୍ମା ପାଇଁ ନେଗେଟିଭ୍ ବୋଲି କେବେ ନୁହେଁ। ଏହି ପାର୍ଥକ୍ୟ ଗୁରୁତ୍ୱପୂର୍ଣ୍ଣ, କାରଣ ନୀଳ କ୍ଷେତ୍ର ପ୍ରମାଣ କରେ ଯେ ରଞ୍ଜନ କାମ କରିଛି, କୋଷଗୁଡ଼ିକ କାଉଣ୍ଟରଷ୍ଟେନ୍ ଗ୍ରହଣ କରିଛନ୍ତି ଏବଂ ଦୃଶ୍ୟ ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷଣ ବ୍ୟବସ୍ଥା ପର୍ଯ୍ୟାପ୍ତ ଥିଲା। କିନ୍ତୁ ଏହା ଚିହ୍ନଟ ସୀମାଠାରୁ କମ୍ ସଂଖ୍ୟାରେ ଥିବା ଜୀବ ବିଷୟରେ କିଛି କହେ ନାହିଁ। ଲାଲ୍ ଜୀବାଣୁ ନଥିବା ଏକ ନୀଳ କ୍ଷେତ୍ର ସ୍ଲାଇଡ୍ ବିଷୟରେ ଏକ ବୈଧ ଫଳାଫଳ, ରୋଗୀଙ୍କ ବିଷୟରେ ଚୂଡ଼ାନ୍ତ ନିଷ୍କର୍ଷ ନୁହେଁ।
କାର୍ଯ୍ୟ ବିଭାଜନକୁ ମନେ ରଖିଲେ ରିପୋର୍ଟ ଲେଖିବା ସହଜ ହୁଏ। କାର୍ବୋଲ୍ ଫୁକ୍ସିନ୍ ସମ୍ଭାବ୍ୟ ଜୀବାଣୁକୁ ଚିହ୍ନଟ କରେ। ଆସିଡ୍-ଆଲକୋହଲ୍ ପରୀକ୍ଷା କରେ। ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ କେବଳ ଉତ୍ତରକୁ ପଠନୀୟ କରେ: ଲାଲ୍ ଆସିଡ୍ ସତ୍ତ୍ୱେ ରଞ୍ଜକ ଧରି ରଖିଲା, ନୀଳ ତାହାକୁ ହରାଇଲା। ବାକି ସବୁ, ପ୍ରଜାତି, ଜୀବାଣୁର ପରିମାଣ ଏବଂ କ୍ଲିନିକାଲ୍ ଅର୍ଥ, ସ୍ଲାଇଡ୍ର ବାହାରେ କରାଯାଉଥିବା କାମରୁ ମିଳେ।