മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ലളിത സ്റ്റെയിനിംഗും ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗും: ഓരോ രീതിക്കും എന്ത് തെളിയിക്കാനാകും

ഒരു വിദ്യാർഥി E. coli എന്ന് ലേബൽ ചെയ്ത കൾച്ചറിൽനിന്ന് ഒരു സ്മിയർ തയ്യാറാക്കുന്നു. അതിനെ ഒരു മിനിറ്റ് മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ കൊണ്ട് മൂടിവെച്ചശേഷം കഴുകി, ഓയിൽ ഇമ്മർഷൻ ലെൻസിലൂടെ നോക്കുന്നു. ദൃശ്യക്ഷേത്രം മുഴുവൻ നീല ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള കോശങ്ങളാണ്. ലാബ് റിപ്പോർട്ടിൽ ഇങ്ങനെ എഴുതുന്നു: "E. coli ആയി തിരിച്ചറിഞ്ഞ ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള ബാക്ടീരിയകൾ." നിരീക്ഷണം ശരിയാണ്. എന്നാൽ ആ സ്ലൈഡിൽനിന്ന് ആ നിഗമനത്തിലെത്താനാവില്ല.

പിശക് സാങ്കേതികമല്ല, ആശയപരമാണ്. ഒരു ലളിത സ്റ്റെയിനിനെ വിദ്യാർഥി ഒരു വ്യത്യാസനിർണയ പരിശോധനയായി കണക്കാക്കി. ലളിത സ്റ്റെയിനും ഗ്രാം സ്റ്റെയിനും വ്യത്യസ്ത ചോദ്യങ്ങൾക്കാണ് ഉത്തരം നൽകുന്നത്; കാരണം, അവ വ്യത്യസ്ത സ്റ്റെയിനിംഗ് ആശയങ്ങളെ അടിസ്ഥാനമാക്കുന്നു. ഒന്ന് ചോദിക്കുന്നത്: ഏത് ആകൃതിയാണ് കാണുന്നത്. മറ്റൊന്ന് ചോദിക്കുന്നത്: പരീക്ഷണത്തിന് വിധേയമാക്കുമ്പോൾ കോശഭിത്തി എങ്ങനെ പെരുമാറുന്നു. ഇവ രണ്ടും കൂട്ടിക്കുഴച്ചാൽ, ശരിയായി സ്റ്റെയിൻ ചെയ്ത സ്ലൈഡിൽനിന്നുപോലും ന്യായീകരിക്കാനാകാത്ത ഒരു റിപ്പോർട്ട് ഉണ്ടാകും.

ഈ താരതമ്യം രണ്ടു രീതികളെയും വേർതിരിച്ചുനിർത്തുന്നു, ഓരോ ഫലവും ഏത് അവകാശവാദത്തിനാണ് അടിസ്ഥാനമാകുന്നതെന്ന് കാണിക്കുന്നു, വിദ്യാർഥികൾ ഏറ്റവും കൂടുതൽ ചോദിക്കുന്ന രണ്ടു ചോദ്യങ്ങൾക്ക് ഉത്തരം നൽകുന്നു: ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗിൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിക്കാമോ, E. coli-യുടെ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിൻ യഥാർത്ഥത്തിൽ എന്താണ് കാണിക്കുന്നത്.

ചുരുക്കത്തിലുള്ള ഉത്തരം

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ലളിത സ്റ്റെയിനിംഗ്, സ്റ്റെയിൻ സ്വീകരിക്കുന്ന എല്ലാ കോശങ്ങൾക്കും ഒരേ നീല നിറം നൽകുന്നു. അതിനാൽ അത് രൂപഘടനയും (ദണ്ഡങ്ങൾ, ഗോളങ്ങൾ, സർപ്പിളങ്ങൾ) ക്രമീകരണവും (ഒറ്റയായി, ജോഡികളായി, ശൃംഖലകളായി) വെളിപ്പെടുത്തുന്നു; ഗ്രാം വിഭാഗത്തെക്കുറിച്ച് ഒന്നും വെളിപ്പെടുത്തുന്നില്ല. ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗിൽ അയോഡിൻ, ഒരു നിറംനീക്കൽ ഘട്ടം, ഒരു പ്രതിവർണ്ണകം എന്നിവ കൂടി ഉൾപ്പെടുന്നു. അതിനാൽ കോശാവരണങ്ങൾ വർണ്ണകം നിലനിർത്തുന്ന വിധത്തെ അടിസ്ഥാനമാക്കി ബാക്ടീരിയകളെ ഗ്രാം-പോസിറ്റീവ് (പർപ്പിൾ), ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് (പിങ്ക് അല്ലെങ്കിൽ ചുവപ്പ്) എന്നിങ്ങനെ വേർതിരിക്കുന്നു. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിച്ചതിനുശേഷം നീല ദണ്ഡങ്ങൾ കാണുന്നതിന്റെ അർഥം "ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള കോശങ്ങൾ ഉണ്ട്" എന്നാണ്. പൂർണ്ണ ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ് ക്രമത്തിനുശേഷം പിങ്ക് ദണ്ഡങ്ങൾ കാണുന്നതിന്റെ അർഥം "ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള ബാക്ടീരിയകൾ ഉണ്ട്" എന്നാണ്. രണ്ടാമത്തെ പ്രസ്താവന കൂടുതൽ ശക്തമാണ്; കാരണം, ആ നടപടിക്രമം ഒരു അധിക പരിശോധന നടത്തി.

ഈ ലേഖനം ഉൾപ്പെടുന്ന, ഒറ്റ വർണ്ണകം ഉപയോഗിച്ചുള്ള ബാക്ടീരിയ സ്റ്റെയിനിംഗ് രീതികളുടെ വിപുലമായ വിഭാഗത്തെക്കുറിച്ച് അറിയാൻ മൈക്രോസ്കോപ്പി സ്റ്റെയിനിംഗ് അറ്റ്ലസ് കാണുക.

ലളിത സ്റ്റെയിനിംഗ്: ഒരു വർണ്ണകം, ഒരു ചോദ്യം

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഒരു ബേസിക് (കാറ്റയോണിക്) വർണ്ണകമാണ്. അതിന്റെ നിറമുള്ള അയോണിന് ധനചാർജുണ്ട്. ന്യൂക്ലിക് ആസിഡുകളും ഉപരിതലത്തിലെ അമ്ലസ്വഭാവമുള്ള ഗ്രൂപ്പുകളും ഉൾപ്പെടെ കോശത്തിലെ ഋണചാർജുള്ള ഘടനകളുമായി അത് ബന്ധപ്പെടുന്നു. അതിനാൽ ഇളം പശ്ചാത്തലത്തിൽ കോശങ്ങൾ നീലയായി കാണപ്പെടുന്നു. OpenStax അതിന്റെ സ്റ്റെയിനിംഗ് അധ്യായത്തിൽ ഈ പോസിറ്റീവ് സ്റ്റെയിനിംഗ് തത്ത്വം വിവരിക്കുന്നു. വർണ്ണക കാറ്റയോൺതന്നെ ചെറുതും പരന്നതുമായ ഫീനോതയാസീൻ അയോണാണ്; മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ രസതന്ത്ര റഫറൻസിൽ ഇത് വിശദീകരിച്ചിട്ടുണ്ട്. ക്ലോറൈഡ് പ്രതിഅയോൺ അല്ല നിറം നൽകുന്നത്.

പഠനത്തിനുള്ള ഒരു സാധാരണ നടപടിക്രമം ബോധപൂർവം ലളിതമാണ്: നേർത്ത സ്മിയർ ഉണ്ടാക്കുക, വായുവിൽ ഉണക്കുക, ചൂടുപയോഗിച്ച് ഉറപ്പിക്കുക, ഏകദേശം ഒരു മിനിറ്റ് ഏതാണ്ട് 1% ജലീയ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ കൊണ്ട് മൂടിവെക്കുക, വെള്ളം ഉപയോഗിച്ച് മൃദുവായി കഴുകുക, ഒപ്പി ഉണക്കുക, ഓയിൽ ഇമ്മർഷൻ ഉപയോഗിച്ച് പരിശോധിക്കുക. LibreTexts-ലെ ഒരു പഠന നടപടിക്രമം കൃത്യമായി ഈ 1%, ഒരു മിനിറ്റ് രീതി നൽകുന്നു; ചില ലാബുകൾ സമയം നീട്ടാറുണ്ടെന്നും അതിൽ പറയുന്നു. മോർഡന്റ് ഇല്ല, നിറംനീക്കൽ പദാർഥം ഇല്ല, രണ്ടാമത്തെ വർണ്ണകം ഇല്ല. ഈ അഭാവമാണ് പ്രധാന കാര്യം. ഒരു വർണ്ണകം മാത്രം ഉപയോഗിക്കുകയും അത് തിരഞ്ഞെടുത്ത് നീക്കാതിരിക്കുകയും ചെയ്യുമ്പോൾ, വർണ്ണകം ബന്ധിക്കുന്ന എല്ലാ കോശങ്ങളും ഒരേ നിറത്തിലാകും.

E. coli ഉപയോഗിക്കുമ്പോൾ പ്രതീക്ഷിക്കുന്ന ദൃശ്യക്ഷേത്രം നീല ദണ്ഡങ്ങളാണ് (ബാസില്ലികൾ); അവ ഒറ്റയായോ ജോഡികളായോ ചെറിയ കൂട്ടങ്ങളായോ കാണപ്പെടും. നീല നിറം വർണ്ണകത്തിൽനിന്നാണ് വരുന്നത്. ദണ്ഡാകൃതി ജീവിയുടെ സവിശേഷതയാണ്. എന്നാൽ ഇവയുടെ സംയോജനം ജീവിയെ തിരിച്ചറിയുന്നില്ല; കാരണം, പല സ്പീഷീസുകളും ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ളവയാണ്, ലളിത സ്റ്റെയിനിൽ പല ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള കോശങ്ങളും നീലയാകുന്നു. ATCC അതിന്റെ മൈക്രോബയോളജി കൾച്ചർ ഗൈഡിൽ രൂപഘടനയിൽ മാത്രം ഒതുങ്ങുന്ന ഈ പരിധി വ്യക്തമായി പറയുന്നു. ശരിയായ റിപ്പോർട്ട് ഇങ്ങനെയാണ്: "നീല ബാസില്ലികൾ നിരീക്ഷിച്ചു." ആകൃതിക്കും ക്രമീകരണത്തിനും അപ്പുറമുള്ള എന്തിനും കൂടുതൽ തെളിവ് ആവശ്യമാണ്.

ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ്: നാല് അഭികാരകങ്ങൾ, ഒരു പെരുമാറ്റ പരിശോധന

ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ് ഒരു വ്യത്യാസനിർണയ സ്റ്റെയിനാണ്. എല്ലാ കോശങ്ങളെയും ഒരേ ക്രമത്തിലുള്ള നടപടികൾക്ക് വിധേയമാക്കി, ഏതൊക്കെ കോശങ്ങൾ ആദ്യ വർണ്ണകം നിലനിർത്തുന്നു, ഏതൊക്കെ അത് നഷ്ടപ്പെടുത്തുന്നു എന്ന് പരിശോധിക്കുന്നു. American Society for Microbiology-യുടെ ഗ്രാം സ്റ്റെയിൻ നടപടിക്രമങ്ങൾ സാധാരണ നാല് ഘട്ടങ്ങളുടെ ക്രമം നിർവചിക്കുന്നു: ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ് (പ്രാഥമിക വർണ്ണകം), ഗ്രാം അയോഡിൻ (മോർഡന്റ്), ആൽക്കഹോൾ അല്ലെങ്കിൽ അസിറ്റോൺ-ആൽക്കഹോൾ (നിറംനീക്കൽ പദാർഥം), തുടർന്ന് സാഫ്രനിൻ (പ്രതിവർണ്ണകം).

സാധാരണ പഠന മാതൃക ഈ വേർതിരിവ് കോശാവരണത്തിന്റെ ഘടനയിലൂടെ വിശദീകരിക്കുന്നു. ഗ്രാം-പോസിറ്റീവ് കോശങ്ങൾക്ക് കട്ടിയുള്ള പെപ്റ്റിഡോഗ്ലൈക്കാൻ ഭിത്തിയുണ്ട്. ആൽക്കഹോൾ ഉപയോഗിച്ച് കഴുകുമ്പോൾ അത് നിർജലീകരിക്കപ്പെടുകയും ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്–അയോഡിൻ സങ്കീർണ സംയുക്തം നിലനിർത്തുകയും ചെയ്യുന്നു. ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് കോശങ്ങൾക്ക് നേർത്ത പെപ്റ്റിഡോഗ്ലൈക്കാൻ പാളിയും ലിപിഡ് സമൃദ്ധമായ ഒരു ബാഹ്യ മെംബ്രേനും ഉണ്ട്. നിറംനീക്കൽ പദാർഥം ഈ മെംബ്രേനെ തകർക്കുന്നതിനാൽ സങ്കീർണ സംയുക്തം കഴുകിപ്പോകുന്നു; തുടർന്ന് കോശങ്ങൾ സാഫ്രനിൻ സ്വീകരിക്കുന്നു. NCBI Bookshelf-ലെ ഗ്രാം സ്റ്റെയിൻ അവലോകനം ഈ കോശഭിത്തി വിശദീകരണം നൽകുന്നു. പൂർണ്ണ ഭൗതികരസതന്ത്രം ഭിത്തിയുടെ കനം മാത്രമുപയോഗിച്ച് വിശദീകരിക്കാവുന്നതിനെക്കാൾ സങ്കീർണമാണെന്ന് വിദഗ്ധർ കൂട്ടിച്ചേർക്കുന്നു. എന്നാൽ ലാബിലെ വ്യാഖ്യാനത്തിന് ഈ പെരുമാറ്റനിയമം ബാധകമാണ്: പർപ്പിൾ എന്നത് വർണ്ണകം നിലനിർത്തിയതിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു; പിങ്ക് എന്നത് ആദ്യ വർണ്ണകം നഷ്ടപ്പെട്ടശേഷം പ്രതിവർണ്ണകം സ്വീകരിച്ചതിനെ സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

വിശദീകരണ ചിത്രഫലകങ്ങൾ. രീതികൾ താരതമ്യം ചെയ്യാനുള്ള ശൈലീകൃത വരകൾ; ക്യാമറയിൽ പകർത്തിയ മൈക്രോഗ്രാഫുകൾ അല്ല. തത്ത്വം പഠിപ്പിക്കാൻ നിറങ്ങൾ ലളിതമാക്കിയിരിക്കുന്നു: ലളിത സ്റ്റെയിനിൽ ഒരു നിറം, ഗ്രാം നിറംനീക്കലിനുശേഷം രണ്ടു നിറങ്ങൾ.

ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗിൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിക്കാമോ

ഈ ചോദ്യത്തെ രണ്ടു രീതിയിൽ വായിക്കാം; അവയ്ക്ക് വ്യത്യസ്ത ഉത്തരങ്ങൾ ആവശ്യമാണ്.

ഒന്നാമത്തെ അർഥം: മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഒരിക്കൽ പ്രയോഗിക്കുന്നത് പൂർണ്ണ ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിംഗ് ക്രമത്തിന് പകരമാകുമോ. ഇല്ല. അയോഡിൻ, നിറംനീക്കൽ പദാർഥം, പ്രതിവർണ്ണകം എന്നിവയില്ലാതെ വ്യത്യാസനിർണയ ഘട്ടമില്ല; അതിനാൽ ഗ്രാം വിഭാഗം പരിശോധിക്കപ്പെടുന്നില്ല. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ മാത്രം ഉപയോഗിച്ചതിനുശേഷമുള്ള നീല ദൃശ്യക്ഷേത്രം ഒരു ലളിത സ്റ്റെയിൻ ഫലമാണ്; കുപ്പി ഗ്രാം അഭികാരകങ്ങളുടെ അടുത്താണ് വെച്ചിരിക്കുന്നത് എന്നതുകൊണ്ട് അത് മാറുന്നില്ല. അത് ഗ്രാം ഫലമായി രേഖപ്പെടുത്തരുത്.

രണ്ടാമത്തെ അർഥം: ഘട്ടം 4-ൽ പ്രതിവർണ്ണകമായി സാഫ്രനിന് പകരം മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ഉപയോഗിക്കാമോ. പ്രവർത്തനപരമായി, നിറംനീക്കിയ കോശങ്ങൾക്ക് അതിന് നിറം നൽകാനാകും. ഇങ്ങനെ മാറ്റിയാൽ ഗ്രാം-പോസിറ്റീവ് കോശങ്ങൾ പർപ്പിളായും ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് കോശങ്ങൾ നീലയായും കാണപ്പെടുമെന്ന് ഒരു പാഠപുസ്തക അഭ്യാസം പ്രവചിക്കുന്നു. ഈ യുക്തി ശരിയാണ്; കാരണം, ശരിയായി നിറംനീക്കിയ ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് കോശങ്ങൾ ഏതാണ്ട് നിറമില്ലാത്തവയായിരിക്കും, അവ മറ്റൊരു കാറ്റയോണിക് വർണ്ണകം സ്വീകരിക്കും. എന്നാൽ ഇത് സാധാരണ നടപടിക്രമമല്ല. ASM നടപടിക്രമങ്ങൾ സാഫ്രനിൻ നിർദേശിക്കുന്നു; ചില വകഭേദങ്ങളിൽ ബേസിക് ഫ്യൂക്സിൻ പോലുള്ള അംഗീകൃത ബദലുകളും ഉണ്ട്, മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ അല്ല. പ്രായോഗികമായ ഒരു പോരായ്മയും ഉണ്ട്: പർപ്പിളിനൊപ്പം നീല തിരിച്ചറിയുന്നത് പർപ്പിളിനൊപ്പം പിങ്ക് തിരിച്ചറിയുന്നതിനെക്കാൾ ബുദ്ധിമുട്ടാണ്; പ്രത്യേകിച്ച് തുടക്കക്കാർക്കും തെളിച്ചം കുറഞ്ഞ മൈക്രോസ്കോപ്പ് വിളക്കുകൾ ഉപയോഗിക്കുമ്പോഴും. പഠനപ്രവർത്തനങ്ങൾക്കും പ്രാധാന്യമുള്ള ഏതൊരു ഫലത്തിനും, നിങ്ങളുടെ നടപടിക്രമം നിർദേശിക്കുന്ന പ്രതിവർണ്ണകം ഉപയോഗിക്കുക; സാധാരണയായി അത് സാഫ്രനിനാണ്. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ പ്രതിവർണ്ണകത്തെ തുല്യമായ ഒരു മാനദണ്ഡരീതിയായി കാണാതെ, പ്രദർശനത്തിനുള്ള ഒരു വകഭേദമായി കാണുക.

മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ മറ്റ് ഒറ്റ-വർണ്ണക രീതികളുമായി എങ്ങനെ താരതമ്യം ചെയ്യപ്പെടുന്നു എന്ന അനുബന്ധ ചോദ്യം, ലളിത ബാക്ടീരിയ സ്റ്റെയിനുകളുടെ താരതമ്യത്തിൽ ചർച്ച ചെയ്യുന്നു.

E. coli-യുടെ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്റ്റെയിൻ എന്ത് തെളിയിക്കുന്നു, എന്ത് തെളിയിക്കുന്നില്ല

E. coli ഒരു ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള ബാക്ടീരിയയാണ്. എന്നാൽ ആ വാക്യം പല രീതികളിൽനിന്നുള്ള വസ്തുതകൾ ഒരുമിപ്പിക്കുന്നു: മൈക്രോസ്കോപ്പിയിൽനിന്ന് രൂപഘടന, ഗ്രാം സ്റ്റെയിനിൽനിന്ന് ഗ്രാം പ്രതികരണം, കൾച്ചറും ജൈവരാസ അല്ലെങ്കിൽ തന്മാത്രാതല പരിശോധനകളും ചേർന്ന് സ്പീഷീസിന്റെ തിരിച്ചറിയൽ. മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്മിയർ ആദ്യ ഭാഗത്തിന് മാത്രമാണ് തെളിവ് നൽകുന്നത്. സ്റ്റെയിൻ ചെയ്ത സാമ്പിളിൽ ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള കോശങ്ങൾ ഉണ്ടെന്നും അവ എങ്ങനെ ക്രമീകരിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്നും അത് വ്യക്തമാക്കുന്നു. നിറംനീക്കൽ പരിശോധന നടത്തിയിട്ടില്ലാത്തതിനാൽ ഗ്രാം പ്രതികരണം അത് സ്ഥാപിക്കുന്നില്ല. ഈ റെസല്യൂഷനിൽ പല സ്പീഷീസുകളുടെയും ദണ്ഡാകൃതിയിലുള്ള കോശങ്ങൾ ഒരുപോലെ കാണപ്പെടുന്നതിനാൽ സ്പീഷീസിനെയും അത് തിരിച്ചറിയുന്നില്ല.

ഇവിടെയാണ് റിപ്പോർട്ടുകളിൽ പ്രവചിക്കാവുന്ന രീതിയിൽ പിശക് സംഭവിക്കുന്നത്. റിപ്പോർട്ട് എഴുതുന്നയാൾ പശ്ചാത്തല അറിവ് ("ഈ കൾച്ചർ E. coli ആയിരിക്കണം, E. coli ഗ്രാം-നെഗറ്റീവ് ആണ്") നിരീക്ഷണവരിയിൽ ചേർക്കുന്നു. അങ്ങനെ, യഥാർത്ഥത്തിൽ അനുമാനിച്ച കാര്യം സ്ലൈഡ് സ്ഥിരീകരിച്ചതായി തോന്നുന്നു. കൂടുതൽ വ്യക്തമായ റിപ്പോർട്ട് ഈ തലങ്ങളെ വേർതിരിക്കുന്നു: "മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ ലളിത സ്റ്റെയിൻ: നീല ബാസില്ലികൾ നിരീക്ഷിച്ചു; രൂപഘടന മാത്രം, ഗ്രാം വിഭാഗം പരിശോധിച്ചിട്ടില്ല." തുടർന്ന്, നിയന്ത്രണ സാമ്പിളുകളോടെ ഗ്രാം സ്റ്റെയിൻ ശരിയായി നടത്തിയിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ: "ഗ്രാം സ്റ്റെയിൻ: പിങ്ക് ദണ്ഡങ്ങൾ, ഗ്രാം-നെഗറ്റീവിനോട് യോജിക്കുന്നത്." സ്പീഷീസിന്റെ തിരിച്ചറിയൽ പിന്നീട് തിരിച്ചറിയൽ നടപടിക്രമത്തിൽനിന്നാണ് ലഭിക്കുന്നത്; നിറത്തിൽനിന്ന് മാത്രം അല്ല.

വ്യാഖ്യാനത്തിനുള്ള ഒരു പ്രായോഗിക മാർഗദർശി

ലാബിൽ ഈ തീരുമാനനിയമം ഉപയോഗിക്കുക. എല്ലാ കോശങ്ങളും ഒരേ നിറത്തിലാണെങ്കിൽ, നടപടിക്രമത്തിൽ നിറംനീക്കൽ പദാർഥമില്ലാതെ ഒരു വർണ്ണകം മാത്രമാണ് ഉപയോഗിച്ചതെങ്കിൽ, നിങ്ങൾ നടത്തിയത് ലളിത സ്റ്റെയിനാണ്. ആകൃതി, വലുപ്പത്തിന്റെ ഏകദേശ കണക്ക്, ക്രമീകരണം എന്നിവ റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുക. അവിടെ നിർത്തുക. അറിയപ്പെടുന്ന പോസിറ്റീവ്, നെഗറ്റീവ് നിയന്ത്രണ സാമ്പിളുകളോടെ ക്രിസ്റ്റൽ വയലറ്റ്, അയോഡിൻ, നിറംനീക്കൽ പദാർഥം, പ്രതിവർണ്ണകം എന്നിവ നടപടിക്രമത്തിൽ ഉപയോഗിച്ചിട്ടുണ്ടെങ്കിൽ, നിങ്ങൾ നടത്തിയത് ഗ്രാം സ്റ്റെയിനാണ്. നിറവും രൂപഘടനയും ചേർത്ത് റിപ്പോർട്ട് ചെയ്യുക: ശൃംഖലകളിലുള്ള പർപ്പിൾ കോക്കികൾ, പിങ്ക് ദണ്ഡങ്ങൾ തുടങ്ങിയവ.

മിക്ക ആശയക്കുഴപ്പങ്ങൾക്കും കാരണം മൂന്ന് പിശകുകളാണ്. ഒന്നാമത്, നീല ദണ്ഡങ്ങളെ E. coli സ്ഥിരീകരണമായി അമിതമായി വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നത്. രണ്ടാമത്, നോട്ട്ബുക്കിൽ "ഗ്രാം സ്റ്റെയിൻ" എന്ന തലക്കെട്ടിന് കീഴിൽ മെത്തിലീൻ ബ്ലൂ സ്ലൈഡ് രേഖപ്പെടുത്തുന്നത്; പിന്നീട് വായിക്കുന്നവർ അത് തെറ്റായി വ്യാഖ്യാനിക്കും. മൂന്നാമത്, പ്രതിവർണ്ണകങ്ങൾ അനായാസം മാറ്റിയശേഷം നിറക്രമങ്ങൾ ഒരുപോലെയാണെന്ന മട്ടിൽ വ്യത്യസ്ത ലാബുകളിലെ നിറങ്ങൾ താരതമ്യം ചെയ്യുന്നത്. ഓരോ പിശകിനും പരിഹാരം ഒന്നുതന്നെ: യഥാർത്ഥത്തിൽ നടത്തിയ രീതി ഏതെന്ന് വ്യക്തമാക്കുക, ആ രീതി പരിശോധിക്കുന്ന കാര്യങ്ങൾ മാത്രം അവകാശപ്പെടുക.

പരിമിതമായ കാര്യങ്ങൾ മാത്രം അവകാശപ്പെടുന്നതിനാലാണ് ലളിത സ്റ്റെയിനിംഗിന് അതിന്റേതായ സ്ഥാനമുള്ളത്. അത് വേഗത്തിൽ ചെയ്യാം, ചെറിയ നടപടിക്രമ വ്യതിയാനങ്ങൾ സഹിക്കും, രൂപഘടനയാണ് ചോദ്യമെങ്കിൽ മതിയാകും: അവിടെ എന്തെങ്കിലും ഉണ്ടോ, അതിന് എന്ത് ആകൃതിയാണ്. ചോദ്യം വർഗീകരണത്തെക്കുറിച്ചാണെങ്കിൽ, വ്യത്യാസനിർണയ പരിശോധന നടത്തുക. നീല സ്ലൈഡ് കോശങ്ങൾ എങ്ങനെയിരിക്കുന്നു എന്ന് പറയുന്നു. പർപ്പിൾ അല്ലെങ്കിൽ പിങ്ക് സ്ലൈഡ് അവയുടെ ഭിത്തികൾ എങ്ങനെ പെരുമാറുന്നു എന്ന് പറയുന്നു. ഒരു സ്ലൈഡും ഒറ്റയ്ക്ക് സ്പീഷീസ് ഏതെന്ന് പറയുന്നില്ല.