ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ କ୍ଷାରୀୟ ଓ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରଞ୍ଜକର ବ୍ୟାଖ୍ୟା

ରଞ୍ଜନ କାର୍ଯ୍ୟମେଜ ଉପରେ ତିନୋଟି ବୋତଲ ପାଖାପାଖି ରହିପାରେ, ପ୍ରତ୍ୟେକର ଲେବେଲ୍‌ରେ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର କୌଣସି ଏକ ପ୍ରକାରର ନାମ ଲେଖାଥାଏ। ଗୋଟିଏରେ ଜଳୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ 1% ଲେଖାଥାଏ। ଆଉ ଗୋଟିଏରେ ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ କ୍ଷାରୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଲେଖାଥାଏ। ତୃତୀୟଟିରେ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଲେଖାଥାଏ। ବ୍ୟସ୍ତ କର୍ମୀ ନିକଟରେ ଥିବା ବୋତଲଟି ନେଇନିଅନ୍ତି। ତାପରେ ସ୍ମିୟର୍‌ଟି ଅତ୍ୟଧିକ ଫିକା, ସବୁଠି ସମାନ ନୀଳ, କିମ୍ବା ଅପ୍ରତ୍ୟାଶିତ ବାଇଗଣୀ ଛଟାରେ ରଞ୍ଜିତ ହୁଏ, ଆଉ ଫଳାଫଳ ପାଇଁ ନମୁନାକୁ ଦାୟୀ କରାଯାଏ।

ଏହା ନମୁନାର ସମସ୍ୟା ନୁହେଁ, ରଞ୍ଜକର ସଂଯୋଜନ ସମସ୍ୟା। ଏହି ତିନୋଟି ଦ୍ରବଣରେ ସମ୍ପର୍କିତ ରଞ୍ଜକ ରହିଛି, କିନ୍ତୁ ସେମାନେ ଭିନ୍ନ ରଞ୍ଜନ ଧାରଣା ଉପରେ ଆଧାରିତ। ଗୋଟିଏ ପ୍ରାୟ ନିରପେକ୍ଷ pHରେ ଥିବା ସାଧାରଣ ଧନାୟନିକ ରଞ୍ଜକ। ଆଉ ଗୋଟିଏ ସେହି ରଞ୍ଜକ, ଯାହାର କ୍ରିୟାକୁ କ୍ଷାର ଦ୍ୱାରା ଅଧିକ ତୀବ୍ର କରାଯାଇଛି। ତୃତୀୟଟି ଆଉ ଏକକ ରଞ୍ଜକ ନୁହେଁ, ବରଂ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟମୂଳକ ଭାବେ ଅକ୍ସିକୃତ ମିଶ୍ରଣ। ଭୁଲ୍ ଦ୍ରବଣ ବ୍ୟବହାର କଲେ ଆପଣଙ୍କ କାମ ମଧ୍ୟରେ ରଞ୍ଜନର ମୂଳ ନୀତି ବଦଳିଯାଏ।

ସଂକ୍ଷିପ୍ତ ଉତ୍ତର

ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ହେଉଛି ମୂଳ ମାନଦଣ୍ଡ: ପାଣିରେ ପ୍ରାୟ 1% ରଞ୍ଜକ, ଯାହା ଜୀବାଣୁର ଆକୃତି ଅଧ୍ୟୟନ ଓ ସାଧାରଣ ଅଣୁବୀକ୍ଷଣ ପାଇଁ ଏକ ସରଳ ଧନାୟନିକ ରଞ୍ଜକ। ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ କ୍ଷାରୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁରେ ପାଣିରେ ପତଳା କରାଯାଇଥିବା ଆଲକୋହଲୀୟ ମୂଳ ଦ୍ରବଣ ସହ ଅଳ୍ପ, ମାପିଥିବା ପରିମାଣର ଲଘୁ କ୍ଷାର ମିଶାଯାଏ। ଏହା pH ବଢ଼ାଏ ଏବଂ ଧନାୟନିକ ରଞ୍ଜକକୁ ଜୀବାଣୁର ଅମ୍ଳୀୟ ସଂରଚନା ସହ ଅଧିକ ଦୃଢ଼ ଭାବେ ବାନ୍ଧେ। ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ହେଉଛି କ୍ଷାରରେ ଅକ୍ସିକରଣ ଦ୍ୱାରା ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟମୂଳକ ଭାବେ ପରିପକ୍ୱ କରାଯାଇଥିବା ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ। ତେଣୁ ବୋତଲରେ ଅବଶିଷ୍ଟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସହ ଡିମିଥାଇଲିତ ସମଜାତୀୟ ଯୌଗିକଗୁଡ଼ିକର ମିଶ୍ରଣ (azure A, azure B, azure C), ଥାୟୋନିନ୍ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ରହିଥାଏ, ଏବଂ ଏହି ମିଶ୍ରଣ ଭିନ୍ନ ସଂରଚନାକୁ ଭିନ୍ନ ଛଟାରେ ରଞ୍ଜିତ କରେ।

କେବଳ ଗୋଟିଏ ବାକ୍ୟ ମନେ ରଖିବାକୁ ହେଲେ: କ୍ଷାରୀକରଣ ରଞ୍ଜନର ତୀବ୍ରତା ବଦଳାଏ, ଯେତେବେଳେ ପଲିକ୍ରୋମିଂ ରଞ୍ଜନର ରଙ୍ଗ ବଦଳାଏ।

ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ତୁଳନାର ଆଧାର

ସବୁଠାରୁ ସରଳ ପ୍ରସ୍ତୁତି ହେଉଛି ପାଣିରେ ଦ୍ରବୀଭୂତ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, ସାଧାରଣତଃ 1% w/v, ବିନା କ୍ଷାର ଓ ବିନା ଅକ୍ସିକରଣରେ। ରଙ୍ଗଯୁକ୍ତ ରାସାୟନିକ ପ୍ରଜାତିଟି ହେଉଛି କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ପ୍ରତିଆୟନ ସହିତ ମିଥାଇଲ୍‌ଥାୟୋନିନିୟମ୍ ଧନାୟନ—ଏକ ଛୋଟ, ସମତଳ ଫେନୋଥାୟାଜିନ୍ ରଞ୍ଜକ, ଯାହାକୁ PubChemର ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ରେକର୍ଡରେ ମିଥାଇଲ୍‌ଥାୟୋନିନିୟମ୍ କ୍ଲୋରାଇଡ୍ ଭାବେ ବର୍ଣ୍ଣନା କରାଯାଇଛି। ଧନାୟନ ଭାବେ ଏହା ନ୍ୟୁକ୍ଲିକ୍ ଅମ୍ଳର ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ମୂଳ ଶୃଙ୍ଖଳ ଏବଂ ଜୀବାଣୁ କୋଷପ୍ରାଚୀରର ଅମ୍ଳୀୟ ଗୋଷ୍ଠୀ ସହ ବନ୍ଧନ କରେ, ଫଳରେ ହାଲୁକା ପୃଷ୍ଠଭୂମିରେ କୋଷଗୁଡ଼ିକ ନୀଳ ଦେଖାଯାଆନ୍ତି।

ଏହାର ଭଲ ଗୁଣ ହେଉଛି ଫଳାଫଳର ପୂର୍ବାନୁମେୟତା। କେନ୍ଦ୍ରକ ଓ ଜୀବାଣୁ ନୀଳ ଦେଖାଯାଆନ୍ତି। ବିପରୀତତା ମଧ୍ୟମ ମାତ୍ରାରେ ଥାଏ। ଅସ୍ପଷ୍ଟ ଜୀବଗୁଡ଼ିକ ଦୁର୍ବଳ ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ ହୋଇପାରନ୍ତି, ଏବଂ ଠିକ୍ ଏହି ସୀମାବଦ୍ଧତାକୁ ଦୂର କରିବା ପାଇଁ ଲୋଫ୍ଲର୍ ଚେଷ୍ଟା କରିଥିଲେ। ଏହି ଦ୍ରବଣ ଯେଉଁ ବ୍ୟାପକ ସରଳ ଜୀବାଣୁ ରଞ୍ଜକ ପରିବାରର ଅଂଶ, ସେ ବିଷୟରେ ଜାଣିବାକୁ ଜୀବାଣୁର ସରଳ ରଞ୍ଜନର ଏକ ସମୀକ୍ଷା ଦେଖନ୍ତୁ। ଏଠାରେ ମଧ୍ୟ ପଦାର୍ଥର ସଠିକ୍ ପରିଚୟ ନିଶ୍ଚିତ କରିବା ଜରୁରୀ: ମିଥାଇଲ୍ ବ୍ଲୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଭିନ୍ନ ଏକ ଅଣୁ, ଯେପରି ମିଥାଇଲ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁର ପାର୍ଥକ୍ୟରେ ବୁଝାଯାଇଛି। ତେଣୁ କେବଳ ରଙ୍ଗର ନାମ ଆଧାରରେ କ୍ୟାଟାଲଗ୍‌ରେ ଖୋଜିଲେ ଭୁଲ୍ ଶ୍ରେଣୀର ରଞ୍ଜକ ମିଳିପାରେ।

ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ କ୍ଷାରୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ସେହି ରଞ୍ଜକ, ଅଧିକ ତୀବ୍ର କ୍ରିୟା

ପାରମ୍ପରିକ ଲୋଫ୍ଲର୍ ପ୍ରସ୍ତୁତି ପଦ୍ଧତିରେ ଆଲକୋହଲୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମୂଳ ଦ୍ରବଣକୁ ପାଣିରେ ଥିବା ଲଘୁ କ୍ଷାର ସହ ମିଶାଯାଏ। ପାଠ୍ୟପୁସ୍ତକର ପଦ୍ଧତି ଅନୁସାରେ 30 mL 95% ଇଥାନଲ୍‌ରେ 0.3 g ରଞ୍ଜକ ସହ 100 mL 0.01% ଜଳୀୟ ପଟାସିୟମ୍ ହାଇଡ୍ରକ୍ସାଇଡ୍ ମିଶାଯାଏ (କିମ୍ବା ସମତୁଲ୍ୟ ଭାବେ 30 mL ସନ୍ତୃପ୍ତ ଆଲକୋହଲୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, 100 mL ପାତିତ ପାଣି ଓ 1 mL 1% KOH)। ଏଥିରୁ ସ୍ପଷ୍ଟ ଭାବେ କ୍ଷାରୀୟ pHରେ ପ୍ରାୟ 0.3% ରଞ୍ଜକ ଥିବା ବ୍ୟବହାରଯୋଗ୍ୟ ଦ୍ରବଣ ମିଳେ। ବାଣିଜ୍ୟିକ ପ୍ରସ୍ତୁତିଗୁଡ଼ିକ ମଧ୍ୟ ସେହି ନୀତି ଅନୁସରଣ କରନ୍ତି, ଏବଂ Thermo Fisherର ଅଣୁଜୀବବିଜ୍ଞାନ ରଞ୍ଜକ କ୍ୟାଟାଲଗ୍ରେ ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ କ୍ଷାରୀୟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ, ପଲିକ୍ରୋମ୍ ଓ ଜଳୀୟ ପ୍ରକାରଗୁଡ଼ିକୁ ପୃଥକ୍ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ବ୍ୟବହାର ଥିବା ପୃଥକ୍ କ୍ୟାଟାଲଗ୍ ସାମଗ୍ରୀ ଭାବେ ତାଲିକାଭୁକ୍ତ କରାଯାଇଛି।

ଏଠାରେ ମୁଖ୍ୟ କାର୍ଯ୍ୟକାରୀ ଧାରଣା ହେଉଛି କ୍ଷାର। pH ବଢ଼ାଇଲେ ନମୁନାର କାର୍ବକ୍ସିଲ୍ ଓ ଫସ୍‌ଫେଟ୍ ଗୋଷ୍ଠୀରୁ ପ୍ରୋଟନ୍ ଅପସାରିତ ହୁଏ, ଯାହା ଋଣାତ୍ମକ ସ୍ଥାନଗୁଡ଼ିକର ଘନତା ବଢ଼ାଏ। ଅନ୍ୟପଟେ, ଆଲକୋହଲୀୟ ମୂଳ ଦ୍ରବଣ ରଞ୍ଜକକୁ ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଦ୍ରବୀଭୂତ ରଖେ, ତେଣୁ ଏହା ସେହି ସ୍ଥାନଗୁଡ଼ିକରେ ଏକକ ଅଣୁ ରୂପରେ ପହଞ୍ଚେ। ଫଳରେ ନିରପେକ୍ଷ ଜଳୀୟ ରଞ୍ଜକ ତୁଳନାରେ ଜୀବାଣୁ ଅଧିକ ଦ୍ରୁତ ଓ ଅଧିକ ତୀବ୍ର ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ ହୁଏ, ଏବଂ ସାଧାରଣ ଜୀବାଣୁବିଜ୍ଞାନୀୟ ସ୍ମିୟର୍‌ର ପରିଚିତ ଗାଢ଼ ନୀଳ ଦଣ୍ଡାକୃତି ଜୀବାଣୁ ଓ କକାଇ ଦେଖାଯାଆନ୍ତି। ରଞ୍ଜନ ସମୟ ସାଧାରଣତଃ ଏକରୁ ତିନି ମିନିଟ୍, ତାପରେ ପାଣିରେ ଧୋଇଦିଆଯାଏ।

ଏହାର ପାରମ୍ପରିକ ପ୍ରୟୋଗ ହେଉଛି ଲୋଫ୍ଲର୍ ସିରମ୍ ମାଧ୍ୟମରେ ବଢ଼ାଯାଇଥିବା Corynebacterium diphtheriae: ସରୁ, ପ୍ରାୟତଃ ଗଦା ଆକୃତିର ଦଣ୍ଡାକାର ଜୀବାଣୁ, ଯେଉଁଥିରେ ସଞ୍ଚିତ ପଲିଫସ୍‌ଫେଟ୍‌ର ତୀବ୍ର ଭାବେ ରଞ୍ଜିତ ମେଟାକ୍ରୋମାଟିକ୍ ବାବେସ୍-ଏର୍ନ୍‌ଷ୍ଟ ଦାଣା ଥାଏ। ଏହି ମାଧ୍ୟମ ଓ ରଞ୍ଜକର ଯୋଡ଼ି ଐତିହାସିକ; ଉଭୟର ଶ୍ରେୟ ସେହି ଏକ ଜୀବାଣୁବିଜ୍ଞାନୀଙ୍କୁ ଦିଆଯାଏ, ଏବଂ ଦାଣାଗୁଡ଼ିକର ସ୍ପଷ୍ଟ ବିପରୀତତା ହେଉଛି ନିଦାନ ପାଇଁ ଏହାର ଲାଭ। ଡିଫ୍ଥେରିଆ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ କାମ ବ୍ୟତୀତ, ଏହା କଲ୍ଚର୍‌ରୁ ପ୍ରସ୍ତୁତ ସ୍ମିୟର୍ ପାଇଁ ସାଧାରଣ ଜୀବାଣୁବିଜ୍ଞାନୀୟ ରଞ୍ଜକ, କ୍ଲିନିକାଲ୍ ସ୍ମିୟର୍‌ରେ Neisseriaର ଆକୃତି ଅଧ୍ୟୟନ ପାଇଁ, ଏବଂ ଯେଉଁଠାରେ ଗ୍ରାମ୍ ରଞ୍ଜନ ଆବଶ୍ୟକ ନୁହେଁ କିନ୍ତୁ ସାଧାରଣ ଜଳୀୟ ବ୍ଲୁ ଅତ୍ୟଧିକ ଫିକା ହୁଏ, ସେଠାରେ ବ୍ୟବହୃତ ହୁଏ। ଏହା ଏକବର୍ଣ୍ଣୀ ରଞ୍ଜକ। ସମସ୍ତ ଅମ୍ଳୀୟ ଅଂଶ କୌଣସି ନା କୌଣସି ନୀଳ ଛଟା ନିଏ। ପ୍ରୋଟୋକଲ୍‌ରେ ରଙ୍ଗ ମାଧ୍ୟମରେ ଭେଦ କରିବା ଆବଶ୍ୟକ ଥିଲେ, କେବଳ କ୍ଷାର ତାହା ଦେଇପାରିବ ନାହିଁ।

ଏକ ବ୍ୟବହାରିକ ସତର୍କତା: ସଂରକ୍ଷଣ ଓ କାର୍ବନ୍ ଡାଇଅକ୍ସାଇଡ୍ ଗ୍ରହଣ ଫଳରେ କ୍ଷାରୀୟ ରଞ୍ଜକ ଦ୍ରବଣର ଗୁଣ ହ୍ରାସ ପାଏ ଏବଂ ଅବକ୍ଷେପ ତିଆରି ହୁଏ। ତେଣୁ ପ୍ରୟୋଗଶାଳାଗୁଡ଼ିକ ଅଳ୍ପ ପରିମାଣରେ ଦ୍ରବଣ ପ୍ରସ୍ତୁତ କରନ୍ତି କିମ୍ବା କ୍ୟାଟାଲଗ୍‌ର ଦ୍ରବଣ କିଣି ତାହାର ସଂରକ୍ଷଣ ଅବଧି ମାନନ୍ତି; ପ୍ରତ୍ୟେକ ସ୍ଲାଇଡ୍‌ରେ ତଳଛଟ ଛାଡ଼ୁଥିବା ପୁରୁଣା ବୋତଲକୁ ଚଳାଇ ରଖନ୍ତି ନାହିଁ।

ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ: ଗୋଟିଏ ନାମ, ଅନେକ ରଞ୍ଜକ

ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସେହି ରଞ୍ଜକରୁ ଆରମ୍ଭ ହୁଏ, କିନ୍ତୁ ତାହାକୁ କ୍ଷାରରେ ନିୟନ୍ତ୍ରିତ ଅକ୍ସିକରଣ କରାଯାଏ। ଐତିହାସିକ ଭାବେ ଏହାକୁ ପରିପକ୍ୱ କରିବା ବା ପଲିକ୍ରୋମିଂ କୁହାଯାଉଥିଲା। କ୍ଷାରୀୟ ପରିବେଶରେ ସମୟ ଦେଇ ପରିପକ୍ୱ କରିବା, କାର୍ବନେଟ୍ ସହ ଉତ୍ତାପ ଦେବା, କିମ୍ବା ଡାଇକ୍ରୋମେଟ୍ ପରି ପଦାର୍ଥ ଦ୍ୱାରା ଅକ୍ସିକରଣ କରିବା ଫଳରେ ଡାଇମିଥାଇଲ୍‌ଆମିନୋ ପ୍ରତିସ୍ଥାପକଗୁଡ଼ିକରୁ ପର୍ଯ୍ୟାୟକ୍ରମେ ମିଥାଇଲ୍ ଗୋଷ୍ଠୀ ଅପସାରିତ ହୁଏ। ଉତ୍ପାଦଟି ଏକ ମିଶ୍ରଣ: ଅବଶିଷ୍ଟ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସହ azure B (ଗୋଟିଏ ମିଥାଇଲ୍ ଅପସାରିତ), azure A ଓ azure C (ଆହୁରି ଡିମିଥାଇଲେସନ୍), ଥାୟୋନିନ୍ (ସମ୍ପୂର୍ଣ୍ଣ ଡିମିଥାଇଲିତ), ଏବଂ ମିଥିଲିନ୍ ଭାୟୋଲେଟ୍ ପରିବାରର ଅକ୍ସିକରଣଜନିତ ପାର୍ଶ୍ୱ ଉତ୍ପାଦ। ପ୍ରତ୍ୟେକ ଉପାଦାନର ନିଜସ୍ୱ ଛଟା ଓ ତନ୍ତୁ ପ୍ରତି ଆକର୍ଷଣ ରହିଛି, ତେଣୁ ମିଶ୍ରଣଟି ମେଟାକ୍ରୋମାଟିକ୍ ଭାବେ ରଞ୍ଜନ କରେ: କେନ୍ଦ୍ରକ, ଦାଣା, ମ୍ୟୁସିନ୍ ଓ ଉପାସ୍ଥି ପ୍ରତ୍ୟେକ ଭିନ୍ନ ନୀଳରୁ ଲାଲ୍-ବାଇଗଣୀ ଛଟା ନିଅନ୍ତି।

ପ୍ରସିଦ୍ଧ ରକ୍ତ ରଞ୍ଜକଗୁଡ଼ିକ ପଛରେ ମଧ୍ୟ ଏହି ରସାୟନ ରହିଛି। ପ୍ରାରମ୍ଭିକ ଗବେଷକମାନେ ଦେଖିଥିଲେ ଯେ କ୍ଷାରୀକୃତ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ମ୍ୟାଲେରିଆ ପରଜୀବୀର କେନ୍ଦ୍ରକକୁ ବାଇଗଣୀ ଛଟାରେ ରଞ୍ଜିତ କରୁଥିଲା, କିନ୍ତୁ ସେମାନଙ୍କ ଜଳୀୟ ପରିପକ୍ୱ ଦ୍ରବଣ ଅସ୍ଥିର ଥିଲା ଏବଂ କିଛି ଦିନ ମଧ୍ୟରେ ଅବକ୍ଷେପ ହେଉଥିଲା। ବାଇଗଣୀ ରକ୍ତ ରଞ୍ଜକ କିପରି ଉଦ୍ଭାବିତ ହେଲା ବିଷୟର ସମୀକ୍ଷାରେ ବର୍ଣ୍ଣିତ ଅଛି ଯେ 1891ରେ ମାଲାଖୋଭ୍‌ସ୍କି ଓ ରୋମାନୋଭ୍‌ସ୍କି କିପରି ସ୍ୱାଧୀନ ଭାବେ ଏହି ପ୍ରଭାବକୁ ବ୍ୟବହାର କଲେ, ରଞ୍ଜକ ଅବକ୍ଷେପକୁ ସ୍ଥିର କରିବା ଓ ଉତ୍ତାପ ବିନା ନମୁନାର ପତଳା ସ୍ତରକୁ ସ୍ଥିରୀକରଣ କରିବା ପାଇଁ କିପରି ମିଥାନଲ୍ ବ୍ୟବହାର ଆରମ୍ଭ ହେଲା, ଏବଂ ପରେ ଗିମ୍ସା କିପରି ମାପିଥିବା azure B ଓ ଇଓସିନ୍‌କୁ ଆଧାର କରି ଗ୍ଲିସେରଲ୍ ଦ୍ୱାରା ସ୍ଥିରୀକୃତ ମିଶ୍ରଣର ମାନକୀକରଣ କଲେ। ଆଧୁନିକ ଗିମ୍ସା-ପ୍ରକାର ରଞ୍ଜକଗୁଡ଼ିକ ସିଧାସଳଖ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ଓ ଇଓସିନ୍‌ରୁ ଉତ୍ପନ୍ନ; ଏହି ସଂଯୋଗ ରୋମାନୋଭ୍‌ସ୍କି ପ୍ରଭାବ ସୃଷ୍ଟି କରେ। ଇଓସିନ୍ ସହ ସଂଯୋଗ ଓ azure B ଉପାଦାନ ବିଷୟରେ ବିସ୍ତୃତ ଭାବେ ଜାଣିବା ପାଇଁ ରୋମାନୋଭ୍‌ସ୍କି-ପ୍ରକାର ରଞ୍ଜକ ଓ azure B–ଇଓସିନ୍ ପାରସ୍ପରିକ କ୍ରିୟା ଦେଖନ୍ତୁ।

ଏହା ଏକ ମିଶ୍ରଣ ହୋଇଥିବାରୁ, ସ୍ୱଭାବତଃ ଏହି ତିନୋଟି ମଧ୍ୟରେ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁ ସବୁଠାରୁ କମ୍ ମାନକୀକୃତ। ଏହାର ଛଟାଗୁଡ଼ିକର ସଠିକ୍ ସନ୍ତୁଳନ ଅକ୍ସିକରଣର ପଦ୍ଧତି ଓ ମାତ୍ରା ଉପରେ ନିର୍ଭର କରେ। ସେଥିପାଇଁ ତନ୍ତୁବିଜ୍ଞାନ ସାମଗ୍ରୀ ଯୋଗାଣକାରୀମାନେ ଏହାକୁ ପୁରୁଣା ଲୋଫ୍ଲର୍ ଦ୍ରବଣ ଭାବେ ନୁହେଁ, ନିଜସ୍ୱ କାର୍ଯ୍ୟଦକ୍ଷତା ପରୀକ୍ଷା ଥିବା ଏକ ପୃଥକ୍ ଉତ୍ପାଦ ଭାବେ ବିକ୍ରି କରନ୍ତି। ସାଧାରଣ ବ୍ୟବହାର ମଧ୍ୟରେ ମାଷ୍ଟ କୋଷର ଦାଣା, ମ୍ୟୁସିନ୍ ଓ ଉପାସ୍ଥିର ମେଟାକ୍ରୋମାଟିକ୍ ପ୍ରଦର୍ଶନ, ପ୍ଲାଜ୍‌ମା କୋଷର ସୂକ୍ଷ୍ମ ବିବରଣୀ, ଏବଂ ଗୁଡ୍‌ପାସ୍ଚର୍-ପ୍ରକାର ପଲିକ୍ରୋମ୍ ପଦ୍ଧତି ଦ୍ୱାରା ତନ୍ତୁ ଖଣ୍ଡରେ Helicobacter pylori ଦେଖାଇବା ଅନ୍ତର୍ଭୁକ୍ତ। ରଙ୍ଗ ଆଧାରରେ ଭେଦ କରିବା ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଥିଲେ ଏହା ସଠିକ୍ ପସନ୍ଦ; କିନ୍ତୁ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍‌ରେ ଜୀବାଣୁର ସ୍ପଷ୍ଟ ଏକବର୍ଣ୍ଣୀ ଆକୃତି ଆଶା କରାଯାଉଥିଲେ ଏହା ଭୁଲ୍ ପସନ୍ଦ।

ସଂଯୋଜନ ଓ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟର ତୁଳନା

ସାରଣୀକୁ ନିଷ୍ପତ୍ତି ନେବାର ପଦ୍ଧତି ଭାବେ ପଢ଼ନ୍ତୁ। ନମୁନା ଅତ୍ୟଧିକ ଫିକା ରଞ୍ଜିତ ହେଉଥିଲେ, pH ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଧାରଣା ବଦଳାଇ ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ ରଞ୍ଜକ ନିଅନ୍ତୁ। ସବୁକିଛି ରଞ୍ଜିତ ହେଉଥିଲେ ମଧ୍ୟ କୌଣସି ଅଂଶ ଅଲଗା ଦେଖାଯାଉନଥିଲେ, ରଞ୍ଜକ ସମ୍ବନ୍ଧୀୟ ଧାରଣା ବଦଳାଇ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ନିଅନ୍ତୁ। ଲୋଫ୍ଲର୍ ସ୍ମିୟର୍‌ରେ ଦାଣାଗୁଡ଼ିକ ଖୁବ୍ ସ୍ପଷ୍ଟ ଦେଖାଯାଉଥିଲେ ମଧ୍ୟ ଯଦି ପର୍ଯ୍ୟବେକ୍ଷକ ପଚାରନ୍ତି କେନ୍ଦ୍ରକ ଓ କୋଷଦ୍ରବ୍ୟ କାହିଁକି ସମାନ ନୀଳ, ଉତ୍ତର ହେଉଛି ଯେ କୌଣସି କ୍ଷାରୀୟ ଏକବର୍ଣ୍ଣୀ ରଞ୍ଜକ ସେମାନଙ୍କୁ ଭିନ୍ନ ରଙ୍ଗରେ ଦେଖାଇପାରିବ ନାହିଁ। ସେହି ପ୍ରଶ୍ନ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ପରିବାର ଓ ତାହାର ରକ୍ତ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟୁତ୍ପନ୍ନଗୁଡ଼ିକ ସହ ସମ୍ପର୍କିତ।

ସାଧାରଣ ଭ୍ରମରୁ ବଞ୍ଚିବା

ଅଧିକାଂଶ ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱର କାରଣ ଦୁଇଟି ଭୁଲ୍। ପ୍ରଥମଟି ହେଉଛି ବୋତଲରେ ଉଭୟ ନୀଳ ଦେଖାଯାଉଥିବାରୁ ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ ରଞ୍ଜକ ଓ ସାଧାରଣ ମିଥିଲିନ୍ ବ୍ଲୁକୁ ପରସ୍ପରର ବିକଳ୍ପ ଭାବେ ଧରିନେବା। ସେମାନଙ୍କ pH ଓ ତୀବ୍ରତା ଭିନ୍ନ। ଯେଉଁଠାରେ ଲୋଫ୍ଲର୍‌ଙ୍କ ରଞ୍ଜକ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ କରାଯାଇଛି, ସେଠାରେ ନିରପେକ୍ଷ ରଞ୍ଜକ ବ୍ୟବହାର କଲେ ପ୍ରୋଟୋକଲ୍‌ର ମୂଳ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଥିବା ଦାଣାର ବିପରୀତତା ହିଁ ହରାଇଯାଏ। ଦ୍ୱିତୀୟଟି ହେଉଛି ଯେକୌଣସି ପୁରୁଣା କିମ୍ବା ଅନିଚ୍ଛାକୃତ ଭାବେ ପରିପକ୍ୱ ହୋଇଯାଇଥିବା କ୍ଷାରୀୟ ବ୍ଲୁକୁ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ଭାବେ ଧରିନେବା। ଅନିୟନ୍ତ୍ରିତ ପରିପକ୍ୱତାରୁ ଅଜଣା ସାନ୍ଦ୍ରତାର ଅଜଣା ମିଶ୍ରଣ ତିଆରି ହୁଏ। ଅନ୍ୟପଟେ, ପ୍ରକୃତ ପଲିକ୍ରୋମ୍ ଦ୍ରବଣଗୁଡ଼ିକ ନିର୍ଦ୍ଧାରିତ ଅକ୍ସିକରଣ ପଦ୍ଧତିରେ ପ୍ରସ୍ତୁତ ହୁଏ ଏବଂ ରକ୍ତ ରଞ୍ଜକ ପରମ୍ପରାରେ ମାପିଥିବା ଇଓସିନ୍ ସହ ମିଶାଯାଏ। ଏଠାରେ ଇତିହାସ ଶିକ୍ଷାଦାୟକ: 1890 ଦଶକର ଅସ୍ଥିର ଜଳୀୟ ପରିପକ୍ୱ ଦ୍ରବଣଗୁଡ଼ିକ ବଦଳରେ ମିଥାନଲ୍‌ରେ ସ୍ଥିରୀକୃତ ପ୍ରସ୍ତୁତି ବ୍ୟବହାର ଆରମ୍ଭ ହେଲା, କାରଣ ଅନିୟନ୍ତ୍ରିତ ମିଶ୍ରଣଗୁଡ଼ିକୁ ସମାନ ଭାବେ ପୁନଃପ୍ରସ୍ତୁତ କରିବା ସମ୍ଭବ ନଥିଲା। କେତେ ପୁରୁଣା ତାହା ଅଜଣା ଥିବା ବୋତଲରୁ ନିଦାନମୂଳକ ସ୍ଲାଇଡ୍ ରଞ୍ଜିତ କରିବା ପୂର୍ବରୁ ଏହି ଶିକ୍ଷା ମନେ ରଖିବା ଉଚିତ।

ନାମର ସଠିକ୍ ଯାଞ୍ଚ ଏହି ଦ୍ୱନ୍ଦ୍ୱ ଦୂର କରେ। ରଙ୍ଗ ଦେଖି ଅନୁମାନ କରିବା ପରିବର୍ତ୍ତେ ଲେବେଲ୍‌ରେ କ୍ୟାଟାଲଗ୍ ସାମଗ୍ରୀଟି କ’ଣ (ଜଳୀୟ, ଲୋଫ୍ଲର୍ କିମ୍ବା ପଲିକ୍ରୋମ୍), ରଞ୍ଜକର ପରିମାଣ କେତେ, ଏବଂ ନିର୍ଦ୍ଦିଷ୍ଟ ପ୍ରୟୋଗ କ’ଣ ତାହା ନିଶ୍ଚିତ କରନ୍ତୁ। ଏହି ତିନୋଟି ପ୍ରସ୍ତୁତିର କ୍ରୋମୋଫୋର୍‌ର ମୂଳ ଏକ। କିନ୍ତୁ ସେମାନଙ୍କ ଉଦ୍ଦେଶ୍ୟ ଏକ ନୁହେଁ।