Kif taqra r-riċerka dwar il-blu tal-metilene: ċelloli, annimali, tessut uman, u provi kliniċi

Ikkunsidra żewġ sejbiet ippubblikati. F’wieħed, doża orali waħda ta’ blu tal-metilene żiedet l-attività tal-moħħ waqt kompiti ta’ attenzjoni u memorja u tejbet l-irkupru tal-memorja b’7 percent. Fl-ieħor, il-blu tal-metilene naqqas il-fluss tad-demm ċerebrali u l-metaboliżmu tal-ossiġnu fil-moħħ f’voluntiera b’saħħithom. L-istess molekula, direzzjonijiet opposti. Qarrej li jqis it-tnejn bħala verdetti dwar l-istess mistoqsija jasal għall-konklużjoni li wieħed minnhom bilfors huwa żbaljat.

L-ebda wieħed mhu żbaljat. Staqsew mistoqsijiet differenti, f’sistemi differenti, b’dożi differenti, permezz ta’ rotot differenti, u kejlu endpoints differenti f’ħinijiet differenti. Dan l-artiklu jgħallmek tara dawk id-differenzi kif jarahom riċerkatur, sabiex il-pretensjoni li jmiss li tiltaqa’ magħha tkun tista’ tiġi kklassifikata qabel ma titwemmen. L-isfond dwar x’tagħmel il-molekula fil-livell kimiku huwa kopert fl-ispjegazzjoni tal-mekkaniżmu, u l-mistoqsija dwar kif id-doża tifforma l-effett hija koperta fir-reviżjoni tal-evidenza dwar id-dożaġġ. Hawnhekk is-suġġett huwa l-evidenza nnifisha.

Kull studju jwieġeb mistoqsija dejqa

Riżultat ta’ studju qatt mhu stqarrija dwar il-blu tal-metilene b’mod ġenerali. Huwa stqarrija dwar il-blu tal-metilene f’mudell partikolari, mogħti permezz ta’ rotta partikolari, b’doża partikolari, imqabbel ma’ kontroll partikolari, imkejjel b’endpoint partikolari, f’ħin partikolari. Ibdel wieħed biss minn dawn u t-tweġiba tista’ tinbidel. Seba’ oqsma, mimlija għal kull studju li taqra:

1. Mudell. Ċelloli f’dixx, ġurdien, tessut uman miżmum ħaj barra l-ġisem, jew nies. Kull pass ’il fuq iżid ir-realiżmu u jnaqqas il-kontroll.
2. Rotta. Jinbela’, jiġi injettat ġo vina, jiġi injettat ġo ġog, jew jitqattar fuq ċelloli. Ir-rotta tiddetermina kemm jasal fit-tessut u kemm jasal malajr.
3. Unitajiet tad-doża. Milligrammi għal kull kilogramma għall-annimali u n-nies, micromolar għaċ-ċelloli u għall-banjijiet tat-tessuti. Dawn l-unitajiet ma jistgħux jiġu kkonvertiti bejniethom bl-aritmetika biss, għax bejniethom jidħlu l-assorbiment, id-distribuzzjoni, l-irbit mal-proteini, u t-tneħħija.
4. Komparatur. Plaċebo, soluzzjoni vehicle, annimali mhux trattati, jew baseline qabel id-doża. Riżultat mingħajr komparatur huwa osservazzjoni, mhux sejba.
5. Endpoints. X’ġie mkejjel fil-fatt: sinjal minn skan tal-moħħ, livell ta’ enzima, densità tal-għadam, punteġġ f’test. Markaturi surrogati (affarijiet li jirrappreżentaw riżultat) mhumiex ir-riżultat innifsu.
6. Ħin. Doża waħda mkejla wara siegħa hija pretensjoni differenti minn dożaġġ ta’ kuljum għal sena.
7. Inċertezza. Id-daqs tal-kampjun, voluntiera b’saħħithom kontra pazjenti, u jekk l-awturi stess jindikawx limitazzjonijiet. Studji pilota żgħar jiġġeneraw ipoteżijiet; ma jsolvuhomx.

L-erba’ eżempji hawn taħt jimlew din l-iskeda għal studji reali, inklużi tnejn li jidhru li ma jaqblux.

Eżempju 1: prova fuq voluntiera li sabet aktar attività fil-moħħ

F’prova ta’ imaging randomizzata, double blind, u kkontrollata bi plaċebo, 26 adult b’saħħtu ta’ bejn 22 u 62 sena wettqu kompiti ta’ attenzjoni sostnuta u memorja għal żmien qasir fi skaner, imbagħad belgħu jew 280 mg ta’ blu tal-metilene ta’ grad farmaċewtiku (madwar 4 mg/kg) jew plaċebo ta’ kulur blu għall-ikel, u rrepetew il-kompiti siegħa wara. Il-grupp tal-blu tal-metilene wera risponsi aktar qawwija fil-kortiċi insulari waqt l-attenzjoni u fin-netwerks prefrontali, parjetali, u oċċipitali waqt il-memorja, flimkien ma’ 7 percent aktar tweġibiet korretti waqt l-irkupru. Test bil-karbonju dijossidu ma wera l-ebda bidla fir-reattività vaskulari, li l-awturi interpretaw bħala evidenza li s-sinjal kien jirrifletti l-użu tal-ossiġnu aktar milli effetti fuq il-vini.

Qari tal-iskeda: mudell, nies b’saħħithom. Rotta, kapsula orali. Doża, 4 mg/kg darba waħda. Komparatur, plaċebo b’blinding protett billi s-suġġetti ntalbu ma jagħmlux l-awrina f’nofs is-sessjoni (awrina blu kienet tikxef il-grupp tal-istudju). Endpoints, sinjal tal-iskan flimkien ma’ punteġġi tal-kompiti. Ħin, siegħa wara doża waħda. Inċertezza, 26 persuna, b’saħħithom, sessjoni waħda, surrogat ta’ imaging aktar milli riżultat kliniku.

Dak li dan jipprova huwa limitat u reali: doża orali baxxa waħda bidlet l-attività tal-moħħ relatata mal-kompitu f’adulti b’saħħithom dakinhar. Ma jittestjax trattament ta’ xi kundizzjoni, użu fit-tul, jew xi doża oħra. Pretensjonijiet dwar il-memorja u l-prestazzjoni konjittiva għandhom jiġu evalwati b’dan il-limitu f’moħħok.

Eżempju 2: il-kontradizzjoni li fil-fatt mhijiex waħda

Tim aktar tard kejjel direttament il-fluss tad-demm u l-metaboliżmu wara blu tal-metilene ġol-vina, fi tmien voluntiera b’saħħithom (0.5 u 1 mg/kg) u fil-firien (2 u 4 mg/kg). Iż-żewġ speċijiet urew tnaqqis fil-fluss globali tad-demm ċerebrali; il-metaboliżmu tal-ossiġnu fil-bnedmin naqas u l-użu tal-glukożju fil-firien naqas. L-ispjegazzjoni tal-awturi stess kienet l-imġiba skont id-doża: il-blu tal-metilene huwa bifażiku, stimulanti f’espożizzjoni baxxa u inibitorju f’espożizzjoni ogħla, bil-firxa baxxa normalment deskritta madwar 0.5 sa 4 mg/kg u b’riverżjoni ’l fuq minn madwar 7 sa 10 mg/kg, skont il-mudell.

Poġġi ż-żewġ skedi ħdejn xulxin u l-kunflitt jisparixxi. Rotta differenti (ġol-vina kontra orali), dożi differenti, endpoints differenti (rata metabolika kontra attività evokata minn kompitu), ħin differenti (infużjoni 30 minuta qabel l-iskan kontra kapsula siegħa qabel). Doża ġol-vina li tasal kollha f’daqqa mhijiex l-istess espożizzjoni bħal kapsula assorbita mill-musrana, u rata metabolika waqt il-mistrieħ mhijiex l-istess kejl bħall-attività waqt kompitu tal-memorja. Studji li jidhru kontradittorji ħafna drabi sempliċement ikunu qed iwieġbu mistoqsijiet differenti, u l-istorja tar-rispons għad-doża li tgħaqqadhom hija spjegata fil-ħarsa ġenerali lejn l-ormesi u d-dożaġġ.

Eżempju 3: tessut uman studjat barra l-ġisem

Studju pilota inkuba kampjuni ta’ xaħam meħuda waqt kirurġija tal-qalb bil-blu tal-metilene. Il-kampjuni ġew minn 25 pazjent b’insuffiċjenza tal-qalb: tessut adipuż epikardjali u perivaskulari, id-depożiti tax-xaħam madwar il-qalb u l-vini li jikkontribwixxu għall-istress ossidattiv. Wara inkubazzjoni għal 24 siegħa b’0.1 micromolar blu tal-metilene, it-tessut wera espressjoni aktar baxxa tal-enzimi monoamine oxidase (l-aktar MAO-A) u inqas speċijiet reattivi tal-ossiġnu. Iż-żieda ta’ serotonin, is-substrat ta’ MAO-A, reġgħet żiedet l-istress ossidattiv, u l-blu tal-metilene reġġa’ lura parti minn dik iż-żieda.

Dan huwa tessut uman u effett bijoloġiku reali, iżda mhuwiex prova ta’ trattament fin-nies. Ħadd ma ngħata doża. Ma kien hemm l-ebda ċirkolazzjoni, l-ebda metaboliżmu mill-fwied, l-ebda riżultat kliniku, u l-konċentrazzjoni fid-dixx waħedha ma tgħid xejn dwar liema doża orali tirriproduċiha. Xogħol ex vivo (tessut studjat barra l-ġisem ħaj) jinsab bejn il-kultura taċ-ċelloli u r-riċerka klinika: juri li effett huwa possibbli f’materjal uman taħt kundizzjonijiet ikkontrollati, iżda ma jistax jistabbilixxi effikaċja, sigurtà, jew dożaġġ. Meta taqra kopertura ta’ sejbiet mit-tessuti, iċċekkja jekk it-titlu jiddeskrivix dak li ġara fid-dixx jew jaqbiżx għal dak li jiġri f’pazjent. Il-kuntest usa’ għal dan it-tip ta’ sejba redox jinsab fir-reviżjoni tal-evidenza dwar l-istress ossidattiv.

Eżempju 4: l-istudju fuq il-ġrieden fejn riżultat fiċ-ċelloli ma żammx

Studju dwar ix-xjuħija fil-ġrieden ittestja blu tal-metilene fit-tul kontra t-telf tal-għadam relatat mal-età. Ġrieden nisa xjuħ xorbu ilma li kien fih 250 micromolar blu tal-metilene għal 6 jew 12-il xahar, u ġrieden ġenetikament diversi ġew trattati mill-età adulta sax-xjuħija. Fil-kultura taċ-ċelloli, il-kompost kien naqqas id-differenzjazzjoni tal-osteoklasti, it-tip ta’ riżultat li jiġġenera titli. Fl-annimali ħajjin ma biddel xejn: il-morfoloġija tal-għadam kortikali u trabekulari xjaħet eżatt bħalma ġara fil-ġrieden mhux trattati, u fergħa parallela b’MitoQ falliet bl-istess mod.

Din hija d-distakk fit-traslazzjoni fl-aktar forma ċara tiegħu. Dixx iżomm il-konċentrazzjoni kostanti, ineħħi kull sistema ta’ organi, u jkejjel imġiba waħda taċ-ċelloli. Annimal iżid il-musrana, il-fwied, il-kliewi, l-ormoni, u xhur ta’ kumpens. Riżultat null bħal dan mhuwiex falliment tax-xjenza; huwa x-xjenza taħdem, billi teskludi ipoteżi (trattament antiossidant waħdu jipproteġi l-għadam li qed jixjieħ) qabel ma xi ħadd jirrepetiha fin-nies. Sejbiet fl-annimali jsaħħu jew idgħajfu mekkaniżmu. Ma jippreskrivux użu fil-bnedmin, limitu li huwa importanti kull meta pretensjonijiet dwar il-lonġevità u x-xjuħija jiċċitaw data mill-ġrieden.

L-iskeda, lesta biex tikkopjaha

Għall-istudju jew l-artiklu li jmiss dwar studju, imla dan qabel tiddeċiedi x’taħseb:

• Mudell: ċelloli, annimal (liema speċi, b’saħħtu jew marid), tessut uman ex vivo, voluntiera b’saħħithom, jew pazjenti?
• Rotta: orali, ġol-vina, injezzjoni lokali, jew applikat direttament fuq ċelloli jew tessut?
• Unitajiet tad-doża: mg/kg (ġisem) jew micromolar (dixx)? Qatt tikkonverti wieħed għall-ieħor bil-piż molekulari biss.
• Komparatur: plaċebo, vehicle, grupp mhux trattat, jew baseline qabel id-doża? Il-blinding kien protett?
• Endpoints: imkejla direttament jew surrogati? Sinjal ta’ skan, livell ta’ enzima, u riżultat ta’ marda huma tliet livelli differenti ta’ saħħa fil-pretensjoni.
• Ħin: doża waħda jew kroniku? Imkejjel wara minuti, sigħat, jew xhur?
• Inċertezza: kemm kien hemm suġġetti, u x’qalu l-awturi stess li kien limitat? Studji pilota, fuq voluntiera b’saħħithom, u b’doża waħda jiġġeneraw ipoteżijiet.

Żewġ drawwiet jagħmlu l-iskeda mgħaġġla. L-ewwel, aqra l-metodi qabel il-konklużjoni; il-konklużjoni tgħidlek x’jemmnu l-awturi, il-metodi jgħidulek x’għandhom bażi biex jemmnu. It-tieni, meta żewġ studji ma jaqblux, qabbel l-iskedi qabel tqabbel il-verdett. Differenzi fil-mudell, ir-rotta, id-doża, u l-endpoint isolvu l-biċċa l-kbira tal-kontradizzjonijiet apparenti mingħajr ma jkun hemm għalfejn xi ħadd ikun żbaljat.