Agar EMB irratti bifa koloonii E. coli fi kanneen biroo dubbisuu

Barataan tokko saamuda eenyummaan isaa hin beekamne agar eosin methylene blue irratti sararaan facaasa, halkan guutuu inkubeetarii keessa tursiisa, achiis gara saanii koloonii dukkanaa'oo calaqqee magariisaa qabanitti deebi'a. Galmeen yaadannoo isaa "E. coli, mirkanaa'e" jedha. Galmeen kun waan saaniin ragaa itti kennuu danda'u caalaa hima. Saaniin kun haala murtaa'e keessatti amala guddinaa fi raacessuu mul'atu agarsiisa. Eenyummaan gosa maaykiroorgaanizimii garuu hima adda ta'ee ragaa adda ta'e barbaada.

Qajeelfamni kun bu'aa agar EMB akka hojii hiikuu tokkootti ilaala. Yaada bu'uuraa isaa ibsa, atlasi fakkeenyaa saaniiwwanii to'annoo waliin dhiheessa, akkasumas haalota fakkiin kitaaba barnootaa nama dogoggorsu adda baasa.

Yaada saanii kana duuba jiru

Agar EMB filataa fi adda baasaa dha. Halluuwwan eosin Y fi methylene blue maaykiroorgaanizimoota Gram poozatiivii hedduu ukkaamsu; kanaaf meediyaan kun guddina Gram negaatiivii jajjabeessa. Halluuwwan kun akka agarsiiftuutis hojjetu: maaykiroorgaanizimiin sukkaara jiru raacessee asiidii naannoo isaa keessatti gahaa yoo oomishu, kolooniin halluu baay'ee xuuxee diimaa-buluugaa dukkanaa'aa irraa gara buluugaa-gurraachaatti jijjiirama. Oomishni asiidii cimaa yoo ta'e, fuulli koloonii calaqqee sibiilawaa magariisaa, kan kofa ilaalchaan jijjiiramu, agarsiisuu danda'a. Pirootokooliin ASM saanii agar eosin methylene blue walitti makamuu filannoo fi adda baasuu kana ibsa; suuraawwan wabii barsiisuuf gargaaranis dhiheessa.

Bu'aa kamiyyuu dubbisuu dura wanti tokko barbaachisaa dha: qophii makaa kam akka fayyadamaa jiru mirkaneessaa. Qophiin makaa durii Holt Harris Teague laaktoosii fi sukroosii qaba; Levine EMB garuu laaktoosii qofa qaba. Maaykiroorgaanizimiin sukroosii raacessu garuu laaktoosii hin raacessine, kan akka saamudawwan addaan baafaman Serratia marcescens hedduu, qophiiwwan lamaan irratti bifa adda addaa qabaachuu danda'a. Sanadni oomishtootaa meediyaa EMB garaagarummaa qophii makaa kana ifatti ibsa. Maqaa oomishtootaa fi qophii makaa bu'aa waliin galmee yaadannoo keessatti barreessaa.

Agar EMB qophaa'ee garuu maaykiroorgaanizimiin irratti hin facaafamne yeroo baay'ee diimaa-bunaamaa irraa gara diimaa-buluugaatti ta'a; yeroo tokko tokko bifa magariisa fakkaatu ykn kuufama xixiqqoo qaba. Halluun duubbee kun guddina miti. Dubbisa hunda saanii maaykiroorgaanizimiin irratti hin facaafamne ykn haala jalqabaa galmaa'e waliin wal bira qabaa. Pirootokooliin barnootaa waan biraa yoo hin murteessine, saanii jalqabaa 35 hanga 37 C irratti, oksijiiniin jiru keessatti, gara sa'aatii 18 hanga 24 inkubeetarii keessa erga turee booda dubbisaa. Yeroo inkubeetarii dheeressuun bifa raacessuu jijjiiruu danda'a.

Saanii akkamitti ilaaluu qabdu

Ifa gosa lama fayyadamaa. Jalqaba saanii ifa irraa calaqqisu ykn cinaa irraa dhufu jalatti ilaalaa, achiis jallisaa: calaqqeen sibiilawaa kofa ilaalchaan jijjiirama; kofa irratti hundaa'ee mul'achuu ykn dhabamuu danda'a. Sana booda halluu koloonii fi giddugaleessa dukkanaa'aa madaaluuf ifa saanii keessa darbuun ilaalaa. Kolooniiwwan sirriitti wal irraa fagaatan irratti hojjedhaa; walitti tuulamuun fi kolooniiwwan ollaa kuufama asiidii naannoo sanaa jijjiiru, halluu hir'isuu ykn garmalee cimsuu danda'u. Tuuti suuraawwan ASM kana kallattiin agarsiisa: E. coli guddisa maaykiroorgaanizimoota walmakaa keessatti calaqqee irraa eegamu dhabuu danda'a, sababni isaas maaykiroorgaanizimoonni naannoo isaa jiran haala asiidii jijjiiru.

Yeroo shaakalli hayyamutti saamudawwan to'annoo dabaladhaa. Tuuti barsiisuu keessatti yeroo baay'ee fayyadamu, akkuma gabateewwan to'annoo qulqullinaa idilee meediyaa EMB keessatti tarreeffametti, amala buluugaa-gurraachaa fi calaqqee sibiilawaaf E. coli ATCC 25922, amala halluu hin qabneef raacessaa hin taane kan akka Salmonella Typhimurium ATCC 14028 ykn Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, akkasumas to'annoo ukkaamsuuf Gram poozatiivii kan akka Enterococcus faecalis ykn Staphylococcus aureus of keessatti qabata. Saamudni to'annoo poozatiivii calaqqee yoo hin qabaanne, saamuda hin beekamne shakkuu dura haala inkubeetarii, walitti tuulama, ykn qophii makaa shakkaa.

Atlasi saaniiwwanii fakkeenyaan agarsiisu

Saaniiwwan armaan gadii fakkeenyota uumaman malee suuraawwan guddisa dhugaa miti. Bifa barbaaduu qabdan agarsiisu malee halluu sirrii sanyii tokkoo hin agarsiisan. Suuraawwan wabii ASM fi saaniiwwan dhugaa laaboraatorii barnootaa keessaa waliin wal bira qabaa.

Saanii 1: Escherichia coli agar EMB irratti, raacessaa laaktoosii cimaa

E. coli agar EMB irratti yeroo baay'ee diimaa-buluugaa dukkanaa'aa irraa gara buluugaa-gurraachaatti ta'a; yeroo hedduu giddugaleessa dukkanaa'aa fi calaqqee sibiilawaa magariisaa oomisha asiidii cimaa irraa argamu qaba. Calaqqeen kun mallattoo beekamaa barattoonni barbaadan dha; garuu akka ragaa deeggaruutti ilaalaa malee akka hiika E. coli murteessuutti hin fudhatinaa. Ciminni calaqqee sanyii, yeroo inkubeetarii, baay'ina koloonii, fi kofa ilaalchaa irratti hundaa'ee jijjiirama. Calaqqeen dhabamuun E. coli akka hin jirre hin mirkaneessu; kolooniin dukkanaa'aa calaqqee hin qabne immoo raacessitoota biroo hedduu agarsiisuu danda'a. Hojii itti aanu kamiifuu kutaa kolooniin itti walitti tuulame irraa dubbisuu mannaa koloonii sirriitti adda ba'e filadhaa.

Saanii 2: Klebsiella pneumoniae agar EMB irratti, raacessaa mucucaataa

Klebsiella pneumoniae agar EMB irratti yeroo baay'ee koloonii gurguddoo, calaqqisoo, mucucaataa, halluu pilaankii-diimaa-buluugaa irraa gara bunaamaa-diimaa-buluugaatti qaban uuma. Isaanis yeroo hedduu giddugaleessa dukkanaa'aa qabu, garuu yeroo baay'ee calaqqee sibiilawaa cimaa hin qaban. Raacessitoota fira ta'an kan akka Enterobacter keessattis bocni walfakkaataan mul'ata. Amalli mucucaataa fi guddinni koloonii kutaa dubbisaa ti: kolooniin pilaankii xiqqaa fi diriiraan, koloonii guddaa gombifamee mucucaataa ta'e irraa hiika adda ta'e qaba. Akkuma E. coli, saaniin kun amala raacessuu mul'atu akeeka; maqaa sadarkaa gosaatti kennuuf mirkaneessa baayookeemikaalaa armaan gaditti ibsame barbaachisa.

Saanii 3: Salmonella agar EMB irratti fi raacessitoota hin taane biroo, koloonii halluu hin qabne

Salmonella agar EMB irratti fi maaykiroorgaanizimoonni laaktoosii hin raacessine kanneen isa waliin ilaalaman, Shigella fi saamudawwan Pseudomonas addaan baafaman hedduu dabalatee, yeroo baay'ee akka koloonii halluu hin qabne, ifa muraasa dabarsan, ykn keelloo-bunaamaa dadhabaa ta'anitti guddatu. Qophiiwwan makaa fi haalota tokko tokko keessatti bifa pilaankii dadhabaa argatu; kanaaf kolooniin pilaankii dadhabaa ta'e ofumaan raacessaa jechuu miti. EMB Salmonella, Shigella, ykn raacessitoota hin taane biroo irraa adda hin baasu; adda baasuun kun qorannoowwan itti aananiin raawwatama. Sanyiiwwan Salmonella laaktoosii raacessan, koloonii sibiilawaa E. coli fakkaatan qaban, galmaa'uu isaaniis hubadhaa; kunis sababii dabalataa saaniin tokko qofti murtii xumuraa kennuu hin dandeenyeef ta'a.

Saanii 4: Serratia marcescens fi dogoggora qophii makaa irraa dhufu

Serratia marcescens kutaa mataa isaa qabaachuun barbaachisaa dha, sababni isaas barattoonni yeroo baay'ee koloonii diimaa eeganii sana booda saanii dogoggoraan dubbisu. Saamudawwan kilinikaa keessaa addaan baafaman baay'een laaktoosii hin raacessan; kanaaf Levine EMB irratti yeroo baay'ee halluu dadhabaa ykn halluu xiqqoo qabuun mul'atu. Saamudawwan addaan baafaman hedduun sukroosii waan raacessaniif, qophiin makaa sukroosii qabu deebii dukkanaa'aa ykn asiidii waliin walqabatu caalaa agarsiisuu danda'a. 35 hanga 37 C irrattis halluu diimaa prodigiosin beekamaa hin eeginaa; oomishni halluu ho'a inkubeetarii irratti amanamaa miti. Pirootokooliin Serratia marcescens agar EMB irratti yeroo ibsu, ibsi sun qophii makaa kam irratti akka hundaa'e mirkaneessaa. Sakatta'iinsi meetaboolizimii Serratia bifa laaktoosii hin raacessinee fi sukroosii raacessuun isaa jijjiiramu, kan dogoggora kana duuba jiru, walitti qaba.

Saanii 5: saamudawwan to'annoo fi maaykiroorgaanizimoota ukkaamfaman

Maaykiroorgaanizimoonni Gram poozatiivii kan akka Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, fi Bacillus agar EMB irratti waliigalaan ukkaamfamu ykn guddinni isaanii baay'ee hir'ata; ta'us ukkaamsuun sanyii hunda irratti guutuu miti. Tuuti saamudawwan to'annoo dubbisa amanamaa taasisa: to'annoon E. coli guddina gaarii halluu buluugaa-gurraachaa fi calaqqee qabu agarsiisuu qaba; to'annoon raacessaa hin taane guddina halluu hin qabne agarsiisuu qaba; to'annoon ukkaamsuu immoo guddina xiqqoo ykn guddina dhabuu agarsiisuu qaba. To'annoon ukkaamsuu sirriitti yoo guddate, tarkaanfiin filannoo hin milkoofne; dubbisni biroo hundi qophii sana irratti taasifames shakkisiisaa dha. Malli halluu dibuu gaaffii meediyaa guddisaa irraa adda ta'e deebisa; kutaa laaboraatorii keessatti islaayidii halluu dibuun walqabatuuf, atlasi halluu dibuu methylene blue ilaalaa.

Wal bira qabuu daangaa qabu

Himoonni sadii bifa nama dogoggorsu kana walitti qabu. Dukkanaa'uun E. coli jechuu miti; Klebsiella, Enterobacter, fi raacessitoonni biroon giddugaleessa dukkanaa'aa calaqqee hin qabne uumu. Pilaankii ta'uun Klebsiella jechuu miti; raacessitoonni giddugaleessaan ykn suuta raacessan, akkasumas tokko tokko maqaan raacessitoota hin taane jedhaman, pilaankii ykn diimaa-buluugaa dadhabaa ta'anii mul'atu. Calaqqeen E. coli ta'uu isaa guutumaan mirkaneessuu hin danda'u; raacessitoonni cimaa biroonis isa uumuu danda'u. Pirootokooliin barsiisuu fi fakkiiwwan guddisa walmakaa isaa dogoggoroota kana hunda fakkeenyaan agarsiisu.

Daangaa mirkaneessuu

Agar EMB amala mul'atu gabaasa malee gosa maaykiroorgaanizimii hin gabaasu. Maaykiroorgaanizimoonni adda addaa bifa koloonii tokko qooddachuu danda'u; maaykiroorgaanizimiin tokko immoo sanyii, umurii, walitti tuulama, qophii makaa, fi haala inkubeetarii irratti hundaa'ee fakkii kitaaba barnootaa isaa irraa adda ta'uu danda'a. Kanaaf adeemsi hojii barsiisuu fi kilinikaa bifa koloonii EMB akka tilmaama jalqabaatti ilaalu.

Adeemsi hojii barataa ragaan deeggaramuu danda'u akkana: koloonii adda ba'e ibsaa (guddina, halluu, giddugaleessa, calaqqee ifa cinaa jalatti, amala mucucaataa); qophii makaa, yeroo fi ho'a inkubeetarii, akkasumas saamudawwan to'annoo galmeessaa; sana booda qorannoo mirkaneessaa kamiyyuu dura koloonii sirriitti adda ba'e gara meediyaa haaraatti dabarsuun guddisa qulqulluu argadhaa. Hojiiwwan itti aanan yeroo baay'ee raawwataman, E. coli fi kolifoormii tilmaamaan adda baasuuf halluu dibuu Gram fi walnyaatinsa IMViC, maaykiroorgaanizimoota mar'imaanii adda baasuuf TSI ykn KIA fi tuuta qorannoowwan baayookeemikaalaa maaykiroorgaanizimichaaf addaa, akkasumas yeroo hojiin sun barbaadutti adda baasuu seerooloojii, MALDI TOF, ykn mala biroo ragaan mirkanaa'e dabalatu. EMB meediyaawwan mar'imaanii filataa fi adda baasaa keessaa akkamitti akka hammatamu hubachuuf, seensawwan meediyaa guddisaa mar'imaanii fi hojii halluu dibuu Gram booda itti aanu ilaalaa. Gaaffii walqabataa halluu buluugaan islaayidii irratti dibamu maal mirkaneessuu akka danda'uu fi maal akka hin dandeenyeef, atlasi halluu dibuu methylene blue ilaalcha walfakkaatuun waan mul'atee fi xumura irraa baafamu adda tursiisa.

Xumura dura waan argitan barreessaa. "Koloonii buluugaa-gurraacha dukkanaa'aa calaqqee magariisaa kofa irratti hundaa'u qaban, Levine EMB irratti sa'aatii 24 keessatti mul'atan, raacessuu laaktoosii cimaa waliin kan walsimu" jechuun ragaan deeggaramuu danda'a. "E. coli, mirkanaa'e" jechuun tarkaanfii mirkaneessuu saaniin qofti kennuu hin dandeenye barbaada.